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德彪西作品《欢乐岛》的音乐性表达与演奏特征
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作者 任俏嫦 《当代音乐》 2024年第3期88-91,共4页
印象派音乐是19世纪最后一种极富特色的风格,本文以曲式分析的方式“剖解”德彪西印象派钢琴作品《欢乐岛》的演奏重难点,第一部分结合谱例分析作品的演奏技法,分别从触键的方式、节奏的掌握、速度的要求、复杂节奏形式的练习方法和装... 印象派音乐是19世纪最后一种极富特色的风格,本文以曲式分析的方式“剖解”德彪西印象派钢琴作品《欢乐岛》的演奏重难点,第一部分结合谱例分析作品的演奏技法,分别从触键的方式、节奏的掌握、速度的要求、复杂节奏形式的练习方法和装饰音的演奏方式进行演奏技巧分析。第二部分笔者利用音乐情绪分析描绘出一个完整的音乐情景,通过建立音乐“蓝图”而更好地去推动音乐性的表达。希望通过本文对《欢乐岛》的演奏浅析,能为正在练习或准备演奏德彪西音乐作品的朋友们提供一些有意义的参考和建议。 展开更多
关键词 印象派音乐 德彪西 《欢乐岛》 音乐性表达 演奏特征
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任务模块,研究性阅读加持情境性表达——“走近中国古典名著”语文学习任务群的建构
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作者 韦云成 《小学教学参考》 2024年第1期45-47,共3页
“走进中国古典名著”语文学习任务群,有三个学习任务模块:走近四大名著、走心四大名著、亲近四大名著。每个任务群安排两个实践活动,即研究性阅读与情境性表达。这是围绕单元主题,整体建构学习任务群,基于现有语文教材的一次单元学习... “走进中国古典名著”语文学习任务群,有三个学习任务模块:走近四大名著、走心四大名著、亲近四大名著。每个任务群安排两个实践活动,即研究性阅读与情境性表达。这是围绕单元主题,整体建构学习任务群,基于现有语文教材的一次单元学习突破。其具有四层意义:一是阅读兴趣激发;二是单元整体建构;三是阅读与表达相得益彰;四是学习内容的拓展与延伸,让阅读与生活精彩链接。 展开更多
关键词 学习任务群 中国古典名著 研究阅读 情境性表达
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基于地域性表达的红色精神赋能高校德育建设实施路径
3
作者 王琬萱 《中国科技经济新闻数据库 教育》 2024年第3期0070-0072,共3页
红色精神是中国革命的重要组成部分,具有强烈的地域性特征。在高校德育建设中,基于地域性表达的红色精神可以为学生提供独特的思想教育资源,促进学生的道德修养和人格塑造。本文从红色精神的内涵、地域性表达的意义以及高校德育建设等... 红色精神是中国革命的重要组成部分,具有强烈的地域性特征。在高校德育建设中,基于地域性表达的红色精神可以为学生提供独特的思想教育资源,促进学生的道德修养和人格塑造。本文从红色精神的内涵、地域性表达的意义以及高校德育建设等方面进行探讨,提出了基于地域性表达的红色精神赋能高校德育建设的实施路径,旨在为高校德育工作提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 地域性表达 红色精神 高校 德育建设 实施路径
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动漫角色的文化象征与符号性表达
4
作者 匡宁 《记者摇篮》 2023年第4期36-38,共3页
动漫角色不仅构成了动漫故事的主体,也是动漫文化象征及符号表达的重要载体。动漫角色承载着社会性、审美性以及商品性的同时,在文化传播、社会互动交流以及符号性消费等方面具有潜在意义与显性价值。准确把握动漫角色文化象征与符号性... 动漫角色不仅构成了动漫故事的主体,也是动漫文化象征及符号表达的重要载体。动漫角色承载着社会性、审美性以及商品性的同时,在文化传播、社会互动交流以及符号性消费等方面具有潜在意义与显性价值。准确把握动漫角色文化象征与符号性表达,有助于创新动漫表达形式、丰富动漫文化呈现方式,可为动漫产业发展提供行动指南。本文基于文化传播视角,在简要分析动漫角色象征性与符号性的基础上,着重对动漫角色的文化象征与符号性表达进行深入解读。 展开更多
关键词 动漫角色 文化象征 符号性表达 传播
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母源性表达基因8在糖尿病视网膜病变中的作用
