天冬总皂苷提取物的化学成分鉴定及指纹图谱分析

目的:鉴定天冬总皂苷提取物的主要化学成分,建立其HPLC指纹图谱,对天冬药材进行评价分类。方法:利用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术对天冬总皂苷提取物的成分进行鉴定。采用HPLC-ELSD法建立10批广西产地天冬指纹图谱,并进行相似度评价。通过聚类分析对多产地天冬进行差异分析。结果:天冬总皂苷提取物中共鉴定出5个甾体皂苷类成分及3个环肽类成分。指纹图谱标定了16个共有峰,相似度均在0.900以上,结合质谱数据对其中4个共有峰进行了结构指认。聚类分析可将不同产地天冬药材初步分为2大类。结论:该研究建立的指纹图谱方法稳定、可靠。通过指纹图谱结合质谱分析可对天冬总皂苷提取物进行化学成分鉴定,为天冬综合质量评价提供参考。

三七总皂苷提取物物理指纹图谱构建及预测方法

【目的】为了丰富中药质量一致性评价手段,促进新原料的风险评估,提升中药原料的质量控制水平。【方法】以三七总皂苷提取物为研究对象,借鉴中药化学指纹图谱的概念,构建其物理指纹图谱,通过数据驱动的方法对不同批次原料之间的差异进行深入分析并探索关键物理属性参数之间的关系;根据主成分分析和层次聚类分析的结果划分样品类别,在此基础上建立分类模型并筛选出造成样品物理属性质量差异的重要变量;采用近红外光谱技术对不同原料的质量进行快速识别并建立重要物理属性参数的快速预测方法。【结果】首先清晰地阐明关键物理属性参数之间的关系,筛选出对样本分类贡献较大的物理属性参数;建立能够快速有效鉴别原料差异的分类模型;采用近红外光谱技术对不同原料的质量进行快速识别并建立重要物理属性参数的快速预测方法。【结论】所建方法可以对不同批次三七总皂苷提取物的物理属性质量进行准确分析,能够最大化地从物理属性参数数据中提取有效信息,从而提升药品生产过程中原料的质量控制水平。

苜蓿总皂苷提取物抗动脉粥样硬化和降血脂的实验研究

目的观察苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂作用。方法该实验采用高脂饲料、血管壁钙超载、内皮损伤三者结合引发大鼠大血管动脉粥样硬化斑块模型。检测指标:用紫外分光光度计测定血清总胆固醇TCH,甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C)的含量;并计算低密度脂蛋白(LDL-C)的含量和动脉粥样硬化指数(AI);检测主动脉的病理变化。结果苜蓿总皂苷提取物可明显降低高脂血症大鼠的血清TCH,TG,LDL-C水平,明显升高HDL-C水平,明显降低AI,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);主动脉斑块的病变分级,苜蓿总皂苷提取物明显降低粥样硬化面积,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。冠状动脉病变分级,苜蓿总皂苷提取物能明显降低AS病变发生率,减轻斑块对管腔的阻塞程度。结论苜蓿总皂苷提取物具有降血脂和抗动脉粥样硬化的作用。

黄芪总皂苷提取物的质量标准研究

目的建立黄芪总皂苷提取物的质量标准。方法采用薄层色谱法进行定性鉴别。对黄芪总皂苷提取物的干燥失重进行测定。紫外分光光度法测定黄芪总皂苷的含量。高效液相色谱-蒸发光散射法测定黄芪甲苷的含量。结果定性鉴别薄层色谱特征明显,专属性强,黄芪总皂苷提取物干燥失重不得过5%,黄芪总皂苷以黄芪甲苷(C41H68O14)计,不得少于50%,黄芪甲苷含量不得少于2.8%。结论该方法准确方便,能较全面地控制黄芪提取物总皂苷提取物的质量。

苜蓿总皂苷提取物对大鼠长期毒性的实验研究

目的研究苜蓿总皂苷提取物对大鼠的长期毒性。方法苜蓿总皂苷提取物7.2,5.0,2.8g.kg-1,相当药效学有效剂量(0.35g.kg-1为中剂量)的20,16,8倍,连续对大鼠灌胃给药27周。给药14,27周及停药4周后,经检查动物的一般状态、血液学、血液生化学指标及主要脏器组织。结果苜蓿总皂苷提取物对大鼠的一般状况、血常规、血液生化指标、主要脏器系数、重要脏器组织结构等无明显影响。停药4周后检测上述各指标均未见明显异常。与空白对照组比较各给药组大鼠未见与药物相关的明显异常。结论大鼠长期毒性实验表明,苜蓿总皂苷提取物在2.8～7.2g.kg-1属于安全剂量范围。

苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用

目的研究苜蓿总皂苷提取物抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。方法苜蓿总皂苷提取物组高、中、低剂量分别为0.7,0.35,0.18g.kg-1,阳性组:绞股蓝总苷片56mg.kg-1,模型组:等体积蒸馏水,灌胃同时给予高脂饲料;对已造模的大鼠,按体重1.0ml/100g灌胃,空白组:等体积蒸馏水,灌胃同时给予普通饲料;1次/d,连续给药90d。检查血脂相关指标、主动脉病变情况、主要脏器组织的情况。结果苜蓿总皂苷提取物使大鼠的血脂相关指标、主动脉病变情况、重要脏器组织病变情况有不同程度的改善。结论苜蓿总皂苷提取物有抗大鼠动脉粥样硬化和降血脂的作用。

反相高效液相色谱法测定绞股蓝50%总皂苷提取物中芦丁和槲皮素的含量

目的建立绞股蓝50％总皂苷提取物中芦丁与槲皮素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱仪，使用TURNER Kromasil^TN C18色谱2（250mm×4．6mm，5μm），流动相为0．4％磷酸水溶液-甲醇-乙腈进行梯度洗脱，流速为0．5ml·min^-1。检测波长为360nm；柱温为40℃。结果芦丁在0．37～3．70μg范围内有良好的线性关系，r=0．9999。槲皮素在0．05—0．50μg范围内有良好的线性关系，r=0，9999；芦丁的平均加样回收率为99．2％，RSD为1．69％；槲皮素的平均加样回收率为99．1％，RSD为2．21％。结论该方法简便快捷，准确度高。

人参不定根总皂苷的提取工艺优化及其抗氧化与抗疲劳作用

目的:探究人参不定根总皂苷(ginseng adventitious roots total saponins,GARS)的最佳提取工艺及抗氧化和抗疲劳作用。方法:利用乙醇回流法提取GARS,通过正交试验考察乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间对GARS含量的影响;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)、3-氧代-2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-1-氧(PTIO)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_(2)^(-)·)清除能力及还原力作为测定抗氧化活性指标;通过测定小鼠力竭游泳和爬杆时间,测定肌/肝糖原、乳酸(LD)、尿素氮(BUN)含量及乳酸脱氢酶(LDH)活性来判定GARS抗疲劳能力。结果:通过正交试验得到最佳提取工艺条件为乙醇浓度70%、料液比1:30 g/mL、提取温度70℃、提取时间40 min,得到GARS含量为107.85 mg/g;GARS对DPPH、ABTS^(+)、PTIO、OH、O_(2)^(-)自由基都有一定程度清除作用,且具有还原性,其清除能力和还原性与浓度呈正比;GARS能够显著延长小鼠力竭游泳和爬杆时间(P<0.05),显著增加肌/肝糖原含量(P<0.05),降低LD、BUN含量,提高LDH活性,并与其浓度呈正比。结论:GARS提取的最优条件为乙醇浓度70%、料液比1:30 g/mL、提取温度70℃、提取时间40 min,可为GARS产业化生产提供依据,且GARS具有一定的抗氧化和抗疲劳作用,可为明确人参不定根营养成分和活性物质提供理论支持,为开发人参不定根药食同源的相关产品提供技术参考。

柴胡总皂苷粗提取物对大鼠肝毒性损伤作用研究

目的观察长期、大量给予柴胡总皂苷粗提取物致大鼠肝毒性损伤的作用和程度。方法按45天毒性实验方法,除观察一般状况、肝毒性相关指标外,检测血和肝组织内脂质代谢情况、糖代谢、胆红素(TBIL)水平和肝组织病理检查。结果柴胡总皂苷粗提取物可导致血中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性增高,肝脏重量和肝体比值增大,血和肝内甘油三酯(TG)含量增加,对血中胆固醇(CHO)和肝内糖原(Gn)影响不明显,仅高剂量组对TBIL有影响;上述变化随剂量的增加而逐渐加重,病理组织学检查可见肝细胞损伤,与蒸馏水对照组相比有明显差异。结论长期给柴胡总皂苷粗提取物可致大鼠明显的肝毒性损伤,既可致肝功能指标的改变,又可致肝细胞器质性病变。

