狗脊总酚酸的提取工艺优化及抗氧化活性

目的采用Box-Behnken设计-响应面法优化狗脊总酚酸的提取工艺,并评价其体外抗氧化活性。方法以液料比、乙醇浓度和提取温度为影响因素,总酚酸提取率为评价指标,在单因素考察的基础上,运用三因素三水平的Box-Behnken设计-响应面法优化狗∶脊总酚酸的最佳提取工艺。测定狗脊总酚酸提取物对ABTS·^(+)和DPPH·的清除效果。结果狗脊总酚酸最佳提取工艺为:乙醇浓度55%、提取温度88℃、液料比602 mg/mL和1 mg/mL时,对ABTS·^(+)、DPPH·的清除率分别为92.76%和88.66%。结论响应面优化法试验理论值与实测值较一致,得到的狗脊总酚酸提取工艺简便可行,狗脊总酚酸提取物具有良好的体外抗氧化活性。

水芹总酚酸体外抗HIV-1的作用

目的探讨水芹总酚酸体外抑制人类免疫缺陷病毒1型的作用。方法用不同稀释度的水芹总酚酸与TZM-bl细胞共同培养,使用MTT法检测活细胞的数量,观察水芹总酚酸对TZM-bl细胞的毒性作用;用人类免疫缺陷病毒1型实验室适应株SF33、BAL分别感染TZM-bl细胞,基于TZM-bl细胞的荧光素酶检测体系,采用荧光素酶活性检测方法检测水芹总酚酸抗人类免疫缺陷病毒1型的活性。结果水芹总酚酸对TZM-bl细胞表现出较低的细胞毒性,半数细胞毒浓度>1600μg·ml^(-1)。水芹总酚酸对TZM-bl细胞HIV-1 SF33、HIV-1 BAL病毒的半抑制浓度平均值分别为38.93和24.25μg·ml^(-1),治疗指数分别为>41和>66。结论水芹总酚酸在体外具有抑制人类免疫缺陷病毒1型复制活性的作用。

响应面法优化火绒草中总黄酮与总酚酸的提取工艺研究

为探究野生火绒草(Leontopodium leontopodioides(Wild.)Beauv)总黄酮与总酚酸最佳提取工艺及抗氧化活性,本试验采用快速溶剂萃取法探索萃取温度、循环次数、加热时间及萃取压力对火绒草总黄酮、总酚酸提取含量的影响,通过单因素试验和响应面设计法确定了活性物质的最佳提取工艺。结果表明:当使用70%乙醇提取火绒草中总黄酮时最佳提取工艺为:萃取温度93℃,循环次数3次,加热时间20 min,萃取压力102 bar,提取含量为(45.45±0.36)mg·g^(-1);总酚酸最佳提取工艺为:萃取温度90℃,循环次数3次,加热时间19 min,萃取压力97 bar,提取含量为(23.52±0.34)mg·g^(-1)。火绒草总黄酮提取液对DPPH自由基和ABTS自由基的IC_(50)为0.012 mg·mL^(-1)和0.356 mg·mL^(-1),具有一定的还原力。本研究可为火绒草活性物质的提取工艺及加工利用提供可靠的理论依据和详实的科学参考。

以丹参茎叶总酚酸为底物的丹酚酸A化学转化研究及其抗氧化活性

目的:优选丹参茎叶总酚酸为底物转化丹酚酸A的工艺参数,并进一步评价其转化前后的抗氧化活性。方法:以丹酚酸A转化率为指标,考察不同酸、pH值、反应时间、反应温度、底物浓度(以丹酚酸B计)等因素对转化率的影响,结合正交试验结果,优选丹参茎叶酚酸部位化学转化工艺,对转化前后总酚酸的抗氧化活性进行评价。结果:优选的转化工艺为:盐酸调节pH值为3,底物浓度(以丹酚酸B计)15 mg/mL,反应温度135℃,反应时间2 h,转化率可达89%,转化后其化学构成发生改变,丹酚酸A、丹参素、原儿茶醛含量显著提高。丹参茎叶总酚酸转化后对DPPH·和ABTS自由基的IC_(50)值分别为(3.00±0.16)mg/mL、(16.88±0.32)mg/mL,FRAP法为(1.15±0.03)mmol FeSO_(4),较转化前表现出更优的抗氧化能力。结论:采用化学转化方法可有效实现丹参茎叶总酚酸高效转化为高附加值的丹酚酸A,提升其资源利用价值。

