延龄草总皂苷的黑曲霉发酵工艺及提取条件研究

该文对延龄草总皂苷的最佳提取方法进行筛选,并通过紫外分光光度法与高效液相色谱法对发酵前后药液进行对比分析,在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken响应面实验研究了黑曲霉接种量、发酵时间和发酵温度对延龄草中总皂苷提取率的影响。结果表明:延龄草总皂苷最佳提取方法为75%乙醇回流法,其最佳发酵条件为黑曲霉接种量2.25%,发酵时间6d,发酵温度27℃,在此条件下总皂苷提取率为8.620%,与预测结果基本一致。

三七总皂苷通过激活PPARα/Nrf2减轻内皮细胞屏障和功能损伤

目的研究三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的内皮细胞屏障和功能损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法使用OGD/R诱导bEnd.3细胞以建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组(Control)、模型组(OGD/R)、PNS高剂量组(OGD/R+PNS 400μg/mL)、PPARα抑制剂组(OGD/R+PNS 400μg/mL+PPARαinhibitor)和Nrf2抑制剂组(OGD/R+PNS 400μg/mL+Nrf2 inhibitor)。采用CCK-8检测bEnd.3细胞活性损伤,LDH试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)表达,蛋白印迹法检测ZO-1、claudin-5、occludin表达;采用细胞划痕和细胞侵袭实验检测bEnd.3细胞侵袭和迁移的水平;借助小管形成实验检测bEnd.3细胞小管形成能力。结果PNS通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体α/核因子E2相关因子2(PPARα/Nrf2)信号减轻OGD/R诱导的bEnd.3细胞活性损伤和内皮屏障损伤,抑制细胞迁移和侵袭能力,改善血管生成损伤。结论PNS通过激活PPARα/Nrf2信号减轻OGD/R诱导的内皮细胞屏障和功能损伤。

林分类型对林下参产量及人参总皂苷含量的影响

以吉林省白山市抚松县露水河镇人参基地内3种林型及塑料棚共7个类型的人参(长白落叶松林10年生人参、长白落叶松林18年生人参、樟子松林10年生人参、樟子松林18年生人参、杂木林10年生人参、杂木林18年生人参和30年生园参)为材料,测定各类人参的保存数量、产量及人参总皂苷含量,探究林型、参龄对人参产量和质量的影响。方差分析结果显示,不同林型的人参保存数量、产量和总皂苷含量均呈极显著差异水平(P<0.01)。樟子松林10年生人参保存数量(211根)最多,其次是长白落叶松林10年生人参(97根),杂木林人参保存数量最少,10年生和18年生人参的保存数量分别为21个和14个;园参产量(4.25 kg)最高,其次为樟子松林10年生人参(2.94 kg),杂木林人参产量最低,10年生与18年生人参产量分别为0.36 kg和0.15 kg;杂木林人参总皂苷含量最高,18年生和10年生人参总皂苷含量分别为5.06%和4.73%,长白落叶松林10年生人参总皂苷含量最低(3.71%)。

不同覆盖栽培方式对金铁锁生长习性及总皂苷含量的影响

本研究设置绿色无纺布覆盖(处理1)、白色农膜覆盖(处理2)、银黑双色农膜覆盖(处理3)和不覆盖任何农膜对照(CK)4种栽培方式,探明金铁锁覆盖栽培的效果。结果表明:采用不同栽培方式,金铁锁生长情况及总皂苷含量存在较大差异,以处理3表现最好,杂草和病虫害发生较轻,长势较好,总皂苷含量最高。

三七总皂苷对急性髓系白血病细胞增殖、凋亡的影响

目的观察三七总皂苷对急性髓系白血病细胞株KGIa增殖、凋亡的影响。方法采用CCK-8实验检测不同浓度的三七总皂苷处理24、48、72 h后对KGIa细胞存活率的影响,倒置显微镜及荧光显微镜下观察KGIa细胞经三七总皂苷作用72 h后细胞形态及凋亡情况的影响,流式细胞术检测KGIa细胞凋亡和细胞周期的变化。结果三七总皂苷明显抑制KGIa细胞的增殖,呈浓度依赖性。三七总皂苷实验组的KGIa细胞凋亡明显增加,且三七总皂苷使细胞周期阻滞在G 0-G 1期。结论三七总皂苷可抑制急性髓系白血病细胞的增殖,可能与阻滞细胞周期和诱导调亡有关。

