急性胰腺炎相关肺损伤的CT表现与肾周间隙受累的相关性

目的回顾性分析急性胰腺炎(AP)相关肺损伤的CT影像学特征,探究AP的严重程度、肺组织损伤程度与肾周间隙受累的相关性。方法收集2018年12月1日~2022年7月31日经南方医科大学第五附属医院临床和实验室检查诊断为AP的402例患者的临床及胸部、上腹部CT影像学资料。根据CT严重指数将AP分为轻症AP(MAP)、重症AP(SAP);根据高分辨率CT形态学将肺损伤程度分为正常肺组织、轻度肺损伤、中度肺损伤和重度肺损伤;根据肾筋膜厚度判别肾周间隙受累情况。结果根据高分辨率CT影像学表现,402例AP患者中急性胰腺炎相关肺损伤发生率为82.34%(331/402),包括轻度肺损伤264例、中度肺损伤34例、重度肺损伤33例。AP相关肺损伤表现:258例表现为胸膜增厚、胸膜下线、支气管血管束增粗;46例表现为小叶间隔增厚;48例表现肺内斑片状实变影或伴胸腔积血、积液。单因素分析显示,年龄、脂肪酶>300 U/L、胰腺CT分级、是否累及肾周与肺损伤程度相关(P<0.05)。逐步多因素无序多分类Logistic回归分析显示:以无肺损伤为对照,年龄为轻度肺损伤的危险因素(OR=1.04,95%CI:1.02~1.06);年龄(OR=1.05,95%CI:1.03~1.08)和累及肾周(OR=6.69,95%CI:2.40~18.66)为中度肺损伤的危险因素,淀粉酶>110 U/L为保护因素(OR=0.24,95%CI:0.06~0.97);年龄(OR=1.04,95%CI:1.01~1.07)和累及肾周(OR=34.86,95%CI:7.03~172.94)为重度肺损伤的危险因素,女性(OR=0.23,95%CI:0.07~0.78)和轻度肺损伤分级(OR=0.09,95%CI:0.01~0.76)为重度肺损伤的保护因素。结论在评估AP肺损伤严重程度及其发展过程中,肾周间隙受累可能比CT严重指数具有更高的临床诊断价值。

大黄素通过抑制肺泡巨噬细胞ATF6/CHOP通路改善重症急性胰腺炎相关肺损伤

目的探究大黄素(EMO)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺泡巨噬细胞(AMs)内质网应激的影响及潜在机制。方法40只大鼠随机分为假手术(SO)组、SAP组、4-苯基丁酸(4-PBA)组和EMO组。利用5%牛磺胆酸钠逆行注射胆胰管建立SAP大鼠模型。HE染色评估胰腺、肺组织病理学改变;计算肺组织湿/干重比;测量动脉血氧分压(PaO_(2))和动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))水平;检测血清淀粉酶活性和炎性因子TNF-α及IL-6水平;TUNEL染色计算肺组织细胞凋亡率;Western blot法检测肺组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子6(ATF6)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及半胱氨酸蛋白酶-12(Caspase-12)蛋白表达水平。体外培养大鼠AMs(NR8383),分为对照(CON)组、脂多糖(LPS)组、4-PBA组和EMO组。检测细胞中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;检测细胞中GRP78、ATF6、CHOP及Caspase-12蛋白表达水平。结果与SO组比较,SAP组大鼠胰腺、肺组织病理学评分升高(P<0.05);血清淀粉酶活性、TNF-α及IL-6水平升高(P<0.05);肺组织湿/干重比、细胞凋亡率升高(P<0.05);动脉血PaO_(2)降低且PaCO_(2)升高(P<0.05);肺组织GRP78、ATF6、CHOP及Caspase-12蛋白表达水平升高(P<0.05)。与SAP组比较,4-PBA和EMO组上述参数的改变得到缓解(P<0.05)。体外实验中,与CON组比较,细胞培养上清液中GSH水平降低、MDA水平升高(P<0.05);细胞中GRP78、ATF6、CHOP及Caspase-12蛋白表达水平上调(P<0.05)。与LPS组比较,4-PBA和EMO组上述参数改变得到缓解(P<0.05)。结论大黄素可能通过抑制AMs中ATF6/CHOP通路诱导的氧化应激及细胞凋亡对大鼠SAP相关肺损伤发挥保护作用。

