山竹果皮中总氧杂蒽酮对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制。方法将人鼻咽癌CNE2细胞随机分成阴性对照组和不同浓度山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物组。阴性对照组不加药物,正常培养;总氧杂蒽酮提取纯化物组分别以200,400,600,800μmol·L-1总氧杂蒽酮作用24,48,72 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞增殖的影响,Annexin-V/PI双重染色、碘化丙啶单染进行流式细胞术检测总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞周期和凋亡的影响。Caspase-3试剂盒检测总氧杂蒽酮提取纯化物对CNE2细胞Caspase-3酶活化的影响。结果总氧杂蒽酮提取纯化物随着浓度增加,可显著抑制人鼻咽癌CNE2细胞的增殖活性,浓度为371.536 7μmol·L-1时可诱导人鼻咽癌CNE2细胞出现明显早期凋亡,并且随着药物作用时间的增加(24,48,72 h),凋亡早期癌细胞的比例显著上升(分别为0.03%,10.54%,26.47%)(P<0.05);总氧杂蒽酮提取纯化物使CNE2细胞G1期细胞比例大幅升高,同时S期细胞比例明显下降;对Caspase-3具有激活作用,Caspase-3酶的活性与药物浓度成正比。结论山竹果皮中总氧杂蒽酮提取纯化物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖有显著抑制作用和促凋亡作用,其作用机制可能与抑制鼻咽癌细胞增殖活性、抑制细胞进入S期和激活Caspase-3有关。

复合酶法提取山竹中总氧杂蒽酮工艺

目的以山竹为原料,采用复合酶法提取山竹中总氧杂蒽酮。方法先以单因素试验明确酶解适宜pH、时间、温度及酶用量,进而采用正交设计及方差分析确定了复合酶法提取山竹总氧杂蒽酮的最佳条件。结果最佳条件为:纤维素酶0.5%、蛋白酶0.5%、果胶酶0.5%、漆酶0.5%、温度20℃、时间2 h、pH 5.0。结论在此条件下,山竹中总氧杂蒽酮的提取率为10.55%。

山竹果皮中总氧杂蒽酮通过调控miR-338-3p抑制胃癌细胞AGS增殖、迁移侵袭及炎症反应的实验研究

背景山竹果皮中总氧杂蒽酮具有抗肿瘤作用,但其对胃癌细胞生物学行为的影响尚未可知,miRNA在胃癌发生发展过程中可发挥重要调控作用,并可能作为胃癌治疗的潜在靶点,但其是否可作为山竹果皮中总氧杂蒽酮治疗胃癌的潜在靶点尚未可知.目的探讨山竹果皮中总氧杂蒽酮对胃癌细胞AGS生物学行为的影响及其可能作用机制.方法以人胃癌细胞AGS为研究对象,随机分组:NC组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、miR-NC组、miR-338-3p组、高剂量组+anti-miR-NC组、高剂量组+anti-miR-338-3p组;MTT法、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移及侵袭;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平;qRT-PCR法检测miR-338-3p的表达量.结果山竹果皮中总氧杂蒽酮处理后细胞活力、TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),miR-338-3p的表达量升高(P<0.05);转染miR-338-3p mimics后细胞活力、TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05);转染anti-miR-338-3p可逆转山竹果皮中总氧杂蒽酮对AGS细胞生物学行为的作用.结论山竹果皮中总氧杂蒽酮可通过促进miR-338-3p表达而抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及炎症反应.