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恒河猴Tetherin蛋白对马传染性贫血病毒抑制作用的研究 被引量:2
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作者 谷勤雍 胡哲 +4 位作者 尹鑫 张泽力 吴星亮 魏萍 王晓钧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期87-90,共4页
Tetherin是新发现的具有限制多种病毒从细胞膜释放功能的细胞蛋白。本研究采用RT-PCR技术从恒河猴巨噬细胞中扩增Tetherin基因,将其插入真核表达载体pEF4/myc-His B中构建重组质粒pHF-Tetherin。并将其转染293T细胞,通过western blot和... Tetherin是新发现的具有限制多种病毒从细胞膜释放功能的细胞蛋白。本研究采用RT-PCR技术从恒河猴巨噬细胞中扩增Tetherin基因,将其插入真核表达载体pEF4/myc-His B中构建重组质粒pHF-Tetherin。并将其转染293T细胞,通过western blot和激光共聚焦分析Tetherin在293T细胞中的表达及亚细胞定位。将pHF-Tetherin分别与马传染性贫血病毒(EIAV)或猴免疫缺陷病毒(SIV)假病毒粒子感染性质粒共转染293T细胞,分析Tetherin对EIAV及SIV出芽的限制作用。研究结果表明,pHF-Tetherin转染293T细胞48 h后可以检测到Tetherin的表达并定位于细胞膜,而且该蛋白具有抑制EIAV及SIV从转染细胞中出芽的生物学功能。 展开更多
关键词 恒河猴tetherin 马传染性贫血病毒 免疫缺陷病毒 病毒出芽
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雌性恒河猴月经周期异常与肠道微生物的相关性研究
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作者 谢明学 赵宸 +7 位作者 颜宇宸 彭正华 李娇春 谭银珍 王学付 张朝武 杨武 赵远 《中国现代医生》 2024年第17期1-6,12,共7页
目的以健康雌性育龄期恒河猴为研究对象,采用16S rRNA宏基因组方法探讨雌性恒河猴月经周期异常与肠道微生物组成的相关性。方法将27只健康雌性恒河猴分为月经规律和不规律两组,分别采集两组实验猴卵泡期(follicular phase,FP)、排卵期(o... 目的以健康雌性育龄期恒河猴为研究对象,采用16S rRNA宏基因组方法探讨雌性恒河猴月经周期异常与肠道微生物组成的相关性。方法将27只健康雌性恒河猴分为月经规律和不规律两组,分别采集两组实验猴卵泡期(follicular phase,FP)、排卵期(ovulatoryperiod,OP)和黄体期(lutealphase,LP)粪便样品,对16SrRNA基因的V3~V4高变区测序,分析比较两组实验猴月经周期肠道菌群结构及多样性。结果在门水平,规律组和不规律组猕猴在卵泡期、黄体期和排卵期3个不同时期均以厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为主要菌群,占比总和超过98%;在属水平以普雷沃菌属_9(Prevotella_9)、瘤胃球菌(Ruminococcaceae_UCG-002)、乳杆菌属(Lactobacillus)、普雷沃菌属_2(Prevotella_2)、考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)、瘤胃球菌_UCG-005(Ruminococcaceae_UCG-005)、链球菌属(Streptococcus)、布劳特菌属(Blautia)、普雷沃菌属_NK3B31(Prevotellaceae_NK3B31_group)、理研菌属(Rikenellaceae_RC9_gut_group)为主;在黄体期规律组厚壁菌门(Firmicutes)占比高于不规律组,而拟杆菌门(Bacteroidetes)刚好相反。规律组3个阶段,螺旋体门(Spirochaetes)均高于不规律组(P<0.05)。结论月经周期规律与月经周期不规律的两组猕猴肠道微生物组成存在一定差异,为研究肠道细菌与排卵障碍提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 恒河 月经周期 肠道微生物 宏基因组
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人源化六基因编辑猪红细胞治疗恒河猴急性失血性休克的疗效观察
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作者 贾志博 崔梦一 +10 位作者 王恺 杜嘉祥 董阳辉 宋翔宇 陈蕾佳 杨博尧 陈胜峰 彭熙为 许文静 潘登科 彭江 《解放军医学院学报》 CAS 2024年第4期397-404,共8页
