罗氏沼虾眼柄性腺抑制激素(GIH)的分离纯化及性质的研究

以加热离心的方法获得罗氏虾眼柄粗提取液及用凝胶层析和平板电泳等生化方法进一步分离纯化，并分别对日本沼虾和罗氏沼虾卵母细胞进行体外培养，发现其对卵母细胞发育均具有一定的抑制作用，说明罗氏虾眼柄抽提液含有较多的ＧＩＨ，且他们在结构和功能上具有属内相似性．

波纹龙虾性腺抑制激素(GIH)基因克隆、表达及其对光周期的响应

为探讨波纹龙虾Panulirus homarus性腺抑制激素(gonad-inhibiting hormone,GIH)基因(PhGIH)的时空表达及其对不同光周期的响应,采用RACE技术克隆获得波纹龙虾眼柄组织GIH全长cDNA序列,通过卵巢颜色与形态、石蜡组织切片和性腺发育指数,比较不同光周期(12L∶12D、13L∶11D和14L∶10D)对波纹龙虾卵巢发育的影响,采用qPCR技术检测波纹龙虾不同卵巢发育时期(增殖期、发育期和成熟期)、不同组织GIH的表达情况及其对光周期的表达响应。结果表明:波纹龙虾GIH的cDNA序列全长为1206 bp,开放阅读框(ORF)为354 bp,编码117个氨基酸,预测该蛋白质包括39个氨基酸组成的信号肽和78个氨基酸组成的成熟肽,具有高血糖激素家族(CHH家族)Ⅱ型肽激素的典型特征;同源性分析显示,波纹龙虾GIH氨基酸序列与非洲龙虾Jasus lalandii的一致性最高,为56.76%;系统进化分析显示,波纹龙虾GIH与非洲龙虾亲缘关系最近;qPCR结果显示,波纹龙虾GIH在各组织中广泛表达,其中眼柄中表达量最高(P<0.01),GIH在眼柄中的表达量随卵巢成熟而下降;光周期试验显示,采用14L∶10D光周期处理92 d时能更好地促进卵巢发育,波纹龙虾性腺发育指数(GSI)显著升高(P<0.05),其眼柄GIH表达量显著下降(P<0.05),石蜡组织切片观察显示,此时的卵巢为橘红色,以成熟卵母细胞为主。研究表明,波纹龙虾GIH基因可能在波纹龙虾卵巢发育过程中起着重要作用,14L∶10D光周期处理对卵巢发育促进效果最明显。

鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的研究进展

促性腺激素抑制激素是2000年由日本学者首次从鹌鹑脑中分离出的一种新型下丘脑神经肽,通过其受体介导参与机体的生长、生殖以及摄食等生理过程。迄今,只在金鱼、斑马鱼、星点东方鲀、罗非鱼以及斜带石斑鱼等几种鱼中鉴定出促性腺激素抑制激素。目前,鱼类促性腺激素抑制激素的生理学功能研究相对较少,且存在争议。鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的表达调控以及其他生理学功能仍有待进一步研究。本研究简要总结鱼类促性腺激素抑制激素及其受体的研究进展,并对促性腺激素抑制激素的生理学功能进行概括讨论,旨在加深对鱼类促性腺激素抑制激素的认识和了解,为进一步研究做铺垫。

促性腺激素释放激素抑制剂在卵巢功能低下患者促排卵中的应用

目的:比较卵巢功能低下患者应用促性腺激素释放激素抑制剂(GnRH antagonist,GnRH-A)促排卵与促性腺激素释放激素激动剂(GnRH agonist,GnRH-a)短方案促排卵有无差异。方法:A组应用GnRH-a与HMG/rFSH(Gn)促排卵共53个周期,B组应用HMG/rFSH(Gn)与GnRH-A促排卵共30个周期,比较两组HCG注射日的血清E2与LH水平及内膜厚度、卵泡刺激素用量及所用天数,获卵数、受精率、卵裂率、种植率和妊娠率。结果:B组与A组相比,两组的促卵泡激素(Gn)所用天数有明显差异(10.87±2.43 vs 9.62±1.70,P<0.05),B组平均获卵数要高于A组但两组无统计学意义(10.43±7.94 vs 9.00±6.98,P>0.05),两组之间的HCG注射日血清E2与LH水平及内膜厚度、Gn用量、受精数、受精率、卵裂数、卵裂率、妊娠率均无显著性差异(P>0.05)。结论:GnRH-A是卵巢功能低下患者的促排卵治疗可行方案。