乙酰肝素酶在重症急性胰腺炎相关肺损伤中的表达及意义

目的探讨乙酰肝素酶(heparananse,HPSE)在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关肺损伤中的表达及意义。方法选取2021年5月至2023年5月在本院就诊的SAP患者112例,依据患者是否发生肺损伤分为肺损伤组和无肺损伤组,对比两组临床资料、HPSE mRNA相对表达量,并多因素Logistic回归分析SAP患者发生肺损伤的相关因素,绘制ROC曲线,分析HPSE mRNA对SAP患者肺损伤发生的预测价值。结果112例SAP患者并发肺损伤55例(肺损伤组)、未并发肺损伤57例(无肺损伤组)。两组性别、年龄、BMI、基础疾病、Hb、WBC、AMY比较差异无统计学意义(P>0.05),两组BISAP评分、LDH、IL-6、CRP、Fib、PCT、TNF-α比较差异具有统计学意义(P<0.05)。肺损伤组外周血HPSE mRNA水平高于无肺损伤组(3<0.05)。BISAP评分[OR=2.891,95%CI:1.481~5.644]、HPSE mRNA[OR=3.335,95%CI:1.711~6.513]、Fib[OR=3.285,95%CI:1.524~6.231]、IL-6[OR=1.654,95%CI:1.105~5.254]、CRP[OR=1.884,95%CI:1.112~5.885]、PCT[OR=1.713,95%CI:1.121~5.126]、TNF-α[OR=1.624,95%CI:1.087~6.321]均是影响SAP患者肺损伤的危险因素(P<0.05)。外周血HPSE mRNA联合Fib预测SAP患者肺损伤敏感性为85.51%、特异性79.35%、AUC为0.821(95%CI:0.754~0.903)高于单一检测。结论外周血HPSE、Fib均与SAP相关肺损伤有关,且外周血HPSE联合Fib对SAP患者发生肺损伤的预测效能高。

纤维结合蛋白在重症急性胰腺炎相关肺损伤中的作用

目的:探讨FN在大鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤发病机制中的作用。方法:30只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、胰腺炎2、4、8、12小时组。采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射的方法,复制大鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤模型。分别对胰腺损伤、肺损伤程度进行病理评分,测定肺组织湿/干质量比、胰腺组织湿重、血清淀粉酶,用ELISA法检测血浆FN含量,用半定量RT-PCR法检测肺组织中的FN mRNA水平。结果:造模后各组,肺损伤评分、胰腺损伤评分、肺组织湿/干质量比、胰腺组织湿重及血清淀粉酶均逐渐升高。造模后各组血浆及肺组织的FN均较正常组降低。结论:大鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤发病过程中,血浆及肺组织FN表达明显降低。提示FN在重症急性胰腺炎相关肺损伤中可能起重要作用。

核转录因子-κB在重症急性胰腺炎相关肺损伤中的作用及治疗研究进展

重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）是临床常见急腹症之一，主要特征是以胰腺自身消化和自身坏死为基础的一类全身性疾病，其具有发病急骤，病情凶险，进展迅速，并发症多，死亡率高等特点，CT上常表现为胰腺的出血坏死。SAP易引发全身炎症反应综合征（systemic inflammatory responsesyndrome，SIRS），甚至导致多脏器功能障碍综合征（muhipleorgan dysfunction syndrome，MODS）。SAP病死率可高达50％L3]。肺脏是在SAP早期最易受累的脏器H0称作为SAP并发急性肺损伤（severe acute pancreatitis-associatedlunginjury，APALI）。APALI发生机制繁琐，机体变化复杂，众多胰酶、细胞因子、炎症介质、中性粒细胞、氧自由基等_50参与APAu的发生。而APAu发病过程中NF—kB在复杂的炎症反应网络系统内是一个中心环节，激活后可参与可促进多种细胞因子的转录，参与感染、炎症反应、细胞增生和凋亡。现以NF—kB为中心对APAu发生的相关研究进展作一综述。

