急性高眼压发作后眼后节的变化

眼压急进性升高是急性闭角型青光眼的典型表现,也是导致青光眼患者眼部组织损伤,视力下降甚至失明的重要原因。急性闭角型青光眼的短时间内眼压急剧地升高,会对视网膜、脉络膜以及视神经的结构和功能造成特征性的损伤。目前对于青光眼的诊断及病程评估,很大程度上是依赖于高眼压的状态,视神经的变化及视野的损伤,但此时青光眼患者的眼底已经发生了不可逆性的损伤。而眼后节的微结构改变,对于高眼压更加敏感,往往出现在视神经和视野损伤之前,可以更早的提示高眼压对眼部的损伤。通过对眼后节影像学特点的评估,可以从中探索出临床上评估影响青光眼预后的形态学特征,对于青光眼的早期诊断具有重要的临床意义。

赖氨酰氧化酶家族在大鼠急性高眼压视网膜中的表达

目的观察赖氨酰氧化酶家族(LOXs)在急性高眼压(AOH)大鼠视网膜中的表达变化。方法取SD成年雄性大鼠随机分为对照组(CON组)和AOH组。CON组大鼠正常饲养不做任何处理;AOH组大鼠采用前房灌注法建立AOH模型。2周后处死大鼠,收集视网膜组织。qRT-PCR检测视网膜组织中LOXs[包括赖氨酰氧化酶(LOX)和赖氨酰氧化酶样蛋白LOXL1、LOXL2、LOXL3、LOXL4]表达及细胞外基质(ECM)相关蛋白Collagen 1/3/4 a1(Col1/3/4 a1)、Elastin(Eln)、Fibulin1/4(Fbn 1/4)表达。免疫组化染色检测LOXs在大鼠视网膜中的定位表达情况。Western blot检测大鼠视网膜中LOX表达变化。结果LOXs在大鼠视网膜各层均有不同程度的表达,LOX主要表达于视网膜神经节细胞层、神经纤维层、内丛状层和外丛状层;LOXL1主要表达于内丛状层、外丛状层和血管壁;LOXL2主要在神经节细胞层、内丛状层和内核层中表达;LOXL4在内丛状层和内核层中表达;然而LOXL3仅在视网膜血管壁中表达。与CON组比较,AOH组大鼠视网膜组织中LOX、Col1a1、Eln表达增加(P<0.05);2组大鼠视网膜中LOXL1、LOXL2、LOXL3、LOXL4、Col3a1、Col4a1、Fbn1、Fbn4 mRNAs表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论AOH大鼠视网膜中LOX高表达,其可能通过ECM重塑参与高眼压导致的视网膜损伤病理过程。

青光安颗粒对兔急性高眼压视神经轴突的保护作用

目的:观察青光安颗粒对兔急性高眼压状态后视神经轴突及视网膜神经节细胞的保护作用。方法:家兔48只随机分成青光安治疗组、模型对照组,每组24只。用生理盐水灌注法1眼造成急性高眼压模型,另1眼则穿刺灌注不加压作为自身空白对照组,连续灌胃14d。分别于造模后7,14d处死,检测视网膜中NO及谷氨酸的含量,并观察视网膜的病理组织学改变。结果:7d后各组视网膜组织中NO、谷氨酸含量比较差异有显著性(P<0.01),治疗组和模型组中NO及谷氨酸含量均高于空白组,差异具有显著性(P<0.01,P<0.05),但治疗组明显低于模型组,差异亦具有显著性(P<0.01)。14d后治疗组中NO及谷氨酸含量均接近空白组,差异无显著性;但模型组仍明显高于空白组,差异具有显著性(P<0.05,P<0.01)。治疗组与模型组两组2wk之间比较差异均有显著性(P<0.05)。电镜结果表明,与模型组对比治疗组轴突肿胀较轻,轴浆内线粒体清晰数目较多,视网膜神经节细胞损伤较轻。结论:青光安能加速急性高眼压状态后视网膜组织中NO及谷氨酸的清除,对视神经轴突有保护性作用。

