地西他滨对AML1-ETO阳性急性髓系白血病细胞中PD-L2分子表达的影响

背景复发难治性AML1-ETO融合基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者预后差。程序性细胞死亡蛋白-配体2(programmed cell death-ligand 2,PD-L2)是参与白血病免疫逃逸的重要分子,研究去甲基化药物对白血病细胞中PD-L2分子表达的影响,对于优化用药方案具重要意义。目的分析AML1-ETO融合基因阳性的AML细胞中PD-L2分子启动子区甲基化水平及DNA甲基转移酶抑制剂地西他滨(decitabine,DAC)对其表达的影响。方法以AML1-ETO融合基因阳性AML细胞系Kasumi-1以及两对AML1-ETO沉默(SKNO-1-PGK,SKNO-1-siA/E)或诱导细胞系(U937-MT,U937A/E,U937A/E+ZnSO4)为模型,采用终浓度为2.5μmol/L的DAC或0.1%二甲基亚砜(对照)处理细胞72 h,其中Kasumi-1、SKNO-1-PGK细胞系设置0.25μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L 3个浓度梯度。采用亚硫酸氢盐修饰后测序法检测PD-L2 DNA启动子区特异性位点的甲基化水平;采用逆转录实时定量PCR技术检测PD-L2 mRNA表达水平。结果Kasumi-1、SKNO-1-PGK细胞系中PD-L2 DNA启动子区呈高甲基化水平,DAC处理后该区域DNA甲基化水平下降(94.3%vs 90.7%,88.6%vs 83.6%)。2.5μmol/L DAC处理后的Kasumi-1、SKNO-1-PGK、SKNO-1-siA/E、U937A/E细胞中PD-L2 mRNA的相对表达水平均显著高于对照组(P均<0.05);特别是DAC处理后,沉默AML1-ETO基因的细胞系中PDL2表达增加(SKNO-1-siA/E与SKNO-1-PGK相比上升35.80%,P=0.031),过表达AML1-ETO基因的细胞系中PD-L2表达减少(U937A/E+ZnSO4与U937A/E相比下降95.51%,P=0.036)。经DAC处理后的Kasumi-1和SKNO-1-PGK细胞系中,PD-L2 mRNA表达呈浓度依赖性递增(Kasumi-1:r2=0.87;SKNO-1-PGK:r2=0.93。P均<0.05)。结论AML1-ETO阳性AML细胞中PD-L2基因的表达受DNA甲基化调控,AML1-ETO可能参与了PD-L2基因表达的抑制。

环腺苷酸拟似物8-CPT-cAMP诱导M2b型急性髓系白血病细胞系Kasumi-1细胞分化的研究

为了解环腺苷酸拟似物8-对氯苯硫基环腺苷酸(8-CPT-cAMP)对M2b型急性髓系白血病(AML-M2b)细胞的作用,以AML-M2b细胞株Kasumi-1细胞为模型,通过观察细胞生长、形态、表面分化抗原、细胞周期分布以及对四氮唑蓝的还原能力的改变,研究8-CPT-cAMP对Kasumi-1细胞增殖及分化的影响,并应用半定量RT-PCR和Western blot检测药物处理前后Kasumi-1细胞内AML1-ETO融合蛋白的变化。结果发现,8-CPT-cAMP(200μmol/L)可明显抑制Kasumi-1细胞增殖而促使细胞趋向分化,但这种分化不是典型的完全终末性分化,8-CPT-cAMP对Kasu-mi-1细胞内AML1-ETO融合基因及其编码蛋白的表达无显著影响。结论:8-CPT-cAMP对AML-M2b细胞具有诱导分化效应。

