线虫尾部性细胞分化相关基因研究进展

人类性器官分化发育异常的分子机制一直是发育生物学和遗传学极为关注的问题,模式生物学的发展为解决这一问题提供了新的思路。由于线虫尾部性细胞分化发育的调节与人类性器官分化发育的局部调节有一定相似性,因此线虫尾部性细胞分化相关基因的研究,对人类性发育异常的分子水平研究有重要的参考价值。本文从线虫调节腹侧中线上皮融合、外阴形态发育、直肠、尾部形态发育、尾部神经、肌肉和性腺发育的相关基因等方面,总结了与线虫尾部性细胞分化密切相关的一些基因研究进展,其中以腹侧中线上皮融合相关基因对于线虫尾部性细胞分化尤为重要。

CMTM4调节宫颈癌髓源性抑制细胞分化和免疫效应

CMTM4蛋白异常表达与肿瘤发生、发展及预后相关,其在宫颈癌中的作用和机制尚不明确。本研究旨在探讨CMTM4在宫颈癌中的表达水平及其对MDSCs分化和免疫细胞功能的调节作用和分子机制。首先,利用免疫组化染色和Western印迹检测CMTM4在宫颈癌肿瘤和癌旁组织中的表达水平。结果显示,CMTM4在宫颈癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01)。通过流式细胞术检测宫颈癌患者肿瘤样本中MDSCs的分化,使用CD45、CD11b和Ly6G标记M-MDSCs,使用CD45、CD11b和Ly6C标记G-MDSCs。发现宫颈癌患者血液中M-MDSCs和G-MDSCs的百分比显著高于健康志愿者组(P<0.01)。此外,流式分析发现,CMTM4高表达提高宫颈癌患者血液中CD3+CD4+T细胞和CD3+CD8+T细胞比例(P<0.01),促进Th1和Th17细胞的活化比例(P<0.05),抑制Th2和Treg细胞的活化比例(P<0.05或P<0.01)。通过流式分析肿瘤组织中CD8+PD-1+T细胞和CD8+PD-L1+T细胞的百分比。结果显示,CMTM4高表达抑制肿瘤组织中CD8+PD-1+T细胞和CD8+PD-L1+T细胞的百分比(P<0.05)。体外研究表明,CMTM4过表达的HeLa细胞显著抑制MDSCs生成(P<0.01),PD-1过表达的HeLa细胞进一步促进了MDSCs生成(P<0.05)。此外,使用ELISA检测Th1、Th2、Th17和Treg细胞因子的水平。发现CMTM4过表达的HeLa细胞可降低T细胞的IL-10分泌水平(P<0.01),而增加IFN-γ和TNF-α的分泌水平(P<0.01),其均被PD-1过表达逆转(P<0.05或P<0.01)。综上,本研究表明,CMTM4在宫颈癌中的低表达导致MDSCs的异常分化和肿瘤的免疫逃逸,CMTM4通过调节PD-1/PD-L1通路,从而影响肿瘤T细胞的活化。因此,CMTM4可能成为治疗宫颈癌的潜在靶点。

甲状腺破骨细胞样巨细胞性未分化癌2例并文献复习

目的 报道 2例少见的甲状腺破骨细胞样巨细胞性未分化癌并进行文献复习。方法 对此瘤的临床病理特征做详细的形态学观察和免疫组织化学检查并进行分析。结果 甲状腺破骨细胞样巨细胞性肿瘤主要由两种细胞组成 ,一种为多核巨细胞 ,分两型 :一型为破骨细胞样多核巨细胞 ,核数目多 ;一型为较小的具明显异型性的瘤巨细胞 ,核数目较少。另一种为单核细胞 ,也分两型 :一型为组织细胞样单核细胞 ,一型为梭形、多角形的单核细胞。免疫组织化学研究显示 ,破骨细胞样多核巨细胞、组织细胞样单核细胞CD6 8( ) ,所有细胞vimentin( ) ,cy tokeratin、EMA、NSE、Syn、CgA和calcitonin均 (- ) ;少量梭形单核细胞、异型多核细胞的thyroglobulin为局灶阳性。结论 该肿瘤属甲状腺未分化癌的另一种亚型。破骨细胞样多核巨细胞是组织细胞样单核细胞融合的结果 ,来源于单核巨噬系统 。

SMAD3介导TGF-β1刺激软骨细胞增殖和抑制软骨细胞肥大性分化(英文)