人抑制素α亚基主动免疫对鸡卵泡发育和性腺激素及产蛋率的影响

用人工合成人抑制素α亚基 (1 2 6Gly .Tyr)片段与KLH连接作完全抗原免疫产蛋三黄母鸡 ,用放免法测定排卵周期外周血中雌二醇和孕酮的水平 ,观察产蛋率的变化。宰杀后卵巢称重 ,各期卵泡分类计数。结果免疫组产蛋率、大白泡、小白泡和小黄泡数比对照组高 (P <0 0 5 ) ,蛋重、卵巢上直径大于 10mm的卵泡数两组间无显著差异。经放免法测定 ,免疫组外周血雌二醇基础水平比对照组高 ,但孕酮没有显著性差异。

抑制素A及促性腺激素对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟的影响

目的:探讨抑制素A(InhibinA,INHA)对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟(In vitro maturation,IVM)的影响。方法:从孕马血清促性腺激素(Pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG)组(使用PMSG组,16例)及无PMSG组(未使用PMSG组,20例)获得的生殖泡期(Germinal vescle,GV)卵母细胞在不同浓度INH A的培养液中进行体外培养,观察第一极体(The first polar body,PB1)排出和皮质颗粒(Cortical granules,CG)染色情况。结果:PMSG组获卵数为(17.2±2.6)个/只,无PMSG组获卵数为(15.9±1.8)个/只(P>0.05);PMSG组与无PMSG组的PB1率分别为57.7%、50.7%(P>0.05)。PMSG组中INH A200、350ng/ml组的PB1率较对照组高(P<0.05);无PMSG组中各INH A组PB1率与对照组比较无显著差异(P>0.05);结论:INH A和PMSG对体外培养GV期卵母细胞核成熟有促进作用。

促性腺激素抑制激素的研究进展

促性腺激素抑制激素(GnIH)是近年在鸟类首先发现的一种神经肽,C端具有精氨酰-苯丙酰胺(RF酰胺),GnIH及其受体在脑和多种器官分布,具有抑制促性腺激素合成和分泌、刺激摄食等作用。在哺乳动物发现C端具有RF酰胺的多肽,为鸟类GnIH类似物,具有相似的作用和组织分布。本文对GnIH的发现、结构、受体、分布定位、生理功能和作用机制进行了综述。

抗缪勒管激素、抑制素B及性激素水平对儿童性腺发育异常的诊断价值

目的:探讨抗缪勒管激素(anti-Mullerian hormone,AMH)、抑制素B(inhibin B,INH-B)及性激素水平对儿童性腺发育异常的诊断意义。方法:选取2019年1月至2019年6月在湖南省儿童医院体检且行血清学检查的儿童共150例,按最后确诊是否儿童性腺发育异常分为性腺发育异常组(n=101)和对照组(n=49)。采用单因素分析性腺发育异常患儿的血清学标志物表达特征,采用logistic回归分析儿童性腺发育异常的独立预测因素,用独立预测因素构建预测儿童性腺发育异常可能的回归方程模型,采用受试者工作特征曲线分析本模型对儿童性腺发育异常的诊断效能。结果:性腺发育异常组儿童血清AMH、INH-B、T水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);性腺发育异常组血清LH、FSH、E2、PRL水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,AMH、INH-B、E2是儿童性腺发育异常的独立预测因素。本模型最佳截点值为85.43,其曲线下面积为0.943,此截点值下本模型对儿童性腺发育异常的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率分别为97.02%、75.51%、89.09%、92.50%、90.00%。结论:本研究构建的logistic回归方程模型对儿童性腺发育异常有较高的准确性及较好的诊断效能,可以作为辅助筛查的工具之一。

反相高效液相色谱法分离中华绒螯蟹性腺抑制激素的初步研究

采用反相高效液相色谱层析法(RP-HPLC)分离中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)眼柄视上神经节中的性腺抑制激素,收集在高血糖激素家族区域内出峰的洗脱液组分,得到7组单一的样品组分。通过活体注射的方法,观察和统计每一组分对去眼柄中华绒螯蟹卵母细胞直径大小的影响,以检验每个分离组分的性腺抑制活性。结果发现,其中的第7组分对中华绒螯蟹的卵巢发育具有最强的抑制作用,推测这一组分为中华绒螯蟹的性腺抑制激素。