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作者 王蓄杨 陈王灵 《福建医科大学学报》 2023年第2期89-95,共7页
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)母源性表达基因8(MEG8)在糖尿病(DM)视网膜病变(DR)中的表达情况,并进一步评估MEG8对DR的诊断价值及对DR的调控机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测全部受试者血清中MEG8的表达水平;受试者工作... 目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)母源性表达基因8(MEG8)在糖尿病(DM)视网膜病变(DR)中的表达情况,并进一步评估MEG8对DR的诊断价值及对DR的调控机制。方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测全部受试者血清中MEG8的表达水平;受试者工作特征(ROC)曲线评估MEG8对DR的诊断价值;CCK-8法和Transwell实验评估MEG8对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)增殖和迁移的影响;荧光素酶报告基因实验验证MEG8与miR-15a-5p的3’-非翻译区(3’-UTR)的相互作用。结果 与对照组比较,DM组的MEG8水平显著增高,DR组的MEG8水平较DM组更高;miR-15a-5p的表达趋势与MEG8相反;MEG8的表达水平与DM病程等指标呈正相关;ROC曲线显示,血清MEG8具有区分DM和DR的能力。高糖诱导后HRMECs的MEG8水平显著增高,且高糖诱导促进HRMECs的增殖和迁移能力。通过细胞转染MEG8小干扰RNA下调胞内MEG8水平后,HRMECs的增殖和迁移均受到不同程度的抑制作用;荧光素酶报告基因实验证实,MEG8直接靶向miR-15a-5p, miR-15a-5p的水平与MEG8的水平呈显著负相关。结论 MEG8在DR患者中失调,ROC曲线显示MEG8对DM和DR有区分价值。体外DR细胞模型可见,过表达的MEG8通过靶向调控miR-15a-5p,对高糖诱导的HRMECs的增殖和迁移产生促进作用。初步证实MEG8可能参与对DR的调控。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 母源性表达基因8 miR-15a-5p 诊断
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研究性阅读+情境性表达——“走近鲁迅”语文学习任务群建构谈 被引量:1
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作者 林春曹 《江苏教育》 2023年第1期41-46,共6页
“走近鲁迅”语文学习任务群,包括3个学习任务模块:“云游鲁迅故里”“阅读鲁迅作品”“传承鲁迅精神”。每个任务模块又安排了两个实践活动“:研究性阅读”与“情境性表达”。这是语文学习任务群设计的一次尝试,是基于现有语文教材的... “走近鲁迅”语文学习任务群,包括3个学习任务模块:“云游鲁迅故里”“阅读鲁迅作品”“传承鲁迅精神”。每个任务模块又安排了两个实践活动“:研究性阅读”与“情境性表达”。这是语文学习任务群设计的一次尝试,是基于现有语文教材的一次单元学习突破。它有三层意义:一是学习内容的拓展延伸;二是主题活动的整体建构;三是真实情境的阅读表达。 展开更多
关键词 语文学习任务群 “走近鲁迅” 研究阅读 情境性表达
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关于住宅建筑设计中的地域性表达探析 被引量:1
7
作者 伏莉 《住宅与房地产》 2023年第9期46-49,共4页
我国各地区的地域性有所不同,将其融入住宅建筑设计之中,能够增加地方民众对于住宅建筑的认可,满足其对建筑的各项需求,然而,现代建筑设计中在地域性表达上存在些许不足。为从根本上解决这一问题,本文以住宅建筑设计为核心,阐明地域性... 我国各地区的地域性有所不同,将其融入住宅建筑设计之中,能够增加地方民众对于住宅建筑的认可,满足其对建筑的各项需求,然而,现代建筑设计中在地域性表达上存在些许不足。为从根本上解决这一问题,本文以住宅建筑设计为核心,阐明地域性表达趋势与意义,指明住宅建筑设计的核心原则,并提出地域性表达的设计要点,以供参考。 展开更多
关键词 住宅建筑 地域性表达 设计要点
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主题空间设计中纤维艺术的释义性表达研究
8