辽东楤木总皂苷联合酵母硒对C57小鼠的降血糖作用

[目的]探究辽东楤木总皂苷联合酵母硒对2型糖尿病小鼠血糖的影响,为研制治疗糖尿病的新药物提供参考。[方法]选用60只C57小鼠,10只为对照组(A组),其余采用30 mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病模型作为试验组。建模成功后随机分成B、C、D、E、F组,即模型组、二甲双胍组、辽东楤木总皂苷+酵母硒(120 mg/kg+1.5 mg/kg)组、辽东楤木总皂苷+酵母硒(120 mg/kg+1.0 mg/kg)组、辽东楤木总皂苷+酵母硒(120 mg/kg+0.5 mg/kg)组,每组各10只,连续治疗4周,采用血糖仪、全自动糖化血红蛋白分析仪、全自动生化分析仪对C57小鼠尾静脉血液中空腹血糖、糖化血红蛋白、血脂、口服葡萄糖耐量进行检测。[结果]与B组相比,各试验组均有不同程度的变化,C组、D组优于其他各组,且二组之间差异不显著。D组FBG降低了4.86 mmol/L,HbA1c水平下降了3.87%,TC、TG和LDL水平分别下降了1.18、0.02、1.72 mmol/L,而HDL显著升高0.42 mmol/L。口服糖耐量检测2 h恢复至餐前水平。[结论]120 mg/kg辽东楤木总皂苷联合1.5 mg/kg酵母硒降血糖效果最佳。

人参不定根总皂苷的提取工艺优化及其抗氧化与抗疲劳作用

目的:探究人参不定根总皂苷(ginseng adventitious roots total saponins,GARS)的最佳提取工艺及抗氧化和抗疲劳作用。方法:利用乙醇回流法提取GARS,通过正交试验考察乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间对GARS含量的影响;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)、3-氧代-2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1-氧(PTIO)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_(2)^(-)·)清除能力及还原力作为测定抗氧化活性指标;通过测定小鼠力竭游泳和爬杆时间,测定肌/肝糖原、乳酸(LD)、尿素氮(BUN)含量及乳酸脱氢酶(LDH)活性来判定GARS抗疲劳能力。结果:通过正交试验得到最佳提取工艺条件为乙醇浓度70%、料液比1:30 g/mL、提取温度70℃、提取时间40 min,得到GARS含量为107.85 mg/g;GARS对DPPH、ABTS^(+)、PTIO、OH、O_(2)^(-)自由基都有一定程度清除作用,且具有还原性,其清除能力和还原性与浓度呈正比;GARS能够显著延长小鼠力竭游泳和爬杆时间(P<0.05),显著增加肌/肝糖原含量(P<0.05),降低LD、BUN含量,提高LDH活性,并与其浓度呈正比。结论:GARS提取的最优条件为乙醇浓度70%、料液比1:30 g/mL、提取温度70℃、提取时间40 min,可为GARS产业化生产提供依据,且GARS具有一定的抗氧化和抗疲劳作用,可为明确人参不定根营养成分和活性物质提供理论支持,为开发人参不定根药食同源的相关产品提供技术参考。

三七总皂苷合黄芪总皂苷对实验性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

通过观察黄芪总皂苷合三七总皂苷(TSA+P NS) 对脑缺血再灌注致脂质过氧化反应的影响,初步探讨七总皂苷合黄芪总皂苷对实验性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制,旨在为相关研究提供指导。方法 通过结扎大鼠颈总动脉以构建脑缺血一再灌注损伤模型,随后通过静脉给药的方式,观察药物对大鼠脑组织乳酸脱氢酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量的影响。利用Fe2+-H2O系统生成羟自由基,以及黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统生成超氧阴离子,通过Fe2+-H2O引发大鼠脑内脂质过氧化反应,深入探究TSA+PNS对该过程的调控机制。结果 经过对比分析,我们发现模型组相较于假手术组,其MDA含量呈现出明显增长趋势(P<0.01),而与此同时,LDH活性和SOD活性则表现出显著下降趋势(P<0.01)。然而,当TSA与PNS联合应用时,观察到SOD和LDH活性均有所回升,MDA含量则呈现下降趋势。此外,在体外实验条件下,TSA+PNS的组合能够有效抑制脂质过氧化作用,这种抑制效果在统计学上具有显著意义(P<0.05~0.01)。结论 TSA与PNS的联合应用对于调节相关酶活性及抑制脂质过氧化具有积极作用。