响应曲面法优化枸骨总皂苷的提取工艺及抗氧化活性

为优化枸骨总皂苷的提取工艺,研究枸骨总皂苷的抗氧化活性。用超声-微波协同萃取法,以提取时间、提取功率、料液比为考察因素,在单因素试验基础上,采用响应曲面法(response surface methodology,简称RSM)BoxBenhnken中心组合试验设计,优化枸骨总皂苷的提取工艺;采用清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picryylhydrazyl,简称DPPH)自由基能力分析枸骨总皂苷的抗氧化活性。结果表明,采用超声-微波协同萃取法,在提取时间180 s、提取功率100 W、料液比1 g∶30 m L、乙醇体积分数80%的条件下,枸骨总皂苷的提取率为3.739 3%;抗氧化试验结果表明,枸骨总皂苷浓度为62.24μg/m L时,对DPPH自由基的清除率为24.22%,表明响应曲面法优化了枸骨总皂苷的提取工艺,枸骨总皂苷具有一定的抗氧化活性。

柴胡总皂苷粗提取物对小鼠急性毒性实验研究

目的探讨柴胡总皂苷提取物对小鼠急性毒性的影响。方法采用经典的小鼠急性毒性试验方法,进行柴胡总皂苷粗提取物对小鼠的急性毒性研究。结果按含生药量计算,柴胡总皂苷粗提取物对小鼠的半数致死量(LD50)为94.974g·kg-1·d-1,相当于临床70kg成人每公斤人日用量的422.8倍;95%可信限为88.742～103.76g·kg-1·d-1,相当于临床70kg成人每公斤人日用量的414.1～484.2倍;按含总皂苷含量计算,LD50为5231.5mg·kg-1·d-1,95%可信限为4886.1～5721.2mg·kg-1·d-1。死亡小鼠急性毒性主要表现为安静怠动,即而出现走路不稳、腹卧昏睡、心率加快、呼吸急促、连续性抽搐、神经抑制而死亡。存活小鼠在14天观察期内体重增长缓慢,余未见明显异常。结论柴胡药材具有一定的毒性,与临床报道相一致。柴胡总皂苷既是其发挥功效的主要化学成分,又是其产生毒性的主要物质基础。其毒性部位以及体内蓄积毒性的"量-时-毒"关系有待进一步研究。

柴胡总皂苷粗提取物对大鼠急性毒性实验研究

目的探讨柴胡总皂苷粗提取物对大鼠急性毒性的影响。方法采用经典的急性毒性试验方法,进行柴胡总皂苷粗提取物对大鼠的急性毒性研究。结果按含柴胡总皂苷含量计算,柴胡总皂苷粗提取物对大鼠的半数致死量(LD50)为2255.6mg·kg-1·d-1,95%可信限为2057.2～2452.9mg·kg-1·d-1。死亡大鼠急性毒性主要表现为安静怠动,继而出现步态不稳、腹卧昏睡、心率加快、呼吸急促、连续性抽搐、神经抑制而死亡。存活小鼠在14天观察期内体重增长缓慢,余未见明显异常。结论柴胡总皂苷粗提取物可致大鼠全部死亡,且其毒性比小鼠毒性小。其产生毒性的部位及毒性机制有待于深入研究。

HPLC-ELSD法测定黑种草总皂苷提取物中黑种草皂苷A的含量

目的:建立测定黑种草总皂苷提取物中黑种草皂苷A含量的方法。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法。色谱柱为Cosmosil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0ml/min,柱温为30℃,进样量为10μl,ELSD的漂移管温度为65℃,气体流速为2.0L/min。结果:黑种草皂苷A的质量浓度在0.183～2.562mg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9990);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<2%;平均加样回收率为99.93%,RSD=1.60%(n=6)。结论:该方法操作简便、重复性好、准确性高,可用于黑种草总皂苷提取物中黑种草皂苷A的含量测定。

