小菊悬浮细胞培养与植株再生研究

以小菊‘七月红’品种为试材，进行了细胞悬浮培养及植株再生诱导的探讨。结果表明，MS＋1．0mg·L^-1 2，4-D＋0．2mg·L^-1 6-BA培养基适合从试管苗茎段有效诱导生长迅速、质地疏松的愈伤组织。获得的愈伤组织在MS＋0．5mg·L^-1 2，4-D＋0．2mg·L^-1 6-BA液体培养基中振荡培养，建立细胞悬浮培养体系。悬浮细胞的生长曲线呈上升的半抛物线型，细胞生长大致分缓慢生长期（0～2d）、对数生长期（2～10d）和停滞期（10d以后）；随着悬浮细胞生长，培养液pH值迅速下降。悬浮细胞固液双层培养表明，在培养基MS＋0．2mg·L^-1 KT＋0．2mg·L^-1 2，4-D上植板率最高；4℃低温2h处理能促进悬浮细胞生长，提高植板率；随着继代次数增加植板率呈下降趋势。培养1个月后，形成了直径约0．2cm的愈伤组织，将其转到MS＋2mg·L^-1 6-BA＋0．1mg·L^-1 NAA培养基后，继代4次，分化后出芽；分化芽在培养基MS＋0．5mg·L^-1 NAA上诱导生根，形成小植株。

银杏液体悬浮细胞培养产生黄酮的研究

为探索银杏液体悬浮细胞培养条件下产生黄酮的工艺条件,以银杏液体悬浮系为试验材料,在250 mL的三角瓶中装入80 mL液体培养基,置于25℃,100 r/min转速下摇床培养,试验设计分别为光照与黑暗、培养时间、细胞聚集体的大小、前体物对银杏液体悬浮细胞系产生黄酮的影响。结果表明:光照条件下培养14 d黄酮含量最高,3～4 mm粒径的细胞聚集体是黄酮合成的适宜细胞聚集体,前体物L-苯丙氨酸和乙酸钠对黄酮合成无明显的促进作用,且对细胞生长有抑制作用。结论:初步探索到银杏液体悬浮细胞培养条件下产生黄酮的工艺条件,为银杏细胞悬浮培养工业化生产黄酮类物质提供一定的理论基础和技术参数。

元宝草悬浮细胞培养及其生长特性研究

研究了元宝草悬浮细胞生长及其金丝桃素类物质（金丝桃素和假金丝桃素）的代谢规律。悬浮培养细胞的生长周期为18d，其中4～10d是对数期。金丝桃素类物质在10d达到46．06μg／g（DW），其含量增加与细胞鲜质量增长相偶联。可溶性糖的消耗与细胞的生长以及金丝桃素类物质的代谢有着密切的关系，是影响细胞鲜质量和金丝桃素类物质增长的重要因素。

樟属植物叶水浸提液对油樟悬浮细胞培养的影响

以油樟、大叶樟、香樟、天竺桂4种樟属植物叶水浸提液为诱导子,添加到油樟悬浮培养系中,研究诱导子对油樟悬浮培养细胞生长及挥发性物质积累的影响。结果表明,4种樟属植物叶水浸提液对油樟悬浮细胞生长无明显影响。不同樟属植物叶水浸提液对挥发性物质影响不同。对于总的挥发性物质的积累,有促进作用的是天竺桂与香樟叶浸提液,添加量分别是4%和1%时促进作用最强,其峰面积分别为空白对照组的1.78和1.45倍;对1,8-桉叶油素的积累,有促进作用的是天竺桂叶浸提液,添加量为1%时,促进作用最强,其峰面积为空白对照组的1.46倍;对于γ-松油烯的积累,4种叶浸提液均有促进作用,大叶樟、天竺桂和香樟水提液添加量1%时促进作用最强,其峰面积分别0.39、0.27和0.32 p A,油樟水提液添加量4%时促进作用最强,其峰面积为0.27 p A(对照中无);对于α-松油醇的积累,有促进作用的是天竺桂与香樟水提液,添加量为0.25%时促进作用最强,其峰面积分别为空白对照组的1.62和1.24倍。本研究在一定程度上揭示了油樟油成分积累相关促进因子情况,为进一步研究奠定基础。

评价植物悬浮细胞培养物两项测定指标的建立(简报)

