条件恐惧实验用于评价阿尔茨海默病转基因小鼠认知功能性别差异的实验研究

目的探讨条件恐惧(fear conditioning, FC)实验用于评价阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)转基因小鼠认知功能的性别差异的应用效果。方法选择AD转基因模型小鼠与野生型小鼠(C57BL/6)交配后的子代小鼠20只,按性别分笼养殖至6月龄,采用FC实验研究6月龄AD转基因小鼠认知障碍的性别差异,并与Morris水迷宫、Barnes迷宫的实验结果进行比较。结果 AD小鼠在Morris水迷宫和Barnes迷宫的训练和测试中性别差异无统计学意义(P>0.05)。FC实验显示:第3天的环境测试中,雌性AD小鼠的静止时间(42.8 s,6.4~120.0 s)明显长于雄性AD小鼠(3.1 s,0~17.4 s),声音测试中,雌性AD小鼠的静止时间(117.7 s,80.4~158.9 s)明显长于雄性AD小鼠(91.0 s,57.4~118.4 s),差异均有统计学意义(P <0.05);第7天的环境测试中,雌性AD小鼠的静止时间(30.3 s,1.5~57.2 s)明显长于雄性AD小鼠(5.4 s,0~31.6 s),差异有统计学意义(P <0.05),仅在第7天的声音测试中,雌性与雄性AD小鼠的静止时间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论认知障碍的性别差异确实存在于老年AD转基因小鼠中,并且FC实验最适用于测试AD小鼠的认知障碍。

不同测试指标及观测时段对情景条件恐惧实验检测5XFAD转基因小鼠行为学效力的影响

目的·探讨选择不同的测试指标和观测时段是否影响情景条件恐惧实验对5XFAD转基因小鼠学习和记忆能力的检测效力。方法·选用雄性5XFAD转基因小鼠与雌性C57BL/6小鼠交配繁殖的4月龄雌性子代5XFAD小鼠12只为实验组,同窝Littermates小鼠(LM小鼠)14只为对照组,相继进行旷场实验及情景条件恐惧实验。分别采用旷场实验中的总路程、速度及情景条件恐惧实验训练阶段前60 s的平均运动指数,评估2组小鼠的自发活动性有无差异。继而分别选取测试阶段前180 s、181~360 s或前300 s作为观测时段,评估不同观测时段下小鼠僵直时间百分比和活动抑制率,并进一步探究选择不同观测时段对2种检测指标的差异性检出效力的影响。结果·2组小鼠在旷场实验中的总路程和速度比较,差异均无统计学意义;但其情景条件恐惧实验训练阶段前60 s的平均运动指数间比较,差异有统计学意义(P=0.027)。LM小鼠不同观测时段僵直时间百分比的差异有统计学意义(均P<0.05),而活动抑制率的差异无统计学意义;5XFAD小鼠不同观测时段僵直时间百分比和活动抑制率的差异均无统计学意义。在3个观测时段观察小鼠的运动状态时,2组小鼠僵直百分比的差异均无统计学意义;选取测试阶段的前180 s观测时,5XFAD小鼠的活动抑制率明显高于LM小鼠(P=0.038);而在其余2个观测时段中,2组小鼠活动抑制率的差异无统计学意义。结论·采用情景条件恐惧实验训练阶段的平均运动指数检测5XFAD小鼠的自发活动性较旷场实验的总路程和速度更敏感。在情景条件恐惧实验中,观测时段的不同设定可对单一品系小鼠的僵直时间百分比产生影响,而不影响活动抑制率。选用活动抑制率较僵直时间百分比更能准确反映出5XFAD小鼠的认知功能障碍,将测试阶段的前180 s作为观测时段更为准确。