作者 芮奇扬 《化纤与纺织技术》 CAS 2023年第11期180-182,共3页
主题空间与纤维艺术是两个具有独立意义和特点的概念,但在实际应用中,二者可以相互交融,共同表达和传递特定主题的信息和价值。纤维艺术是一种脱胎于传统艺术的现代艺术,如今被广泛应用于各类主题空间,其释义性表达会因为不同主题空间... 主题空间与纤维艺术是两个具有独立意义和特点的概念,但在实际应用中,二者可以相互交融,共同表达和传递特定主题的信息和价值。纤维艺术是一种脱胎于传统艺术的现代艺术,如今被广泛应用于各类主题空间,其释义性表达会因为不同主题空间的不同需求而呈现出丰富多彩的发展形势,主要集中于具象、抽象、意象三大类。基于此,文章将围绕主题空间设计、纤维艺术、释义性表达的概念与特点,对主题空间设计中纤维艺术的释义性表达进行研究,以期为纤维艺术的发展提供有价值的参考依据。 展开更多
关键词 主题空间设计 纤维艺术 释义性表达 现代艺术
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提高四年级学生创意性表达能力的研究
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作者 楼佳玲 《学苑教育》 2023年第5期27-28,31,共3页
新课标背景下,语文课堂不再是灌输式、填鸭式。教师在教学中应该要以学生为主体,以激发学生学习兴趣,提高学生的核心素养为目的展开教学。本文从四年级学生出发,从确定教学目标出发,明确具体的学习任务。教学时依托具体的学习任务,开展... 新课标背景下,语文课堂不再是灌输式、填鸭式。教师在教学中应该要以学生为主体,以激发学生学习兴趣,提高学生的核心素养为目的展开教学。本文从四年级学生出发,从确定教学目标出发,明确具体的学习任务。教学时依托具体的学习任务,开展有效学习课堂,提高学生的学习兴趣,丰富想象,调动学生的语文学习积极性和课堂参与主动性,实现核心素养提升的目标。 展开更多
关键词 教学目标 想象力 创意性表达 核心素养
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基于中考命题分析的实用性表达探索
10
作者 周奕 《语文教学通讯》 2023年第34期85-88,共4页
在大力提倡教学评一体的当下,中考试卷中关于实用性表达的试题也在努力指向在特定的表达任务中考查学生运用语言文字的实际能力。关于实用性表达的中考复习,教师应该研究命题,对近年来的中考真题进行分层级归类,研究学情,聚焦学生存在... 在大力提倡教学评一体的当下,中考试卷中关于实用性表达的试题也在努力指向在特定的表达任务中考查学生运用语言文字的实际能力。关于实用性表达的中考复习,教师应该研究命题,对近年来的中考真题进行分层级归类,研究学情,聚焦学生存在的主要问题,针对学情研究方法,开发学习支架,指导学生有效学习,不断提升学生实用性表达的条理性、清晰性、针对性,促进学生语文素养不断提升。 展开更多
关键词 实用性表达 中考命题 分层级归类 学习支架
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生活叙事油画创作中陶瓷静物的意象性表达
11
作者 吴佩燕 杨欢欢 《美与时代(美术学刊)(中)》 2023年第11期30-32,共3页
生活叙事绘画是一种通过绘画来表达个人生活和情感的艺术形式,强调以绘画的方式来呈现个体的内在世界。意象性绘画表达强调创作者在自由安全的空间下,通过绘画实现情感表达和自我疗愈。将生活叙事油画和意象性表达相融合,能丰富非语言... 生活叙事绘画是一种通过绘画来表达个人生活和情感的艺术形式,强调以绘画的方式来呈现个体的内在世界。意象性绘画表达强调创作者在自由安全的空间下,通过绘画实现情感表达和自我疗愈。将生活叙事油画和意象性表达相融合,能丰富非语言的表达形式,并结合江西陶瓷静物,分析其作为生活物象在叙事油画创作中的意象性。 展开更多
关键词 意象性表达 油画创作 陶瓷静物
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县域纪录片的地方性表达与跨地域传播策略研究
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作者 侯亮 《喜剧世界(中旬刊)》 2023年第9期0145-0147,共3页