三七总皂苷上调浓缩生长因子释放促进大鼠骨折愈合

背景:研究表明,三七总皂苷和浓缩生长因子均能促进骨折愈合,但是目前关于两者共同干预骨折愈合的研究较少,三七总皂苷可能通过在某段时间内促进浓缩生长因子相关因子的释放来达到加快骨折愈合的目的。目的:观察三七总皂苷对浓缩生长因子释放,以及对大鼠骨折愈合的影响。方法:8周龄SD大鼠18只,编号后随机分为三七总皂苷组、模型对照组以及空白组。三七总皂苷组给予三七总皂苷灌胃2周,模型对照组给予生理盐水2 mL灌胃2周,空白组正常饲喂。2周后三七总皂苷组与模型对照组同时采血离心获取浓缩生长因子备用,继续正常饲喂1周,然后对所有大鼠进行股骨骨折造模处理,三七总皂苷组与模型对照组植入自体浓缩生长因子,并用ELISA法检测1 h及1,3,5,7,9,11 d生长因子释放量;通过观察术后2个月X射线片及骨组织苏木精-伊红染色结果,评估骨折愈合情况。结果与结论:①生长因子释放情况:三七总皂苷组的血管内皮生长因子A和转化生长因子β在第7,9,11天的释放浓度高于模型对照组(P<0.05),血小板衍生生长因子BB在第5,9,11天的释放浓度高于模型对照组(P<0.05),碱性成纤维细胞生长因子在1-11天的释放浓度均高于模型对照组(P<0.05);②骨折愈合情况:术后2个月行X射线片检查,三七总皂苷组的骨折愈合情况优于模型对照组,两组均优于空白组;取材苏木精-伊红染色发现,三七总皂苷组成骨细胞生成量大于模型对照组,两组均大于空白组;③提示三七总皂苷可以上调浓缩生长因子相关因子的释放浓度,三七总皂苷干预后的浓缩生长因子对促进大鼠骨折愈合更有优势。

三七总皂苷对脑缺血再灌注后神经功能恢复的影响

目的探究三七总皂苷对脑缺血再灌注后神经功能恢复的影响。方法培养30只SPF级雄性SD大鼠,构建脑缺血再灌注模型。将大鼠分为假手术组、模型组和三七总皂苷组,每组10只大鼠。检测各组大鼠脑梗面积、脑含水量。Longa评分评价大鼠神经功能缺损情况。水迷宫实验检测大鼠神经功能。检测各组大鼠血清中氧化应激指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷光甘肽(glutathione,GSH)含量和炎症因子指标肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)含量。Tunel染色检测各组大鼠海马神经元细胞凋亡情况。结果和假手术组大鼠相比,模型组大鼠脑梗面积、脑含水量、神经功能缺损评分、学习潜伏期和记忆潜伏期显著升高,SOD、GSH、IL-10含量显著降低,MDA、TNF-α、IL-1β含量显著升高,海马神经元凋亡比例显著升高(P<0.05)。和模型组大鼠相比,三七总皂苷组大鼠脑梗面积、脑含水量、神经功能缺损评分、学习潜伏期和记忆潜伏期显著降低,SOD、GSH、IL-10含量显著升高,MDA、TNF-α、IL-1β含量显著降低,海马神经元凋亡比例显著降低(P<0.05)。结论三七总皂苷可能通过抑制大鼠炎症反应和氧化应激,减少海马神经元凋亡,促进脑缺血再灌注后神经功能恢复。