天山雪莲总酚酸对脂多糖刺激的RAW264.7细胞炎症因子释放的影响及其机制研究

目的:研究天山雪莲总酚酸(PSI)抑制脂多糖(LPS)刺激的RAW264.7细胞炎症因子释放的作用及其作用机制。方法:采用大孔吸附树脂分离PSI,利用超高效液相色谱法(UPLC)对其进行成分分析。建立LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型。采用噻唑蓝法检测细胞活力;Griess法检测一氧化氮(NO)的生成;酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎症因子释放水平;蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测Toll样受体4(TLR4)信号通路关键蛋白的表达水平;免疫荧光技术检测核转录因子(NF)-κB亚基p65、激活子蛋白1(AP-1)亚基c-Jun和干扰素调节因子3(IRF3)的入核情况。结果:PSI主要含有绿原酸(23.60%),质量浓度为12.50~100.00μg·mL^(-1)时能显著抑制LPS刺激下炎症因子NO、前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10、IL6、趋化因子单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α和调节激活正常T细胞表达分泌因子(Rantes)的释放,并能剂量依赖性地降低TLR4信号通路关键蛋白κB抑制因子(IκB)α、IκB激酶(IKK)α/β、p65、TANK结合激酶1(TBK1)、IRF3、p38、胞外信号调节激酶(ERK)1/2及c-Jun的磷酸化水平,同时抑制LPS诱导的p65、c-Jun和IRF3的入核。结论:PSI能抑制LPS刺激下RAW264.7细胞炎症因子的产生,其作用机制可能与抑制TLR4信号通路有关。

响应面法优化金莲花总酚酸的提取工艺及其美白活性研究

采用响应面分析法中Box-Behnken设计实验优化乙醇回流提取金莲花总酚酸的工艺条件,同时研究了金莲花总酚酸对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力、还原能力及其对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,金莲花总酚酸的最佳提取工艺为乙醇浓度60%,回流时间90 min,回流温度60℃,液料比40∶1(mL/g);在此条件下金莲花总酚酸得率为92.245 mg/g。此外,其对DPPH自由基、羟基自由基具有一定的清除能力和还原能力,并且能够显著性地抑制酪氨酸酶活性。本研究所得的提取工艺稳定可靠,金莲花总酚酸具有一定的体外抗氧化活性和酪氨酸酶抑制作用,为进一步科学合理开发利用金莲花奠定基础。

武当山区民间药材毛连菜不同生长部位总酚酸含量比较研究

目的:比较毛连菜不同生长部位酚酸类成分富集情况,为毛连菜后续研究提供参考。方法:采用福林酚比色法,以没食子酸为对照品,在732 nm波长处测定毛连菜不同生长部位总酚酸含量。结果:毛连菜植株不同生长部位总酚酸分布有一定差异,花序中含量最高,各部位含量由高到低依次为:花序>叶>茎>根,含量分别为3.8415%、2.6092%、1.3445%、0.9632%。结论:毛连菜植株不同生长部位酚酸类成分分布存在明显差异,因此可根据总酚酸含量的差异,选择采收部位。

丹参总酚酸联合anti-PD-L1调控髓源性巨噬细胞浸润抑制乳腺癌发生发展

目的探究丹参总酚酸(total salvianolic acid,TSA)联合anti-PD-L1通过调控髓源性巨噬细胞瘤内浸润抑制乳腺癌的发生发展。方法构建E0771乳腺癌皮下肿瘤模型。25只小鼠随机分为空白组、模型组、TSA组(TSA 10 g·kg^(-1)),anti-PD-L1组(anti-PD-L110 mg·kg^(-1)),TSA联合anti-PD-L1组(TSA 10 g·kg^(-1)+anti-PD-L110 mg·kg^(-1))。TSA组每日灌胃给药,anti-PD-L1每3天1次腹腔注射,连续给药14 d。记录小鼠肿瘤体积变化及肿瘤、肝脏及脾脏重量。ELISA检测小鼠血浆中IL-6,MCP-1的含量,qPCR检测cxcl1,cxcl2,cxcl3,ccl2,gm-csf mRNA的表达,流式、免疫组化检测小鼠肿瘤、淋巴中髓源性巨噬细胞浸润情况,流式检测淋巴、脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞数量变化。结果与模型组相比,TSA,anti-PD-L1,TSA联合anti-PD-L1均可抑制E0771乳腺癌生长,减少IL-6、MCP-1分泌,降低cxcl1,cxcl2,cxcl3,ccl2,gm-csf mRNA表达,抑制髓源性巨噬细胞向肿瘤的募集,增加淋巴及脾脏内CD4+T细胞、CD8+T细胞数量,TSA联合anti-PD-L1治疗效果更佳显著。结论TSA联合anti-PD-L1显著抑制E0771乳腺癌皮下瘤发生发展进程,可能通过抑制髓源性巨噬细胞向肿瘤浸润,增强机体免疫效应发挥作用。