为研究TGF β1 SMAD3信号对小鼠软骨细胞增殖和分化的影响 ,分离了野生型与Smad3基因剔除 (Smad3ex8 ex8)突变纯合子小鼠肋骨软骨细胞并进行了体外培养 .通过3 H TdR参入实验检测了体外培养软骨细胞的增殖能力 .TGF β1可以刺激野生型软骨细胞的增殖 ,Smad3基因缺失导致小鼠软骨细胞丧失对TGF β1刺激生长作用的应答 .Northern杂交显示 ,TGF β1促进野生型小鼠软骨细胞表达Ⅱ型胶原 ,而Smad3基因缺失突变纯合子软骨细胞大量表达肥大性软骨细胞的分子标记物X型胶原 .结果表明 ,SMAD3介导转化生长因子TGF

效应性T细胞分化异质性及调控

初始型CD4+T细胞和CD8+T细胞在宿主体内经过抗原刺激后,出现克隆扩增,形成高频率的抗原特异性T细胞,并迅速拥有效应功能.这种T细胞数目和功能的质、量的变化,伴随抗体反应,形成了免疫记忆,构成了针对感染性疾病及其它有关疾病的基本保护性免疫.疫苗对减少感染引起的发病率和死亡率起了非常重要的作用,其终极目标是发展长效的保护性免疫.

急性髓细胞性白血病微分化型(ANLL-M_0)的临床研究

目的 :探讨ANLL -M0 的细胞形态学、细胞化学、细胞免疫学特性和治疗 .方法 :骨髓涂片用Wright-Giemsa染色、POX染色、PAS染色、NES染色及NaF抑制试验 .骨髓液用流式细胞单克隆抗体直接免疫标记技术检测白血病细胞表面相关抗原分化群 ,TPA试验 .短期培养法直接法G显带分析白血病细胞染色体组型 .化疗、异基因外周血干细胞移植 (allo -PBSCT) .结果 :骨髓早期微分化细胞 (NEC)均 >90 % .POX均阴性 .PAS染色 2例弱阳性 ,2例阴性 .NES染色 2例阳性 ,均不受NaF抑制 .4例TPA强阳性 .免疫表型 2例CD+ 13 ,1例CD+ 15,1例CD+ 3 8,1例CD+ 11b,MPO 3例阳性 ,CD+ 19,CD+ 2 均阴性 ,2例CD+ 7.2例化疗达完全缓解 ,其中 1例作allo -PBSCT ,已存活 2 8月CCR和 19月 .结论 :细胞形态学、细胞化学、细胞免疫表型是诊断急性髓细胞性白血病微分化型的重要依据 ,用AML的治疗方案治疗ANLL -M0 有效 .

原发性食管小细胞未分化癌的外科治疗体会

原发性食管小细胞未分化癌是一种少见的高度恶性肿瘤.我们1978年1月～1996年12月间收治本病21例,占同期收治食管恶性肿瘤的0.8%(21/2572).结合文献复习报告如下.

原发性食管小细胞未分化癌12例治疗分析

目的讨论原发性食管小细胞未分化癌的治疗方式及预后。方法分析收治的12例原发性食管小细胞未分化癌的临床资料,结合文献讨论。结果手术+化疗6例中位生存11个月,放疗+化疗4例中位生存期9.5个月,单纯放疗2例只生存3个月。结论以化疗为主的综合治疗是提高原发性食管小细胞未分化癌生存率的关键。

甲状腺破骨细胞样巨细胞性未分化癌临床病理及分子病理特征探析

目的研究甲状腺破骨细胞样巨细胞性未分化癌临床病理及分子病理特征。方法选择100例德州市陵城区人民医院病理科甲状腺破骨细胞样巨细胞性未分化癌患者作为该次研究病人或研究对象(选取时间为2017年6月-2018年8月),对其实施手术切除、免疫组化染色和甲状腺基因突变检测,分析其基因突变位点。结果100例患者中,出现KRAS、NRAS、PIK3CA基因突变,突变率分别为20.00%、1.50、1.60、2.20。结论甲状腺破骨细胞样巨细胞性未分化癌为一类高度侵袭性肿瘤,预后较差,以肉瘤样改变作为组织形态学,应加以重视。

原发性食管小细胞未分化癌伴呕血1例

患者女,70岁.因轻度进食梗阻半年,突发呕血1日入院.纤维胃镜检查见距门齿23cm处粘膜呈菜花样隆起,突向管腔,肿物表面溃烂且有小结节样隆起.病检为小细胞未分化癌及少许鳞状细胞.胸部CT示食管中段可见其内软组织密度灶突出食管腔内,CT值38Hu,双肺及纵隔正常.头颅CT、腹部B超均未见异常.