促性腺激素释放激素激动剂长方案和促性腺激素释放激素抑制剂方案对卵巢功能减退患者促排卵效果和临床妊娠的影响

目的探讨促性腺激素释放激素激动剂长方案和促性腺激素释放激素抑制剂方案对卵巢功能减退患者促排卵效果和临床妊娠的影响。方法 80例卵巢功能减退患者为研究对象,随机分为观察组和对照组,各40例。观察组采用促性腺激素释放激素激动剂长方案进行治疗,对照组采用促性腺激素释放激素抑制剂方案进行治疗,观察治疗周期结束之后,两组患者促排卵效果(包括获卵数、受精率、种植率、卵裂率)和临床妊娠(包括妊娠率和足月分娩率)情况。结果两组患者的获卵数、受精数、卵裂数、受精率、种植率、卵裂率比较,差异无统计学意义(P>0.05),但观察组妊娠率和足月分娩率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论促性腺激素释放激素激动剂长方案比促性腺激素释放激素抑制剂方案对卵巢功能减退患者临床妊娠效果更显著,值得临床推广应用。

抑制素免疫山羊卵巢对外源性促性腺激素的反应

用重组绵羊抑制素α亚单位在不发情季节主动免疫 4 0只波尔山羊。免疫前和免疫后用马的绒毛膜促性腺激素 (eCG)或猪的卵泡刺激素 (pFSH)处理。排卵通过超声波检测 ,胚胎用非手术法回收。试验结果表明 ,抑制素主动免疫能引起山羊超数排卵。

月经中期促性腺激素升高对甲状腺轴的负反馈抑制

垂体促甲状腺激素(TSH)与促性腺激素包括卵泡刺激素(F5H)、黄体生成素(LH)同属糖蛋白类激素、均具有二个亚基,其α—亚基三者相同,它们的特异性取决于β—亚基。育龄妇女月经中期出现FSH、LH突发高峰,与此同时,基础体温降至月经周期的最低值。

雌性鸭胚胎和雏鸭的抑制素和促性腺激素的分泌

测定了从孵化 ２１ ｄ 到出壳后 １ 日龄雌性鸭胚胎和初生雏 鸭外周及卵巢中具免疫活性的抑制素含量，同时也测定了促卵泡生成素（ Ｆ Ｓ Ｈ）和促黄体生成素（ Ｌ Ｈ）的含量⒚在判定有效后，用牛的抑制素放射免疫系统测定抑制素的含量⒚在第 ２１ 日至 ２５ 日时胚胎血浆中抑制素含量处于低水平， 到第 ２６ 日达到最大值，第 ２７ 日稍降后，抑制素含量在出生后快速下降⒚ Ｆ Ｓ Ｈ 含量在胚胎期无显著变化，其含量的变化与外周抑制素含量的变化相对独立⒚卵巢中抑制素含量在孵 化的第 ２５ 日有显著下降，并于第 ２６ 日时快速回升⒚卵巢和血浆中 抑制素的含量在整个研究阶段后者比前者高约 １０ 倍 ⒚血浆 Ｌ Ｈ 从第 ２１ 日开始下降，至第 ２５ 日 接着有所回升并于第 ２７ 日达第二峰值⒚总之，血浆抑制素和 Ｆ Ｓ Ｈ 在雌性鸭胚胎中不存在负反馈关系， 这预示着胚胎期抑 制素的主要作用 不是抑制垂体分 泌 Ｆ Ｓ Ｈ，同 样 Ｆ Ｓ Ｈ 也不影响抑

促性腺激素对小鼠卵巢透明质酸和间α胰蛋白酶抑制剂表达的影响

目的:观察促性腺激素对野生型和bikunin基因敲除小鼠卵巢透明质酸(HA)和间α胰蛋白酶抑制剂(ITI)表达的影响。方法:应用免疫组织化学法检测激素诱导后HA和ITI在野生型和bikunin基因敲除小鼠中的表达。结果:HA阳性表达分布于野生型和bikunin基因敲除小鼠卵巢,给予促性腺激泉后,其表达增强;在野生型小鼠卵泡周围ITI呈阳性表达,在bikunin基因敲除小鼠ITI表达不受影响。结论:HA和ITI在卵泡发育中起重要作用。