急性白血病患儿骨髓单个核细胞CREB、Bcl-2的表达及其与病灶髓外浸润和预后的关系

目的观察急性白血病(AL)患儿骨髓单个核细胞中CAMP反应元件型结合因子(CREB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA和蛋白的表达变化,并探讨其与AL患儿髓外浸润、预后的关系。方法选择2015年2月~2017年3月收治的96例AL患儿,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)61例为ALL组,急性髓细胞白血病(AML)35例为对照组,另取骨髓穿刺排除白血病的其他血液病患儿35例为对照组。均行骨髓穿刺抽取骨髓组织分离单个核细胞,用实时荧光定量PCR法测算其中CREB、Bcl-2 mRNA相对表达量,用Western blotting法测算其中CREB、Bcl-2蛋白相对表达量,并进行组间比较。将ALL、AML组患儿按是否存在髓外浸润分为髓外浸润亚组和无髓外浸润亚组,按化疗后是否缓解分为缓解亚组和未缓解亚组,比较各亚组CREB、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量。结果ALL、AML组骨髓单个核细胞中CREB、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05)。ALL组和AML组骨髓单个核细胞CREB、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量相比,P均>0.05。ALL、AML组中有髓外浸润亚组患儿骨髓单个核细胞中CREB、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均高于各自的无髓外浸润亚组(P均<0.05)。ALL、AML组中缓解亚组患儿骨髓单个核细胞中CREB、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量均高于各自的未缓解亚组(P均<0.05)。结论 AL患儿骨髓单个核细胞中CREB、Bcl-2 mRNA和蛋白高表达,且表达量与髓外浸润和患儿预后有关。

HAG和HA方案治疗老年初诊急性髓系细胞白血病M2型疗效对比

目的对比分析HAG和HA方案治疗老年初诊急性髓系细胞白血病部分分化(M2)型疗效。方法 94例老年初诊急性髓系细胞白血病M2型患者根据随机分组法分为A组(n=47)和B组(n=47)。A组采用HAG方案治疗,B组采用HA方案治疗。2组患者均于2个疗程后评价疗效、生存时间及不良反应。结果A组总有效率明显高于B组,差异有统计学意义(χ~2=3.898 6,P<0.05);A组中位生存时间明显长于B组,差异有统计学意义(t=23.270 2,P<0.05);A组白细胞最低值和中性粒细胞最低值明显高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);A组中性粒细胞缺乏持续时间明显短于B组,差异有统计学意义(P<0.05);A组非血液学不良反应发生率明显低于B组,差异有统计学意义(χ~2=4.039 3,P<0.05)。结论老年初诊急性髓系细胞白血病M2型患者应用HAG方案治疗效果明显优于HA方案。

儿童急性髓性白血病M2型AML1/ETO融合mRNA检测及其临床意义

目的 研究AML1/ETO融合mRNA在儿童急性髓性白血病M2型中的表达及其对残留白血病监测及预后的指导意义。方法 通过逆转录酶 /聚合酶链反应 (RT PCR)方法扩增M2型患者的AML1/ETO融合mRNA ,并结合临床资料综合分析。结果 3 6例AMLM2中 2 7例AML1/ETO融合基因阳性 ,占 75 %;RT PCR方法阳性率明显高于染色体分析 ;AML1/ETO融合基因阳性病人缓解率 ( 74 %)高于阴性病人 ( 5 6%) ;通过AML1/ETO融合mRNA的检测可监测体内残留白血病情况 ,AML1/ETO阳性病人经治疗后转阴并持续阴性者预后好 ;而持续阳性者预后差 ;由阴性转阳性者可预示复发。结论 RT PCR检测AML1/ETO融合mRNA为更敏感的细胞遗传学诊断方法 ,定期检查可以监测体内微小残留白血病 ,为治疗、预后判断提供了有效手段。

急性髓系白血病M2b型分子生物学特征的鉴定

目的 :研究急性髓系白血病 (AML) M2 b细胞遗传学和分子生物学特征 ,探讨 AML- M2 b与 t(8;2 1)白血病的关系。方法 :应用 G显带技术分析染色体核型 ,用 RT- PCR法检测 AML 1/ MTG8融合基因转录本并进行微量残留白血病检测 ,采用 Southern Blot技术检测 AML 1及 MTG8基因重排。结果 :86 .1% (31/ 36例 )的 AML -M2 b具有 t(8;2 1) ,13.9% (5 / 36例 )无 t(8;2 1)。在 AML- M2 b中 ,AML1/ MTG8融合基因转录本的检出率为10 0 % (44 / 44例 ) ,其中包括 5例无 t(8;2 1)的病例 ,AML1基因和 MTG8基因的重排检出率分别为 81.8%和71.0 %。 13例完全缓解 (CR)的 AML- M2 b中 12例可检出 AML1/ MTG8融合基因转录本。结论 :AML- M2 b与国际上的 t(8;2 1)白血病所指为同一疾病实体 ,AML 1/ ETO融合基因是这种疾病的基因标志 ,AML - M2 b可分为 t(8;2 1) (+) AML 1/ ETO(+) AML - M2 b和 t(8;2 1) (- ) AML 1/ ETO(+) AML - M2 b。经化疗获 CR的 AML - M2 b仍可检出微量残留白血病细胞。