流式细胞术检测肉桂活性成分对Tfh细胞的影响

滤泡辅助性T细胞(Follicular helper CD4 T cells,Tfh)是重要的CD4^(+)T淋巴细胞亚群之一,与多种疾病的发生和发展密切相关,其参与疾病发生的机制尚有待深入研究。该研究将分离小鼠脾脏细胞,应用贝克曼Moflo分选系统分选出CD4^(+)T淋巴细胞。使用细胞因子刺激Tfh细胞分化并检测其分化比例,同时采用流式细胞术检测和分析肉桂活性成分对滤泡辅助性T细胞分化的影响。结果表明,贝克曼Moflo XDP分选系统可以显著提高CD4^(+)T淋巴细胞的纯度,且肉桂活性成分可以显著抑制Tfh细胞分化。为新药在Tfh细胞的开发提供一定实验基础,并且为研发肉桂作为新的增强免疫疗效药物提供可靠的实验依据。

特发性少弱精子症Th1/Th2细胞因子与自身抗体表达水平及临床意义

目的探讨特发性少弱精子症辅助性T淋巴细胞分化平衡比(Th1/Th2)细胞因子与自身抗体表达水平及临床意义。方法选取于我院就诊的特发性少弱精子症患者150例为观察组,根据精子浓度分为,轻、中度组(n=95):精子浓度(5~15)×10^(6)/mL;重度组(n=55):精子浓度(1~5)×10^(6)/mL。另选取同期于我院就诊的精液常规检查结果正常、确定为女方不孕因素的男性80名为健康对照组。比较三组精液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-ɑ和IFN-γ水平,观察三组AhCGAb、aAsAb阳性表达率。结果重度组IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平明显高于轻中度组,轻中度IL-2、TNF-ɑ、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10水平明显高于对照组(P<0.05)。重度组AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率明显高于轻中度组,轻中度组AhCGAb、AsAb抗体阳性表达率明显高于对照组(P<0.05)。结论Th1/Th2细胞因子与自身抗体表达水平与特发性少弱精子症的发生发展具有相关性,是影响男性不育的重要因素。

自身免疫性甲状腺炎患者血浆中Th1/Th2细胞及甲状腺自身抗体水平变化及临床意义

目的探讨辅助性T淋巴细胞分化平衡比(Th1/Th2)及血浆抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)检测应用于自身免疫性甲状腺炎(AIT)诊断及病情评估的临床价值。方法回顾性分析96例AIT患者临床资料,根据其血浆免疫球蛋白G4(IgG4)检测情况分为阳性组(IgG4>1.35 g/L,n=34)与阴性组(IgG4≤1.35 g/L,n=62),并将同期确诊的47例非炎症性甲亢患者纳入对照。比较AIT患者与非炎症性甲亢患者、阳性组与阴性组患者Th1/Th2及血浆TGAb、TPOAb、TRAb水平差异,以受试者工作特征(ROC)曲线,评估上述指标分别或联合诊断AIT效能,分析上述指标与IgG4的相关性。结果AIT患者Th1/Th2及血浆TGAb、TPOAb水平高于非炎症性甲亢患者,血浆TRAb水平低于非炎症性甲亢患者(P<0.05)。Th1/Th2、TGAb、TPOAb、TRAb诊断AIT的cut-off值分别为12.83、228.13 U/ml、503.63 U/ml、33.45 U/L,ROC曲线下面积(AUC)均小于联合诊断(P<0.05),联合诊断灵敏度90.62%,特异度97.87%。两组Th1/Th2、TRAb水平比较差异无统计学意义(P>0.05),阳性组TGAb、TPOAb水平高于阴性组(P<0.05)。AIT患者Th1/Th2、TRAb水平与IgG4水平未见相关性(P>0.05),TGAb、TPOAb水平与IgG4水平呈正相关(P<0.05)。结论Th1/Th2及血浆TGAb、TPOAb、TRAb水平应用于诊断AIT效能较为理想,其中TGAb、TPOAb水平与患者病情进展密切相关,具有较高临床检测价值。

前列消汤干预自身免疫性前列腺炎辅助性T细胞17分化机制研究

目的:观察前列消汤干预转化生长因子-β1(TGF-β1)-Smad同源物2/3(Smad2/3)信号通路调控自身免疫性前列腺炎(EAP)辅助性T细胞17(Th17)分化机制。方法:120只无特定病原体(SPF)级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照(吡非尼酮)组、前列消汤低/中/高剂量组,每组20只,采用免疫佐剂结合中医湿热证候因素诱导建立EAP小鼠湿热证模型,造模结束后给予相应药物处理;苏木精-伊红(HE)染色观察前列腺、脾脏组织病理改变,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与蛋白质印迹法(Western Blotting)检测前列腺组织中TGF-β1、TGF-β1受体Ⅰ(TGF-β1RⅠ)、白细胞介素17-A(IL-17A)、核转录因子维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、Smad2磷酸化(p-Smad2)、Smad2、p-Smad3和Smad3 mRNA及蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠前列腺指数和湿热证候积分明显增高,前列腺和脾脏组织出现大量炎症细胞浸润,提示EAP小鼠湿热证模型制作成功,TGF-β1、TGF-β1RⅠ、IL-17A、RORγt、p-Smad2和p-Smad3表达显著增高(P<0.05);与模型组比较,吡非尼酮组及前列消汤低/中/高剂量组均能不同程度改善炎症浸润程度,TGF-β1、TGF-β1RⅠ、IL-17A、RORγt、p-Smad2和p-Smad3表达显著降低(P<0.05)。结论:前列消汤能有效抑制自身免疫性前列腺炎Th17细胞异常分化功能,其作用机制可能与TGF-β1-Smad2/3信号通路相关。

