响应面法优化阿里红总三萜酸提取工艺及抗氧化活性研究

以6个不同产地的阿里红为研究对象,采用单因素实验结合响应面法对超声辅助提取阿里红总三萜酸(FOATTA)工艺进行优化,通过测定其对DPPH自由基清除率及Fe^(3+)还原能力考察其抗氧化活性。确定最佳提取工艺为:料液比1∶33(g∶mL)、乙醇体积分数85%、提取时间40 min,在此条件下,FOATTA得率为14.510%;在实验浓度范围内,随着浓度的增加,不同产地FOATTA对DPPH自由基清除能力和Fe^(3+)还原能力均呈上升趋势,表明其具有一定的抗氧化能力。优化后的超声辅助提取工艺可行性强,操作简便,为进一步研究和开发阿里红资源提供了参考。

阿里红总三萜酸的制备及其抗哮喘作用研究

目的以总三萜酸和3个三萜酸单体作为指标优化阿里红总三萜酸的制备工艺,并对总三萜酸的抗哮喘作用进行研究。方法以总三萜酸含量和转移率为指标,采用Hunter和星点设计-响应面法优化阿里红总三萜酸的大孔树脂富集纯化工艺,确定关键工艺参数,并以3个三萜酸成分含量对制备工艺进行验证。最后采用氯化乙酰胆碱和磷酸组织胺致喘豚鼠的动物模型,评估阿里红总三萜酸对哮喘豚鼠引喘潜伏期和血清中血栓素B_(2)(TXB_(2))和白三烯B_(4)(LTB_(4))含量的影响。结果最优工艺为:乙醇除杂浓度30.0%(23.0%~35.7%),乙醇解析浓度83.0%(72.0%~97.2%)和乙醇解析用量7.5倍(5~10倍);3批总三萜酸中齿孔酸含量依次为7.91%、6.56%、8.91%,去氢齿孔酸含量依次为4.95%、4.56%、6.02%,去氢硫色多孔菌酸含量依次为11.2%、11.0%、12.8%;与模型组相比,阿里红总三萜酸低、中和高剂量组均能显著延长哮喘豚鼠引喘潜伏期,中和高剂量组均可显著降低哮喘豚鼠血清中TXB_(2)和LTB_(4)含量。结论所建立的HPLC分析方法可准确测定阿里红总三萜酸中3个三萜酸的含量,优化的D101型大孔树脂富集纯化阿里红总三萜酸的工艺稳定可行,所得总三萜酸具有较好的抗哮喘活性。

Box-Behnken设计—响应面法优化地参总三萜酸纯化工艺

【目的】建立响应面模型优化合适树脂下地参总三萜酸的纯化工艺,为研究地参总三萜酸活性提供技术参考。【方法】运用Box-Behnken设计方法,采用大孔树脂吸附纯化地参总三萜酸,以吸附率和解吸率为指标,测定5种大孔树脂(AB-8、D101、HPD600、DA201和S-8型)对地参总三萜酸的纯化效果。以上样浓度、上样流速、洗脱浓度和洗脱流速为自变量,回收率为因变量,运用响应面法优化地参总三萜酸纯化工艺参数。【结果】最佳显色条件:显色温度60℃,5%香草醛—冰乙酸0.2 mL,高氯酸0.4 mL,检测波长545 nm。AB-8型树脂对地参总三萜酸的吸附和解吸效果最佳,解吸率为88.61%,吸附率为70.54%。上样体积在40 mL,80%乙醇100 mL为最佳洗脱体积。建立的回归方程:Y=0.6887+0.0196A-0.0085B-0.0287C+0.0052D+0.0299AB-0.0107AC-0.0122AD+0.0128BC+0.0211BD+0.026A2-0.0765B2-0.0877C2-0.0932D2(A为上样浓度,B为上样流速,C为洗脱浓度,D为洗脱流速,Y为总三萜酸回收率)。由Box-Behnken方差分析结果可得,上样浓度和洗脱浓度2个因素,以及上样浓度与上样流速的交互作用、洗脱浓度与洗脱流速的交互作用对地参总三萜酸回收率影响极显著(P<0.01),上样流速与洗脱流速的交互作用对总三萜酸回收率影响显著(P<0.05),4个因素对地参总三萜酸回收率影响顺序为洗脱浓度>上样浓度>上样流速>洗脱流速。优化后的地参总三萜酸纯化工艺:上样浓度0.66 mg/mL、上样流速2 BV/h、洗脱浓度80%、洗脱流速2 BV/h,在此条件下,总三萜酸平均回收率为67.37%。【结论】建立的回归模型可用于地参总三萜酸纯化工艺的预测;AB-8型大孔树脂对地参总三萜酸的分离纯化效果较好,适用于总三萜酸物质的纯化。