超极化激活的环核苷酸门控通道1参与七氟烷诱导的顺行性遗忘作用的机制研究

目的旨在探讨超极化激活的环核苷酸门控通道1(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel 1,HCN1)在七氟烷诱导的顺行性遗忘中的作用机制。方法采用雄性SPF级C57BL/6J野生型小鼠(WT组,n=60)和HCN1基因全身敲除(HCN1-/-)小鼠(HCN1-/-组,n=60)。将两组小鼠分别暴露于不同浓度的七氟烷(0%、0.1%、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%)下,每个浓度10只小鼠。随后进行条件性恐惧实验,计算两组小鼠七氟烷抑制条件性恐惧记忆的半数效应浓度(median effective concentration,用EC50表示)。采用全细胞膜片钳技术记录0.125mmol/L七氟烷浓度灌流液对转染HCN1的人胚肾293细胞(HEK293-HCN1)上HCN1电流的影响,比较七氟烷处理前(Control组)和处理后(Sevoflurane组)HCN1电流的变化。结果与-/-WT组小鼠相比,HCN1组小鼠在七氟烷抑制场景恐惧记忆和声音恐惧记忆中的EC50值升高,差异有统计学意义(场景恐惧记忆:0.18%比0.26%,P<0.001;声音恐惧记忆:0.47%比0.49%,P<0.001)。全细胞电生理记录显示,与基础值相比,0.125mmol/L七氟烷抑制HEK293-HCN1细胞在﹣90~﹣140mV范围内的电流幅度(P值均<0.05),并增加了半最大激活电压(V1/2a)值[(﹣108±2.9)mV比(﹣100.1±3.0)mV,(P<0.001)]。结论HCN1电流的抑制可能参与了七氟烷诱导的顺行性遗忘作用。

华生实验被试小阿尔伯特的身份确认及争论

行为主义创立者华生的经典儿童恐惧获得实验在心理学史上具有里程碑的意义,但因研究的伦理、设计缺陷等问题一直备受争议。在过去的几十年里,心理学界一直在寻找实验被试小阿尔伯特的下落。2009年,Beck等人经研究确认道格拉斯.梅里特就是小阿尔伯特,6岁时夭折于脑积水。而其他的研究者结合小阿尔伯特的领养、健康状况,以及刊载华生研究报告的当期杂志是否延期出版等问题,对Beck等人的研究结果提出了质疑。最新研究表明,华生很有可能在知情的情况下对患病的小阿尔伯特实施了实验。关于小阿尔伯特身世的研究,能够唤起心理学界对小阿尔伯特的历史记忆以及对心理学研究中被试权利的保障意识。

化学实验中学生易出现的问题及防治

对化学实验中学生存在的一些问题应给予重视,并及早防治,从而使学生能够主动地参与化学实验,并在化学实验中增长智能和技能。

华生实验被试小艾尔波特的身份之争

1920年,华生和雷纳对一名只有11个月名为Little Albert的婴儿被试进行了恐惧实验,在心理学史上,这是一个经典的实验,也是一个备受争议的实验.关于小艾尔波特的身世研究使心理学界对小艾尔波特的身份陷入了疑惑,同时也对心理学实验的伦理道德提出了更高的要求.

CRMP2对七氟醚诱导的发育大鼠远期记忆功能障碍的影响

目的:探究坍塌反应调节蛋白2对七氟醚诱导的发育大鼠远期记忆功能障碍的影响。方法:构建CRMP2靶基因的野生型腺病毒,进行SD幼鼠海马定位注射,应用Western Blot、免疫荧光验证过表达效果。腺病毒注射后将幼鼠养至第七天,进行空气与七氟醚暴露4 h,31-32天时进行场景恐惧记忆实验。结果:在场景恐惧记忆实验中,七氟醚暴露后的大鼠的“木僵”时间明显降低。然而,过表达CRMP2能够逆转七氟醚所致的大鼠“木僵”时间的下降,提示七氟醚能够导致大鼠远期记忆功能损害,而CRMP2能够逆转七氟醚所致的记忆功能障碍。结论:七氟醚诱导新生大鼠远期记忆功能障碍的机制可能与抑制CRMP2表达有关。

姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力及大脑中Aβ_(42)表达的影响

目的观察姜黄素对APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠学习记忆能力和大脑β-淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)42表达的影响,探讨姜黄素在阿尔采末病(Alzheimer’sdisease,AD)防治中的作用。方法将20只6月龄APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠随机分为对照组和姜黄素饲喂组,每组10只。姜黄素饲喂组每天饲喂姜黄素(500 mg·L-1),6个月后采用Morris水迷宫实验方法及恐惧实验方法检测小鼠的学习记忆能力,采用免疫组化法检测小鼠大脑Aβ42表达的变化。结果与对照组相比,姜黄素饲喂组小鼠空间学习和记忆能力有明显改善(P<0.01),大脑中Aβ42表达明显减少。结论姜黄素能降低APPswe/PSEN1dE9双转基因小鼠大脑中Aβ42的表达,进而改善小鼠的学习记忆能力。