急性髓系白血病靶向治疗药物的研究进展

急性髓系白血病(AML)是最具侵袭性的成人白血病,大量的临床前和临床研究推动了美国食品药品监督管理局逐步批准了数种适用于AML的靶向药物。然而,大多数患者的预后仍然不佳,而且常因耐药突变克隆导致疾病复发。因此,临床上仍需要进一步研究新的靶向药物,或提出创新性的、更为合理的用药方案。本文综述了包括B淋巴细胞瘤-2基因抑制剂、异柠檬酸脱氢酶抑制剂、FMS样酪氨酸激酶3抑制剂和TP53抑制剂药物的临床研究进展,并简述这些药物在AML治疗中的地位及作用,为未来治疗方案制订的精准化、个体化提供思路。

急性髓细胞性白血病M2患者形态学及免疫学分型与融合基因染色体检查的价值

背景:传统的形态学分型法仅能使70%左右的急性白血病得以准确分型,单纯的FAB分型已远远不能满足临床需要。目的:评价形态学、免疫分型、融合基因、染色体检查在急性髓细胞性白血病(M2)中的诊断价值及预后意义。方法:选择新疆医科大学第一附属医院收治的急性髓细胞性白血病患者M2型76例,男40例,女36例。用反转录-聚合酶链反应技术检测AML1/ETO融合基因的表达、R带法进行染色体核型分析、流式细胞仪免疫分型检测,应用形态学和免疫分型、融合基因、染色体检查,并持续观察,定期检查血象等相关检查,由是否能明确诊断或协助诊断,对复发有无相关检查预测性来分析其诊断价值及预后影响因素。结果与结论:76例患者中有形态学不易分类的6例患者,结合免疫分型、融合基因及染色体检查可明确,单纯髓系抗原表达较伴有干祖系抗原表达缓解率高,CD19抗原可与部分急性髓系白血病有交叉表达,且有交叉表达的有较好的预后,伴有CD7抗原表达7例均完全缓解,可能更倾向于分化成熟的细胞,具有单纯t(8,21)、融合基因阳性者预后较佳,完全缓解率高。提示形态学、免疫学分型结合融合基因、染色体检查可提高急性白血病M2的诊断准确性、判断预后。

儿童急性髓细胞性白血病中B淋巴细胞瘤-2基因和P-糖蛋白表达的临床价值

目的探讨儿童急性髓细胞性白血病中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和P-糖蛋白(P-gp)的表达及临床价值。方法采用免疫组化S-P法检测初诊未治的100例儿童急性髓细胞性白血病和50例非恶性血液病患儿中Bcl-2和P-gp的表达,并分析两者的相关性。结果 100例儿童急性髓细胞性白血病骨髓细胞中Bcl-2和P-gp的阳性表达率分别为72.00%和44.00%,高于50例非恶性血液病患儿的4.00%和6.00%,差异均有统计学意义(χ~2=61.664、22.371,P均<0.001)。100例儿童急性髓细胞性白血病骨髓细胞中Bcl-2和P-gp的表达呈正相关关系(r_s=0.373,P<0.001)。结论儿童急性髓细胞性白血病的骨髓细胞中存在Bcl-2和P-gp蛋白的高表达,这可能有助于儿童急性髓细胞性白血病的诊断和预后判断。

伴有t(9;12)(q22;p13)易位的急性髓细胞白血病M_(2a)

目的报告1例伴有t(9;12)(q22;p13)易位的急性髓细胞白血病M2a。方法患者骨髓细胞短期培养后按常规方法制备染色体,采用R显带技术进行染色体核型分析;以9 号和12 号整条染色体涂染探针对其进行染色体涂染检测。结果染色体核型和染色体涂染分析均证实该患者具有t(9;12)(q22;p13)克隆性染色体异常。结论t(9;12)(q22;p13)易位是急性髓细胞白血病M2a的一种新的临床遗传学类型。

慢性粒细胞白血病先后急性变M2a,M2b例

目的追踪观察患者慢性粒细胞白血病(CML)双重急性变(M2a,M2b)的诊断及治疗过程,以期对慢粒急变有更深入的了解.方法对患者整个病程给予追踪记录.结果与结论通过对患者病程的诊断、治疗和观察,进一步研究和探讨慢性粒细胞白血病急性变机制及基因、染色体的结构变化.