红参提取物总皂苷近红外定量分析建模中的变量筛选

注射用益气复脉(冻干)是由红参、麦冬、五味子3种药材制成的新型冻干粉针制剂。红参提取物总皂苷是注射用益气复脉(冻干)生产过程的重要质控指标,传统分析方法分析结果具有滞后性,无法快速反馈生产过程质量信息。近红外光谱(NIR)作为一种快速无损的过程监控工具已经广泛应用于中药质量控制领域。中药成分复杂且近红外光谱吸收强度弱、谱区重叠严重,如何从干扰严重的复杂光谱中提取有效信息是提高测量准确度的关键。模型集群分析(MPA)通过随机采样,最大限度地提取了样本信息,打破了传统一次性建模思路,为变量筛选方法提供了新的思想。采集了55批红参提取物近红外光谱数据,运用多元散射校正(MSC)进行光谱数据预处理,并将MPA衍生的随机蛙跳法(RF)、竞争自适应重加权(CARS)、变量组合集群分析法(VCPA)、VCPA联合迭代保留信息变量(IRIV)方法与OPUS软件自带的变量筛选方法分别用于总皂苷含量偏最小二乘(PLS)定量分析模型的建立中。结果表明,OPUS软件、CARS-PLS与RF-PLS所建模型校正集相关系数(Rc)仅为0.6013,0.5653与0.6440,拟合效果不理想。VCPA-P LS法所建模型的R c为0.9512,是几种变量筛选方法中最高的,但是其预测性能不佳,模型稳健性不理想。VCPA-IRIV-PLS模型具有最好的预测效果,Rc为0.928,RSEP%为7.99%。

毒性导向下的柴胡总皂苷精制工艺研究

目的通过小鼠急性毒性比较研究,探讨不同精制工艺对毒性物质基础柴胡总皂苷的富集程度。方法参照经典的急性毒性实验方法,进行柴胡总皂苷粗提取物、柴胡总皂苷水洗脱液和柴胡总皂苷醇洗脱液对小鼠的急性毒性比较研究。结果按总皂苷含量计算,测得柴胡总皂苷粗提取物LD15为0.3g·kg-1,MTD为0.48g·kg-1;测得柴胡总皂苷水洗脱液LD10为0.83g·kg-1,MTD为1.324g·kg-1;测得柴胡总皂苷醇洗脱液LD100为12.4g·kg-1。结论上述不同精制工艺样品的柴胡总皂苷富集程度为:柴胡总皂苷醇洗脱液>柴胡总皂苷水洗脱液>柴胡总皂苷粗提物;上述不同精制工艺样品的小鼠急性毒性大小为:柴胡总皂苷醇洗脱液>柴胡总皂苷粗提物>柴胡总皂苷水洗脱液,故确定醇洗脱工艺为富集柴胡总皂苷的最佳精制工艺。

2种不同设计方法优化红梅消总皂苷双水相提取工艺研究

目的:确定红梅消中总皂苷的最佳提取工艺。方法:以红梅消总皂苷含量为指标,通过星点设计与混料设计2种不同设计方法优化双水相提取中各相质量百分比,预测出双水相提取红梅消总皂苷的最优工艺。结果:预测值与实测值无显著差异。星点设计法总皂苷的最佳提取条件:硫酸铵12.14%、乙醇40.01%、总皂苷的含量为2.95%;混料设计法总皂苷的最佳提取条件:硫酸铵11%,乙醇37%、总皂苷的含量为3.10%。结论:2种设计方法均适用于优化双水相提取中各相质量百分比,可行性高,结果可靠;双水相体系对红梅消总皂苷有较好的提取作用,工艺简单、节能、易操作,且易放大于工业生产。

13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶活性的影响

目的:研究13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。方法:通过体外模型试验测定13种太白楤木皂苷单体对α-葡糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率。结果:皂苷单体4、12对α-葡糖苷酶的抑制作用较强,其半数抑制浓度(IC50)分别为(0.83±0.05)、(1.07±0.04)μmol/L;皂苷单体12对α-淀粉酶的抑制作用较强,其IC50为(1.02±0.03)μmol/L。结论:皂苷单体4、12对α-葡糖苷酶,皂苷单体12对α-淀粉酶均具有较好的抑制作用,可为后期试验提供一定参考。

苜蓿降血脂胶囊对实验性金黄地鼠动脉粥样硬化的作用

目的:研究苜蓿降血脂胶囊对实验性金黄地鼠动脉粥样硬化的作用。方法:采用高脂饲料喂养诱导金黄地鼠动脉粥样硬化模型,继续造模同时灌胃给药,8周后观察苜蓿降血脂胶囊对血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、动脉粥样硬化指数(AI)、心脏及肝脏形态学变化及冠状动脉粥样硬化病变程度的影响。结果:苜蓿降血脂胶囊在降低血清TC、TG、LDL-C、AI、冠状动脉粥样硬化病变发生率及管腔狭窄、肝脏脏器系数,升高HDL-C方面与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.001)。用药组心脏、肝脏病变程度减轻。结论:苜蓿降血脂胶囊对动脉粥样硬化金黄地鼠有较好的治疗作用。