简易灭菌和恒温方法

简易灭菌和恒温方法当阳市高级中学（４４４１００）吴宏琼一、简易灭菌设备用砖砌一煤灶，上面固定一个割去顶盖的旧铁油桶，在桶底放几个空罐头瓶以支撑蒸格，蒸格由铁网或木条拼成，然后加水至不浸没蒸格为度。在蒸格上分层竖放待灭菌的菌筒，装满后顶部用双层薄膜中间...

施马伦贝格病毒实时荧光RT-RAA快检方法的建立

旨在建立一种快速检测施马伦贝格病毒(SBV)的方法。本研究对于SBV S基因,设计特异性引物和探针,通过优化反应条件,建立SBV反转录重组酶介导核酸恒温扩增(RT-RAA)检测方法。结果显示,该方法在38℃条件下,8 min内即可特异性检出SBV,与口蹄疫病毒(FMDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、非洲马瘟病毒(AHSV)、塞内卡谷病毒(SVV)、水疱性口炎病毒(VSV)无交叉反应,其敏感性为103拷贝/反应,且批内和批间重复性变异系数均小于5%。对模拟阳性和阴性绵羊样品的检出率为100%,与SBV的RT-qPCR检测结果一致。本研究成功建立了一种快速、敏感、特异的SBV实时荧光RT-RAA方法,为SBV防控提供新技术手段。

牛传染性鼻气管炎病毒恒温隔绝式荧光PCR检测方法的建立

为建立检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的恒温隔绝式荧光PCR(iiPCR)方法,本研究采用文献报道的引物和探针,通过优化反应体系,首次建立了检测IBRV核酸的iiPCR方法。结果显示该方法仅特异性检测出IBRV,而对牛病毒性腹泻-黏膜病病毒、牛副流感3型病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛腺病毒3型、牛冠状病毒、牛支原体、多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌等病原则不能检出。该方法的检测下限为2.4拷贝/μL质粒标准品,并具有良好的重复性。对临床样品的检测结果与OIE推荐的荧光定量PCR方法的检测结果一致;该方法配合PetNAD核酸萃取试剂盒,从核酸提取到报告检测结果仅需1h,具有操作简便、快速、可现地化的特点。对9个省29份商品化冻精检测结果显示,IBRV阳性率为24%(7/29),表明我国流通的商品化冻精携带IBRV情况普遍。本研究为IBRV的现地检测提供了一个可靠的方法。

解旋酶恒温基因扩增方法快速检测酸乳中醋化醋杆菌

目的建立解旋酶恒温基因扩增方法(helicase-dependent isothermal DNA amplification,HDA)快速检测酸乳中醋化醋杆菌的分析方法。方法以醋化醋杆菌的16S-23S rRNA ITS序列为目的基因,设计一对特异性引物,优化反应条件UvrD helicase、T4 gp32的浓度,通过解旋酶恒温基因扩增方法直接检测酸乳中醋化醋杆菌,扩增产物通过电泳进行检测。结果 HDA法检测酸乳中醋化醋杆菌的特异性强,实验涉及的其他菌株均未发生扩增,只有醋化醋杆菌得到与设计序列长度一致的197 bp基因片段,方法检出限为3.6×10~1 CFU/g,实验条件优化后T4 gp32、UvrD helicase的终含量分别为4.0、0.15μg。结论该方法灵敏度较高,时间较短,为酸乳中醋化醋杆菌的检测提供了新的思路,同时也为其他食品污染菌的快速检测提供了借鉴意义。

燃气烤炉均温和恒温控制方法分析

文章对燃气烤炉的炉腔均温性和恒温性问题进行了深入研究,以解决目前燃气烤炉均温性和恒温性存在问题解决方法进行介绍,其中包含:炉腔分火板分布、分火板角度、分火板零件本身的结构、燃烧器与烤架间距、增加鼓风装置、无极电磁控制阀,最后分析新材料应用对均温性改善。希望能通过此次研究分析能够对燃气烤炉均温性和恒温性改进有一定的促进作用。

基于ARM的热式空气流量计的设计

针对传统空气流量计在测量汽车发动机进气量时存在精度低、响应慢等缺点,设计了一种基于ARM的热式空气流量计。系统基于恒温差的测量方法,当空气流经加热电阻时,利用加热电路维持加热电阻与环境温度的恒定温差,通过加热电阻上电流变化引起的电压变化来计算得到空气流量信号。实验结果表明,该流量计具有响应速度快、测量范围大、测量精度高等优点,综合测量误差小于1%,流量计的精度满足发动机的要求。