右美托咪定对术后认知功能障碍小鼠血浆及海马组织中血小板活化因子含量的影响

目的探讨右美托咪定对术后认知功能障碍（POCD）小鼠血浆及海马组织中血小板活化因子（PAF）含量的影响。方法将30只SPF级C57BL／6J小鼠采用随机数字表法分为3组：假手术组、POCD组和右美托咪定组，每组10只。右美托咪定组小鼠和假手术组、POCD组小鼠分别于术前30min腹腔注射右美托咪定25μg／kg或等体积生理盐水．假手术组小鼠只麻醉而不行部分肝脏切除术，POCD组、右美托咪定组小鼠采取麻醉下行部分肝脏切除术的方法制备POCD模型。于术后第3天采用条件恐惧实验（包含场景恐惧记忆实验、声音提示恐惧记忆实验）对各组小鼠进行行为学测试，记录实验中大鼠僵直时间百分比；测试结束后留取小鼠血液及海马组织，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测PAF含量。结果（1）与假手术组比较，POCD组小鼠在场景恐惧记忆实验中的僵直时间百分比明显降低（57.3％±9．1％ vs.30．0％±5．4％），差异有统计学意义（P〈0．05）。与POCD组比较，右美托咪定组小鼠在场景恐惧记忆实验中的僵直时间百分比明显升高（30．0％±5．4％vs.46．5％±6．6％），差异有统计学意义（R〈0．05）。（2）与假手术组比较，POCD组小鼠血浆和海马组织中PAF含量均明显增高[血浆：（0．5±0．3）ng／mL vs.（22．5±2．2）ng／mL；海马组织：（5．7±1．0）ng／mL vs.（9．8±1．4）ng／mL]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与POCD组比较，右美托咪定组小鼠血浆和海马组织中PAF含量均明显降低[血浆：（22．5±2．2）ng／mL vs.（14．6±1．6）ng／mL；海马组织：（9．8±1．4）ng／mL vs.（7．4±1．2）ng／mL]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论右美托咪定可通过减少血浆和海马组织中PAF含量而改善行部分肝脏切除手术小鼠早期的POCD。

右美托咪定对术后认知功能障碍小鼠海马组织中雷帕霉素靶蛋白信号通路的影响

目的探讨右美托咪定对术后认知功能障碍（POCD）小鼠海马组织中雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的影响。 方法清洁级成年C57BL/6J小鼠64只，采用随机数字表法分为4组：假手术组、POCD组和右美托咪定低剂量组（DEX-L组）及高剂量组（DEX-H组），每组16只。假手术组小鼠只麻醉而不行部分肝脏切除手术；POCD组小鼠采取麻醉下部分肝脏切除手术的方法复制POCD模型；DEX-L组和DEX-H组小鼠于术前30 min腹腔注射右美托咪定25 μg/kg、50 μg/kg，随后复制POCD模型；假手术组和POCD组小鼠均于术前30 min腹腔注射等体积的生理盐水。行为学测试采用条件恐惧实验，分别于术前1 d和术后第3天进行训练和行为学测试，记录僵直时间百分比。酶联免疫吸附法（ELISA）检测术后第3天小鼠脑脊液β淀粉样蛋白42 （Aβ42）和磷酸化tau-181（p-tau-181）蛋白水平。术后第3天留取小鼠海马组织，逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）测定海马组织mTOR、tau、核因子-κB（NF-κB）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α） mRNA表达水平，Western blotting法测定海马组织mTOR、磷酸化tau蛋白（pS396 tau蛋白）、NF-κB p65及TNF-α蛋白表达水平。结果（1）场景性恐惧记忆实验中，与对照组比较，POCD组小鼠僵直时间百分比明显降低，差异有统计学意义（P〈0.05）；与POCD组比较，DEX-L组和DEX-H组小鼠僵直时间百分比均明显升高，差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）与假手术组比较，POCD组、DEX-L组和DEX-H组小鼠脑脊液中Aβ42和p-tau-181蛋白含量均明显增加，差异有统计学意义（P〈0.05）。与POCD组比较，DEX-L组和DEX-H组小鼠脑脊液中Aβ42和p-tau-181蛋白含量均明显减少，差异有统计学意义（P〈0.05）。与DEX-L组比较，DEX-H组小鼠脑脊液中Aβ42和p-tau-181蛋白含量进一步减少，差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）与假手术组比较，POCD组海马组织mTOR、NF-κB p65和TNF-α mRNA及其蛋白表达水平、tau mRNA及pS396 tau蛋白表达水平均明显升高，差异有统计学意义（P〈0.05）。与POCD组比较，DEX-L组和DEX-H组海马组织上述指标明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）。与DEX-L组比较，DEX-H组小鼠上述指标进一步降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论右美托咪定可改善小鼠早期POCD，其机制可能与抑制小鼠海马组织mTOR信号通路有关。