大黄素对急性胰腺炎大鼠胰腺核因子-kB活化的影响

目的观察大黄素对急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺组织核因子-kB(NF-kB)活化的影响,初步阐明大黄素治疗 AP 的分子作用机制。方法雄性 SD 大鼠采用持续输注雨蛙素(5 μg·kg^(-1)·h^(-1))法建立急性水肿性胰腺炎模型,分为注射后5、30min 及1、2、4、6 h 组,停止输注后6h 组;造模前2h 大鼠腹腔注射大黄素(10、30、100mg/kg)组及生理盐水对照组。采用电泳迁移率改变分析实验检测 NF-kB DNA 结合活性,Western blot 检测 NF-kB 抑制蛋白(ⅠkBs)的ⅠkBα和ⅠkBβ降解水平,Northern blot 检测 NF-kB 信号下游效应分子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因表达。结果超生理剂量的雨蛙素可诱导大鼠胰腺 NF-kB 发生双相活化,活化高峰出现在雨蛙素注射30min 和4h 后,其相对面积灰度值分别为正常对照的(3.9±2.0)和(7.7±3.2)倍(n=4,P 值均<0.01)。大黄素10、30和100mg/kg剂量治疗组大鼠胰腺 NF-kB 活性较 AP 模型组分别下降45%,62%和84%(30min)和28%,74%和80%(4h,n=4,P 值均<0.01)。同时,大黄素(100mg/kg)可明显抑制雨蛙素诱导的胰腺ⅠkBα和ⅠkBβ蛋白降解(n=4,P 值均<0.01)。与其对 NF-kB 活化的抑制作用一致,大黄素剂量依赖性地抑制雨蛙素诱导的胰腺 MCP-1和 ICAM-1基因表达。结论大黄素可抑制胰腺内ⅠkBs/NF-kB 信号转导通路活化,从而抑制炎性细胞因子和粘附分子基因表达,发挥其对 AP 的治疗作用。