近些年,县域纪录片开始渐渐地进入到了大众视野,同时开始有越来越多的地方电视台制作将县域作为主题的纪录片。这些纪录片在其传播过程中呈现出了非常鲜明的地方发展特色以及独具特色的纪录片风格,也形成了一种全新的纪录片类型。作为... 近些年,县域纪录片开始渐渐地进入到了大众视野,同时开始有越来越多的地方电视台制作将县域作为主题的纪录片。这些纪录片在其传播过程中呈现出了非常鲜明的地方发展特色以及独具特色的纪录片风格,也形成了一种全新的纪录片类型。作为一类地方性知识,县域纪录片的知识传播过程有着非常独特的价值和意义。因此需要加强对这一特色知识的深度挖掘和利用,强化地方文化的传播,在始终坚持记录性原则的条件下展开县域纪录片的跨地域传播,展现出县域纪录片在社会发展过程中具有的促进作用。基于此,本文针对县域纪录片的地方性表达和跨地域传播展开研究,并提出具体的传播策略,以供参考。 展开更多
关键词 县域纪录片 地方性表达 跨地域传播 传播策略
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新文创视角下扬州旅游文创产品设计的地域性表达研究
13
作者 王新杰 薛婷 《上海包装》 2023年第4期152-154,共3页
在城市文化发展中,文创产品设计属于重要手段,对推动地域文化与审美价值有着积极作用。以扬州为例,对旅游文创产品设计的地域性表达展开探讨,以期能够为扬州旅游文创产品设计与开发路径提供参考。
关键词 新文创视角 旅游文创产品 产品设计 地域性表达
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文学语言的意象性表达与感受意 被引量:4
14
作者 刘宏伟 《外国语文》 北大核心 2014年第6期79-85,共7页
文学语言是心智活动的反映。高意象性表达容易唤起意象表征,在非概念性体验的呈现和感受意的引发中起到重要作用。低意象性表达的认知更多地依赖言语语境因素,能够在与高意象性表达互动中提炼出变异性感受意。文学创新从很大程度上讲是... 文学语言是心智活动的反映。高意象性表达容易唤起意象表征,在非概念性体验的呈现和感受意的引发中起到重要作用。低意象性表达的认知更多地依赖言语语境因素,能够在与高意象性表达互动中提炼出变异性感受意。文学创新从很大程度上讲是感受意的创新,自由意志的发挥受到随附性的影响和制约。 展开更多
关键词 感受意 高意象性表达 低意象性表达 文学创新 随附
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食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布与时序性表达 被引量:11
15
作者 杨静 杨军 +3 位作者 黄继超 何玮玲 张驰 黄明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期4057-4066,共10页
【目的】研究食源性金黄色葡萄球菌各血清型肠毒素基因的分布,并进一步分析其时序性表达规律。【方法】针对51株各类食品中分离的金黄色葡萄球菌菌株,应用PCR技术对11种葡萄球菌肠毒素进行基因分型;提取细菌总RNA,以ftsZ和ropB作为内标... 【目的】研究食源性金黄色葡萄球菌各血清型肠毒素基因的分布,并进一步分析其时序性表达规律。【方法】针对51株各类食品中分离的金黄色葡萄球菌菌株,应用PCR技术对11种葡萄球菌肠毒素进行基因分型;提取细菌总RNA,以ftsZ和ropB作为内标基因,使用反转录荧光定量PCR研究各肠毒素基因在细菌生长周期中的表达水平变化。【结果】除see、ses和set外,其余8种肠毒素基因在51株食源性金黄色葡萄球菌菌株中均有检出,且sei和seg的检出率最高(27.45%)。各肠毒素基因在mRNA水平的时序性表达规律基本一致,均在对数后期达到峰值,随后快速下降。以内标基因为参照,同一菌株中不同肠毒素基因的相对表达量以及不同菌株中同一肠毒素基因的相对表达量均差异较大。【结论】本文系统研究了肠毒素基因在食源性金黄色葡萄球菌中的分布,并探究了肠毒素基因的时序性表达规律,对金黄色葡萄球菌毒力机制研究与食品质量安全控制具有参考意义。 展开更多
关键词 食源金黄色葡萄球菌 肠毒素 基因分型 时序性表达 荧光定量实时PCR
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蚯蚓溶栓酶基因的克隆及非融合性表达 被引量:6
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作者 陈飞 李莉 +3 位作者 孟宪志 梁国栋 刘艳玲 吴红艳 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第12期961-963,共3页
