Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9和周期素依赖性激酶4在结直肠息肉、结直肠癌中的表达及意义

目的 探究Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9(SOX9)和周期素依赖性激酶4(CDK4)在结直肠息肉、结直肠癌中的表达及意义。方法 选取中国人民解放军第八十二集团军医院2015年1月至2017年6月收治的结直肠癌病人病理组织标本(结直肠癌组)94例及癌旁正常结直肠组织(正常结直肠组)39例,另取同时期结直肠息肉病人结直肠息肉组织(结直肠息肉组)51例。采用免疫组织化学SP染色法检测SOX9、CDK4的表达情况,分析SOX9、CDK4表达与结直肠癌病人临床病理参数之间的关系;对结直肠癌病人进行术后复查随访,分析结直肠癌病人生存情况。结果 SOX9在正常结直肠组织、结直肠息肉组织和结直肠癌组织中的阳性表达率分别为10.26%(4/39)、27.45%(14/51)、76.59%(72/94),差异有统计学意义(P<0.05);CDK4在正常结直肠组织、结直肠息肉组织和结直肠癌组织中的阳性表达率分别为7.69%(3/39)、21.57%(11/51)、54.84%(51/94),差异有统计学意义(P<0.05);正常结直肠组织中SOX9、CDK4蛋白表达水平低于结直肠息肉组织、结直肠癌组织(P<0.05),结直肠息肉组织中SOX9、CDK4蛋白表达水平低于结直肠癌组织(P<0.05)。结直肠癌病人病理组织SOX9、CDK4表达与肿瘤分化程度、临床分期、是否合并淋巴结转移有关(P<0.05);结直肠癌组织SOX9与CDK4表达呈正相关(r=0.58,P<0.001),由TCGA数据库检索结直肠癌组织SOX9、CDK4基因表达相关性显示,二者之间亦呈正相关(r=0.40,P<0.001);SOX9高表达、低表达病人术后3年累积生存率分别为44.6%、72.4%,两组比较Log-rank检验差异有统计学意义(χ^(2)=8.31,P=0.004);CDK4高表达、低表达病人术后3年累积生存率分别为25.6%、76.5%,两组比较Log-rank检验差异有统计学意义(χ^(2)=36.36,P<0.001)。结论 SOX9和CDK4在结直肠癌组织、结直肠息肉组织、正常结直肠组织中的阳性表达率逐渐降低,与结直肠癌肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移情况及预后有关,可能参与结直肠癌的发生发展过程。

大鼠肝再生的肝细胞干性变化中性别决定区转录因子2 mRNA和其他非编码RNA的表达变化与作用

目的了解大鼠肝再生(LR)0 h和2 h时性别决定区转录因子2(SOX2)基因及其mRNA相互作用的微小RNA(miRNA,miR)和环状RNA(circRNA)的表达变化、相互作用和调节肝细胞干性变化的途径与方式。方法按Higgins等方法制备大鼠2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,按Smedsrod等方法分离肝细胞,用大规模定量检测技术测定大鼠肝再生中肝细胞的mRNA、miRNA合称内源竞争RNA(ceRNA)的表达变化,用Cytoscape 3.2软件构建ceRNA的相互作用网,用ceRNA综合分析等方法解析它们的表达相关性和作用相关性。结果PH后0 h和2 h时,SOX2 mRNA的比值为1.00±0.09和2.15±0.48,miR-3558-3p为4.53±0.10和0.81±0.16,circRNA_18404为1.24±0.04和11.10±0.57,circRNA_18045为1.97±0.47和4.44±0.23。同时,PH后0 h时,SOX2促进的富含AT的交互域5A(ARID5A)、激活转录因子3(ATF3)、BTG抗增殖因子2(BTG2)等8个细胞去分化相关基因表达下调,抑制的细胞分化相关基因干扰素调节因子6(IRF6)和生长抑素(SST)表达上调。PH后2 h时,SOX2促进的ARID5A、ATF3、BTG2等8个细胞去分化相关基因表达上调,抑制的细胞分化相关基因SST表达下调、IRF6未发生有意义表达变化。结论上述circRNA抑制的miRNA、miRNA抑制的SOX2 mRNA以及SOX2调节的细胞干性相关基因的表达相关性和作用相关性有利于PH后0 h时肝细胞处于分化状态和PH后2 h时肝细胞处于干性状态。