同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗重症急性胰腺炎相关肺损伤

背景:目前骨髓间充质干细胞移植治疗各种炎症性疾病研究甚多,但在重症急性胰腺炎相关器官损伤干预方面研究甚少。目的:观察同种异体骨髓间充质干细胞移植对重症急性胰腺炎相关肺损伤大鼠的干预作用。方法:采用全骨髓差异贴壁法培养获得骨髓间充质干细胞。100只SD大鼠随机取32只为假手术组,仅翻动轻柔胰腺;另68只制作重症急性胰腺炎肺损伤动物模型,并分为干预组和对照组,每组再分为4个时间点。分别经尾静脉注入1×109L-1浓度骨髓间充质干细胞悬液和同体积生理盐水。干预组每个时间点随机取1只注射CM-DiI标记的骨髓间充质干细胞悬液用于细胞示踪研究。结果与结论:逆行胆胰管注射建模能早期诱发重症急性胰腺炎及相关肺损伤,炎症因子及E-选择素表达明显增高,并且胰腺和肺的损伤程度随时间延长而加重;移植荧光标记的干细胞后肺组织可见红色荧光出现,并随时间增长而增多;干预组肺组织损伤情况均较对照组各时间点减轻,血清淀粉酶及炎症递质肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β较对照组各时间点下降。干预组肺组织中E-选择素表达较对照组下降。提示同种异体骨髓间充质干细胞移植能有效保护肺血管内皮细胞,减轻重症急性胰腺炎相关肺损伤。

TLR4在盐酸戊乙奎醚改善大鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤中的作用研究

目的探讨Toll样受体4（TLR4）调控的NF—κB及炎性因子IL-1B、IL-6在盐酸戊乙奎醚减轻大鼠重症急性胰腺炎（SAP）相关肺损伤（PALI）中的表达变化及可能作用。方法36只健康雄性成年SD大鼠，应用随机数字表法分为三组，每组12只：假手术组（A组）、PALl模型组（B组）、盐酸戊乙奎醚（PHCD）＋PALI模型组（c组）。B、C组采用4％牛磺胆酸钠（1mL／kg）逆行性胰胆管注射法建立大鼠PALI模型。C组在建立PALI模型后即刻给予大鼠腹腔内注射PHCD（0．2mg／kg），A组和B组经腹腔注射等量0．9％氯化钠溶液。造模后12h处死大鼠，取肺组织称质量后计算肺湿干质量比（W／D），Western Blot检测肺组织TLR4的表达，免疫组织化学法检测肺组织NF—κBp65的蛋白表达，光镜下观察胰腺及肺组织病理学变化并评分，ELISA法检测肺组织的IL-1β、IL-6和血清淀粉酶水平。结果B组和c组大鼠的胰腺组织均存在广泛的中性粒细胞浸润、腺泡出血坏死和脂肪坏死，胰腺组织损伤评分均明显高于A组（P〈0．01），而B组和C组大鼠血清淀粉酶水平及胰腺组织损伤评分比较差异无统计学意义（P〉0．05）。B组和C组大鼠的肺组织W／D值均明显高于A组（P〈0．01），C组的肺组织病理学变化较B组明显改善，肺W／D值明显降低（P〈0．05）。与A组比较，B、C组大鼠肺组织的TLR4表达明显升高（P〈0．01），C组大鼠肺组织的TLR4表达明显低于B组（P〈0．05）。B组和C组大鼠肺组织的NF—κBp65、IL—1β、IL-6表达较A组明显升高（P〈0．01），C组大鼠肺组织的NF-κBp65、IL-1β、IL-6表达较B组明显降低（P〈0．05）。结论PHCD虽不能改变SAP胰腺组织的损伤，但可能通过影响TLR4调控的NF—κB及IL—1β、IL-6炎性因子的表达而有效减轻大鼠的PALI。