急性高眼压兔眼视网膜神经节细胞凋亡的病因分析

选取健康成年新西兰大耳白兔 30只 ,随机分为 5组 ,每组 6只 ,均一眼为高眼压模型眼 ,另一眼为自身对照眼。5组兔分别于制造模型眼后 1、3、7、15和 30天处死。应用辣根过氧化物酶 (HRP)组织化学染色方法和透射电镜技术观察急性高眼压对视神经顺行轴浆运输和超微结构的影响。结果显示实验组较对照组 HRP积分光密度的差异有极显著性 (P<0 .0 1) ;自高眼压后 1天始 ,实验组部分轴突出现肿胀、变性 ,第 15天部分轴突明显萎缩。认为急性高眼压可使视神经顺行轴浆运输发生障碍 ,轴突变性 ,髓鞘松解 ,最终导致 RGC凋亡乃至死亡。

中药青光安对急性高眼压兔视网膜组织结构及细胞凋亡的影响

目的:探讨中药青光安对兔实验性急性高眼压后视网膜组织结构及细胞凋亡的影响。方法:将49只家兔随机分为7组,每组7只。其中A1和A2为青光安组;B1和B2为石斛夜光丸组;C1和C2为模型组;D组为空白对照组。青光安连续灌胃1wk后用前房内灌注生理盐水法制成急性高眼压模型。再连续灌胃1wk和2wk处死动物,用光镜和透射电镜观察视网膜超微结构的变化,光镜观察视网膜细胞凋亡情况。结果:1wk和2wk视网膜组织结构差别不大。模型组和石斛夜光丸组视网膜各层结构紊乱,细胞数量不同程度减少,其凋亡小体数量明显多于青光安组,A组与B,C组比较,差异有非常显著统计学意义(P<0.01)。模型组和石斛夜光丸组的神经节细胞核膜欠清,大多数线粒体肿胀,有固缩现象,粗面内质网扩张;青光安组上述改变不明显。结论:青光安具有保护视网膜组织结构,减少细胞凋亡的作用。

大鼠急性高眼压模型视网膜组织中HSP60的表达及功能

目的:探讨HSP60(热休克蛋白60)在大鼠急性青光眼模型视网膜组织中的表达及其与血清中相应抗体的关系。方法:将SD大鼠70只随机分为高眼压组60只,正常对照组10只。大鼠全身及表面麻醉后,将一盛有等渗的生理盐水的储容器相连的7号针头于3∶00位的角膜缘处刺入前房,提升储容器的高度,使眼内压达到110mmHg,但不超过150mmHg,观察大鼠眼前段变白,且视网膜色白,未见红色反光时即为视网膜缺血,缺血1h后再灌注,并于再灌注后2,6,12,24,72,168h将大鼠麻醉过量致死,处死前测眼压,抽血2mL,供酶联免疫吸附测定使用,分析视网膜组织内HSP60抗原产生的血清中相应抗体水平。并立即取出眼球,同时对鼠眼视网膜组织进行石蜡切片,采用免疫组化法检测视网膜组织中HSP60的表达及分布情况,并对检测结果进行统计学分析。结果:急性高眼压诱导的视网膜缺血/再灌注组眼压明显升高,视网膜组织中的HSP60阳性表达率在术后各时间点,高眼压组与正常对照组比较,差异有统计学意义(F=97.21,40.72,83.85,95.82,48.63及44.37,均P<0.01)。神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)中HSP60阳性表达随着眼压升高及高眼压持续时间延长逐渐增强,且视网膜神经纤维层中也出现较明显的HSP60阳性表达。结论:HSP60表达增强可能在急性高眼压所致的视神经病变中具有重要作用。

急性高眼压后大鼠视网膜谷氨酰胺合成酶的表达变化

为了探索谷氨酰胺合成酶在青光眼视网膜中的表达变化及其可能作用,本实验用急性高眼压模型,结合免疫组织化学染色和Western blot检测了急性高眼压后大鼠视网膜中谷氨酰胺合成酶的表达。结果显示:正常视网膜中,谷氨酰胺合成酶免疫组织化学染色主要见于Muller细胞胞体;0 d组中,Muller细胞胞体染色稍淡,而内网层中表达增加,且呈明显的点状分布; 1d组、3 d组中Muller细胞胞体染色进一步变淡,但内网层中呈现弥散染色。至再灌第7 d、14 d,Muller细胞胞体又出现浓的染色。平均灰度值显示:与正常组相比,0 d组中谷氨酰胺合成酶表达有增加但差异无显著性;1 d组中表达显著增加,3 d组、7 d组表达逐渐减少,至第14 d时基本恢复正常。Western blot显示谷氨酰胺合成酶为一分子量约为45 kD的单一蛋白带,与其它组相比,1 d组中表达显著增加。提示:急性高眼压导致的视网膜缺血再灌早期,Muller细胞中谷氨酰胺合成酶的快速重新分布和表达上调可能加速了胞外谷氨酸的代谢,对缺血再灌条件下的视网膜特别是节细胞起到保护作用。