背景临床上血液制品短缺是一项世界难题,猪红细胞与人类红细胞有诸多相似之处,有望解决这一难题。目的将人源化基因编辑猪(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的红细胞输注至非人灵长类动物恒河猴体内,探讨异种输血的可能性。... 背景临床上血液制品短缺是一项世界难题,猪红细胞与人类红细胞有诸多相似之处,有望解决这一难题。目的将人源化基因编辑猪(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的红细胞输注至非人灵长类动物恒河猴体内,探讨异种输血的可能性。方法采用盐水介质交叉配血法,检测六基因编辑猪红细胞(6GE-pRBC)与恒河猴的血液凝集情况。通过IgG、IgM结合实验和补体介导的细胞毒性实验验证异种输血安全性,从恒河猴体内抽取25%血容量血液后输注等量的异硫氰酸荧光素标记6GE-pRBC,通过流式细胞分析术监测在其体内的存活状态,并定期采集受体血液样本验证异种输血的有效性,观察6GE-pRBC输注治疗失血性休克恒河猴的可能性。结果6GE-pRBC与恒河猴主次侧交叉配血试验均为阴性;其基因表型鉴定符合预期结果;恒河猴血清与6GE-pRBC的IgG、IgM结合实验结果显示IgG(3.35%)、IgM(4.13%)表达量较低;6GE-pRBC的补体介导细胞毒作用(CDC)显著低于野生猪红细胞(P<0.0001)。输血后60 h 6GEpRBC在恒河猴体内仍存活;血细胞比容失血后为28.6%,60 h升高至35%;血红蛋白含量失血后为92 g/L,60 h升高至116 g/L并维持于失血前正常水平。结论6-GE-pRBC输注给恒河猴在一定时间内能有效地纠正恒河猴休克症状,且未发现免疫排斥反应。随着基因编辑技术不断创新,基因编辑猪红细胞有望替代人红细胞治疗人类急性失血性休克。 展开更多
关键词 异种输血 人源化编辑猪 猪红细胞 恒河 免疫排斥反应
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恒河猴肠道寄生虫感染情况调查与控制
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作者 冉艳洪 王俐梅 +3 位作者 颜欣欣 周珊珊 宋慧 杨威 《中国动物检疫》 CAS 2024年第4期11-15,共5页
为了解恒河猴在实验室饲养环境下的肠道寄生虫感染情况,采用直接涂片法和饱和食盐水漂浮法,对采集的66只试验用恒河猴新鲜粪便进行肠道寄生虫检查,并评估了血液学、血液生化学相关指标以及驱虫药物的驱虫效果。结果显示:从66只恒河猴新... 为了解恒河猴在实验室饲养环境下的肠道寄生虫感染情况,采用直接涂片法和饱和食盐水漂浮法,对采集的66只试验用恒河猴新鲜粪便进行肠道寄生虫检查,并评估了血液学、血液生化学相关指标以及驱虫药物的驱虫效果。结果显示:从66只恒河猴新鲜粪便中检出类圆线虫和鞭虫2种肠道蠕虫卵囊,感染率分别是9.1%和12.1%,均为单一感染且感染强度较低;感染类圆线虫或鞭虫恒河猴的血液学指标(WBC、RBC、HGB、MCH、MCHC、HCT、MCV、PLT、PDW、MPV、PCT、LYMPH、MONO、EO、BASO)和肝肾功能指标(ALT、AST、ALP、LDH、TP、BUN、CREA)与健康动物无显著差异(P>0.05);连续使用伊维菌素注射液或阿苯达唑伊维菌素片均能有效驱除感染的类圆线虫或鞭虫。结果说明:恒河猴在实验室饲养环境下,其肠道寄生虫的感染种类较少,感染率和感染强度均较低,对动物健康状况无明显影响,通过良好的饲养管理和完善的药物驱虫程序能实现对猴肠道寄生虫病的有效控制。 展开更多
关键词 恒河 肠道寄生虫 类圆线虫 鞭虫 感染 控制
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猪-恒河猴心脏异种移植的围术期受体感染预防及治疗策略总结与分析
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作者 周晔农 张冰 +9 位作者 陈涛 杨秀玲 金艳 吕向妮 郭红 易蔚 赵荣 段维勋 刘金成 金振晓 《空军军医大学学报》 CAS 2024年第1期26-31,共6页
目的针对2022年开展的基因编辑猪恒河猴心脏异种移植实验,总结并分析围术期受体感染情况及治疗策略,为异种移植围术期感控提供指导。方法以雄性基因编辑(GTKO/β4GalNT2 KO/CMAH KO/hCD55/hCD46/hTBM)猪为供体,以雄性恒河猴为受体,将猪... 目的针对2022年开展的基因编辑猪恒河猴心脏异种移植实验,总结并分析围术期受体感染情况及治疗策略,为异种移植围术期感控提供指导。方法以雄性基因编辑(GTKO/β4GalNT2 KO/CMAH KO/hCD55/hCD46/hTBM)猪为供体,以雄性恒河猴为受体,将猪心脏异位移植入恒河猴腹腔内。围术期给予重症监护,监测感染指标包括体征、血常规、血清炎性因子、胸片以及细菌培养(血液、引流液、分泌物、排泄物),并根据感染指标变化调整抗感染药物的使用。结果受体恒河猴存活且移植心脏维持收缩功能20 d,体温及血常规波动较小,未见高热(>38.5℃)和白细胞升高的情况,术后第9日胸片出现类似感染的斑片状阴影,调整抗生素使用和加强肺部护理后好转,术后炎性指标C反应蛋白和降钙素原均未见明显升高,术后第13日口腔分泌物、腹水、胃液细菌培养溶血葡萄球菌阳性。结论高强度、大剂量使用免疫抑制药物导致异种移植术后受体发生感染概率增加,通过及时的检查检验和治疗调整可以有效控制感染的进展。 展开更多