骨髓间充质干细胞通过抑制铁死亡改善大鼠重症急性胰腺炎相关肺损伤

目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织内细胞铁死亡的抑制作用及其潜在机制。方法:选择3周龄SD雄性大鼠提取、培养BMSCs。将30只6周龄SD雄性大鼠随机分为5组:假手术组(Sham)、胰腺炎组(SAP)、PBS对照组(SAP+PBS)、干细胞治疗组(SAP+BMSCs)、干细胞联合Nrf2阻断剂ML385治疗组(SAP+BMSCs+ML385),每组6只。使用牛磺胆酸钠(NaT)构建大鼠SAP模型。于造模前2 h,SAP+BMSCs+ML385组腹腔注射ML385(5 mg/kg);于造模后6 h,SAP+BMSCs组和SAP+BMSCs+ML385组尾静脉注射BMSCs(1×10^(7)/只),SAP+PBS组尾静脉注射等量的磷酸盐缓冲液(PBS)。3 d后处死大鼠,取胰腺、肺组织和血清。H&E染色观察组织损伤情况。检测血清中淀粉酶、脂肪酶活性和炎症因子水平,肺组织中铁含量、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)活性。检测肺组织铁响应元件结合蛋白2(IREB2)、铁蛋白重链1(FTH1)、长链脂酰CoA合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)等铁死亡相关蛋白表达,以及PI3K/AKT/Nrf2通路相关蛋白表达。结果:NaT诱导后大鼠血清淀粉酶、脂肪酶活性、促炎因子水平和病理评分明显升高(P<0.05)。BMSCs移植能够明显减轻上述指标(P<0.05)。相比SAP组,BMSCs治疗组肺组织铁、MDA水平降低,GSH活性升高,IREB2、ACSL4蛋白表达降低,FTH1、GPX4及SLC7A11蛋白表达升高(P<0.05);ML385能够部分抵消BMSCs移植产生的抗脂质过氧化作用(P<0.05)。BMSCs移植上调了肺组织PI3K、p-AKT总蛋白和Nrf2核蛋白的表达(P<0.05)。结论:BMSCs移植能够有效减轻SAP相关肺损伤的全身炎症反应和局部组织损伤,抑制肺组织铁沉积和脂质过氧化,其抗脂质过氧化作用可能与PI3K/AKT/Nrf2通路有关。

外周血IL-6、TNF-α早期检测对急性胰腺炎相关肺损伤及其性质的临床预测价值

目的:探讨早期检测外周血白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对急性胰腺炎(AP)相关急性肺损伤(ALI)及其性质的临床预测价值。方法:选取发病72 h内于本院首次就诊的AP患者90例,根据有无发生ALI及其性质(一过性、持续性)将其分为non-ALI组和ALI组(一过性ALI亚组、持续性ALI亚组)。比较各组入院时、入院第3天外周血IL-6、TNF-α水平。结果:本组47例(52.2%)未发生ALI(non-ALI组),43例(47.8%)发生ALI(ALI组),其中18例(41.9%)为一过性ALI(一过性ALI亚组)、25例(58.1%)为持续性ALI(持续性ALI亚组);入院时、入院第3天,ALI组IL-6、TNF-α水平均高于non-ALI组(P<0.05);入院第3天,ALI组IL-6、TNF-α均高于入院时(P<0.05),但non-ALI组与入院时比较差异均无统计学意义(P>0.05)。进一步亚组分析显示,入院第3天,持续性ALI亚组IL-6、TNF-α水平均高于入院时(P<0.05),但一过性ALI亚组与入院时比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:早期检测外周血IL-6、TNF-α水平可以预测AP相关ALI的发生,并有助于评判ALI严重程度和转归情况。

乌司他丁联合参麦注射液治疗急性胰腺炎相关肺损伤的临床研究

目的观察乌司他丁联合参麦注射液对急性胰腺炎相关急性肺损伤的临床治疗效果。方法选取急性胰腺炎相关肺损伤患者60例,随机分为乌司他丁+参麦组(US组)、乌司他丁组(U组)和对照组(C组),每组20例。C组给予常规治疗,U组在常规治疗基础上每日静脉滴注乌司他丁(6000U/kg),US组在常规治疗基础上每日静脉滴注乌司他丁(6000U/kg)和参麦注射液(0.6ml/kg)。分别于治疗前、治疗后第3、7天行动脉血气分析,计算氧合指数,测定血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度。结果与C组比较,U组和US组治疗后3和7天血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度下降,治疗后7天氧合指数升高(P<0.05);与U组比较,US组治疗后7天血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度下降,氧合指数升高(P<0.05)。结论乌司他丁联合参麦注射液能进一步抑制炎性介质释放,减轻急性胰腺炎相关肺损伤。