姜黄素对急性高眼压家兔的视网膜神经节细胞的保护作用

目的:探讨姜黄素(Curcumin,Cur)对实验性急性高眼压家兔眼视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的保护作用。方法:将24只家兔按照随机等分的方法分为3组,即姜黄素干预青光眼模型组(姜黄素组)、未给予姜黄素干预的青光眼模型组(青光眼组)和不经任何干预措施的正常对照组(正常组)。应用前房灌注升高眼压的方法给姜黄素组和青光眼组的家兔建立急性高眼压模型,急性高眼压模型造模成功后,给予姜黄素组家兔玻璃体腔注射比例浓度为0.1mg/0.1mL的姜黄素,青光眼组家兔玻璃体腔注射相同体积的生理盐水,每天注射1次,共7d。正常对照组不做上述任何处理直接取眼球。实验完成后,通过免疫组织化学法检测三组家兔眼球视网膜神经节细胞Thy-1的表达并计数。结果:姜黄素组和正常组的视网膜神经节细胞Thy-1表达之间差异无统计学意义(P>0.05);青光眼组和正常组的视网膜神经节细胞Thy-1表达差异有显著统计学意义(P<0.01)。姜黄素组、正常组和青光眼组的视网膜神经节细胞密度分别为20.3±2.7、21.5±1.8和15.1±2.3个/高倍视野。结论:在姜黄素作用的急性高眼压模型家兔的实验中,姜黄素可以通过提高视网膜神经节细胞的Thy-1的表达,表明其在一定程度上能够降低急性高眼压状态下家兔视网膜神经节细胞的损伤,推测姜黄素可能对视网膜在特定情况下具有一定的保护作用。

急性高眼压条件下视网膜神经感觉层超微结构的变化

目的:研究高眼压条件对大鼠视网膜神经感觉层(neurosensory retina)超微结构的影响。方法:利用自制的加压装置使大鼠眼内压升高,维持眼底缺血状态2h,再分别于恢复血液再灌注0,8,24,48h;7d处死大鼠,取出视网膜组织,电镜观察。结果:电镜下观察再灌注8h视网膜外核层、内核层细胞死亡表现出凋亡和坏死两种特征,神经纤维层水肿明显,细胞线粒体出现空泡样结构,24h有视网膜节细胞凋亡数量最多,48h减少,7d后凋亡细胞数量减少,细胞密度减小,视网膜萎缩变薄。结论:急性高眼压条件下视网膜各层细胞易损性不同,缺血再灌注不同时间各层超微结构变化不一致,凋亡不仅是视网膜节细胞的死亡形式也是其它层细胞的死亡形式。

外源性BDNF对急性高眼压后大鼠视网膜ERK1／2磷酸化的影响

为研究脑源性神经生长因子(BDNF)干预对急性高眼压后大鼠视网膜磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)表达变化的影响,本实验将成年大鼠随机分为单纯高眼压组、BDNF预处理高眼压组和溶媒预处理高眼压组,BDNF预处理高眼压组和溶媒预处理高眼压组动物左眼于加压前2d分别给予BDNF或溶媒预处理,右眼设为正常对照。各组动物左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压并维持60min,动物分别存活1、3、7、14d后处死,冰冻切片行p-ERK的免疫组织化学染色。结果显示与正常对照相比,单纯高眼压组急性高眼压后p-ERK表达下调(P<0.05),1、3、7d组内核层出现p-ERK阳性细胞;溶媒预处理高眼压组实验结果与单纯急性高眼压组相似;BDNF预处理高眼压组急性高眼压后1、3、7d时p-ERK的表达与正常对照组相似,7d和14d出现了重新分布。此结果提示外源性BDNF可能通过促进急性高眼压后视网膜ERK1/2的活化对受损的视网膜起保护作用。