BECN1、性别决定区Y盒转录因子9表达与甲状腺癌患者临床特征及预后的关系研究

目的探讨BECN1、性别决定区Y盒转录因子9(SOX9)表达与甲状腺癌患者临床特征及预后的关系。方法取106例甲状腺癌患者的甲状腺癌组织及癌旁组织,比较甲状腺癌组织及癌旁组织中BECN1、SOX9表达情况;比较不同临床特征甲状腺癌患者甲状腺癌组织中BECN1、SOX9表达情况;进行为期3年的随访。结果BECN1、SOX9阳性均主要定位于细胞质中。甲状腺癌组织中SOX9阳性表达率明显高于癌旁组织,BECN1阳性表达率明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Ⅰ~Ⅱ期、高分化、无淋巴结转移的甲状腺癌患者甲状腺癌组织中BECN1阳性表达率分别高于Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移患者,SOX9阳性表达率分别低于Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。BECN1阳性表达患者的平均生存时间为(35.26±8.39)个月,明显长于阴性表达患者的(30.16±7.35)个月;SOX9阳性表达患者的平均生存时间为(31.20±8.03)个月,明显短于阴性表达患者的(35.74±6.99)个月,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归模型结果显示,淋巴结转移、分化程度、BECN1及SOX9表达均是甲状腺癌患者预后的影响因素(P﹤0.05)。结论甲状腺癌组织存在BECN1低表达、SOX9高表达,不同临床分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移状态患者BECN1及SOX9表达存在差异,且BECN1及SOX9表达与患者预后密切相关。

AR、SKP2、SOX10、PD-L1及TIL表达在三阴性乳腺癌中的意义

目的:探索雄激素受体(androgen receptor,AR)、S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,SKP2)、性别决定区Y相关的HMG盒含因子10(sry-related HMG box-containing factor 10,SOX10)、程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)及肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)表达与临床病理特征和预后的关系。方法:根据苏木精-伊红染色(hematoxylineosin, HE)染色切片评判109例TNBC瘤巢内TIL的比例,采用Leica Bond-Max全自动免疫组化仪检测TNBC组织中AR、SKP2、SOX10、PD-L1的表达。分析以上各生物指标与临床病理特征间的关系,并采用kaplan-Meier、Log-rank进行生存分析。结果:95例患者获得随访,中位随访时间为48个月,中位无病生存时间(disease-free survival, DFS)为42个月,中位总生存时间(overall survival, OS)48个月。在TNBC中,AR阳性表达与淋巴结转移阴性(P=0.009)、肿瘤最大径<2 cm(P=0.008)相关,TIL高表达与低级别TNBC相关(P=0.007),SKP2阳性表达与神经/脉管侵犯阳性(P=0.011)、高级别TNBC相关(P=0.002),SOX10阳性表达与淋巴结转移阳性(P=0.022)、高级别TNBC(P=0.005)相关,PD-L1阳性表达与淋巴结转移阳性(P=0.020)、神经/脉管侵犯阳性(P=0.006)、高级别TNBC(P=0.042)相关。生存分析显示,SKP2、SOX10阳性表达与更差的DFS(P=0.007、P<0.001)和OS(P=0.013、P<0.001)相关,TIL高表达与更好的DFS(P=0.016)及OS(P=0.004)相关。在生物表志物的联合表达中,AR+/SKP2-、AR+/SOX10-与更好的DFS(P=0.004、P<0.001)及OS(P=0.007、P=0.001)相关,SOX10+/低TIL、PD-L1+/低TIL与更差的DFS(P<0.001、P=0.008)及OS(P=0.001、P=0.002)相关,AR-/低TIL者具有更差的OS(P=0.014)。SKP2(HR=4.143,95%CI为1.578~10.875)、SOX10(HR=7.578,95%CI为2.067~27.782)的阳性表达是影响TNBC患者DFS的独立预后因子,SKP2(HR=3.758,95%CI为1.400~10.084)、SOX10(HR=5.131,95%CI为1.316~20.000)及TIL(HR=0.375,95%CI为0.154~0.917)的阳性表达是TNBC患者OS的独立预后因子(P均<0.05)。结论:在TNBC中,AR阳性、TIL高表达与具有更好预后的临床病理特征相关,SKP2、SOX10和PD-L1与具侵袭性的临床病理特征相关。SKP2、SOX10及TIL表达与TNBC预后相关,提示这些生物指标可能成为TNBC新的预后因子,同时它们也有可能成为潜在的治疗靶点。