LAMP法在阪崎肠杆菌快速检测中的应用

针对阪崎肠杆菌的ompA基因设计4条特异性引物(2条内引物、2条外引物),建立一种快速检测阪崎肠杆菌的DNA环介导恒温扩增法(LAMP)。通过对2株阪崎肠杆菌标准菌株、24株阪崎肠杆菌分离株和18株非阪崎肠杆菌测试,结果表明此方法具有很高的特异性;对其灵敏度进行检验,发现该方法的最低检测限可以达到8CFU/mL,具有较好的敏感性。在1份实验室能力验证盲样和26份实际奶粉样品中应用发现,该方法与传统生化方法结果吻合,具有较好的可靠性。

加速试验法的研究进展

综述了加速试验法的研究进展。

新型远红外线烧伤烤架的制作

烧伤湿性医疗技术是治疗大面积烧伤的主要技术。治疗大面积烧伤患者多采用暴露疗法,为了使创面保持有效的温度,目前使用自制简易烧伤烤架,在应用过程中发现偶有灯泡爆炸伤或灼伤患者皮肤,需佩戴眼罩等防护用品,患者容易发生触电事故,医护人员操作不便等情况,为此,需对烧伤烤架进行改造。

食品中单增李斯特菌环介导等温扩增检测技术

目的:建立一种快速、简单地检测食品中单增李斯特菌的环介导恒温基因扩增方法(loop-mediated isother-mal amplification,LAMP),并初步建立荧光定量LAMP检测单增李斯特菌的方法。方法:根据LAMP方法的原理,设计LAMP检测引物,建立LAMP检测方法,同时对方法的特异性、灵敏度、重复性及初始拷贝数的对数值与反应时间之间的线性关系进行评估。结果:使用LAMP引物可以在0.5h内完成检测工作;LAMP检测技术的灵敏度高出聚合酶链式反应检测技术100倍以上,检出限达到1.72×101拷贝/反应,与其他食源性致病菌无交叉反应,平均实验间变异系数小于5%;反应时间与初始模板浓度的常用对数值有良好的线性关系(R2=0.9994)。结论:本方法具有快速、灵敏、特异、操作简单、设备要求低的特点,具有广阔的应用前景。

HDA法用于检测肉中金黄色葡萄球菌的研究

本文研究了猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌的依赖解旋酶恒温基因扩增检测方法(HDA法),以金黄色葡萄球菌耐热核酸酶nuc基因为目的基因,设计一对特异性引物,优化反应条件UvrD helicase、T4 gp32的浓度,通过赖解旋酶恒温基因扩增方法直接检测猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌,扩增产物通过电泳进行检测。结果表明,HDA法检测肉中金黄色葡萄球菌的特异性强,试验涉及的其它菌株未发生扩增,只有金黄色葡萄球菌得到与设计序列长度一致的216 bp基因片段,检出限为101CFU/g,优化确定UvrD helicase、T4 gp32的终浓度分别为0.1μg、5.0μg,该方法用于检测猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌的灵敏度高,耗时短,为猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉中金黄色葡萄球菌的快速检测提供了新的方法,也为其它食品中金黄色葡萄球菌的快速检测奠定了基础。

0.15%盐酸苯乃辛水溶液稳定性预测

本文用经典恒温加速试验法,对不同pH条件下0.15%盐酸苯乃辛水溶液进行稳定性预测,其含量随加热时间的变化规律符合一级动力学方程,由Arrhenius方程推算出常低温下的分解速度常数,实验证明,pH2稳定性最好,25℃t0.9(贮存期)为2.4年,5℃为38.9年.

温控医用灌注泵温度控制系统的设计

在手术中,医生需用温度适宜的无菌生理盐水进行创伤清洗。为了实现手术过程中常温冲洗液的迅速加温,设计了温控医用灌注泵。本文主要研究了温控医用灌注泵在待机模式和冲洗模式下两种不同的温度控制方法。待机模式时,系统采用传统比例-积分-微分(PID)控制算法;冲洗模式时,系统动态特性实时变化,恒温控制过程复杂,温度控制主要通过拟合控制函数结合PID控制算法实现。根据冲洗液的初始温度和流量实时调节温度控制参数,以实现冲洗液在不同初始温度、不同流速下的恒定温度输出。实验表明该控制系统效果良好,精度较高。