关键词 异种心脏移植 基因编辑猪 恒河 术后感染
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恒河猴源大肠杆菌的分离鉴定及耐药性和致病性 被引量:2
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作者 徐文星 安微 +8 位作者 王乃福 王绥家 王建华 刘忠梅 晁哲 王昱 高慎阳 李丹丹 徐国锋 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期69-73,共5页
为了查明引起海口市某进境实验动物隔离场3例恒河猴死亡的原因,本试验分别采集3只恒河猴的心脏、肝脏、脾脏、肺脏和淋巴结样本,进行细菌分离,通过细菌形态特征、显微镜镜检、生化鉴定、16S核糖体RNA(16S rRNA)序列分析对分离菌进行病... 为了查明引起海口市某进境实验动物隔离场3例恒河猴死亡的原因,本试验分别采集3只恒河猴的心脏、肝脏、脾脏、肺脏和淋巴结样本,进行细菌分离,通过细菌形态特征、显微镜镜检、生化鉴定、16S核糖体RNA(16S rRNA)序列分析对分离菌进行病原学鉴定;采用纸片扩散法(K-B法)测定分离菌的耐药表型;采用玻片凝集法测定分离菌的血清型;采用动物回归试验分析分离菌的致病性。结果显示,从3只恒河猴上各分离鉴定出1株大肠杆菌,命名为H01株(分离自脾脏)、H02株(分离自淋巴结)和H03株(分离自肝脏);3株大肠杆菌对12种常用抗菌药物产生不同程度耐药,并且都呈现多重耐药,其中对阿莫西林、庆大霉素、氯霉素、氟苯尼考和复方新诺明表现为耐药,仅对阿莫西林-克拉维酸钾、阿米卡星和多黏菌素B表现敏感;玻片凝集试验显示,H01株的血清型为O8,H02株的血清型为O3,H03株的血清型为O9;动物回归试验显示,3株分离菌都是强毒株。本试验为实验动物恒河猴源大肠杆菌病的防治提供参考依据。 展开更多
关键词 恒河 大肠杆菌 分离鉴定 耐药性 血清型 致病性
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0~6月龄人工饲养恒河猴幼猴生长发育指标变化研究
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作者 陈丽雄 靳玮华 +8 位作者 李艳艳 杨凤梅 邓自君 李明学 和占龙 徐鸿界 刘权 赵远 王俊斌 《安徽农业科学》 CAS 2023年第5期64-66,共3页
[目的]研究恒河猴幼猴从出生到6月龄各生长发育指标的变化情况。[方法]统计该单位2020年幼猴的出生情况,选取同年出生的140余只幼猴,跟踪称量从出生到6月龄体重的变化情况,测量头围、坐高、体长、胸围、前肢长、后肢长、尾长的生长情况... [目的]研究恒河猴幼猴从出生到6月龄各生长发育指标的变化情况。[方法]统计该单位2020年幼猴的出生情况,选取同年出生的140余只幼猴,跟踪称量从出生到6月龄体重的变化情况,测量头围、坐高、体长、胸围、前肢长、后肢长、尾长的生长情况,观察牙齿的生长情况。将父母是引进猴或是野外猴的与父母是自繁猴的幼猴进行比较。[结果]幼猴出生后各生长发育指标都呈线性增长关系,0~4月龄雄猴平均体长、坐高、前肢长、后肢长、头围、胸围、尾长高于雌猴。5月龄雄猴平均体长、坐高、前肢长、后肢长、胸围、尾长高于雌猴。6月龄雌猴头围、坐高、尾长高于雄猴。父母是野外猴或引进猴的幼猴与自繁猴的幼猴各生长发育指标间无显著差异。6月龄时20颗乳牙基本长齐。[结论]该研究为人工繁育恒河猴的科学饲养管理和试验研究提供参考依据和数据支持。 展开更多
关键词 0~6月龄 恒河 生长发育
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脊髓灰质炎疫苗脑内法猴体神经毒力试验的神经病理研究
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作者 于品 徐艳峰 +2 位作者 韩云林 赵文杰 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期47-53,共7页