三七总皂苷抑制动脉粥样硬化与改善肠道屏障完整性的作用研究

目的探讨三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)抑制动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)和改善肠道屏障的效应。方法以高脂饮食喂养的载脂蛋白基因E敲除(ApoE-/-)小鼠作为AS模型,C57BL/6J小鼠给与普通饮食作为正常组,24只ApoE-/-小鼠给与高脂饮食并按随机数字分为模型组,PNS低剂量给药组和PNS高剂量给药组。PNS低剂量和高剂量组小鼠分别给予50 mg·kg^(-1)·d^(-1)和250 mg·kg^(-1)·d^(-1)PNS灌胃,模型组和正常组小鼠给予同等体积生理盐水。8周后通过HE染色和油红O染色观察小鼠主动脉根部斑块病理改变和脂质沉积情况;通过MCP-1和CD68免疫组化染色观察小鼠主动脉根部巨噬细胞的浸润情况;通过HE染色和阿利新蓝染色观察小鼠回肠病理损伤情况;通过Cingulin免疫荧光染色观察小鼠回肠紧密连接完整性;采用Real-time qPCR法分析小鼠回肠紧密连接蛋白ZO(Zonula Occludens,ZO)-1、Claudin-1 mRNA表达水平;通过ELISA法检测小鼠血清炎症因子TNF-α和IL-1β含量。结果相较于正常组小鼠,模型组小鼠主动脉根部可见明显的AS斑块和脂质沉积,回肠病理损伤明显,回肠绒毛长度变短,杯状细胞数量减少,回肠紧密连接蛋白表达显著下调,肠道屏障受损,血清炎症因子显著升高,主动脉根部巨噬细胞浸润明显。与模型组相比,PNS给药组小鼠主动脉根部斑块的大小及斑块内坏死核心的面积显著减小(P<0.05),主动脉根部脂质沉积显著减少(P<0.01)。回肠损伤显著减轻,回肠绒毛显著增长(P<0.05),杯状细胞数量显著增多(P<0.05),回肠紧密连接蛋白Cingulin及Claudin-1显著增加(P<0.05),显著减轻肠道屏障损伤,血清炎症因子TNF-α和IL-1β显著降低(P<0.05),主动脉根部巨噬细胞浸润显著减少(P<0.05)。结论PNS具有改善肠道屏障,减少炎症反应,抑制AS进展的作用。

黄芪甲苷与三七总皂苷配伍冰片改善大鼠脑缺血再灌注后肾脏损伤的研究

目的观察黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)与三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)配伍冰片改善大鼠脑缺血再灌注后肾脏损伤的作用。方法采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,实验随机分为假手术组、模型组、单用冰片组、ASTⅣ配伍PNS(AP)组、ASTⅣ与PNS配伍冰片(APB)组,缺血2 h后再灌注48 h,神经功能评分、HE染色和尼氏染色检测脑组织功能和神经细胞损伤,HE染色检测肾脏损伤,通过肾脏质量指数和血肌酐以及血清中尿素氮含量评价肾脏功能,ELISA法检测血清IL-1β和IL-10含量,免疫组织化学检测肾组织NF-κB蛋白的表达,Western blot检测肾组织TLR4和MyD88蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能评分和神经细胞损伤率显著升高(P<0.01),尼氏体数量显著减少(P<0.01),同时肾小管水肿、核固缩,肾脏质量指数降低(P<0.01),血清肌酐和尿素氮含量升高(P<0.01),提示脑缺血再灌注可诱发肾脏继发性损伤。与模型组比较,各药物组均能不同程度地降低神经功能评分(P<0.01),减少神经细胞损伤率(P<0.01或P<0.05),增加尼氏体数量(P<0.01),改善肾脏结构损伤,增加肾脏质量指数(P<0.01或P<0.05),降低血清肌酐和尿素氮含量(P<0.01或P<0.05),以ASTⅣ与PNS配伍冰片效果最佳。与假手术组比较,模型组血清IL-1β含量升高(P<0.01),肾组织NF-κB、TLR4和MyD88蛋白表达增高(P<0.01)。与模型组比较,各药物组血清IL-1β含量降低(P<0.01或P<0.05),血清IL-10含量升高(P<0.01或P<0.05),肾脏组织中NF-κB、TLR4和My D88的蛋白表达降低(P<0.01或P<0.05)。结论脑缺血后可诱发肾脏继发性损伤,ASTⅣ和PNS配伍冰片除可减轻脑缺血再灌注后脑组织损伤外,还可减轻脑缺血后继发性肾脏损伤,其作用与调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路、抑制肾脏炎症有关。

石刁柏真伪的红外快速鉴别与总皂苷、总酚酸含量测定及抗氧化活性分析

使用傅里叶红外光谱法对石刁柏样品进行定性研究,并对石刁柏进行总皂苷、总酚酸、DPPH+清除率及抗氧化活性测定。结果显示14批石刁柏样品的红外图谱峰型一致,相似度系数均在98.7%以上,可断定均为正品石刁柏;证明红外光谱技术可快速鉴别石刁柏的真伪。14批石刁柏样品的总皂苷、总多酚含量稳定,最高分别为6.340 mg·g^(-1)、2.0450 mg·g^(-1);各批次石刁柏对DPPH+均有清除作用,最佳IC50为4.57mg·mL^(-1),代表石刁柏总抗氧化能力的Vc浓度最大为2.4110 mg·mL^(-1);对测定结果进行pearson相关性分析和聚类分析,可将14批石刁柏分为5类;总皂苷、总酚酸与石刁柏的总抗氧化能力密切相关,相关系数值具有非常显著的正相关性,石刁柏具有较好的抗氧化能力。本研究为控制石刁柏药材质量、保证其安全使用和后期开发利用提供理论支持。

穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型PLA2R和IgG4表达的影响及其机制

目的 分析穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型磷脂酶A2受体(Phospholipase A2 receptor, PLA2R)和免疫球蛋白G亚型4(Immunoglobulin G4,IgG4)表达影响及可能机制。方法 将40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、贝那普利组(10 mg/kg)、低和高剂量穿山龙总皂苷组(80 mg/kg、160 mg/kg),每组各8只。除对照组,其余4组采用Border法制备膜性肾病模型,造模成功后,贝那普利组灌胃给予贝那普利10 mg/(kg·d),低和高剂量穿山龙总皂苷组分别灌胃给予穿山龙总皂苷80 mg/(kg·d)、160 mg/(kg·d),对照组、模型组灌胃给予10 ml/(kg·d)生理盐水。连续给药4周后,检测24 h尿蛋白、白蛋白、血肌酐、血尿素氮、尿酸水平,HE染色观察肾脏病理改变,蛋白免疫印迹法检测肾脏中M型PLA2R、IgG4、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphorylated phosphoinositide 3-kinase, p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶(Heme oxygenase-1,HO-1)表达水平。结果 与模型组比较,贝那普利组、高剂量穿山龙总皂苷组白蛋白水平明显升高,血肌酐、血尿素氮、尿酸水平明显降低,差异均有统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,贝那普利组、低剂量和高剂量穿山龙总皂苷组肾脏病理改变明显改善,24 h尿蛋白水平及肾脏中M型PLA2R、IgG4、p-PI3K、p-AKT表达水平明显降低,肾脏中Nrf2、HO-1表达水平明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与降低PLA2R、IgG4表达,抑制PI3K/AKT通路,激活Nrf2/HO-1通路相关。

参玫五味粉中总皂苷与多糖的提取及其体外活性研究

试验旨在探究参玫五味粉中总皂苷与多糖联合提取的最佳工艺条件及其体外活性。试验以参玫五味粉总皂苷与多糖的提取质量分数为考察指标,通过对提取溶剂浓度和浸泡时间的优化确定最佳提取工艺,测定参玫五味粉总皂苷提取物与多糖提取物对羟基自由基的清除率及对亚硝酸盐的抑制率,探索其体外抗氧化和抗肿瘤活性。结果显示:在最佳提取工艺条件下,联合提取4根层析柱中总皂苷的提取率依次为92.65%、98.99%、102.68%、104.31%,出膏率为10.00%,干浸膏中总皂苷含量为34.99 mg/g;多糖的提取率依次为93.57%、98.20%、100.77%、101.27%,出膏率为12.55%,干浸膏中多糖含量为19.20 mg/g。参玫五味粉总皂苷与多糖提取物清除羟基自由基的IC_(50) 值均大于对照VC,表明两者具有体外抗氧化活性,且具有一定的亚硝酸盐抑制作用。研究表明,柱层析联合提取法同时提取参玫五味粉总皂苷与多糖,提取率高且操作简便易行,可为畜牧业饲料添加剂的发展提供参考价值。

三七总皂苷预防血栓的机制

三七总皂苷(PNSs)作为三七的有效提取成分,用于预防血栓历史悠久。PNSs下调炎性因子表达,促进血管内皮细胞生长,上调抗凝物质和舒张血管分子表达,调节内皮细胞功能;PNSs多靶点抑制血小板黏附、释放和聚集;PNSs通过调节组织型纤溶酶原激活物和抑制物动态平衡,维持纤维蛋白溶解系统活性;PNSs降低血液黏度,改善红细胞指标,多途径抑制血栓形成。

通关藤总皂苷对LPS诱导的HepG2细胞炎症改善作用研究

目的探讨通关藤总皂苷(MaT)对脂多糖(LPS)诱导的HepG2细胞炎症模型的抑制作用。方法采用四氮唑盐(MTT)法、酶联免疫吸附法(ELISA)筛选出最适LPS造模浓度和诱导时间,建立LPS诱导的HepG2细胞炎症模型;MTT法、ELISA法筛选出MaT干预炎症HepG2细胞浓度范围。采用反转录实时定量聚合酶链式反应RT-PCR技术,检测不同浓度MaT干预后炎症信号通路STAT3和NF-κB通路相关基因的表达。结果以2μg/mL LPS与HepG2细胞在37℃,5%CO_(2)的条件下共培养24 h,建立LPS诱导的HepG2细胞炎症模型。相较于正常组,模型组白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平显著提高(P<0.01);MaT干预后,IL-6、IL-8、TNF-α浓度呈剂量依赖性下降,并且下调了炎症信号通路中STAT3、MCL-1、XIAP、BCL-2、NF-κB mRNA的表达。结论通关藤总皂苷对LPS诱导的HepG2细胞炎症模型具有抑制作用,其机制可能为通关藤总皂苷通过抑制STAT3/NF-κB信号通路相关基因表达,减少炎症因子的释放有关。