大孔树脂分离纯化蜘蛛香总酚酸及其生物活性研究

优化AB-8大孔树脂富集纯化蜘蛛香中总酚酸的工艺条件,并测定其抗氧化、抗乙酰胆碱酯酶的生物活性。以吸附率、解析率、总酚酸含量为评价指标,优化AB-8大孔树脂对蜘蛛香总酚酸的纯化工艺条件,并集成溶剂萃取法制备质量分数≥50%蜘蛛香总酚酸,采用清除DPPH·和PTIO·的方法评价蜘蛛香总酚酸的抗氧化活性,采用改良版的Ellman比色法测定蜘蛛香总酚酸抗乙酰胆碱酯酶活性。结果表明,最佳工艺条件为:上样质量浓度为2.66 mg·L^(-1)、上样液p H=4.6、上样流速1 BV·h^(-1)、上样体积2 BV、水洗用量5 BV、除杂剂20%乙醇4 BV、洗脱剂50%乙醇4 BV;粗提液先用有机溶剂萃取再经大孔树脂分离纯化得57.77%蜘蛛香总酚酸;纯化后样品对DPPH·、PTIO·有较好的清除能力和有较好的抗乙酰胆碱酯酶活性,IC50值分别为0.04 mg·m L^(-1)、2.00 mg·m L^(-1)、5.40 mg·m L^(-1)。优化所得工艺稳定可行,纯化的蜘蛛香总酚酸具有较好的抗氧化和抗乙酰胆碱酯酶活性,为其研究开发提供一定的参考依据。

陈艾提取物的总黄酮、总酚酸含量及抗氧化活性研究

采用超声辅助提取陈艾(Artemisia argyi)总黄酮、总酚酸,并利用清除ABTS+自由基、DPPH自由基试验来对不同年份陈艾提取物的抗氧化能力进行研究。结果表明,新鲜艾草、一年陈艾、三年陈艾和三年陈艾残渣中所含的总黄酮及总酚酸含量有显著差异。其中,三年陈艾中的总黄酮、总酚酸含量最高,并且有较强的抗氧化活性。一年陈艾次之,新鲜艾草其含量最低,对自由基的清除作用相对较低。相关性研究显示,陈艾总黄酮与总酚酸含量和采用DPPH、ABTS+法评价的抗氧化活性无显著相关性。

甘西鼠尾草总酚酸提取物对电离辐射诱导小鼠肠道炎症的保护作用及机制

目的研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)对电离辐射诱导小鼠肠道炎症的保护作用,探讨其调节Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路抑制电离辐射的作用机制。方法选取48只雄性KM小鼠,按照随机数字表法分为正常对照组、辐射模型组、SPE低剂量组、SPE中剂量组、SPE高剂量组和阳性药白藜芦醇组(白藜芦醇组),每组8只。除正常对照组不予以辐射外,其余各组小鼠均接受5.5 Gy^(60)Coγ射线一次性照射。辐射前2 d及辐射后7 d,SPE低、中、高剂量组小鼠分别以75 mg/kg、150 mg/kg、300 mg/kg剂量给予相应的SPE溶液灌胃;正常对照组、辐射模型组小鼠分别给予0.9%氯化钠溶液灌胃,白藜芦醇组小鼠给予剂量为30 mg/kg的白藜芦醇溶液灌胃。辐射7 d后,观察各组小鼠小肠肠道组织病理损伤、外周血常规指标(白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白)、脾脏系数及小肠肠道组织中NLRP3、NF-κB、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达的变化。结果与辐射模型组相比,白藜芦醇组小鼠肠道组织浸润性炎症损伤程度显著降低,SPE各组小鼠肠道组织炎性症状均减轻。各组白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白水平比较差异有统计学意义(均P<0.01)。与正常对照组相比,辐射模型组、SPE低、中、高剂量组和白藜芦醇组白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白水平均降低(均P<0.01)。与辐射模型组相比,SPE低、中、高剂量组和白藜芦醇组白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白水平均升高(P<0.05或P<0.01)。各组小鼠的脾脏系数比较差异有统计学意义(P<0.01)。与正常对照组相比,辐射模型组、SPE低、中和高剂量组的脾脏系数均降低(P<0.01)。与辐射模型组相比,SPE高剂量组、白藜芦醇组脾脏系数均升高(0.58±0.09、0.64±0.14比0.46±0.08)(P<0.05或P<0.01)。各组NLRP3、NF-κB、IL-1β蛋白表达比较差异有统计学意义(均P<0.01)。与正常对照组相比,辐射模型组、SPE低、中、高剂量组、白藜芦醇组NLRP3、NF-κB、IL-1β蛋白表达均升高(P<0.05);与辐射模型组相比,SPE低、中、高剂量组和白藜芦醇组NLRP3、NF-κB、IL-1β蛋白表达均降低(P<0.05)。结论SPE可以通过调节NLRP3炎症小体减轻电离辐射引起的肠道炎症。SPE通过抑制TLR4蛋白,降低NLRP3炎症小体的表达,有效抑制电离辐射诱导的肠道炎症产生。