青梅茎中总三萜酸的含量测定

目的测定青梅茎中总三萜酸的含量。方法以熊果酸为对照品，5％香草醛-冰乙酸和高氯酸为显色剂，采用紫外分光光度法在548nm波长处测定样品的吸光度。结果熊果酸对照品在20—100μg范围内呈良好线性关系。其回归方程为Y=-0．0405＋0．00829X，R^2=0．9994。青梅茎中总三萜酸的含量约为2．15％。结论紫外分光光度法适合青梅茎中总三萜酸的含量测定，方法操作简便，结果稳定，重复性好。

刺玫果提取物中总三萜酸的定性定量分析研究

建立刺玫果提取物中总三萜酸的定性定量分析方法。采用TLC法对刺玫果提取物总三萜酸中的熊果酸进行定性分析;采用UV法对刺玫果提取物中的总三萜酸进行了定量分析;采用HPLC法对刺玫果提取物总三萜酸中的齐墩果酸、熊果酸进行了定量分析。结果表明,UV法中齐墩果酸在1.75~15.75 mg/L范围内与吸光度有良好的线性关系（r=0.999 1）,平均加样回收率为101.60%（RSD1.23%）;HPLC法中齐墩果酸、熊果酸在0.1~1.1μg（r=0.999 7）、0.024~0.768μg（r=0.999 9）线性关系良好,平均加样回收率分别为100.24%（RSD 1.44%）、100.54%（RSD 0.45%）。3批刺玫果提取物中总三萜酸平均为8.62%,齐墩果酸平均为0.273%,熊果酸平均为0.534%。结果表明,所建立的刺玫果提取物中总三萜酸的定性分析和定量分析方法可用于该提取物的质量控制。

分光光度法测定山茱萸制剂中总三萜酸的含量

目的 运用分光光度法测定山茱萸制剂中有效成分总三萜酸的含量 ,从而控制制剂的生产工艺及质量。方法 以制剂中有效成分熊果酸为考察指标 ,用香草醛 -冰乙酸及高氯酸显色。结果 该法测得总三萜酸的含量约为 70 %。结论 与HPLC法相比 ,分光光度法可宏观有效控制山茱萸制剂中总三萜酸的含量 ,方法操作简便 ,可作为山茱萸制剂质量的有效监控手段。

大孔吸附树脂分离纯化连钱草总三萜酸

目的研究大孔吸附树脂分离纯化连钱草总三萜酸的最佳工艺条件及参数。方法以各种浓度梯度的乙醇洗脱后,以紫外分光光度法测定连钱草总三萜酸收率和纯度。结果采用AB-8型大孔树脂进行吸附,在pH=6的条件下用70%乙醇80 mL洗脱,对连钱草总三萜酸进行纯化效果最佳。结论该方法可为工业纯化连钱草总三萜酸提供理论依据。

