五行音乐对孕期恐应激子代社交行为的影响及机制研究

目的探究五行音乐对孕期恐应激子代社交行为的影响和机制,为临床胎源性情志疾病的早期防治提供依据。方法将45只孕鼠随机分为空白组、模型组和五行音乐组。其中,模型组、五行音乐组均采用旁观电击法造模,五行音乐组在孕期的每天17:00~19:00播放五行音乐中的宫调。孕第19天对各组孕鼠采用ELISA法检测血清中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质醇(corticosterone,CORT)的含量进行造模评价。仔鼠延续母鼠的分组,于8周龄时进行三箱社交实验观察社交行为;免疫荧光双标法检测仔鼠内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex,mPFC)谷氨酸能神经元活性的表达;高效液相色谱法检测仔鼠mPFC区谷氨酸(glutamate,Glu)总含量;高尔基染色观察仔鼠mPFC区神经元树突棘的变化。结果与空白组相比,模型组孕鼠血清中ACTH、CORT含量显著上升,模型组仔鼠社交交互时间和社会新奇偏好指数显著降低,谷氨酸能神经元活性、谷氨酸含量及神经元树突棘显著下降。与模型组相比,五行音乐组孕鼠血清中ACTH、CORT的含量降低及仔鼠社交行为、谷氨酸能神经元活性、谷氨酸含量及神经元树突棘的状态得到改善。结论五行音乐干预能够有效改善孕期恐应激所致子代的社交行为障碍,其机制可能与增强mPFC区谷氨酸能神经元的活性有关。

孕期恐应激对仔鼠空间学习记忆及海马、下丘脑c-Fos表达的影响

目的:探讨孕期恐应激对其21日龄仔鼠空间学习记忆及海马、下丘脑c-Fos表达的影响。方法:通过旁观电击法制备恐伤孕鼠模型,运用Morris水迷宫评价21日龄仔鼠的学习记忆力,采用免疫组化法检测仔鼠海马、下丘脑c-Fos的表达水平。结果:与对照组比较,应激组仔鼠逃避潜伏期时间延长、游泳速度慢、跨越平台次数少、20%边缘区域停留时间延长,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,应激组仔鼠海马、下丘脑中c-Fos表达均显著增加(P<0.01);仔鼠海马、下丘脑中c-Fos表达与平均逃避潜伏期和20%边缘区域停留时间呈正相关(P<0.01),与跨越平台次数和游泳速度呈负相关(P<0.01)。结论:孕期恐应激可使21日龄仔鼠空间学习记忆下降及海马、下丘脑c-Fos表达增加,且其空间学习记忆能力的下降与海马、下丘脑c-Fos表达水平密切相关。

孕期恐应激对孕鼠及其子代近远期海马NMDAR1、NR2B表达的影响

目的观察孕期恐应激对孕鼠自身及其子代近远期海马NMDAR1、NR2B表达的影响。方法方法受孕雌鼠随机分为模型组和空白组,每组15只,模型组采用旁观电击法制备孕期恐惧应激动物模型。孕鼠产仔后仔鼠延续孕鼠的分组,每窝随机选择5只饲养至80日龄。以仔鼠21日龄代表幼儿期,80日龄代表成年期,采用免疫组化法检测孕鼠及仔鼠海马NMDAR1、NR2B的表达。结果①与空白组比较,模型组孕鼠海马区NMDAR1、NR2B蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P<0.01);②与同日龄空白组相比,模型组21日和80日龄仔鼠海马区NMDAR1、NR2B蛋白表达均下调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论恐伤孕鼠可导致其自身及子代近远期海马NMDAR1、NR2B蛋白表达下调,这可能是孕期恐刺激后孕鼠及子代学习记忆能力下降的部分机制。

从前额皮质星形胶质细胞、IgG及IL-2探讨孕期恐应激对其近远期仔鼠情绪的影响

目的:从前额皮质星形胶质细胞和免疫球蛋白G(IgG)、白细胞介素-2(IL-2)探讨孕期恐应激对其近远期仔鼠情绪的影响。方法:运用旁观电击法制备恐伤孕鼠模型,通过旷场实验检测其21、80日龄仔鼠情志变化,采用免疫组化法检测前额叶皮质胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,ELISA法检测血液中IgG、IL-2的含量。结果:与同日龄对照组比较,模型组21、80日龄仔鼠垂直得分、水平得分,糖水消耗量、糖水偏好值均显著降低(P<0.05);与同日龄对照组比较,模型组21、80日龄仔鼠血清IgG、IL-2含量均显著降低,前额叶皮质GFAP蛋白表达均上调(P<0.05)。结论:孕期恐应激可导致其近远期仔鼠情志异常,可能与星形胶质细胞过度激活和免疫异常有关。

基于16S rRNA探究孕期“恐伤肾”对仔鼠情绪及肠道菌群的影响

目的:探究孕期“恐伤肾”对仔鼠肠道菌群结构的影响,并预测其关键菌群及差异代谢功能。方法:基线一致的已孕0.5 d Wistar大鼠分为正常组和恐应激组,两组于孕18 d采用悬尾实验、糖偏好实验评价造模效果。仔鼠延续母鼠分组,在5周龄行悬尾试验、高架实验评价仔鼠情绪,使用16S rRNA基因测序分析仔鼠肠道菌群。结果:与正常组比较,恐应激组孕鼠悬尾不动时间显著增加(P<0.05),糖偏好率显著降低(P<0.05);恐应激组仔鼠悬尾不动时间显著增加(P<0.05),高架开放臂停留时间比例显著减少(P<0.05)。两组仔鼠肠道菌群丰富度、多样性、物种结构差异显著(P<0.05)。与正常组比较,恐应激组厚壁菌门(Firmicutes)显著降低,拟杆菌门(Bacteroidetes)显著升高(LDA>4.0,P<0.05),菌属方面乳杆菌属(Lactobacillus)、粪杆菌属(Faecalibacterium)、嗜果胶拟杆菌属(Bacteroides pectinophilus)显著降低(LDA>4.0,P<0.05),瘤胃球菌UCG014(Ruminococcaceae UCG014)、Erysipelotrichaceae科的杜波氏菌属(Dubosiella)、异芽杆菌属(Allobaculum)、尿道杆菌属(Turicibacter)显著升高(LDA>4.0,P<0.05)。菌群代谢功能方面,与正常组比较,恐应激组仔鼠外源生物降解与代谢、脂质代谢功能丰度降低(P<0.05),能量代谢功能丰度增加(P<0.05)。结论:孕期恐应激导致仔鼠不良情绪,伴随肠道菌群紊乱与其代谢功能的失调。