Box-Behnken响应面法优化枫香树叶总酚酸提取工艺

目的:采用Box-Behnken响应面法优化枫香树叶总酚酸提取工艺。方法:采用分光光度法,以枫香树叶总酚酸含量为评价指标,在单因素试验的基础上,以乙醇浓度、提取时间、提取温度、液料比为考察因素,利用Box-Behnken设计优化超声法提取枫香树叶中总酚酸的最佳工艺。结果:枫香树叶总酚酸最佳提取条件为乙醇浓度67%、提取时间50 min、提取温度63℃、液料比25∶1,总酚酸得率为0.187%,与预测得率0.183%较为接近,无显著性差异。结论:Box-Behnken响应面法优化方法稳定可靠、简便可行,可用于枫香树叶总酚酸的提取。

景天三七中没食子酸和总酚酸含量测定

目的:测定景天三七中没食子酸和总酚酸的含量。方法:没食子酸含量分析采用高效液相色谱法。色谱条件为:流动相为甲醇-磷酸水溶液(pH3.0)(90∶10),检测波长271 nm,流速1.0 mL/m in。总酚酸的含量测定采用可见分光光度法,以没食子酸为对照品,0.6%FeC l3—0.9%K3[Fe(CN)6](1∶0.9)混合溶液为显色剂,在720 nm波长处进行测定。结果:没食子酸分析的线形范围为0.343 0μg^1.200μg(r=0.999 7),平均回收率为97.91%,RSD为1.8%(n=6)。总酚酸分析的线形范围为0.4640~2.320μg/mL(r=0.999 3),平均回收率为99.21%,RSD为2.0%(n=6)。结论:本方法简单快捷,重现性好,可作为景天三七中没食子酸和总酚酸的质控方法。

川芎中总生物碱、总酚酸和总挥发油对大鼠离体子宫平滑肌收缩活动的抑制作用

目的:考察川芎中总生物碱、总酚酸和总挥发油对大鼠离体子宫平滑肌收缩活动的抑制作用,为阐明川芎活血调经的传统功效提供依据。方法:取大鼠离体子宫平滑肌浸泡于洛氏液中,以二甲基亚砜为空白对照、盐酸维拉帕米为阳性对照,采用Power Lab生理记录仪记录子宫平滑肌收缩曲线,通过观察收缩活动力、收缩张力变化来评价川芎中总生物碱、总酚酸(质量浓度均分别为0.025、0.05、0.1 mg/m L)和总挥发油(0.04、0.08、0.16 mg/m L)对缩宫素致大鼠离体子宫平滑肌收缩的抑制作用,并计算子宫平滑肌收缩活动力抑制率和收缩张力抑制率。结果:加入缩宫素后大鼠离体子宫平滑肌的收缩活动力、收缩张力较加入缩宫素前均显著升高(P<0.05或P<0.01),不同质量浓度3类川芎组分均可显著降低子宫平滑肌的收缩活动力、收缩张力(P<0.05或P<0.01)。与空白对照比较,除0.025 mg/m L总酚酸外,给予其余浓度药物或组分后子宫平滑肌的收缩活动力抑制率和收缩张力抑制率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:川芎中总生物碱、总酚酸和总挥发油对缩宫素致大鼠离体子宫平滑肌收缩均有一定的抑制作用,这为川芎活血调经的用法提供了参考依据。