目的 克隆和表达我国特有的双胸蚓属蚯蚓 (Lumbricusbimastus)体内一种具有纤溶活性的蛋白质。方法 通过蛋白质N 末端测序、引物设计及合成、RT PCR得其对应的cDNA ,随后构建了 pBV2 2 0 P3 0 重组质粒 ,在大肠杆菌DH5α中进行非融... 目的 克隆和表达我国特有的双胸蚓属蚯蚓 (Lumbricusbimastus)体内一种具有纤溶活性的蛋白质。方法 通过蛋白质N 末端测序、引物设计及合成、RT PCR得其对应的cDNA ,随后构建了 pBV2 2 0 P3 0 重组质粒 ,在大肠杆菌DH5α中进行非融合性表达 ,再经亲和色谱柱纯化复性 ,得到重组蚯蚓溶栓酶蛋白。结果 克隆cDNA全长 888bp ,编码含 2 4 2个氨基酸的成熟肽 ,SDS PAGE电泳显示分子量在 30× 10 3 左右 ,因此将其命名为P3 0 ,经活性测定 ,具有纤溶活性。结论 P3 0 为首次发现的新基因 ,在国际基因库的输入号为GenebankAF 10 96 4 8,并获得国家专利 ,专利号为 9810 2 2 5 7.X。 展开更多
关键词 蚯蚓溶栓酶 基因克隆 非融合性表达 双胸蚓属 重组表达
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心肌细胞肥大过程中心脏发育相关转录因子及下游心脏肥大标志基因的时序性表达规律研究 被引量:11
17
作者 罗漫 吴晓云 +2 位作者 郑敏 刘玲娟 田杰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期394-401,共8页
目的观察在心肌细胞肥大过程中心脏发育相关转录因子及下游心脏肥大标志基因时序性表达规律,为心肌肥大机制研究提供线索。方法用异丙肾上腺素(ISO)干预心肌细胞,用CCK-8、细胞计数仪、免疫组化分别检测细胞存活率、细胞直径及表面积,用... 目的观察在心肌细胞肥大过程中心脏发育相关转录因子及下游心脏肥大标志基因时序性表达规律,为心肌肥大机制研究提供线索。方法用异丙肾上腺素(ISO)干预心肌细胞,用CCK-8、细胞计数仪、免疫组化分别检测细胞存活率、细胞直径及表面积,用RT-PCR、Western blotting分别检测相关基因mRNA及蛋白表达水平。结果用ISO成功构建心肌细胞肥大模型。ISO干预后,GATA结合蛋白4(GATA4)、肌细胞增强因子2C(MEF2C)、GATA5、脑钠肽(BNP)、心房利钠因子(ANP)于24h开始升高,P300、α-肌球蛋白重链(α-MHC)、T-框蛋白5(TBX5)于12h开始升高,血清应答因子(SRF)、β-MHC mRNA于6h开始升高(P<0.05);其中GATA4、α-MHC、β-MHC、SRF、P300 mRNA表达呈先升后降的趋势,至干预72h GATA4、SRF、α-MHC、β-MHC、P300 mRNA表达仍高于正常(P<0.05),而MEF2C降至正常(P>0.05);GATA5、TBX5、ANP、BNP mRNA表达与对照组相比持续升高(P<0.05),而NKX2.5 mRNA(P>0.05)无明显变化。ISO干预48h后,GATA4蛋白表达水平升高,HEY2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论在心肌细胞肥大过程中,MEF2C的时序表达规律与心脏发育过程相似,而GATA4、GATA5、SRF、TBX5的时序性表达规律与心脏发育过程不完全一致,提示其在心肌细胞肥大由代偿转为失代偿过程中的重要作用。同时GATA4、MEF2C、SRF与乙酰化酶P300的时序性表达规律相似,提示在心肌细胞肥大过程中其时序性表达可能受P300调控。 展开更多
关键词 心肌细胞肥大 心脏发育相关转录因子 心脏肥大标志基因 时序性表达
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Myf5基因在马身猪和大白猪背最长肌中的发育性表达研究 被引量:5
18
作者 黎威 高鹏飞 +6 位作者 石建中 张燕青 徐凯 刘宏 郭晓红 李步高 曹果清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2081-2087,共7页
本研究旨在分析猪背最长肌中Myf5基因的发育性表达规律。采用实时荧光定量PCR和Western-blot技术检测了马身猪和大白猪从初生~180日龄7个阶段(初生、30、60、90、120、150和180d)背最长肌中Myf5基因mRNA和蛋白质发育性表达规律。结果表... 本研究旨在分析猪背最长肌中Myf5基因的发育性表达规律。采用实时荧光定量PCR和Western-blot技术检测了马身猪和大白猪从初生~180日龄7个阶段(初生、30、60、90、120、150和180d)背最长肌中Myf5基因mRNA和蛋白质发育性表达规律。结果表明,马身猪和大白猪背最长肌中Myf5基因mRNA相对表达量均表现出初生时最高,30日龄次之,60日龄时突然降低,此后基本维持稳定状态的规律。马身猪背最长肌中Myf5蛋白的相对表达量初生时最高,30日龄时最低,60~180日龄阶段,表达量呈现波动变化的不稳定趋势;在大白猪中,Myf5蛋白60日龄前的相对表达量极显著高于60日龄后的表达量(P<0.05),60日龄前各阶段间的表达量及60日龄后各阶段间的表达量差异不显著(P>0.05)。在同一日龄阶段,马身猪Myf5蛋白的表达量均显著或极显著地高于大白猪(60日龄阶段除外)。Myf5在mRNA和蛋白质水平上的表达与猪的遗传背景和发育阶段有关。 展开更多