目的 探讨脊髓灰质炎疫苗猴体神经毒力试验毒力返强对神经免疫反应的影响及病理机制。方法Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)的原液(≥7000 lgCCID50/L)以及10-1稀释各型脊髓灰质炎疫苗采用脑内法进行神经毒力试验,... 目的 探讨脊髓灰质炎疫苗猴体神经毒力试验毒力返强对神经免疫反应的影响及病理机制。方法Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)的原液(≥7000 lgCCID50/L)以及10-1稀释各型脊髓灰质炎疫苗采用脑内法进行神经毒力试验,观察脊髓灰质炎的病理变化,并利用免疫组织化学法检测脊髓灰质炎病毒受体CD155以及CD4^(+)T淋巴细胞、CD20^(+)B淋巴细胞和CD68^(+)小胶质细胞的分布。结果 发生脊髓灰质炎的猴体出现脊髓炎症细胞浸润,少量神经元变性,脊髓神经元变性坏死、卫星现象、噬神经细胞现象、血管周围炎症细胞袖套状浸润和胶质细胞增生;主要为CD4^(+)T淋巴细胞、CD20^(+)B淋巴细胞和CD68^(+)小胶质细胞大量浸润在血管袖套和增生的胶质结节中;在发生和未发生脊髓灰质炎的猴体中,CD155分布未见明显差别,均表达在神经元和胶质细胞,而血管内皮细胞未见表达。结论 脊髓灰质炎疫苗毒力返强导致典型病毒性脑脊髓炎。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 疫苗 恒河 神经毒力试验 病理学
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SHIV KU-1感染恒河猴颞叶皮层中IMPDH2的表达
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作者 赵长城 丁华明 +5 位作者 鹿伦山 张千 杨静 董颖 薛群山 庄柯 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期34-40,共7页
目的探讨HIV对大脑颞叶皮层神经元中次黄嘌呤核苷酸脱氢酶II(inosine monophosphate dehydrogenase 2,IMPDH2)蛋白表达的影响。方法应用MoCA分数和磁共振成像手段评估HIV感染者轻度认知障碍情况。利用中国恒河猴SHIV KU-1神经艾滋病模型... 目的探讨HIV对大脑颞叶皮层神经元中次黄嘌呤核苷酸脱氢酶II(inosine monophosphate dehydrogenase 2,IMPDH2)蛋白表达的影响。方法应用MoCA分数和磁共振成像手段评估HIV感染者轻度认知障碍情况。利用中国恒河猴SHIV KU-1神经艾滋病模型,HE染色观察猴颞叶皮层细胞结构的变化;采用免疫组化方法和Western blot方法检测IMPDH2在猴颞叶皮层神经元内的表达;以及借助在线数据库预测IMPDH2相关信号通路的关键信号分子。结果HIV感染者颞叶皮质较健康对照萎缩。与健康对照相比,SHIV KU-1感染恒河猴颞叶皮层神经元中IMPDH2蛋白表达显著降低(P<0.0001)。HNRNPA1等8个基因与IMPDH2有潜在的相互作用。结论IMPDH2在HIV患者颞叶皮层神经元中的表达下调,其可能参与了HIV相关神经认知障碍发生。 展开更多
关键词 HIV相关神经认知障碍 IMPDH2 颞叶皮层 SHIV KU-1感染 恒河
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基因编辑“猪-恒河猴”异位心脏异种移植的围术期治疗及管理经验 被引量:2
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作者 张冰 姬鹏飞 +12 位作者 彭岚刚 翟蒙恩 唐嘉佑 赵琳 金艳 徐宝玲 吕向妮 卢林鹤 金振晓 段维勋 杨秀玲 易蔚 刘金成 《中国体外循环杂志》 2023年第4期232-236,共5页
目的总结异种异位心脏移植动物实验的经验,旨在为成功转化基因编辑猪心脏异种移植临床应用积累研究基础。方法2022年10月在1只恒河猴的腹腔内完成了异位猪心脏移植。“猪-恒河猴”异位心脏异种移植实验从多个方面对受体进行精细化管理,... 目的总结异种异位心脏移植动物实验的经验,旨在为成功转化基因编辑猪心脏异种移植临床应用积累研究基础。方法2022年10月在1只恒河猴的腹腔内完成了异位猪心脏移植。“猪-恒河猴”异位心脏异种移植实验从多个方面对受体进行精细化管理,围术期针对免疫排斥和凝血功能障碍,维持供体心脏功能,延长受体生存时间,尽可能保证其生存和生活质量。结果受者存活20天,死于凝血功能障碍。结论为了克服免疫排斥、跨物种感染、凝血功能障碍等致命障碍,仍需要大量的临床前动物实验。 展开更多
关键词 异种心脏移植 基因编辑猪 恒河 免疫排斥反应
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针刺对雌性恒河猴生殖内分泌抑制性影响的研究 被引量:16