清胰通腑汤灌肠治疗重症急性胰腺炎相关性肺损伤45例

本观察旨在探讨清胰通腑汤对重症急性胰腺炎(SAP)相关性肺损伤患者临床疗效。现报道如下。1资料与方法1.1临床资料:选自我院2020年9月~2022年9月SAP相关性肺损伤腑实热结证患者90例,随机分为观察组与对照组各45例。观察组男25例,女20例;年龄45~71岁,平均(60.82±6.47)岁;发病至入院3~27h,平均(15.27±3.18)h;发病诱因:胆源性17例,酒精性16例,其他12例。对照组男26例,女19例;年龄43~70岁,平均(59.71±7.52)岁;发病至入院5~24h,平均(15.08±4.35)h;发病诱因:胆源性19例,酒精性15例,其他11例。两组资料均衡(P>0.05)。本研究获得医院伦理委员会批准(IBR-2019065-R)。

骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠相关肺损伤的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤中ZO-1、Occludin表达的影响。方法将105只雄性SD大鼠随机分成假手术组(SO组)、SAP组和BMMSCs干预组;后两组再按处死时间不同分为6 h、12 h和24 h组,观察各组间肺的病理变化及肺毛细血管通透性改变情况;通过Western blot、RT-PCR检测各组间ZO-1、Occludin蛋白和mRNA的改变情况。结果与SO组相比,SAP组各时间点肺、胰腺的病理改变明显,肺毛细血管的通透性明显增加(P<0.05),肺湿干比值增加(P<0.05),肺ZO-1、Occludin蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);与SAP组比较,BMMSCs干预组各时间点肺、胰腺的病理改变减轻,肺毛细血管通透性改变减轻,肺组织湿干比值降低,肺ZO-1、Occludin蛋白和mRNA表达升高,12 h和24 h时间点表现的更为明显(P<0.05)。结论BMMSCs可使肺中ZO-1、Occludin的表达增加,这可能在减轻SAP相关肺损伤和改善肺毛细血管通透性方面发挥重要作用。

急性胰腺炎肺损伤发病机制与程序性细胞死亡相关性的研究进展

急性胰腺炎为消化系统常见的急腹症,病情进展容易引起器官衰竭,严重者可危及生命,其中肺为重症急性胰腺炎最早且最常损伤的器官,目前治疗方法有限。已有大量研究阐明急性胰腺炎相关肺损伤的病理机制,如胰酶、激肽学说、细胞因子学说和微循环学说等,最新研究又丰富了致病机制。程序性细胞死亡是机体维持内环境稳定的一种主动调控方式,包括细胞凋亡、细胞坏死样凋亡、细胞焦亡和铁死亡等。大量研究发现细胞凋亡在急性胰腺炎肺损伤中起着重要作用,也有相关研究发现细胞坏死样凋亡和细胞焦亡是引起急性胰腺炎胰外器官细胞死亡的重要方式。本文从细胞凋亡、铁死亡、细胞焦亡和细胞坏死样凋亡出发,综述近几年急性胰腺炎肺损伤相关的程序性细胞死亡研究成果,旨在为其临床转化提供理论依据。