不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定

建立不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定方法.灵芝样品用乙醇提取,依次经氯仿、5%碳酸氢钠萃取,酸化后再用氯仿萃取、浓缩至干,称重,即得灵芝总三萜酸量.结果:灵芝子实体总三萜酸为(8.58±0.25)mg/g,孢子粉为(3.48±0.03)mg/g,菌丝体仅为(1.75±0.09)mg/g;菌盖总三萜酸含量为(12.62±0.22)mg/g,菌柄为(7.66±0.08)mg/g.10批次灵芝子实体的总三萜酸含量范围为4.3416.39 mg/g.灵芝子实体提取物中的总三萜酸含量以醇-水提取物的最高为(208.70±5.54)mg/g;碱水提取物的最低,仅为(123.07±4.99)mg/g.HPLC初步分析子实体和孢子及子实体提取物间三萜酸成分大部分相同.本法适用于灵芝子实体及其提取物、灵芝孢子和菌丝体总三萜酸的含量测定,结果可靠,可为灵芝产品质量指标提供依据.

山楂中总三萜酸提取工艺的优选

目的:优选山楂总三萜酸的最佳提取工艺。方法:以熊果酸含量和干浸膏得率为考察指标,应用正交实验设计筛选山楂总三萜酸的最佳提取工艺条件。结果:药材以8倍80%的乙醇加热回流提取1.5h。结论:优选的最佳提取工艺稳定可行。

枇杷叶总三萜酸的微波辅助超声提取工艺

以枇杷叶为研究对象,采用微波辅助超声提取其中的三萜酸,并采用香草醛-高氯酸比色法进行分析,建立标准曲线。考察提取方式、浸泡时间、乙醇浓度、提取时间、液固比和超声功率等因素,得到微波辅助超声提取的优化工艺条件:提取方式为先微波后超声,无浸泡,乙醇体积分数为75%,超声功率为144 W,液固比为25 m L/g,微波时间为180 s,超声时间为75 min,由此得到的枇杷叶总三萜酸得率为9.994%,显著优于传统的中药提取方法。

基于星点设计法的阿里红总三萜酸提取研究

目的优化提取阿里红总三萜酸工艺参数。方法以提取时间、溶剂用量、溶剂体积分数为自变量,以阿里红总三萜酸得率为评价指标,对自变量各水平进行多元线性回归及二项式拟合,采用SAS Deployment Manager 9.3数据处理系统对工艺参数进行预测分析和优化。结果最优提取工艺确定为:提取2次,加13倍量91%乙醇,每次提取145 min。结论星点设计法优化阿里红总三萜酸的提取工艺,方法简便,精密度高,可预测性较优。

积雪草总三萜酸及其主要成分的抗抑郁活性研究

目的:探讨积雪草总三萜酸和其主要成分积雪草酸、羟基积雪草酸的抗抑郁作用。方法:采用小鼠强迫游泳实验、小鼠悬尾实验、开野实验和拮抗利血平所致的小鼠眼睑下垂实验,分别以小鼠不动时间、自主活动数和拮抗率作为评价指标。结果:在强迫游泳实验中积雪草总三萜酸、积雪草酸、羟基积雪草酸60 mg/kg、120 mg/kg剂量均能显著缩短小鼠不动时间,在悬尾实验中30 mg/kg、60 mg/kg、120 mg/kg剂量均能显著缩短小鼠不动时间,开野实验结果表明给药后小鼠的自主活动无明显变化,在利血平拮抗实验中积雪草总三萜酸、积雪草酸、羟基积雪草酸均可减少小鼠眼睑下垂。结论:积雪草总三萜酸、积雪草酸、羟基积雪草酸有抗抑郁作用。

枇杷叶总三萜酸提取分离工艺研究

目的优选提取和分离枇杷叶中总三萜酸的工艺。方法以枇杷叶总三萜酸含量为控制指标,采用单因素法对提取时间、提取温度、提取次数、溶剂用量、洗脱剂组成等主要因素进行考察。结果优选的最佳提取分离工艺为:提取时间2 h,提取温度75℃,提取次数2次,溶剂(80%乙醇)用量4倍,洗脱剂选择60%乙醇及90%乙醇。结论该工艺提取分离效率高、推广性强,适用于枇杷叶中总三萜酸的提取分离过程。