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作者 李沛 黄攸玉 +3 位作者 王训立 李志雄 范春梅 黄秀兰 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 1999年第8期486-488,共3页
选用雌性恒河猴19只,随机分组,实验组10只,自身对照组6只,空白对照组3只。采用针刺方法,观察针刺对恒河猴FSH、LH、E2、T、P分泌水平的影响。结果表明,针刺在垂体和卵巢水平上同时对雌性恒河猴的生殖内分泌产生抑... 选用雌性恒河猴19只,随机分组,实验组10只,自身对照组6只,空白对照组3只。采用针刺方法,观察针刺对恒河猴FSH、LH、E2、T、P分泌水平的影响。结果表明,针刺在垂体和卵巢水平上同时对雌性恒河猴的生殖内分泌产生抑制性效应,其作用机理,有待进一步观察。 展开更多
关键词 生殖器 雌性 恒河 针灸效应 FSH 分泌 雌二醇
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以恒河猴为模型的DNA疫苗的免疫保护作用研究 被引量:13
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作者 钟辉 曹诚 +3 位作者 李平 张艳红 时运林 马清钧 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第11期966-971,共6页
研究了以霍乱毒素B亚基(CTB)为载体的重组疟疾多价抗原(AWTE)表位的DNA疫 苗在恒河猴中的免疫原性及对相应疟原虫感染的免疫保护作用。结果表明:DNA疫苗组免疫 2次后即产生了较高水平的细胞免疫和体液免疫,免疫后... 研究了以霍乱毒素B亚基(CTB)为载体的重组疟疾多价抗原(AWTE)表位的DNA疫 苗在恒河猴中的免疫原性及对相应疟原虫感染的免疫保护作用。结果表明:DNA疫苗组免疫 2次后即产生了较高水平的细胞免疫和体液免疫,免疫后91天用 1.25 ×108个食蟹疟原虫攻 击,对照组5只动物在攻击后14天左右全部感染,感染持续34天以上;DNA疫苗组的5只动 物一直到攻击后60天,没有感染。另外,还检测了免疫后不同时间各组的免疫应答水平,与对 照组相比,DNA疫苗组免疫2次后即产生了较高水平的细胞免疫和体液免疫。从实验结果来 看,首先说明了选择的这种鸡尾酒式的抗原表位组合构建的DNA疫苗具有很好的免疫原性, 同时也说明了DNA疫苗在抗疟感染中起着举足轻重的作用。 展开更多
关键词 DNA疫苗 恒河 疟疾 免疫保护作用 CTB
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大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒ORF2多肽对恒河猴的免疫保护研究 被引量:22
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作者 葛胜祥 张军 +3 位作者 黄果勇 逄淑强 周开姣 夏宁邵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期35-42,共8页
在大肠杆菌中表达的一段戊型肝炎病毒 (HEV)结构蛋白NE2 ,纯化后以弗氏佐剂 ,按0d ,1 0d ,30d的方案 1 0 μg 针的剂量免疫 3只恒河猴 ,在第 2周抗体阳转 ,第 6周时 1只滴度达 1∶1 0 0 0 0 0 ,另 2只滴度 1∶2 0 0 0 0 ,此时以 1 0 6PC... 在大肠杆菌中表达的一段戊型肝炎病毒 (HEV)结构蛋白NE2 ,纯化后以弗氏佐剂 ,按0d ,1 0d ,30d的方案 1 0 μg 针的剂量免疫 3只恒河猴 ,在第 2周抗体阳转 ,第 6周时 1只滴度达 1∶1 0 0 0 0 0 ,另 2只滴度 1∶2 0 0 0 0 ,此时以 1 0 6PCR滴度的HEV病毒粪悬液攻击。对照组 3只均出现血清转氨酶 (ALT)升高 ,抗体阳转 ,粪便持续排毒 1月以上 ;疫苗组无一发病 ,未检出非疫苗来源的抗体 ,其中 1只始终未检出粪便排毒 ,另 2只仅出现短暂排毒。以一份NE2免疫后猴血清 (滴度 1∶2 0 0 0 0 )与 1 0 3PCR滴度的病毒混匀后感染 2只恒河猴 ,结果对照组 2只均持续排毒 3周以上 ,抗体阳转 ,1只ALT明显升高 ;而抗体中和组 2只猴始终未检出粪便排毒 ,抗NE2抗体缓慢下降 ,ALT正常。这些结果表明NE2具有良好的免疫原性和免疫保护性 ,有可能成为有效的戊肝疫苗。 展开更多
关键词 大肠杆菌 基因表达 戊型肝炎病毒 ORF2多肽 恒河 免疫保护
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Hoechst33342、BrdU和GFP示踪恒河猴皮肤干细胞的实验研究 被引量:10