亲吻肽与促性腺激素抑制激素:调控生殖轴的新型RF酰胺肽

亲吻肽为G蛋白偶联受体54(GPR54)的内源性配体,其C末端为精氨酸-苯丙氨酸-NH2(RFamide)。促性腺激素抑制激素(GnIH)的受体为GPR147,其C末端亦为RFamide。雌激素通过上调脑内亲吻肽的表达,促进促性腺激素释放激素(GnRH)分泌。GnIH对GnRH亦可发挥直接作用,在下丘脑和垂体两个水平上抑制促性腺激素的合成和分泌。十余年来越来越多的证据证实,这两条C末端为RFamide的调节性神经肽(RF酰胺肽)能直接作用于GnRH神经元,并相互拮抗地参与性类固醇激素对生殖轴的反馈调控。

促性腺激素峰抑制因子

从70年代到80年代初,人们证明了卵巢卵泡液中存在有生物活性的抑制素,其来源是颗粒细胞。大多数研究表明,抑制素主要在垂体水平上选择性地抑制促卵泡素(FSH)的释放;少数报道抑制素对促黄体素(LH)分泌也有抑制作用。到80年代中期,从牛和猪卵泡液中提纯了抑制素,并克隆出了其互补 DNA,确定了这种分子的结构,并在此基础上建立了该激素的特异性放射免疫测定方法,从而使有关抑制素的研究更加深入。

促性腺激素抑制激素在公猪下丘脑-垂体-睾丸轴的分布定位研究

为揭示促性腺激素抑制激素(GnIH)在公猪生殖发育中的作用,本研究以15头雄性小梅山猪为研究对象,用免疫组化和半定量RT-PCR方法研究3、30、60、90和120 d的公猪(n=3)GnIH阳性细胞在下丘脑-垂体-睾丸轴的分布定位及在下丘脑的发育学变化。结果表明:GnIH在下丘脑主要分布于室旁核,GnIH阳性神经元呈纺锤形和多角形,且在下丘脑室旁核GnIH阳性神经元数目随日龄增长而上下波动,形态趋向成熟;在垂体分布非常广泛,无论是腺垂体还是神经垂体均有强烈的免疫阳性反应;在睾丸集中分布于生精小管内部,可见强烈的免疫阳性反应,在间质细胞也可见免疫阳性反应。GnIH mRNA的丰度随日龄增长而呈规律性波动,在120 d出现显著降低(P<0.05)。结论:GnIH分布于小梅山公猪下丘脑-垂体-睾丸轴,并对其发育有调节作用。

哺乳动物促性腺激素抑制激素的生殖内分泌调节与行为作用

哺乳动物中促性腺激素抑制激素(gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)同源物(RF-amide related peptide,RFRP)的神经元胞体主要存在于下丘脑背内侧核(dorsomedial hypothalamicnucleus,DMH),其神经纤维主要投射到视前区(preoptic area,POA)和下丘脑正中隆起,其受体主要分布在下丘脑。RFRP神经元投射到促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)神经元上;最终,RFRP和GnRH共同完成哺乳动物生殖轴功能调节。

人绒毛膜促性腺激素抑制绒癌细胞系表达PAI-1

目的 :为探讨人绒毛膜促性腺激素 (hCG)对绒癌细胞侵袭性的影响。方法 :采用半定量逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测方法 ,观察了不同浓度hCG不同处理时间对JEG 3绒癌细胞系表达PAI 1的影响。结果 :分别用 0、5 0、5 0 0 0、2 5 0 0 0mIU mLhCG处理 4 8h后 ,JEG 3细胞中PAI 1mRNA的含量逐渐降低 ,并随hCG作用浓度增高而显著。此外还发现 ,在 2 5 0 0 0mIU mLhCG的作用下 ,JEG 3细胞中PAI 1的表达随处理时间的延长逐渐减低。结论 :推测hCG可能通过抑制细胞中PAI

抑制素免疫山羊卵巢对外源性促性腺激素的反应

用重组绵羊抑制素α亚单位在不发情季节主动免疫40只波尔山羊。免疫前和免疫后用马的绒毛膜促性腺激素(eCG)或猪的卵泡刺激素(pFSH)处理。排卵通过超声波检测,胚胎用非手术法回收。试验结果表明,抑制素主动免疫能引起山羊超数排卵。