比色法测定山楂总三萜酸的含量

运用香草醛—冰醋酸、高氯酸显色的比色方法 ,以熊果酸为对照品对山楂总三萜酸进行测定 ,实验结果表明 :其回收率为 97 6 9%,且在一小时内稳定 ,该方法操作方便 ,重现性好 ,可用于质量控制。

射干药材中总三萜酸含量测定及不确定度研究

目的建立射干药材中总三萜酸含量测定方法,并对测定结果进行不确定度分析。方法以熊果酸为对照品,采用香草醛高氯酸系统测定总三萜酸含量;根据测定方法的数学模型,对测定过程中引入的不确定度进行分析评估,并用扩展不确定度表示不同产地射干总三萜酸含量测定结果。结果射干总三萜酸含量在18.42~92.08μg范围内线性关系良好(r=0.9992),平均加样回收率为98.44%;测定方法的不确定度主要来源于标准曲线拟合。25批射干药材中总三萜酸含量为32.83~66.65 mg/g,相应扩展不确定度为2.18~4.30 mg/g。结论本研究建立的射干药材中总三萜酸含量测定方法重复性、准确度良好,用扩展不确定度表达射干中总三萜酸含量更为合理,可用于射干药材质量控制。

女贞子总三萜酸的体外抗氧化活性研究

目的对女贞子总三萜酸的体外抗氧化活性进行研究。方法以清除DPPH自由基、清除ABTS自由基、清除超氧阴离子自由基、Fe^3+还原力、金属离子螯合能力为评价指标研究女贞子总三萜酸体外抗氧化活性。结果女贞子总三萜酸在不同的抗氧化模型中均有较强的抗氧化活性,且呈显著剂量效应关系。结论女贞子总三萜酸具有较好的抗氧化活性,可以做为一种天然抗氧化剂的良好来源。

大孔树脂富集纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸工艺研究

目的:研究AB-8型大孔树脂富集、纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸的工艺条件及参数。方法:以狭基线纹香茶菜总三萜酸的洗脱率和精制度为指标,考察大孔树脂富集、纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸的吸附性能和洗脱参数。结果:狭基线纹香茶菜样品液20 mL(0.5 g/mL)上大孔树脂柱(D15 mm×H120 mm,干重10 g),用蒸馏水200 mL、60%乙醇80mL、90%乙醇160 mL依次洗脱,狭基线纹香茶菜总三萜酸富集于90%乙醇洗脱液部分,且除杂质能力强。通过大孔树脂富集与纯化后的狭基线纹香茶菜总三萜酸洗脱率达93.2%,90%乙醇洗脱液干燥后总固物中狭基线纹香茶菜总三萜酸纯度可达21.0%。结论:采用此法可较好地纯化狭基线纹香茶菜总三萜酸。

瑶药毛萼清风藤中总三萜酸的提取工艺优化及含量测定

【目的】优化瑶药毛萼清风藤(Sabia limoniacea wall.)中总三萜酸的提取工艺,并建立其含量测定方法。【方法】以齐墩果酸为对照品,采用紫外分光光度法测定瑶药毛萼清风藤中总三萜酸的含量。通过单因素试验和正交试验相结合的方法考察提取方法、提取溶剂、乙醇浓度、料液比、提取时间对毛萼清风藤中总三萜酸提取的影响。【结果】试验所用比色条件为5%香草醛溶液0.2mL,高氯酸0.6mL,水浴温度70℃,水浴时间15min,检测波长545nm;最佳提取工艺为50倍量70%乙醇,于常温下超声提取40min;在此条件下所提取得到的平均总三萜酸含量为13.76mg/g。【结论】瑶药毛萼清风中总三萜酸含量相对较高,所得的优选工艺稳定可行。