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恶性胸/腹水肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)体外选择性CD8+T细胞扩增的培养体系建立及功能表型分析 被引量:2
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作者 刘佳梦 毛朝明 +1 位作者 叶飞 袁啸 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期311-317,共7页
目的探讨体外恶性胸/腹水中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)大量培养扩增方法并初步研究其分子表型及功能特征.方法无菌操作条件下抽取恶性肿瘤患者胸/腹水,密度梯度离心法分离淋巴细胞,采用γ干扰素(IFN-γ)、抗CD3多克隆抗体OKT3和白细胞介素2(... 目的探讨体外恶性胸/腹水中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)大量培养扩增方法并初步研究其分子表型及功能特征.方法无菌操作条件下抽取恶性肿瘤患者胸/腹水,密度梯度离心法分离淋巴细胞,采用γ干扰素(IFN-γ)、抗CD3多克隆抗体OKT3和白细胞介素2(IL-2)为基础的联合方案扩增TIL,并记录其细胞形态及扩增速度.采用流式细胞术动态检测扩增淋巴细胞的分子表型T淋巴细胞亚群中淋巴细胞激活信号分子F7(SLAMF7)、CD45RO、颗粒酶B(GZMB)、程序性死亡蛋白1(PD-1)、CD57阳性细胞比例,CCK-8法检测其对肿瘤的杀伤能力.结果在本培养方案中,TIL细胞培养至第26天状态良好,第30天开始增殖速率下降.CD4^(-)CD8^(+)T细胞及CD8^(+)CD56^(+)T细胞比例随培养时间的延长逐渐提高,CD4^(+)CD8^(-)T细胞的比例逐渐下降,CD4^(+)CD25^(+)T细胞始终保持低水平状态.与扩增前相比,SLAMF7、CD45RO、GZMB、PD-1阳性细胞比例均有显著提高,耗竭性T细胞标志CD57表达比例也逐渐升高.TIL源性扩增性T细胞杀伤肿瘤细胞能力明显强于外周血单个核细胞(PBMC)源性,当效靶比为10∶1时杀伤能力最强,且杀伤能力在肿瘤细胞类型间存在明显差异.结论建立了从癌性胸/腹水中大量扩增TIL的培养方案,方法简便易行、效率高、杀伤肿瘤能力强,其效应细胞主要为CD8^(+)T细胞,表型处于活化状态. 展开更多
关键词 肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL) 肺癌 恶性胸/腹水
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恶性胸/腹水游离TS、β-tubulin Ⅲ mRNA的表达及其与化疗药物敏感性的关系
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作者 王立峰 胡静 +4 位作者 李茹恬 孟谊 禹立霞 钱晓萍 刘宝瑞 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1671-1676,共6页
目的 :探索恶性胸腹水上清中游离胸苷酸合成酶(TS)、β-tubulinⅢm RNA的表达,以及游离TS、β-tubulinⅢ表达和患者5-氟尿嘧啶(5-FU)、多西紫杉醇药物敏感性的关系。方法:收集43例进展期肿瘤患者的恶性胸/腹水,分离、提取游离核酸,分离... 目的 :探索恶性胸腹水上清中游离胸苷酸合成酶(TS)、β-tubulinⅢm RNA的表达,以及游离TS、β-tubulinⅢ表达和患者5-氟尿嘧啶(5-FU)、多西紫杉醇药物敏感性的关系。方法:收集43例进展期肿瘤患者的恶性胸/腹水,分离、提取游离核酸,分离肿瘤细胞。实时荧光定量RT-PCR分别检测游离上清和肿瘤细胞中TS和β-tubulinⅢm RNA表达;ATP-TCA方法检测肿瘤细胞5-FU、多西紫杉醇的敏感性。结果:TS和β-tubulinⅢm RNA在恶性胸/腹水游离上清中的检出率为98%。与配对的肿瘤细胞相比,游离上清中TS m RNA表达水平高(P=0.02)。在胃肠肿瘤患者中,游离上清中TS m RNA表达水平与5-FU药物敏感性相关(P=0.002)。尽管观察到游离上清中β-tubulinⅢm RNA高表达者多西紫杉醇药物敏感性高的趋势,但差异没有统计学意义。结论:晚期肿瘤患者恶性胸腹水游离上清中可检测到游离TS、β-tubulin III m RNA的表达。在胃肠肿瘤患者中,游离上清TS m RNA表达水平与5-FU药物敏感相关。 展开更多
关键词 恶性胸/腹水 游离核酸 TS Β-TUBULIN 分子生物标志物
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