SOX14对膀胱癌细胞生物学行为的影响

目的观察性别决定区Y框基因转录因子(SOX)14在膀胱癌组织中的表达情况,探讨其对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法收集2019年12月至2022年6月温州医科大学附属第一医院手术切除的膀胱癌组织(37例)和癌旁组织(14例),采用qRT-PCR法检测癌组织和癌旁组织中、膀胱癌细胞和正常尿路上皮细胞中SOX14 mRNA的表达水平。使用过表达和敲低SOX14载体转染膀胱癌细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法、细胞划痕实验和Transwell实验检测并比较不同转染细胞增殖、迁移和侵袭能力的差异。结果膀胱癌组织中SOX14 mRNA相对表达量显著低于癌旁组织,5637、T24、EJ、J82和RT4等5种膀胱癌细胞中SOX14 mRNA相对表达量均显著低于正常尿路上皮细胞。相比相应对照组,过表达SOX14后膀胱癌细胞存活率、细胞迁移和侵袭能力均显著降低;敲低SOX14后膀胱癌细胞存活率、细胞迁移和侵袭能力均显著升高。结论SOX14在人膀胱癌组织和细胞中低表达。调控SOX14 mRNA的表达水平能影响膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。提示SOX14可能是治疗膀胱癌的新靶点。

LncRNA H19靶向调控miR-19b-3p/SOX9通路对脂肪间充质干细胞向成骨细胞分化的影响

目的:分析长链非编码核糖核酸(LncRNA)H19靶向调控miR-19b-3p/性别决定区Y框转录因子9(SOX9)通路对脂肪间充质干细胞(ADMSC)向成骨细胞分化的影响。方法:体外培养人ADMSC细胞并鉴定,将ADMSC细胞分为对照组(常规培养)、H19组(转染LncRNA H19慢病毒过表达载体)、LncRNA-NC组(转染慢病毒空载体)、miR-19b-3p组(共转染LncRNA H19慢病毒过表达载体和miR-19b-3p模拟物慢病毒载体)、miR-NC组(共转染LncRNA H19慢病毒过表达载体和miR-NC慢病毒载体),检测各组LncRNA H19、miR-19b-3p、SOX9及含锌指的成骨细胞特异性转录因子(Osx)、骨钙素(OCN)和RUN相关转录因子2(RUNX2)表达。观察各组ALP染色和茜素红染色情况,比较细胞增殖活力、ALP活性,分析各组SOX9、BMP-2、OPN蛋白表达,验证LncRNA H19和miR-19b-3p的靶向关系。结果:与对照组、LncRNA-NC组比,H19组LncRNA H19和SOX9、Osx、OCN、RUNX2的mRNA表达及SOX9、BMP-2、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化结节形成量增加,miR-19b-3p表达降低(P<0.05),与H19组、miR-NC组比,miR-19b-3p组LncRNA H19和SOX9、Osx、OCN、RUNX2的mRNA表达及SOX9、BMP-2、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化结节形成量降低,miR-19b-3p表达增加(P<0.05)。各组细胞24h、48h、72h的吸光度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LncRNA H19和miR-19b-3p间存在靶向关系。结论:LncRNA H19能负向调控miR-19b-3p,上调SOX9,有助于人ADMSC细胞向成骨细胞分化。

靶向SOX9调控弥漫性大B细胞淋巴瘤代谢重编程的研究

目的·探索弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中差异表达的性别决定区Y框转录因子9(SRY-box transcription factor 9,SOX9)基因所起到的作用,尤其是在生发中心B细胞(germinal center B-cell,GCB)来源亚型中对代谢重编程的调控作用。方法·选取NCICCR-DLBCL数据库中的481例DLBCL患者的临床信息和基因表达谱数据,使用R语言4.1.3版本进行数据分析与可视化,并基于RNA-seq测序表达量的细胞组织来源亚型(cell of origin subtype,COO)分类算法进行分类;使用ABC/GCB特征注释基因集,通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)对分类进行验证。以SOX9的表达量高低将ABC和GCB亚组分别二分类。使用DEseq2包进行差异分析。使用KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)与Hallmark注释集分析SOX9与DLBCL的代谢的关系。采用KaplanMeier方法绘制生存曲线。采用GEPIA2进行泛癌分析。采用ESTIMATE包进行微环境评分分析。结果·481例DLBCL患者样本中,481例均有RNA-seq的表达量数据,421例有临床分期,335例有国际预后指数(international prognostic index,IPI)评分,234例有生存数据。分类得出ABC亚型232例(48.2%)、GCB亚型173例(36.0%)、未分类76例(15.8%),与数据库声明的比例相符,经富集分析验证符合ABC/GCB表达谱特征。SOX9低表达量组与SOX9高表达量组相比,总生存期更短,预后分数更差。泛癌分析示该现象亦可见于其他类型肿瘤。差异分析显示,在GCB亚型中,与SOX9高表达量组相比,SOX9低表达量组中有上调基因156个、下调基因1826个。对于细胞代谢水平的变化,下调基因富集于糖酵解。结论·在ABC-DLBCL中,SOX9基因通过调控代谢重编程影响ABC-DLBCL的生物学特征。低表达SOX9的DLBCL,预示着肿瘤中糖酵解减少;其肿瘤基质细胞浸润程度更低,并且有着更差的预后。