三七总皂苷复合纳米囊泡对糖尿病足溃疡大鼠皮肤创面愈合及血管生成的影响

目的:探究三七总皂苷(PNS)复合纳米囊泡对糖尿病足溃疡(DFU)大鼠皮肤创面愈合及血管生成的影响。方法:取雄性SD大鼠构建DFU模型,将造模成功的27只大鼠随机分为DFU组、PNS组和PNS复合纳米囊泡(PNS-CNV)组,每组9只。另取12只血糖正常的皮肤创面大鼠作为对照组(Control组)。比较各组创面愈合率。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清中炎症因子白介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,苏木精—伊红(HE)染色法检测创面组织病理学变化,免疫组化染色检测创面组织微血管密度(MVD),western blotting法检测创面组织中血管生成因子(VEGF)、神经源性基因同源蛋白(Notch1)蛋白表达。结果:造模后DFU组、PNS和PNS-CNV组大鼠空腹血糖(FBG)均高于Control组(P<0.05);药物干预7 d、14 d时,与DFU组相比,PNS组和PNS-CNV组大鼠FBG明显降低,且PNS-CNV组低于PNS组(均P<0.05)。与Control组相比,DFU组大鼠创面愈合率、创面组织CD34阳性表达、MVD及VEGF蛋白表达量均明显降低,血清IL-6、IL-8、TNF-α含量及创面组织Notch1蛋白表达量升高(均P<0.05);与DFU组相比,PNS和PNS-CNV组大鼠创面愈合率、创面组织CD34阳性表达、MVD及VEGF蛋白表达量升高,血清IL-6、IL-8、TNF-α含量及创面组织中Notch1蛋白表达量降低(均P<0.05);与PNS组相比,PNS-CNV组大鼠创面愈合率、创面组织CD34阳性表达、MVD及VEGF蛋白表达量升高,血清IL-6、IL-8、TNF-α含量及创面组织Notch1蛋白表达量降低(均P<0.05)。结论:PNS-CNV可上调DFU大鼠创面组织中VEGF表达,抑制炎症反应,促进新生血管生成,从而加速创面的愈合,且该作用优于PNS。

响应面法优化桔梗总皂苷微波提取工艺及其抗炎活性分析

采用微波辅助提取桔梗总皂苷。以总皂苷得率为指标,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化提取工艺,并研究桔梗总皂苷的抗炎活性。结果显示:最佳提取条件为微波功率210 W、微波时间3.5 min、固液比1∶17.5(g/mL)、乙醇体积分数80%,在此条件下桔梗总皂苷得率为5.5%。抗炎活性试验结果表明,桔梗总皂苷含有抑制炎症因子,具有较好的抗炎活性。

三七总皂苷和马齿苋多糖合用的抗炎功效评价

为了探讨不同质量浓度下三七总皂苷和马齿苋多糖的协同抗炎组方,将不同质量浓度的三七总皂苷(1、5、25、125μg/mL)和马齿苋多糖(2、10、50、250μg/mL)两两复配,以100μg/mL地塞米松为阳性对照,通过测定炎症因子TNF-α的抑制率评估16种复配组合物的抗炎功效,并采用协同分数(synergy score值)系统定量评价复配组合物中2种成分的相互作用。结果显示,当质量浓度为125μg/mL的三七总皂苷与50μg/mL或250μg/mL的马齿苋多糖复配时,均对TNF-α具有显著的抑制效应,抑制率分别为45.18%和61.42%,其抑制作用与100μg/mL的地塞米松(抑制率为53.17%)无显著性差异(P>0.05),synergy score值分别为15.58和26.44。综上,125μg/mL的三七总皂苷与50μg/mL或250μg/mL的马齿苋多糖合用时协同抑制TNF-α的产生,但其余14种更低剂量的复配组合仅表现为相加作用。