卵巢睾丸母细胞瘤一例报告

患者承某某,女性,37岁,已婚,因停经5月腹部隆起,无早妊反应,于1988年3月12日入院,住院号19183,病理号88074,患者即往体健,月经规律末次月经87年10月14日,停经40天肌注黄体酮三针,有撤退性出血一天量少,也曾口服黄体酮片有少量子宫出血,后停经,出现下腹肿物渐大,近日增大明显。

基于SKP-SCs来源的胞外囊泡构建的组织工程神经移植物的生物安全性评价

目的:评价基于皮肤源性前体细胞(skin-derived precursors,SKPs)分化成的施万细胞(Schwann cells,SCs)来源的细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)构建的组织工程神经移植物(tissue engineered nerve graft,TENG)的生物安全性。方法:将SKP-SCs来源的EVs(SKP-SC-EVs)注射至带有3根纤维支架的壳聚糖导管中制备成TENGs,修复比格犬坐骨神经40 mm缺损。术后6个月,取心、肝、脾、肺、肾、脑,通过HE染色进行形态学观察,并收集血液进行血液常规和生化指标分析,包括:白细胞、中性粒细胞、红细胞、血小板、总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶和血糖等。结果:形态学分析显示TENGs组比格犬的各脏器组织结构清晰,与自体移植组、壳聚糖导管组相比,各项血液指标差异均无统计学意义(均P>0.05),且未见毒性反应改变。结论:基于SKP-SC-EVs构建的TENGs植入比格犬体内具有良好的生物安全性,为临床应用TENGs治疗周围神经损伤提供安全性数据支持。

Arntl基因敲除对小鼠T细胞发育及抗感染功能的影响

目的观察Arntl基因敲除对小鼠T细胞发育及抗感染功能的影响。方法构建在T细胞中特异性敲除Arntl基因小鼠(Arntl^(F/F)CD4cre^(+),KO);采用流式细胞术(FCM)检测KO小鼠胸腺和脾脏中T细胞各亚群的比例及数目;检测淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus,LCMV)感染7 d后小鼠脾脏中T细胞各亚群比例、病毒特异性CD8^(+)T细胞的比例,以及CD8^(+)T细胞中IFN-γ的表达水平;qPCR方法检测小鼠脾脏中病毒载量;借助流式细胞仪分选初始CD4^(+)T细胞(CD4^(+)CD25^(-)CD44^(-)CD62L^(+)T细胞),经体外诱导Th1细胞分化,检测表达IFN-γ细胞的比例。结果与对照组(Arntl^(F/F)CD4cre^(-),WT)小鼠相比,KO小鼠胸腺和脾脏中T细胞各亚群的百分比及数目均无明显改变(P>0.05)。感染LCMV后,KO小鼠脾脏中效应T细胞的比例较对照组无明显改变(P>0.05),但分泌IFN-γT细胞的比例显著增多(P<0.05),病毒清除率升高(P<0.05)。此外,KO小鼠初始CD4^(+)T细胞向Th1细胞分化较对照组显著增强(P<0.05)。结论Arntl在T细胞中特异性敲除不影响T细胞的发育,但会增强T细胞抗病毒感染的能力。

肝细胞生长因子负性调控细胞转分化在肾间质纤维化中的作用

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用及其可能机制。方法大鼠随机分为UUO组、HGF治疗组和假手术组。用实时荧光定量RT-PCR、Western杂交和免疫组化检测术后大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和骨形成蛋白7(BMP7)表达量。免疫组化检测大鼠肾组织TGF-β1、FN及α-SMA表达。结果与假手术组相比,UUO组及HGF治疗组CTGFmRNA、TGF-β1、α-SMA、FN、CTGF蛋白表达均增高,且UUO组明显高于治疗组;UUO组及HGF治疗组BMP7mRNA和蛋白表达均减少,且UUO组显著低于治疗组。结论HGF能减轻肾间质纤维化,负性调控肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,调节CTGF及BMP7表达可能是其作用途径。