活血化瘀方剂对急性高眼压大鼠视网膜HIF-1α表达的影响

目的观察活血化瘀方剂对大鼠视网膜急性高眼压损伤的保护作用及对低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响。方法 140只清洁级Wistar大鼠随机分为对照组10只、穿刺组10只、加压组60只和治疗组60只。前房灌注加压法制作急性高眼压模型维持60min(眼压至66mmHg,1kPa=7.5mmHg)。加压组分别于造模后2h、12h、1d、3d、7d、14d处死动物,治疗组在造模后即刻给予活血化瘀方剂4mL灌胃,并分别在造模后2h、12h、1d、3d、7d、14d处死动物。通过HE染色观察视网膜的形态学变化,免疫组织化学方法和实时定量逆转录聚合酶链反应(Real-TimeqRT-PCR)方法检测HIF-1α在各组视网膜中的表达情况。结果造模加压后1d,光学显微镜下可见视网膜高度水肿,7d时水肿基本消失,14d时视网膜各层结构紊乱,明显萎缩变薄。治疗组造模加压后2h、12h视网膜形态学变化与加压组同一时间点无明显差别,其他各时间点视网膜损伤程度均较加压组同一时间点轻。免疫组织化学染色及Real-Time qRT-PCR结果显示:造模加压后2 h HIF-1α的表达即增加(IOD0.54±0.06,mRNA1.5162±0.1199),12h达到高峰(IOD1.73±0.10,mRNA2.9041±0.1690),随着时间推移表达逐渐减少,14d时降至最低(IOD0.52±0.03,mRNA1.2847±0.0434),但仍高于对照组(IOD0.25±0.04,mR-NA1.0009±0.0480,P<0.05);治疗组该因子的表达变化趋势与加压组相同,但除造模后2h、12h外,治疗组各时间点HIF-1α的表达量均比加压组同一时间点低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论活血化瘀方剂对急性高眼压造成的视网膜损伤有保护作用,这种保护作用可能与其减少视网膜内源性HIF-1α的表达有关。

外源性脑源性神经营养因子对急性高眼压后大鼠视网膜磷酸化TrkB表达的影响

目的:检测脑源性神经营养因子(BDNF)干预对急性高眼压后大鼠视网膜磷酸化TrkB(p-TrkB)表达变化的影响。方法:成年大鼠随机分为单纯高眼压组、BDNF预处理高眼压组和溶媒预处理高眼压组,BDNF预处理高眼压组和溶媒预处理高眼压组动物左眼于加压前2d分别给予BDNF预处理或溶媒,右眼设为正常对照。各组动物左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压并维持60min,动物分别存活1、3、7、14d后处死,冷冻切片行p-TrkB的免疫组织化学显色。结果:单纯高眼压组急性高眼压后p-TrkB的表达显著下调;溶媒预处理高眼压组实验结果与单纯急性高眼压组相似;BDNF预处理高眼压组p-TrkB的表达随再灌时间的延长进行性下调,但在各时间点的表达均显著高于单纯高眼压组。结论:外源性BDNF干预部分缓解了急性高眼压后视网膜p-TrkB表达的下调,对急性高眼压后的大鼠视网膜起到一定的保护作用。

急性高眼压模型中p75^(NTR)抑制剂对视网膜神经节细胞作用的研究

目的验证通过抑制p75^(NTR)(p75 neurotrophin receptor)可降低急性高眼压(acute ocular hypertension,AOH)对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的损伤作用。方法应用大鼠急性高眼压模型,玻璃体腔注射p75^(NTR)抑制剂(TAT-Pep5),按建模后1、3、5 d取材,分为正常对照组、假手术组、急性高眼压组、急性高眼压+TAT-Pep5组。采用免疫荧光技术、Western blotting等方法检测急性高眼压模型中相关蛋白的表达变化。TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况。结果急性高眼压模型视网膜Müller细胞上proNGF表达增加。注射p75^(NTR)抑制剂TAT-Pep5后急性高眼压视网膜上cleavedcaspase 3蛋白量减少,并且RGCs凋亡数目减少。结论视网膜神经节细胞损伤可引起proNGF表达增加,选择性阻断Müller细胞上的p75^(NTR)或干预其信号传导通路,可以减少急性高眼压模型中RGCs凋亡。