关键词 MYF5 背最长肌 发育性表达
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过氧化物酶体增殖物激活受体α在猪肝脏组织中发育性表达研究 被引量:6
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作者 徐凯 王效京 +4 位作者 刘宏 郭晓红 高鹏飞 曹果清 李步高 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期178-182,共5页
为了探究过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)基因在不同脂肪型猪肝脏组织中的发育表达规律,本研究采用实时荧光定量PCR方法,检测了马身猪和大白猪0、1、2、3、4、5和6月龄个体肝脏... 为了探究过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)基因在不同脂肪型猪肝脏组织中的发育表达规律,本研究采用实时荧光定量PCR方法,检测了马身猪和大白猪0、1、2、3、4、5和6月龄个体肝脏内PPARα基因mRNA的表达量。结果显示,马身猪和大白猪肝脏组织PPARα基因mRNA发育性变化趋势存在差异,大白猪PPARα基因表达量呈现出前、后期高中期低的变化趋势,0月龄时表达量最高,3月龄时表达量最低,两者差异极显著(P<0.01),而马身猪表达量呈现前期高后期低的变化趋势,0月龄和1月龄的表达量极显著高于其他月龄(P<0.01)。上述结果揭示猪PPARα可能是肝脏脂质代谢的调控因子,为猪脂肪沉积的调控机制提供理论数据。 展开更多
关键词 PPARα基因 MRNA 发育性表达
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乳酸乳球菌食品级分泌性表达载体pSQZ的构建及报告蛋白的表达 被引量:5
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作者 孙强正 熊衍文 +1 位作者 叶长芸 徐建国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期224-228,275,共6页
目的构建乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L lactis)食品级分泌表达载体,表达报告蛋白核酸内切酶(NucA)方法PCR扩增乳酸乳球菌未知分泌蛋白(Usp45)编码基因的启动子、核糖体结合位点、分泌信号和成熟肽前11个氨基酸编码序列,克隆到载体pS... 目的构建乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L lactis)食品级分泌表达载体,表达报告蛋白核酸内切酶(NucA)方法PCR扩增乳酸乳球菌未知分泌蛋白(Usp45)编码基因的启动子、核糖体结合位点、分泌信号和成熟肽前11个氨基酸编码序列,克隆到载体pSH91中,构建食品级分泌性表达载体pSQZ;克隆报告蛋白金黄色葡萄球菌NucA成熟肽的编码序列nucA到pSQZ中分泌信号后,转化乳酸乳球菌MBP71,构建乳酸乳球菌分泌性表达系统L lactis MBP71/pSQZ-nucA;采用TB-D法和酶谱法检测乳酸乳球菌分泌性表达的NucA活性。结果PCR扩增得到usp45基因片段,酶切、连接到载体pSH91中构建了食品级表达载体pSQZ;将扩增的nucA基因片段克隆入载体pSQZ并转化乳酸乳球菌,得到乳酸乳球菌分泌性表达系统L lactis MBP71/pSQZ-nucA。在TB-D平板上,L lactis MBP71/pSQZ-nucA克隆子周围出现橙色光晕;在酶谱检测中,L lactis MBP71/pSQZ-nucA上清和菌体在18kDa位置均有橙色条带,但上清条带亮度和宽度大于菌体。结论成功构建了乳酸乳球菌食品级分泌表达系统,实现了报告蛋白NucA在乳酸乳球菌中分泌性表达,为进一步保护性抗原的分泌性表达研究奠定了基础。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 食品级载体 分泌性表达 报告蛋白
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