SOX9在前列腺癌演进中的研究进展

性别决定区Y-盒转录因子9(SOX9)对前列腺发育至关重要。SOX9的失调不仅影响前列腺癌(PCa)的发生,在去势抵抗型前列腺癌(CRPC)中也起着关键作用,但SOX9影响PCa进展的机制仍不清楚。本文主要综述SOX9与PCa发生发展的相关分子机制和信号通路,提出SOX9基因可能是PCa发生发展中重要的新生物标志物,为临床诊断和治疗提供新的思路。

早期胃癌患者SOX9、CDX2及ANXA2的表达及其临床意义

目的探究早期胃癌患者Y染色体性别决定区相关高速泳动族框因子9(SOX9)、尾型同源盒转录因子2(CDX2)及膜联蛋白A2(ANXA2)的表达及其临床意义。方法150例早期胃癌患者,行内镜黏膜下剥离术(ESD)获取胃癌组织及癌旁正常组织免疫组化法检测SOX9、CDX2及ANXA2表达;随访1~2年统计复发情况,并分析影响复发的危险因素。结果早期胃癌组织SOX9、CDX2及ANXA2表达阳性率均高于癌旁组织(均P<0.05)。SOX9、CDX2及ANXA2表达阳性率与性别、年龄、肿瘤位置及肿瘤直径无相关性(均P>0.05);SOX9、CDX2表达阳性率与TNM分期相关(均P<0.05),ANXA2表达阳性率与TNM分期无相关性(P>0.05);SOX9、CDX2及ANXA2表达阳性率与分化程度、浸润深度及复发情况相关(均P<0.05)。术后随访显示早期胃癌2年生存率为95.3%(143/150),复发率为8.7%(13/150)。单因素COX回归分析显示TNM分期、低未分化、浸润黏膜下及SOX9、CDX2、ANXA2表达阳性与早期胃癌患者ESD术后复发相关(均P<0.05);多因素分析显示低未分化、浸润黏膜下及SOX9、CDX2、ANXA2表达阳性为早期胃癌患者ESD术后复发的危险因素(均P<0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)结果显示SOX9、CDX2、ANXA2及联合检测对ESD术后复发的预测的AUC分别为0.792(95%CI 0.731~0.854)、0.836(95%CI0.772~0.899)、0.891(95%CI0.848~0.933)、0.922(95%CI0.889~0.954)。结论早期胃癌患者SOX9、CDX2及ANXA2表达阳性率显著升高,并对患者ESD术后复发具有预测价值。

SOX6与SOX17在口腔鳞状细胞癌的表达及临床意义

目的应用生物信息分析和实验验证探讨转录因子性别决定区Y-box 6(SOX6)与转录因子性别决定区Y-box 17(SOX17)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及意义。方法获取癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载的OSCC组织及相应的癌旁非瘤组织的转录组数据,分析SOX6、SOX17的表达水平与OSCC发生发展及其预后的相关性。收集口腔鳞状细胞癌组织及相应的癌旁非瘤组织标本,应用免疫组化SP法分析SOX6与SOX17在OSCC中的表达及其相关性。利用蛋白-蛋白互作(PPI)网络、基因本体论(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析探讨与SOX6相关的基因、富集通路及其对OSCC发生发展的影响。结果生物信息分析显示,在OSCC组织中SOX6、SOX17的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),SOX6、SOX17在OSCC中有较高的诊断价值(曲线下面积(AUC)分别为0.972、0.731),且其高表达与患者的良好预后相关,Cox回归分析显示,TNM分期、SOX6、SOX17表达水平是OS的独立预后因素(P<0.05)。免疫组化分析显示,SOX6在OSCC组织中含量与肿瘤浸润深度密切相关(P<0.05),Spearman分析显示,SOX6、SOX17表达水平呈正相关(r=0.297,P<0.05)。通过PPI网络获得互作蛋白,GO与KEGG结果显示SOX6可能与FAK信号通路、Notch信号通路和肿瘤细胞的增殖迁移等关系密切。结论SOX6、SOX17在OSCC组织中呈低表达,是OSCC潜在的诊断及预后标记物。