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨清胰汤对重症急性胰腺炎肺泡上皮细胞损伤的修复机制

目的:探究Wnt/β-catenin信号通路在重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤发病机制中的作用及清胰汤(QYD)的干预机制。方法:将40只大鼠分为假手术(Sham)组、Sham+QYD组、SAP组和SAP+QYD组。采用经胆胰管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型,造模48 h后取胰腺和肺组织,苏木素-伊红(HE)染色检测组织病理损伤,真空干燥法检测肺湿/干重比值(W/D),ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-6水平,TUNEL试剂盒和蛋白免疫印迹法(WB)检测肺组织凋亡情况。免疫荧光法检测CyclinD1、β-catenin与SFTPC双染情况。WB法检测肺组织中Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白和下游细胞周期蛋白的表达。结果:与Sham组相比,SAP组大鼠HE切片显示胰腺和肺部病变严重,IL-6含量明显升高,SFTPC表达减少,提示肺泡上皮细胞严重损伤。与SAP大鼠相比,清胰汤治疗后大鼠胰腺和肺组织病理评分、W/D等各项指标均有不同程度改善,IL-6含量减少,凋亡蛋白Bcl-2、Bax及Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白和下游细胞周期蛋白表达明显上调,免疫荧光双染结果显示清胰汤治疗组出现更多的双染细胞,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:清胰汤通过激活Wnt/β-catenin信号通路减少肺泡上皮细胞凋亡,进而在促进急性胰腺炎相关肺损伤修复中发挥关键作用。

基于PI3K/PKB信号通路变化探究清胰汤在急性胰腺炎相关性肺损伤治疗中的应用价值及作用机制

目的:基于磷脂酰肌醇3羟激酶(PI3K)/磷酸化蛋白激酶B(PKB)信号通路变化探究清胰汤在急性胰腺炎相关性肺损伤治疗中的应用价值及作用机制。方法:选取2020年8月~2022年11月我院收治的98例急性胰腺炎相关性肺损伤患者,随机分为对照组与观察组各49例,对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上加用中药清胰汤治疗,均治疗2周,比较两组患者的临床疗效,肠胃恢复状况(发热、腹胀腹痛、恶心呕吐及肠鸣音恢复时间),血氧指标[血氧分压(PaO_(2))、氧合指数(OI)水平],血清学指标[淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LPS)、PI3K、PKB水平],生活质量[生活质量核心问卷(QLQ-C30)评分]以及不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组患者的总有效率为91.84%高于对照组的73.47%(P<0.05);观察组患者恶心呕吐、腹胀腹痛、发热、肠鸣音等肠胃状况恢复时间均短于对照组(P<0.05);观察组患者的PaO_(2)、OI水平均高于对照组(P<0.05);观察组患者的血清AMY、LPS、PI3K、PKB水平均低于对照组(P<0.05);观察组患者的QLQ-C30评分低于对照组(P<0.05);两组患者均未见有明显严重不良反应发生,且两组间不良反应发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:清胰汤对急性胰腺炎相关性肺损伤有较好的临床治疗效果,可有效缓解患者症状,提高生活质量,用药安全性好,PI3K/PKB信号通路激活被抑制是其主要作用机制之一。

沉默cFLIP在重症急性胰腺炎肺损伤中的作用机制研究

目的探讨沉默细胞型Fas相关死亡区域蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cFLIP)对重症急性胰腺炎(SAP)导致的肺损伤的影响及其可能的作用机制。方法分别取12只SD大鼠,随机分为对照组、cFLIPL(或cFLIPS)siRNA1组、cFLIPL(或cFLIPS)siRNA2组和cFLIPL(或cFLIPS)siRNA3组,筛选抑制率最高的cFLIPL siRNA和cFLIPS siRNA。50只SD大鼠随机分成假手术组、模型对照组、cFLIP siRNA-NC组、cFLIPS siRNA组、cFLIPL siRNA组,每组各10只。通过胰胆管内逆行注射3%牛磺胆酸钠溶液建立SAP模型,建模成功后,cFLIPS siRNA、cFLIPL siRNA和cFLIP siRNA-NC组大鼠尾静脉注射对应siRNA溶液,其余组注射等量0.9%NaCl溶液。HE染色检测肺组织病理学变化;ELISA检测IL-6、IL-1β和TNF-α含量;全自动分析仪检测静脉血白细胞数、中性粒细胞数;流式细胞术检测中性粒细胞凋亡;Western blotting检测中性粒细胞RIP1和caspase-8蛋白表达。结果cFLIPL siRNA2组以及cFLIPS siRNA1组干扰效率最明显,因此选择这2组进行后续实验(后续称为cFLIPL siRNA组和cFLIPL siRNA组)。与模型对照组大鼠相比,cFLIPL siRNA组和cFLIPS siRNA组大鼠肺泡结构损伤减轻,肺泡壁变薄,炎症细胞浸润减少;与模型对照组相比,cFLIPL siRNA组和cFLIPS siRNA组IL-6、IL-1β和TNF-α含量均明显降低,静脉血白细胞数、中性粒细胞数明显降低,中性粒细胞凋亡率明显升高,cFLIPL、cFLIPS和RIP1蛋白表达量明显降低,caspase-8蛋白表达量明显升高;以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论本研究结果表明,靶向沉默cFLIP可能通过上调caspase-8和抑制RIP1的表达,促进中性粒细胞凋亡,减少炎症介质IL-6、IL-1β和TNF-α释放,抑制肺组织中的中性粒细胞浸润,缓解SAP导致的肺损伤,在SAP中发挥保护作用。