七种紫珠属植物水提物中总黄酮、总酚酸及其抗氧化活性的测定

采用紫外-可见分光光分度法测定裸花紫珠等7种紫珠属植物水提液中总黄酮、总酚酸的含量及清除自由基的能力。结果表明:7种植物中的总黄酮、总酚酸含量差异很大,均以红紫珠含量最高,其黄酮、总酚酸含量分别为3.75%和2.93%;清除自由基能力与总黄酮、总酚酸含量呈正相关性,亦以红紫珠清除自由基能力最强。研究结果将为紫珠属植物资源的开发与利用提供理论基础。

大孔吸附树脂对川芎中阿魏酸及总酚酸的分离纯化

目的:研究D-101大孔吸附树脂分离纯化川芎中阿魏酸及总酚酸的工艺条件及参数。方法:以阿魏酸及总酚酸的吸附容量和洗脱率为考察指标,研究大孔吸附树脂分离纯化的吸附性能和洗脱参数。结果:D-101大孔树脂对阿魏酸的吸附容量为4．93mg·g^(-1),对总酚酸的吸附容量为51．3mg·g^(-1);洗脱率阿魏酸为96．3％,总酚酸为96．7％。终产品中总酚酸的含量可达51．7％。结论:采用本法分离纯化川芎中阿魏酸及川芎总酚酸是可行的。

比色法测定消癌平注射液中总酚酸的含量

目的 建立消癌平注射液中总酚酸的含量测定方法。方法 以绿原酸为对照品 ,比色法测定。结果 绿原酸回归方程为A =35 8.1 4×C - 5 .3879(r=0 .9993,n =9)。在 2 0 .5～ 32 8μg范围内呈线性关系 ,平均回收率为 1 0 0 .4 8% ,RSD =1 .70 %。结论 所用方法简便、准确、快速 。

丹参总酚酸对博莱霉素致肺纤维化小鼠的治疗作用

目的观察丹参总酚酸对博莱霉素致肺纤维化小鼠的治疗作用。方法通过气管内注射博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型,给予丹参总酚酸ig治疗后,以肺指数、肺组织病理形态及羟脯氨酸(Hyp)水平的测定,观察丹参总酚酸对小鼠肺纤维化形成的影响。结果丹参总酚酸治疗后肺泡炎和肺纤维化明显减轻,Hyp水平比模型组明显降低(P<0.05、0.01)。结论丹参总酚酸能减轻博莱霉素致小鼠肺纤维化程度,有一定的治疗作用。

响应曲面法优化金银花总酚酸提取工艺

目的优化金银花总酚酸提取工艺。方法以总酚酸得率为响应值,考察提取温度、料液比、提取时间、乙醇体积分数4个因素对金银花总酚酸提取率的影响。在单因素试验的基础上,采用响应曲面法中的Box-Behnken模式,对金银花总酚酸的提取工艺参数进行优化分析。结果金银花总酚酸提取的最优工艺条件为提取温度82℃、72%乙醇、料液比1∶31。在此条件下,总酚酸提取率为12.30%。结论实测值与响应曲面法回归模型的预测值接近,与模型高度拟合,使用该方法能合理优化金银花中总酚酸的提取工艺。

不同种类蜂蜜总酚酸含量测定和抗氧化作用的研究

本文测定了槐花蜜、黄芪蜜、苹果蜜、荞麦蜜、枸杞蜜、山楂蜜、山花蜜、五味子蜜、菊花蜜和油菜蜜等十种蜂蜜的总酚酸含量和抗氧化活性。结果表明,十种蜂蜜的总酚酸含量在13.30±0.92mg/100g蜂蜜到148.46±2.34mg/100g蜂蜜之间,其中荞麦蜜的总酚酸含量远高于其它种类的蜂蜜。应用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子自由体系和FeSO4诱导的脂质过氧化模型,研究了稀释蜂蜜的抗氧化活性,结果表明,十种蜂蜜均有抑制超氧阴离子自由基和抗脂质过氧化的作用,呈现量效关系。其中荞麦蜜的抗氧化活性最强。本研究还观察到,蜂蜜中总酚酸的含量与其抗氧化活性成正相关,表明蜂蜜的抗氧化活性可能与其所含的总酚酸有关。十种中国蜂蜜中含有酚酸类抗氧化剂可能是其发挥保健功能的有效成分之一。