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作者 卢蓉 张新春 +5 位作者 黄丹平 宋革 黄冰 高楠 王智崇 葛坚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1842-1844,共3页
目的:通过采用Hoechst33342、5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)和绿色荧光蛋白(GFP)3种不同的方法标记恒河猴皮肤干细胞,探索最有效、便利的干细胞示踪方法。方法:体外培养纯化恒河猴皮肤干细胞后,分别用Hoechst33342、BrdU以及GFP基因转染3种... 目的:通过采用Hoechst33342、5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)和绿色荧光蛋白(GFP)3种不同的方法标记恒河猴皮肤干细胞,探索最有效、便利的干细胞示踪方法。方法:体外培养纯化恒河猴皮肤干细胞后,分别用Hoechst33342、BrdU以及GFP基因转染3种方法标记皮肤干细胞。Hoechst33342和GFP标记皮肤干细胞直接通过荧光显微镜进行鉴定,BrdU标记后的细胞通过细胞免疫化学鉴定,均用流式细胞仪检测标记率。对绿色荧光蛋白标记的干细胞利用显微注射仪挑选阳性细胞进行纯化。结果:3种标记方法对细胞均未显示明显毒性。其中,Hoechst33342的标记率最高(100%),但随时间延长荧光有衰减;BrdU标记细胞较稳定,实验期间细胞内BrdU无明显减少,标记率较高(75.81%);GFP标记最稳定,但标记率低(7.5%),显微注射仪挑选阳性细胞,阳性率高,无明显细胞损伤。结论:GFP基因转染皮肤干细胞,是一种明确、有效的标记细胞的方法,对成体干细胞的示踪有重要意义,用显微注射仪挑选细胞阳性率高,细胞损伤小,利于进一步实验。 展开更多
关键词 恒河 干细胞 实验方法
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颌间Ⅲ类矫形力对青春期恒河猴颞下颌关节改建作用的影像学研究 被引量:20
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作者 李煌 徐芸 +2 位作者 李松 尹康 吴拓江 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期463-466,共4页
目的 评价颌间Ⅲ类矫形力对颞下颌关节的作用及影响。方法 选用青春生长发育期雌性恒河猴 6只 ,分为 3月、6月实验组和对照组。实验组戴用Ⅲ类双阻板磁力矫治器 ,对照组不戴。实验前后拍摄X线头颅侧位片和CT断层扫描片 ,采用计算机头... 目的 评价颌间Ⅲ类矫形力对颞下颌关节的作用及影响。方法 选用青春生长发育期雌性恒河猴 6只 ,分为 3月、6月实验组和对照组。实验组戴用Ⅲ类双阻板磁力矫治器 ,对照组不戴。实验前后拍摄X线头颅侧位片和CT断层扫描片 ,采用计算机头影测量系统进行X线测量分析 ;电子游标卡尺、图像分析系统对颞下颌关节间隙进行测量并行统计学处理。结果 ①头影测量表明 ,与对照组相比 ,实验组位发生改变 ,上颌骨呈生长加快趋势 ,下颌骨呈生长减慢趋势 ,下颌骨长度未见变短。②CT片测量表明 ,实验组与对照组相比关节后间隙减小 ,前间隙增大 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1) ;但两实验组间差异无统计学意义。结论 在颌间Ⅲ类矫形力作用下 ,实验组位发生改变 ,上颌生长加快下颌生长减慢 ;颞下颌关节间隙发生改变 ,关节前间隙增大 ,后间隙减小。 展开更多
关键词 颌间Ⅲ类矫形力 青春期 恒河 颞下颌关节 改建作用 影像学 矫形力
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大肠杆菌重组颗粒性戊型肝炎疫苗对恒河猴的免疫保护 被引量:7
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作者 张军 李益民 +7 位作者 李少伟 欧山海 黄果勇 何志强 葛胜祥 鲜阳凌 逄淑强 夏宁邵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-6,共6页
大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒 (HEV)衣壳蛋白ORF2片段HEV 2 39重组蛋白颗粒 ,经铝佐剂吸附后 ,分别以5 μg、1 0 μg和 2 0 μg剂量免疫恒河猴 ,2 8天时以相同剂量加强免疫 1次 ,3周后分别以不同病毒滴度的基因Ⅰ型或基因Ⅳ型HEV静脉攻... 大肠杆菌表达的戊型肝炎病毒 (HEV)衣壳蛋白ORF2片段HEV 2 39重组蛋白颗粒 ,经铝佐剂吸附后 ,分别以5 μg、1 0 μg和 2 0 μg剂量免疫恒河猴 ,2 8天时以相同剂量加强免疫 1次 ,3周后分别以不同病毒滴度的基因Ⅰ型或基因Ⅳ型HEV静脉攻击。