伴高嗜酸性粒细胞的急性髓系白血病(AML-M2a)1例

造血与淋巴组织肿瘤中,伴嗜酸性粒细胞增多的疾病常见于骨髓增殖性肿瘤（CML、PV、IMF、ET、CEL-非特殊类型等）;骨髓和淋巴肿瘤,伴嗜酸性粒细胞和PDGFRA、PDGFRB或FGFR1异常[1];急性髓系白血病的特殊亚型（AML-M4Eo）及霍杰金淋巴瘤、急性淋巴细胞白血病（ALL）/淋巴瘤等。本文介绍1例伴高嗜酸性粒细胞的急性髓系白血病（AML-M2a）的临床资料和诊断情况如下。

PTEN及BCL-2在急性髓系白血病中的表达及意义

目的:探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白的基因(PTEN)及B细胞淋巴瘤/白血病-2(BCL-2)在急性髓系白血病(AML)中的表达及意义。方法:采用Real-time PCR和Western blot法检测80例AML(包括56例初治患者,16例缓解患者,8例复发患者)及30例非血液病患者骨髓中PTEN及BCL-2的mRNA及蛋白表达水平,并分析二者与临床病理参数的关系。结果:初治和复发组患者骨髓细胞PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著低于对照组及缓解组(P<0.01),BCL-2 mRNA及蛋白表达量均显著高于对照组及缓解组(P<0.01)。PTEN与BCL-2 mRNA表达水平与AML患者年龄,性别及白细胞计数无相关性(P>0.05)。AML患者中PTEN与BCL-2蛋白及mRNA表达水平均呈负相关(r=-0.432,r=-0.569)。结论:PTEN及BCL-2参与AML的发生发展,并对AML的化疗效果起着指示作用。

急性髓系白血病患者PTEN、miR-195、BCL-2的表达及临床意义

目的探讨人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白的基因(PTEN)、microRNA-195(miR-195)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(BCL-2)等基因的表达在急性髓系白血病(AML)患者中的临床意义。方法选取咸阳市中心医院2017年1月至2018年11月间收治的60例AML患者作为研究对象,根据病情情况分为初发组(40例)、复发组(8例)、缓解组(12例),并选择60例体检健康成年人作对照组,采用RT-PCR检测两组受检者骨髓中PTEN、miR-195、BCL-2的mRNA及蛋白表达水平,并分析三者的表达与AML的关系。结果RT-PCR结果显示,初发组患者骨髓单个核细胞中PTEN mRNA、miR-195 mRNA表达量分别为4.25±1.11、1.07±0.23,复发组患者分别为2.91±0.77、0.96±0.21,复发组的PTEN mRNA、miR-195 mRNA表达量低于初发组,且均低于缓解组患者的10.53±2.63、3.85±1.14及对照组的10.76±2.62、3.93±0.88,差异均具有统计学意义(P<0.05);初发组患者的骨髓单个核细胞中的BCL-2 mRNA表达量为9.08±2.08,复发组患者为9.40±2.56,复发组的BCL-2 mRNA表达量高于初发组,且均高于缓解组患者的3.68±1.03及对照组的3.24±0.76,差异均具有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,PTEN、miR-195的表达与AML呈负相关(r=-0.694、-0.735,P<0.01),而BCL-2 mRNA的表达与AML呈正相关(r=0.747,P<0.01)。结论PTEN、miR-195在AML中表达量低,而BCL-2在AML中表达量高,三者的表达均可作为AML的发生、发展的预测指标,且PTEN、miR-195的表达与AML呈负相关,而BCL-2的表达与AML呈正相关,表明靶向调控PTEN、miR-195,从而抑制BCL-2表达,可作为新的AML基因治疗靶点。