伊文思蓝检测急性高眼压后大鼠血-视网膜屏障的变化

目的：检测急性高眼压后大鼠血-视网膜屏障（BRB）的改变。方法：大鼠随机分为正常对照组、实验对照组和实验组（急性高眼压模型）。动物分别存活3h、12h、1d、3d、7d，处死前注射伊文思蓝（EB），共聚焦显微镜检测视网膜铺片和切片中EB的分布；用分光光度计定量视网膜EB的含量。结果：在急性高眼压后视网膜中可见，EB红色荧光斑点主要分布在节细胞层，3h、12h和1d还见于内核层。EB红色荧光斑点在视网膜中央部3h时开始增多，12h达高峰，然后逐渐减少；在视网膜周围部3h时最多，然后逐渐减少。进一步定量检测EB渗漏量呈相同的时空改变。结论：大鼠BRB在急性高眼压后的早期损伤更明显，晚期逐渐恢复；视网膜周围部先于中央部出现BRB严重破坏；BRB损伤主要分布于节细胞层。

急性高眼压后大鼠视网膜突触囊泡素的表达变化

目的研究急性高眼压后大鼠视网膜突触囊泡素(synaptophysin,SYN)的表达变化。方法SD大鼠左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失并维持60min,右眼为正常对照,动物存活1、3、7、14、21d后处死,冰冻切片行SYN免疫组织化学及原位杂交检测。结果正常情况下SYN蛋白分布于视网膜内、外网层,外网层染色较深,急性高眼压后SYN阳性产物除外网层分布外,还出现于外核层的内侧部分,存活7d时,阳性产物在外网层及外核层的分布范围最宽,至14d时又恢复至与正常相似的分布模式。SYNmRNA阳性产物主要分布存在于内核层与节细胞层的神经元胞体,急性高眼压后1、3、7d时内核层SYNmRNA阳性细胞数逐渐增多,均高于正常水平,14d时又恢复至正常水平。结论急性高眼压后大鼠视网膜SYN的表达先增强后减弱,且出现空间分布的改变,提示急性高眼压损伤后视网膜内突触溃变前可能存在突触功能增强的时期。

水通道蛋白-4表达变化与急性高眼压视网膜损伤的相关性研究

目的观察不同高眼压作用下,水通道蛋白-4(AQP4)及其mRNA在大鼠视网膜内的表达变化,以探讨AQP4与眼压异常性疾病的关系。方法采用前房加压灌注法,分别制作75cm、125cm和150cm水柱不同压力急性高眼压大鼠模型;通过HE和尼氏染色了解视网膜病理改变和神经节细胞数目变化;应用免疫组织化学、免疫荧光双标、原位杂交以及RT-PCR等技术检测不同高眼压作用下,AQP4及其mRNA在视网膜内的表达变化。结果与对照组相比,各实验组大鼠视网膜呈不同程度水肿样改变,其内层厚度增加,神经节细胞数目明显减少;AQP4及其mRNA在视网膜内的表达明显增强,其表达上调水平与眼压升高程度呈正相关,并与视网膜内层厚度增加以及节细胞数目减少相关(P<0.01)。结论急性高眼压作用下,大鼠视网膜内AQP4及其mRNA的表达明显增强,呈压力依赖性,其异常高表达可能与急性高眼压的病理损伤过程以及眼内水、电解质代谢失衡有关。

αB-晶状体蛋白对急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞保护作用机制的研究

目的研究αB-晶状体蛋白对钾离子通道kv1.1、kv1.3及凋亡抑制因子Bcl-xl和凋亡因子Caspase-3的影响,探讨αB-晶状体蛋白对急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)保护作用的机制。方法 60只SD大鼠随机分为A组(急性高眼压组)、B组(急性高眼压+玻璃体内注射生理盐水5μL组)、C组(急性高眼压+玻璃体内注射10×10-6 g·L-1αB-晶状体蛋白5μL组),每组20只,右眼为实验眼。注射后7 d和14 d时,应用Western blot和实时定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)法检测kv1.1、kv1.3、Bcl-xl和Caspase-3在视网膜上的表达水平。结果注射后7 d和14 d时,C组kv1.1、kv1.3通道蛋白和凋亡因子Caspase-3蛋白表达水平和mRNA相对表达量均较A组、B组低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);C组Bcl-xl蛋白表达水平和mRNA相对表达量较A组、B组高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);相同时间点不同因子A组、B组间两两比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论αB-晶状体蛋白通过抑制急性高眼压后RGC上钾离子通道kv1.1、kv1.3的表达,从而提高凋亡抑制因子Bcl-xl的表达、降低凋亡因子Caspase-3的表达,减少细胞凋亡,保护RGC。

