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多发性骨髓瘤恶性相关基因快速表达克隆法的建立 被引量:1
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作者 田菁燕 胡维新 钟慧 《生命科学研究》 CAS CSCD 2003年第1期42-47,共6页
为从多发性骨髓瘤细胞中克隆与鉴定恶性相关基因并试图阐明其发病分子机制,建立了一种改进的快速表达克隆法,简单、快捷、直接从多发性骨髓瘤细胞株ARH 77cDNA文库中克隆恶性相关基因.其特点是常用的表达克隆法与经典的DNA介导的NIH 3T... 为从多发性骨髓瘤细胞中克隆与鉴定恶性相关基因并试图阐明其发病分子机制,建立了一种改进的快速表达克隆法,简单、快捷、直接从多发性骨髓瘤细胞株ARH 77cDNA文库中克隆恶性相关基因.其特点是常用的表达克隆法与经典的DNA介导的NIH 3T3转染实验相结合,直接从cDNA表达文库中克隆恶性相关基因.首先建立高质量的cDNA表达文库,将cDNA表达文库分成几个基因池,转染NIH 3T3细胞;将转化活性最强的基因池再分成几个亚基因池,转染NIH 3T3细胞;将转化活性最强的亚基因池再分成次级亚基因池,直到获得有明显转化活性的单个cDNA克隆.该技术亦可用于从其他肿瘤细胞中克隆恶性相关基因. 展开更多
关键词 基因克隆 表达克隆法 恶性相关基因 多发性骨髓瘤
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cDNA代表性差异分析法筛选二羟环氧苯并芘致癌相关基因片段
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作者 蒋义国 陈家堃 +2 位作者 陈学敏 易菲 冯苏妹 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1175-1177,共3页
目的 采用cDNA代表性差异分析法 ,分离二羟环氧苯并芘诱导恶性转化的细胞与对照组细胞之间的差异表达基因。方法 先从细胞中提取mRNA并合成双链cDNA ,双链DNA以Sau3AI内切酶消化 ,连接接头并经PCR扩增。以BPDE诱导恶变细胞的cDNA为“... 目的 采用cDNA代表性差异分析法 ,分离二羟环氧苯并芘诱导恶性转化的细胞与对照组细胞之间的差异表达基因。方法 先从细胞中提取mRNA并合成双链cDNA ,双链DNA以Sau3AI内切酶消化 ,连接接头并经PCR扩增。以BPDE诱导恶变细胞的cDNA为“检测子”、以对照组细胞cDNA为“驱赶子”进行消减杂交。结果 经 3轮消减杂交后分离出 5个cDNA片段 ,在琼脂糖凝胶上清晰显示 2 10bp以下的 5条条带 ,这些片段分别与总RNA作Northern印迹杂交证实它们均来自BPDE诱变的细胞。结论 cDNA代表性差异分析法是筛选化学致癌相关基因的有效。 展开更多
关键词 cDNA代表性差异分析 恶性转化相关基因 二羟环氧苯并芘
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人脑星形细胞瘤组织中NF-κB的DNA结合活性
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作者 郭春宝 陈峰 高宗炜 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1207-1209,共3页
背景与目的:人类肿瘤细胞的转录因子可在转录水平调控许多恶性相关基因的表达,与肿瘤细胞的低分化和高转移有关,并抑制肿瘤细胞凋亡。本研究旨在观察人脑星形细胞瘤组织中核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)的DNA结合活性,探讨其... 背景与目的:人类肿瘤细胞的转录因子可在转录水平调控许多恶性相关基因的表达,与肿瘤细胞的低分化和高转移有关,并抑制肿瘤细胞凋亡。本研究旨在观察人脑星形细胞瘤组织中核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)的DNA结合活性,探讨其在人脑星形细胞瘤发生和发展中的意义。方法:采用电泳迁移率(electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)同位素放射自显影方法分别检测12例正常脑组织及37例人脑星形细胞瘤组织中NF-κB的DNA结合活性。结果:NF-κB的DNA结合活性在人脑星形细胞瘤组织光密度值为134.2±24.1,高于正常脑组织的97.5±1.9(P<0.05),其中多形胶质母细胞瘤(Ⅳ级)NF-κB的DNA结合活性最高,为106.8±7.4,依次为间变性星形细胞瘤(Ⅲ级)123.2±10.1,星形母细胞瘤(Ⅱ级)139.3±16.8,星形细胞瘤(Ⅰ级)160.2±18.6(P<0.05)。结论:NF-κB的DNA结合活性与人脑星形细胞瘤分级有关,并随恶性程度增加而增强。 展开更多
关键词 DNA结合活性 人脑星形细胞瘤 NF-ΚB 瘤组织 瘤细胞 正常 脑组织 转录水平 恶性相关基因 变性
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乳腺癌高危人群筛查或有新帮手
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《浙江中西医结合杂志》 2011年第12期877-877,共1页
复旦大学附属肿瘤医院邵志敏等发现了一种乳腺癌干细胞相关小RNA,及其与肿瘤恶性转化相关基因在乳腺癌遗传易感性中的关键作用,从而为临床寻找乳腺癌高危女性提供了参考。
关键词 乳腺癌干细胞 高危人群筛查 恶性转化相关基因 附属肿瘤医院 遗传易感性 小RNA 复旦大学 高危女性
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Expression of telomerase gene and apoptosis related genes in benign and malignant breast lesion
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作者 Mengquan Li Jingruo Li Jing Su Jianzhang Li Jiangtao Li 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2007年第4期361-364,共4页
Objective:To analyse the expression of telomerase and apoptosis related protein,and explore the possible mechanism of breast cancer development.Methods:Immunohistochemistry method(SP)was used to detect the expression ... Objective:To analyse the expression of telomerase and apoptosis related protein,and explore the possible mechanism of breast cancer development.Methods:Immunohistochemistry method(SP)was used to detect the expression of hTERT,p53 and bcl-2 in the tissues of 48 cases of human breast cancer and 42 cases of benign lesions in breast.Results: The positive rates of expression of hTERT,p53 and bcl-2 in breast cancer were 87.50%,56.25%and 54.17%,respectively. Compared with the groups of adjacent noncancerous and benign lesions,there was a significant difference among three types of tissues(P<0.05).The positive rates of expression of p53 and bcl-2 in the group with positive expression of hTERT were 64.28%and 61.90%,respectively,and their difference was significant compared with the negative group(P<0.05). Conclusion:There is a correlation between the activation of telomerases and p53 gene mutation in the development of breast cancer,and they are perhaps relation to the down regulation of bcl-2. 展开更多
关键词 TELOMERASE apoptosis related protein breast cancer
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