结果 ,加强后 3周 ,3个免疫剂量组猴的抗体几何平均滴度分别为 1∶2 71 75、1∶344 0 9、1∶4 16 0 7,以世界卫生组织参比血清定量 ,则分别为 1 0 98IU/ml,1 35 7IU/ml、1 72 4IU/ml。每个剂量免疫组及对照组各有 3只猴接受 1 0 7病毒滴度基因Ⅰ型HEV感染 ,对照组 3只猴均被成功感染 ,2只出现肝炎 ;2 0 μg免疫组 3只猴均未被感染 ;1 0 μg和 5 μg免疫组各有 2只猴未被感染 ,另 1只猴出现短暂感染 ,免疫猴均未出现肝炎。 3个剂量免疫组及对照组另外 3只猴 ,接受 1 0 4病毒滴度基因Ⅰ型HEV感染 ,对照组 3只猴均被感染 ,1只出现肝炎 ;而免疫猴均未被感染 ,也未出现肝炎。 3只 1 0 μg免疫猴和 3只对照猴分别接受 1 0 7病毒滴度基因Ⅳ型HEV感染 ,对照组均被感染并出现肝炎 ,而免疫组均未出现肝炎 ,有 2只未被感染 ,另 1只被短暂感染。另有 3只 1 0 μg免疫猴和 3只对照猴分别接受 1 0 4病毒滴度基因Ⅳ型HEV感染 ,对照组均被感染 ,而免疫组均未被感染。这些结果表明 展开更多
关键词 戊型肝炎 疫苗 原核表达 恒河 保护率
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人工饲养条件下恒河猴血液学、血液生化正常参考值测定及分析 被引量:29
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作者 代解杰 唐东红 +4 位作者 鲁帅尧 匡德宣 杨帆 程树军 黄韧 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2000年第4期224-230,共7页
目的测定人工饲养条件下104只健康恒河猴的血液学、血液生化正常参考值,并分析不同性别、不同年龄阶段(青幼年组: 3~4岁,成年组: 5~ 10岁,老年组: 11~25岁)恒河猴的血液学、血液生化值的差异及相互关系。方法应... 目的测定人工饲养条件下104只健康恒河猴的血液学、血液生化正常参考值,并分析不同性别、不同年龄阶段(青幼年组: 3~4岁,成年组: 5~ 10岁,老年组: 11~25岁)恒河猴的血液学、血液生化值的差异及相互关系。方法应用全自动血液细胞分析仪和全自动血液生化分析仪,测定及分析非麻醉状态下健康恒河猴血液学和血液生化正常值。结果血液学值中较明显低(P<0.05)的项目为MED。血液生化值中■猴比■猴明显低(P<0.01)的项目有ALT、ALP、GGT、CHOL、APOA、HDL、LDL、P3+、BUN,较明显低(P<0.05)的项目为ALB。较明显高(P<0.05的项目为UA。各年龄组之间的分析如下:血液学值中RDW值为青幼年组比成年组及老年组均明显低(P<0.01),MEDIAN值为成年组比青幼年组较明显高(P<0.05),血液生化值中青幼年组比成年组及老年组均明显高(P<0.01)的项目有ALT、ALP、GGT、P3+,青幼年组比成年组明显高(P<0.01)的项目为BUN、ALP、AST、,青幼年组比老年组明显高(P<0.01)的项目为CK、TF;成年组比老年组明显低(P<0.01)的项目为CREAT,较明显低? 展开更多
关键词 血液学 幼年 老年 恒河 血液生化值 成年 正常参考值 人工饲养条件 ALP TF
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不同年龄实验恒河猴自然死亡的肝脏病变谱分析 被引量:8
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作者 赵玺龙 李学锋 +4 位作者 陈玥 宋蜀伶 李锋 蔡琳 杨举伦 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第3期228-232,279,共6页
目的观察人工饲养条件下实验恒河猴肝脏病理改变,探讨肝脏疾病分布规律和病理改变特点,丰富实验猴自发病变基本研究资料。方法对1998~2008年云南地区饲养的自然死亡的155只恒河猴(年龄2~20岁)的肝脏进行病理检查,按年龄分为幼年组、... 目的观察人工饲养条件下实验恒河猴肝脏病理改变,探讨肝脏疾病分布规律和病理改变特点,丰富实验猴自发病变基本研究资料。方法对1998~2008年云南地区饲养的自然死亡的155只恒河猴(年龄2~20岁)的肝脏进行病理检查,按年龄分为幼年组、成年组、老年组,并对观察结果进行统计学分析。结果 155例恒河猴中88例检出肝脏病变,有肝细胞变性、肝细胞坏死、炎细胞浸润、吞噬细胞增生、肝淤血、纤维组织增生、肝脓肿、寄生虫共八种主要病变,出现率最高的为肝细胞水样变性(34.19%)。除肝脓肿外,幼年组、成年组、老年组八种病变均有检出。卡方检验显示:肝细胞水样变性成年组病变率明显高于幼年组;肝细胞脂肪变性老年组明显高于成年组和幼年组;轻度炎细胞浸润病变老年组明显高于成年组;纤维组织增生老年组明显高于幼年组(P<0.05)。结论人工饲养条件下死亡实验猴肝脏病变检出率较高,实验猴肝脏病理改变随年龄增长而病变加重,提示在进行实验猴肝脏研究时,应注意对自发性病变的判别,药物安全性评价实验应避免选择老年猴做为研究对象。死亡实验猴肝脏病变谱研究,对实验猴的质量控制和相关动物实验有重要指导价值。 展开更多