清解化攻方对重症急性胰腺炎模型大鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制

目的使用网络药理学探究清解化攻方对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的可能作用机制,并通过动物实验验证。方法检索TCMSP、BATMAN-TCM、ETCM、SwissTargetPrediction数据库获取清解化攻方中各药物入血有效成分的作用靶点,在GeneCard数据库中检索获得SAP-ALI疾病靶点,将药物靶点与疾病靶点取交集获得共同靶点,随后通过STRING数据库及Cytoscape3.7.1软件对共同靶点进行蛋白互作网络分析,借助DAVID数据库行GO、KEGG富集分析,最后动物实验对关键信号通路予以验证。结果共筛选出清解化攻方治疗SAP-ALI有效活性成分28种,作用于42个共同靶点。PPI网络分析显示,STAT3、IL-6、TGFB1可能是核心靶点;GO、KEGG富集分析主要涉及细胞增殖、PI3K/AKT信号通路等。动物实验证实,清解化攻方能够改善SAP-ALI大鼠模型的胰腺、肺组织的病理情况,下调血清中α-淀粉酶、脂肪酶、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,下调肺组织中PI3K/AKT1信号通路相关蛋白及mRNA表达水平。结论清解化攻方可能通过多成分、多靶点,多通路协同治疗SAP-ALI,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化有关。

探讨血必净注射液治疗重症急性胰腺炎肺损伤的机制

目的:探讨血必净(XBJ)注射液对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤模型的治疗机制。方法:将80只雄性Sprauge-Dawley(SD)大鼠随机分为4组:对照组、SAP模型组、XBJ低剂量治疗组、XBJ高剂量治疗组,每组20只。除对照组,各组大鼠均经胰胆管匀速逆行注射4.5%牛磺胆酸钠溶液(0.1 mL/100 g,0.05 mL/min)以诱发SAP,造模成功30 min后,将XBJ低、高剂量治疗组大鼠经尾静脉注射XBJ(剂量分别为5、20 mL/kg),对照组及模型组给予等体积生理盐水。24 h后,从每组中随机抽取10只大鼠,经尾静脉注射Evans blue检测肺组织毛细血管通透性。处死余下的各组大鼠,取腹水测量其体积;取部分胰腺及肺组织计算组织干湿重比值;苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺、肺脏的病理改变,并进行病理评分;酶联免疫吸附法(ELISA)检测腹水淀粉酶含量;Western印迹法检测肺组织中ROCK1、MYPT1、pMLC的相对表达量。结果:SAP模型组较对照组腹水量及腹水淀粉酶含量明显升高(t=-21.73、-40.72,均P<0.01);SAP模型组、XBJ低剂量组、XBJ高剂量组腹水量及腹水淀粉酶含量逐渐降低(F=39.66、141.78,均P<0.01)。SAP模型组较对照组,胰腺干湿重比值、肺脏干湿重比值明显降低(t=19.83、15.47,均P<0.01),肺组织中Evans blue渗出量明显增高(t=-27.9,P<0.01);SAP模型组、XBJ低剂量组、XBJ高剂量组胰腺干湿重比值、肺脏干湿重比值逐渐升高(F=75.19、15.47,均P<0.01),肺组织中Evans blue渗出量逐渐降低(F=99.52,P<0.01)。对照组大鼠胰腺组织结构完整,SAP模型组大鼠胰腺病理得分明显升高(t=-42.79,P<0.01);XBJ低剂量组、XBJ高剂量组大鼠胰腺病理得分逐渐降低(F=175.43,P<0.01)。对照组大鼠肺组织结构完整,SAP模型组大鼠病理得分明显升高(t=-37.57,P<0.01);XBJ低剂量组、XBJ高剂量组大鼠肺组织病变减轻,病理得分逐渐降低(F=126.00,P<0.01)。SAP模型组较对照组肺组织中ROCK1、pMLC蛋白表达量明显升高(t=-16.97、-13.53,均P<0.01),MYPT1表达量显著降低(t=23.30,P<0.01);SAP模型组、XBJ低剂量组、XBJ高剂量组肺组织中ROCK1、pMLC蛋白表达量逐渐降低(F=84.89、50.84,均P<0.01),MYPT1表达量显著升高(F=48.68,P<0.01)。结论:XBJ通过降低多种细胞因子及DAMPs形成,抑制ROCK1-MYPT1-pMLC信号通路活化,对SAP肺损伤起到治疗的作用。