SOX2影响PD-L1表达参与乳腺癌细胞免疫逃逸的机制探讨

目的:探讨转录因子性别决定区Y框蛋白2(SOX2)基因通过诱导程序性死亡因子配体1(PD-L1)表达,促进乳腺癌细胞免疫逃逸的作用机制。方法:qRT-PCR和Western blot法检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231、SK-BR-3和正常乳腺上皮细胞系MCF10A中SOX2、PD-L1、T细胞免疫球蛋白及粘蛋白结构域分子3(TIM3)和核受体亚家族4 A组成员1(NR4A1)的mRNA表达量及对应蛋白表达量。分别构建SOX2敲减质粒NC和si-SOX2并转染MDA-MB-231,与细胞因子诱导的杀伤细胞构建共培养体系,连续培养48h,MTT法检测细胞增殖率,TUNEL法检测细胞凋亡率,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测T细胞杀伤率,ELISA检测T细胞活化标志物IL-2和IFN-γ,qRT-PCR检测T细胞耗竭标志物PD-1、TIM3和NR4A1 mRNA表达量。结果:与MCF10A相比,MDA-MB-231与SK-BR-3中SOX2、PD-L1、TIM3、NR4A1的m RNA表达量及对应蛋白表达量均显著升高(P<0.05)。与空白组和NC组相比,si-SOX2组SOX2 mRNA和PD-L1蛋白表达量明显下降,细胞增殖率显著下降,细胞凋亡率增加,T细胞杀伤率增加,IL-2和IFN-γ水平升高,PD-1、TIM3和NR4A1 mRNA表达量降低(P<0.05)。结论:SOX2基因可能通过诱导PD-L1高表达,进而促使乳腺癌细胞免疫逃逸的能力增强,沉默SOX2表达可以增强T细胞杀伤力,抑制肿瘤增殖,SOX2基因有望成为乳腺癌干预的重要分子靶点。

Sox2在人肾癌组织中的表达及其临床意义

【目的】观察性别决定区因子(SRY-related high-mobility group box 2,Sox2)在人肾癌组织中的表达,探讨Sox2的表达与临床病理因素和预后的相关性。【方法】运用免疫组化Envision法检测156例人肾细胞癌及其配对癌旁正常肾组织病理标本中Sox2的表达水平,采用SPSS13.0统计软件分析肿瘤组织Sox2与临床病理因素及患者总生存时间的关系。【结果】Sox2在人肾癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.05);随TNM分期的递增(P=0.027)、淋巴结转移的出现(P=0.010)以及Ki-67表达(P=0.037)的增加,Sox2表达水平逐渐升高,各组间有显著相关性;Sox2表达阳性的肾癌患者,术后五年生存率较低(P=0.017);Sox2的表达与患者性别、年龄、肿瘤直径及组织类型无显著相关性。【结论】Sox2的表达与临床病理因素及预后有一定关系,其高表达可能在肾癌发生、发展中起重要作用,并很可能成为潜在的治疗靶点及预测肾癌预后的有价值的分子标记物。

SOX6在口腔黏液表皮样癌中的表达及其临床意义

目的检测转录因子性别决定区Y-box 6(SOX6)在唾液腺黏液表皮样癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,并探究其表达的差异与临床病理特征及患者预后的关系。方法采用免疫组化EnVision法检测55例唾液腺黏液表皮样癌及相应癌旁正常组织中SOX6蛋白的表达情况,应用统计学方法分析SOX6的表达情况与唾液腺黏液表皮样癌患者的临床病理特征(性别、年龄、病理分级、TNM分期、淋巴结转移)及其预后的关系。结果黏液表皮样癌组织中SOX6阳性表达率为62.3%(37/55),其相应癌旁正常组织的阳性表达率为36.4%(20/55),黏液表皮样癌组织中SOX6阳性表达率明显高于其相应癌旁正常组织(P<0.05)。在黏液表皮样癌中,SOX6表达阳性率的差异与病理分级和临床分期相关(均P<0.05)。随着唾液腺黏液表皮样癌患者病理分级的降低、TNM分期的升高,SOX6阳性表达率明显升高。但患者性别、年龄与SOX6阳性表达率的高低间的差异无统计学意义(均P>0.05)。统计分析结果示,SOX6阴性组的5年生存期较阳性组长,差异有统计学意义,SOX6的高表达与患者不良预后有明显的相关性(P<0.05),SOX6可能是影响唾液腺黏液表皮样癌患者的独立预后因素。结论SOX6在唾液腺黏液表皮样癌组织中呈高表达,其可能在唾液腺黏液表皮样癌发生、发展过程中扮演着重要角色,这为唾液腺黏液表皮样癌的治疗及预后评估提供一定的参考依据。