T、B淋巴细胞联合免疫缺陷对急性高眼压小鼠视网膜神经细胞的影响

目的研究T、B淋巴细胞联合缺陷对急性高眼压小鼠视网膜神经细胞的影响。方法选取重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠和野生型C57BL/6小鼠各16只。2种小鼠分别随机取6只不做任何处理作为正常对照组,剩余10只作为模型组。采用前房穿刺的方法建立缺血-再灌注模型,每只小鼠取右眼为实验眼,左眼为模型对照眼。通过荧光金逆行标记技术,观察并计数再灌注后21d存活的视网膜神经节细胞(RGCs);同时进行视网膜切片苏木精-伊红染色,观察再灌注后21d视网膜形态并测量内核层厚度。结果正常对照组SCID小鼠和C57BL/6小鼠的RGCs形态和数量、视网膜结构及厚度均无明显差异。视网膜缺血-再灌注损伤后21d,SCID小鼠RGCs的存活率为91%±5%,C57BL/6小鼠RGCs的存活率为78%±5%,二者比较差异有统计学意义(P=0.003);SCID小鼠实验眼内核层厚度为(33.52±2.13)μm,模型对照眼为(34.06±3.00)μm,二者比较差异无统计学意义(P>0.05);C57BL/6小鼠实验眼内核层厚度为(22.44±1.70)μm,模型对照眼为(31.06±3.75)μm,二者比较差异有统计学意义(P=0.004)。结论急性高眼压模型中,T、B淋巴细胞联合免疫缺陷小鼠RGCs的存活率较高,视网膜损伤明显轻于野生型C57BL/6小鼠。

优视胶囊对急性高眼压家兔眼压及神经节细胞的影响

目的 :观察优视胶囊对急性高眼压兔眼压的影响及对视网膜视神经的保护作用。方法 :采用自行设计的上巩膜静脉结扎法建立 18只兔眼急性高眼压动物模型 ,于造模前 1周至造模后 3天共 10天内给予具活血化瘀、开窍明目功效的优视胶囊灌胃 ,18只造模眼随机分为模型组、低剂量组和高剂量组 ,每组 6眼 ,与18只正常眼进行对照。实验过程中测量眼压并行视网膜神经节细胞计数。结果 :①造模后即可获得平均眼压高于 6 .83kPa并能持续 3天以上的高眼压动物模型 ,优视胶囊高、低剂量组表现出轻微的降眼压作用。②持续性的高眼压可造成视网膜神经节细胞减少 ,但高、低剂量组经优视胶囊治疗后高眼压模型眼神经节细胞数高于模型组 ,提示优视胶囊具有保护或改善急性高眼压后兔眼视网膜神经节细胞的作用。结论 :优视胶囊对急性高眼压兔眼视网膜视神经具有保护的作用。

大鼠急性高眼压后视网膜神经节细胞自噬和副凋亡的发生

目的:观察急性高眼压后不同时间点大鼠视网膜神经节细胞中自噬及副凋亡的发生,并探讨其机制。方法:将50只健康成年SD雄性大鼠随机分为正常对照组、急性IOP损伤3d,1、4、8wk组。利用高眼压(elevated intraocular pressure,IOP)前房灌注法建立SD大鼠急性IOP损伤模型,取各组大鼠的视网膜组织,采用免疫荧光染色法检测视网膜微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达;利用透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)细胞质中自噬体及胞质空泡的产生,验证自噬及副凋亡的发生。结果:透射电镜观察可见大鼠RGCs细胞质中包裹着电子致密物的双层或多层膜的自噬泡,正常对照组、急性IOP损伤后3d,1、4、8wk组,RGCs细胞质中每50μm^2自噬泡数量分别为0.79±0.43、2.14±0.36、2.29±0.47、1.57±0.51、1.21±0.43个,急性IOP损伤后各组大鼠RGCs内每50μm^2自噬泡数量均较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。正常对照组视网膜神经节细胞层(ganglion cell layer,GCL)仅见少量LC3阳性表达,LC3阳性细胞百分比15.90%。急性IOP损伤后3d,1、4、8wk组大鼠GCL中LC3阳性细胞百分比均较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。急性IOP损伤后3d,1、4、8wk组大鼠每200μm内RGCs数量较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。急性IOP后3d持续至8wk透射电镜观察可见大量由线粒体和/或内质网肿胀形成的细胞质空泡。结论:急性IOP损伤后RGCs涉及自噬和副凋亡的激活,各种类型的程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)可作为单一细胞死亡的形式或多种细胞死亡形式共存,参与急性IOP后视网膜神经节细胞的损伤。