成人急性非淋巴细胞白血病M2型患者AML1/ETO融合基因mRNA表达及其临床意义

目的分析成人急性非淋巴细胞性白血病M2型患者AML1/ETO(AE)融合基因的表达,并探讨其与临床表现,疗效的关系以及在预后判断中的意义。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应技术分析成人急性非淋巴细胞性白血M2患者AE融合基因mRNA表达,并比较其与临床表现、治疗缓解率的关系。通过随访,评价其在预后判断中的意义。结果在23例成人急性非淋巴细胞性白血M2患者中,12例可检测到AE融合基因mRNA表达,为所检测患者的52.2%(12/23),其中,11例为M2a,1例为M2b。与AE融合基因mRNA表达阴性患者比较,AE融合基因mRNA表达阳性患者年纪较轻,外周血白细胞计数较低,临床上易出现发热,出血。经治疗后,AE融合基因mRNA表达阳性患者缓解率为75.0%,而AE融合基因mRNA表达阴性患者缓解率为36.4%。经8个月随访发现,1例AE融合基因mRNA表达阴性患者在缓解后第4个月复发并出现脑内转移而死亡,另1例在缓解后第7个月复发。而AE融合基因mRNA表达阳性患者在8个月的随访中无一例复发。结论在成人急性非淋巴细胞性白血病M2患者中50%以上表达AE融合基因mRNA,AE融合基因mRNA表达阳性患者更易出现发热,出血倾向,但治疗效果较好,预后良好。

伴[t(2;13)(q37;q12),t(8;21)(q22;q22)]特殊染色体易位的M2型急性髓系白血病1例报告

随着儿童白血病诊疗技术的不断提高,尤其是细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子遗传学分型的应用,发现越来越多的白血病患儿有着其自身的细胞遗传学和分子生物学特点。t（8;21）（q22;q22）异位是急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）中最常见的染色体异常之一,在分子水平上,位于8q22的ETO基因与位于21q22的AML1基因发生融合,

急性单核细胞白血病M_(5a)和M_(5b)细胞遗传学与临床表现的比较(英文)

为了比较急性单核细胞白血病M_(5a)和M_(5b)细胞遗传学差异,并研究其与临床行为之间的相互关系,采用骨髓直接法和24小时短期培养法制备染色体标本,用G显带技术对58例成人初发急性单核白血病细胞进行核型分析,同时对其临床资料进行回顾性研究。结果表明58例患者中正常核型28例,异常核型30例,其中正常核型在M5b中出现率高于M5a(P=0.0001),异常核型中11q23异常和+8染色体在M5a中均较M5b常见(P<0.01);临床上异常核型的M5患者常有高白细胞(WBC)计数,中枢神经系统浸润,完全缓解(CR)率低及存活期明显缩短的特征。结论急性单核细胞白血病在遗传和临床上是一组异质性疾病,但M5a和M5b似乎具有各自独特的遗传学背景和临床表现。

Ang 2 mRNA在急性髓系白血病患者骨髓细胞的表达及临床意义

目的观察Ang 2 m RNA在急性髓系白血病患者骨髓细胞的表达并对其临床意义做出简要评价。方法选择白血病患者80例,根据患者临床表现、免疫分型、细胞形态学以及遗传学特征等分为初治组、复发组、难治组、缓解组,各20例,另择取20名健康体检者设为对照组。对比各组之间Ang 2 m RNA表达水平差异,并对其临床意义做出简要评价。结果初治组患者Ang 2 m RNA水平为5.46,复发组为1.54,难治组为8.66,初治组Ang 2 m RNA水平显著高于对照组与缓解组（P〈0.05）;复发组与难治组Ang 2 m RNA水平亦高于对照组与缓解组（P〈0.05）;初治组、复发组与难治组之间Ang 2 m RNA水平比较差异无统计学意义。患者初治时白细胞计数中位数为11.88,范围为0.29~417,血红蛋白中位数为76.54,范围为2.8~125,外周血原幼稚细胞比例中位数为40.01,范围为0~99,白细胞计数、血红蛋白、外周血原幼稚细胞比例不存在显著相关性。结论 Ang 2 m RNA表达水平在不同患者中具有显著差异,可将其作为判断缓解率的有效标准。