保肝饮对化学性肝损伤的保护作用及急性毒性实验研究

目的探讨中药复方保肝饮对化学性肝损伤的保护作用及其安全性.方法通过CCl4 诱导急性肝损伤模型观察保肝饮的护肝作用,进行小鼠经口急性毒性试验初步评价其安全性.结果连续30d灌胃给药后,与模型组比较,保肝饮中、高剂量血清中ALT、AST、ALP 水平及TB 含量显著降低,高剂量SOD活性显著提高,中、高剂量MDA 含量、肝脏系数、肝细胞坏死、脂肪变性及胞浆水肿显著降低（P 〈 0.05 或 0.01）.急性毒性试验观察 14d后,无动物死亡,未见明显不良反应.结论保肝饮对大鼠急性肝损伤有明显的保护作用,且安全性良好.

大黄对小鼠急性肝损伤蛋白质表达的影响

以大黄为研究对象,将CCl4急性肝损伤模型组、空白对照组和大黄高剂量、中剂量、低剂量等药物组进行处理,小鼠断头处死取其肝脏研究大黄对小鼠肝脏蛋白质的影响。实验运用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析大黄对各组实验小鼠肝脏蛋白质的损伤。结果表明,在大黄作用下,蛋白质的表达有所变化,表现在高剂量组有新增加的蛋白的出现,同时蛋白含量有所变化,在中低剂量组中更加明显,并表明CCl4肝损伤模型可引起转氨酶升高,而大黄有降酶作用,得出大黄对CCl4化学性肝损伤具有保护作用。

CCl_4致小鼠急性肝损伤模型的研究

目的建立稳定的CCl4小鼠急性肝损伤动物模型。方法观察小鼠性别、给药剂量、测定方法、动物质量因素对CCl4所致急性肝损伤模型小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平的影响。结果动物性别对肝损伤模型动物ALT检测指标有一定的影响,0.1%浓度CCl4作为造模浓度较适宜,肝损伤模型动物ALT、AST指标机测较手测准确、简便,动物质量因素对CCl4肝损伤动物模型影响较大。结论 CCl4致小鼠急性肝损伤模型效果受动物性别、给药剂量和动物质量因素影响较大,各实验室应进行标准化研究,以保证CCl4急性肝损伤动物模型的稳定性。

菊花炒制前后化学成分变化及对CCl4所致小鼠急性肝损伤的影响

从菊花炒制前后化学成分变化及其对保肝药效影响来揭示菊花炮制机制。采用UPLC-Q-TOF-MS和超高效液相色谱对菊花炒制前后化学成分进行定性定量研究,借助Progenesis QI,SPSS软件进行主成分分析(PCA),偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)、变量重要性投影(VIP)分析和t检验,寻找显著变化的差异性成分。再结合药效学实验研究生、炒菊花对CCl4所致的小鼠急性肝损伤的保护作用。根据质谱数据分析鉴定出生、炒菊花中共28个化学成分,主要包括黄酮类与有机酸类成分,其中木犀草素、芹菜素和木犀草苷等13个成分炒制后显著升高,绿原酸、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷和芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷等7个成分炒制后显著降低。通过主成分分析,菊花生品与菊花炒制品明显分为2类,说明生、炒菊花质量存在内在差异。小鼠肝损伤保护实验结果显示,生、炒菊花高、中剂量组均能显著降低肝损伤小鼠的AST,ALT和MDA含量,升高SOD水平;组织病理学检查表明生、炒菊花可以通过减少炎症细胞浸润,减少脂肪变性,修复损伤肝细胞来保护肝脏。该研究结果表明菊花炒制前后化学成分变化明显,生、炒菊花对CCl4所致小鼠急性肝损伤均有保护作用,并且在设置的高、中、低剂量范围内,生、炒菊花保肝作用随着剂量的增加而增强,实验研究结果为菊花炒制机制和临床合理选择炮制品提供参考。

保肝药物体内活性筛选方法的建立

目的:建立一种稳定便捷的保肝药物活性筛选方法。方法:用CCl4复制小鼠急性肝损伤模型,考察CCl4染毒剂量、染毒时间及染毒途径对实验结果的影响,选择阳性对照药物,多次重复实验来考察方法的稳定性。结果:对小鼠一次性腹腔注射0.2%CCl4橄榄油溶液0.1ml/10g.bw,染毒20h后,模型组小鼠血清ALT、AST均高于正常组(P<0.01),可成功复制急性CCl4肝损伤模型;联苯双酯组小鼠血清ALT低于模型组(P<0.01),提示其有保肝降酶作用,故选择联苯双酯作为阳性对照药;经多次方法学考察,确定已建立了稳定的保肝药物活性筛选实验方法。结论:对小鼠一次性腹腔注射0.2%CCl4橄榄油溶液0.1ml/10g.bw,染毒20h,可以成功复制结果稳定的小鼠CCl4急性肝损伤模型。

美洲大蠊提取物抗肝损伤的实验研究

目的:观察美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物对小鼠急性肝损伤模型及CCl4所致大鼠慢性肝损伤模型的影响,为美洲大蠊抗肝损伤的临床应用及物质基础研究提供一定实验依据。方法:美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物连续灌胃给予小鼠10天,分别采用灌胃醋氨酚、60%乙醇及腹腔注射CCl4进行小鼠急性肝损伤造模,测定模型小鼠血清ALT与AST水平、肝组织SOD与MDA水平及肝脏、脾脏指数以评价受试药物的抗急性肝损伤作用;采用每周两次灌胃CCl4,连续8周的方式制备慢性肝损伤大鼠模型,测定模型动物血清ALT、AST水平及肝、脾、胸腺指数以评价药物的抗慢性肝损伤作用。结果:美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物49.13 mg﹒kg^(-1)显著降低酒精性与CCl4性急性肝损伤模型小鼠血清AST、ALT水平(P<0.05),对醋氨酚模型小鼠血清AST、ALT水平有降低趋势(P>0.05),能显著性降低醋氨酚模型小鼠脾脏指数(P<0.05);65.51 mg﹒kg^(-1)显著降低酒精性急性肝损伤模型小鼠血清ALT、AST水平(P<0.05),32.75 mg﹒kg^(-1)显著降低血清ALT与肝组织MDA水平(P<0.05)。美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物75.78 mg﹒kg^(-1)显著降低CCl4所致慢性肝损伤模型大鼠血清AST、ALT水平(P<0.05),45.76、75.78 mg﹒kg^(-1)显著提高模型大鼠胸腺指数(P<0.05),45.76 mg﹒kg^(-1)明显降低肝脏指数(P<0.05)。结论:美洲大蠊活虫冷浸药渣水提物具有抗急性和慢性肝损伤的作用,该部位可能是其保肝作用的物质基础之一。