黄芪多糖对急性高眼压大鼠眼压、视网膜、内外颗粒层、视神经纤维及caspase-3、视网膜神经节细胞凋亡影响随机平行对照研究

[目的]观察黄芪多糖对急性高眼压大鼠眼压、视网膜、内外颗粒层、视神经纤维及caspase-3、视网膜神经节细胞凋亡影响。[方法]使用随机平行对照方法,将50只SD大鼠按随机数字表法分为5组,空白对照组、模型组、黄芪多糖组(高、中、低剂量组),10只/组。实验1d灌胃干预,黄芪多糖组黄芪多糖500、1000、2000mg/kg,空白对照组及模型组等体积生理盐水,连续14d,每周称重一次并随体重调整给药剂量。参照Kawasaki等建模方法,实验15d,对模型组及黄芪多糖组水合氯醛麻醉后,氯霉素滴眼液冲洗眼睛,滴盐酸奥布卡因麻醉眼部,手术显微镜下穿刺大鼠眼部前房,抽取0.1m L房水后注射1m L甲基纤维素,连续5d,同时滴注氯霉素滴眼液预防感染。检测眼压稳定>22mm Hg后确定模型成立。实验20d,过量麻醉处死后迅速摘除眼球,抽部分玻璃体与房水并甲醛溶液等量置换,4%多聚甲醛固定,24h后流水冲洗,乙醇脱水,石蜡包埋,切片。HE染色、免疫组织化学染色及TUNEL。观测视网膜病理图像、眼压、视网膜、内外颗粒层及视神经纤维层厚度及caspase-3表达、视网膜神经节细胞凋亡。[结果]实验第20d:黄芪多糖低剂量组视网膜组织结构清晰度提高,节细胞密集整齐,视网膜全层、视经纤维层及外颗粒层厚度均明显高于模型组。眼压、视网膜、内颗粒层、外颗粒层、视神经纤维模型组、黄芪多糖高、中、低剂量组均明显高于空白组(P<0.01),眼压黄芪多糖低中高各剂量组间呈量效递减(P<0.01),视网膜、内颗粒层、外颗粒层、视神经纤维呈量效递增(P<0.01)。caspase-3表达、视网膜节细胞凋亡率模型组、黄芪多糖高、中、低剂量组均明显高于空白组(P<0.01);黄芪多糖各剂量组均低于模型组(P<0.01),黄芪多糖各剂量组之间呈量效递减(P<0.01,P<0.05)。[结论]黄芪多糖对急性高眼压大鼠视网膜损伤具有保护作用,与用药剂量相关。

低氧预处理对长时间急性高眼压下视网膜节细胞存活的作用．

目的观察低氧预处理对长时间大鼠急性高眼压模型视网膜节细胞存活的作用。方法实验研究。对2011年2月至2012年12月在汕头大学·香港中文大学联合汕头国际眼科中心应用健康成年Fischer344雌性大鼠，8～12周龄，前房灌注生理盐水诱导急性高眼压模型（灌注高度1496mm，2h）作为急性高眼压组（n=5），低氧预处理（氧浓度11％，2h）联合急性高眼压为联合组（n=10），及正常对照组（n=10），前房灌注后7天及18天后进行视网膜节细胞计数；多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用Bonferroni检验。结果急性高眼压组及联合组前房灌注后7天的平均视网膜节细胞密度分别为（1815．0±84．9）mm^2，（1697．4±291．0）mm^2，18天分别为（1468．9±92．0）mm^2，（1373．4±87．0）mm^2。正常对照组平均视网膜节细胞密度为（2259．0±163．8）mm^2，急性高眼压组和联合组7天及18天组间视网膜节细胞皆差异无统计学意义（P=0．775，P=0．318），两组各时间点的平均视网膜节细胞密度与正常对照组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论低氧预处理对延长缺血时间的大鼠急性高眼压的视网膜节细胞无显著保护作用。