关键词 恒河 肝脏 病理 尸检
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rhIL-12对恒河猴造血系统辐射防护作用的初步研究 被引量:12
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作者 熊国林 赵毅 +10 位作者 邢爽 申星 宁学成 卢世香 李建 郭玲玲 郝锐 陈廷超 缪锦来 贺济琛 罗庆良 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期150-154,共5页
本研究旨在初步观察重组人白介素-12(rhIL-12)对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12(0、1、5、25、125和625 ng/ml)对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞... 本研究旨在初步观察重组人白介素-12(rhIL-12)对急性辐射损伤猴造血系统的防护和治疗作用,为同类型病人的临床救治提供实验依据。在体外实验中,观察了不同浓度rhIL-12(0、1、5、25、125和625 ng/ml)对来自人和健康成年猴骨髓造血祖细胞集落形成能力的影响。在体内实验中,用11只经3.0 Gy全身照射后90 d活存猴再经致死剂量60Coγ(6.0 Gy)射线全身1次照射以建立重度骨髓型急性放射病动物模型。模型动物被随机分为照射对照组(n=4)、单次给药组(n=3)和分次给药组(n=4)。单次给药组于照射后2 h皮下注射rhIL-12 4μg/kg,分次给药组分别于照射后2 h和3、6、9 d皮下注射rhIL-12 1μg/kg,对照组于皮下注射同样体积的PBS。观察照射后动物活存情况和外周血象变化。体外培养结果显示,不同浓度rhIL-12可明显促进正常猴和人骨髓单个核细胞形成各系造血祖细胞集落,特别是CFU-E和CFU-GM最为明显。照射对照组动物于照射后22 d内全部死亡,死亡动物平均活存时间为(20.3±1.2)d;rhIL-12单次给药组3只动物全部存活,rhIL-12分次给药组1只动物于照射后17 d因贫血死亡。与对照组比较,rhIL-12治疗能明显提高动物存活(P=0.018),并促进外周血白细胞数、血红蛋白水平、血小板以及网织红细胞数的恢复(P<0.05)。结论:rhIL-12可明显促进灵长类骨髓造血祖细胞体外集落形成,并明显促进重度骨髓型急性放射病猴的造血功能恢复,提高动物存活率。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素-12 辐射损伤 急性放射病 恒河
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中国不同地域恒河猴MHC-Ⅰ型部分等位基因的调查 被引量:9
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作者 万玉玲 季芳 +1 位作者 饶军华 刘晓明 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期1-5,共5页
采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)分型方法对在华南灵长类动物研究中心繁殖的247只中国恒河猴(Macaca mulatta)(其中30只来源于广西、34只来源于海南,183只来源于川西、安徽等内陆地区杂交群)的Mamu-A01、A02、A08、B01和NA7... 采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)分型方法对在华南灵长类动物研究中心繁殖的247只中国恒河猴(Macaca mulatta)(其中30只来源于广西、34只来源于海南,183只来源于川西、安徽等内陆地区杂交群)的Mamu-A01、A02、A08、B01和NA7等5个MHC-Ⅰ型分子位点进行检测。结果显示,A01、A02发现于海南群和杂交群,阳性率均小于8.8%;A08发现于杂交群中,阳性率小于3.8%;B01发现于广西群和杂交群,阳性率均大于17.48%;NA7在3个猴群中均有发现,阳性率均大于32.4%。中国不同地域恒河猴群体携带的5个MHC-Ⅰ型等位基因的频率存在明显差异,通过与印度的恒河猴比较,中国恒河猴与印度恒河猴携带的MHC-Ⅰ等位基因也存在显著的差异。 展开更多
关键词 Mamu-Ⅰ型 中国 恒河 PCR—SSP
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