中药治疗重症急性胰腺炎肺损伤机制的研究进展

重症急性胰腺炎(SAP)是普外科最严重的急腹症之一,具有起病急、病死率高等特点,常导致多器官功能衰竭。急性肺损伤(ALI)是SAP发病后最常见的全身并发症,以进行性低氧血症和呼吸窘迫为主要表现,严重者可发展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)甚至多器官功能障碍综合征(MODS)。目前,重症急性胰腺炎肺损伤(SAP-ALI)的发病机制尚不完全清楚,广大学者们研究发现中药治疗SAP相关肺损伤疗效显著。故本文查阅近5年来国内外相关文献,总结了中药治疗SAP-ALI的作用机制,以期为进一步的基础研究、临床研究及广大医师临床治疗此病提供参考和新思路。

白花蛇舌草提取物通过AMPK/ATG5信号通路对急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用机制研究

目的:通过5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/自噬相关蛋白5(ATG5)信号通路,探讨白花蛇舌草提取物减轻急性胰腺炎(AP)大鼠肺损伤的机制。方法:建立AP肺损伤大鼠模型,随机分为模型组、提取物(白花蛇舌草提取物)组、3-MA(自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤)组、AICAR(AMPK激活剂)组、提取物+AICAR组,每组15只,另取15只大鼠作为假手术组;ELISA检测血清淀粉酶(AMY)、IL-1β、IL-6、IL-18水平;检测大鼠腹水量及肺湿/干重比(W/D);HE观察胰腺及肺组织病理损伤;Western blot检测溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、自噬底物p62、IL-1β前体蛋白(pro-IL-1β)、胰蛋白酶原活化肽(TAP)、AMPK、p-AMPK、ATG5、自噬标志物LC3-Ⅱ/Ⅰ、泛素特异性蛋白酶10(UPS10)表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠腹水量、肺W/D、胰腺和肺组织病理损伤评分、血清AMY、IL-1β、IL-6、IL-18水平、胰腺组织p62、TAP、pro-IL-1β表达、肺组织pAMPK/AMPK、ATG5、LC3-Ⅱ/Ⅰ、UPS10、pro-IL-1β表达均升高(P<0.05),胰腺和肺组织LAMP2蛋白表达降低(P<0.05);模型大鼠经白花蛇舌草提取物或自噬抑制剂3-MA干预后,上述指标均得到显著改善(P<0.05),且白花蛇舌草提取物的改善效果优于3-MA(P<0.05);而AMPK激活剂AICAR可削弱白花蛇舌草提取物对AP大鼠肺损伤的改善作用(P<0.05)。结论:白花蛇舌草提取物可通过抑制AMPK/ATG5信号通路减轻炎症反应、降低自噬水平改善AP大鼠肺损伤。