由于在细胞培养研究中缺乏一些可操作性强的且定量化的细胞状态评价指标,人们对植物细胞状态的有些性状的评价只能停留在定性描述水平,如对悬浮细胞培养物褐化程度的评价仅能作出定性判断。这里我们提出了两项悬浮细胞培养物细胞状态评价指标。

植物悬浮细胞培养的关键技术及存在问题

介绍了建立良好植物悬浮细胞系的几个关键技术(外植体的选择、胚性愈伤组织的甄别及合适的培养条件),同时阐明了悬浮细胞系建立过程中存在的一些问题及相应的解决措施。

茶树悬浮细胞培养儿茶素的产生

利用植物细胞培养方法生产有用次生代谢产物,是植物生物工程研究的一个重要方面.茶树是次生代谢产物较为丰富的植物种类,尤其是以儿茶素为主要代表的多酚类物质,在茶树细胞中含量较高,因此,利用细胞培养方法生产儿茶素类物质具有天然的有利条件.茶树组织培养次生代谢产物形成的研究最早见于英国Forrest的报道,其后,原苏联科学家对茶愈伤组织中酚类化合物的形成也作了一系列研究.中国农业科学院茶叶研究所在茶树愈伤组织培养儿茶素的形成方面也进行了一系列的研究,证实茶树培养细胞在一定条件下不仅能够保持其次生代谢产物的合成能力,而且可以通过培养基组分调节等方法大幅度提高其儿茶素含量.本文着重讨论茶树细胞悬浮培养下培养基配方、接种量、碳源和氮源浓度、激素、培养基初始pH值等因素对儿茶素形成的影响.

毛泡桐悬浮细胞培养及其植株再生

先将毛泡桐叶片在MS,WPM,KM8P和B5等液体基本培养基中进行悬浮培养,然后建立毛泡桐叶片悬浮细胞培养及其体外植株再生体系.结果表明,毛泡桐叶片愈伤组织悬浮诱导最适培养基为改良MS+0.2 mg.L-1NAA+8 mg.L-1BA;细胞悬浮培养的最佳起始密度为6.67×106个.mL-1;悬浮愈伤组织芽诱导和根诱导的最适培养基分别为MS+0.3 mg.L-1NAA+17 mg.L-1BA和1/2MS+0.1 mg.L-1NAA.

野罂粟悬浮细胞培养及其野罂粟生物碱的产生

对野罂粟细胞悬浮培养及其次生代谢物野罂粟生物碱进行了研究。结果显示 ,在培养的中后期补充营养物质可促进细胞生长及生物碱的累积。 3 %的蔗糖浓度对细胞的生长最为有利 ;4%的蔗糖对总生物碱的累积最为适宜。悬浮细胞在pH 5 .7的培养基中生长最为旺盛 ,而在pH 5 .4的培养基中总生物碱的含量最高。HPLC法测定野罂粟悬浮培养物中野罂粟碱的含量为 0 .0 2 3 5mg gDW ,黑龙辛甲醚的含量为 0 .0 2 2mg gDW。

茄子愈伤组织诱导及悬浮细胞培养(英文)

[目的]建立茄子愈伤组织悬浮细胞培养体系。[方法]以三月茄为试验材料,利用正交设计筛选适合茄子愈伤组织诱导、继代保存以及悬浮培养的培养基并测定悬浮培养过程中细胞生长状况。[结果]适宜茄子愈伤组织诱导的培养基为MS＋6-BA（0.2 mg/L）＋NAA（0.2 mg/L）;适宜继代保存的培养基为MS＋6-BA（0.2 mg/L）＋NAA（0.2 mg/L）＋KT（0.1 mg/L）;适宜悬浮细胞培养的培养基为MS＋NAA（0.4mg/L）＋6-BA（0.2 mg/L）液体培养基。茄子悬浮培养细胞生长呈S形曲线,其中前3 d为起始期,3~7 d处于对数生长期,7~8 d为静止期;8~11 d为衰退期。悬浮细胞密度随着培养时间的延长增长,在培养第7天达到最高值,约3.8×105个/ml.随后细胞数量迅速减少。起始期细胞活力最高。茄子悬浮细胞在MS＋NAA（0.4 mg/L）＋6-BA（0.2 mg/L）液体培养基上生长良好,其分裂指数最大达4.1%。[结论]茄子悬浮细胞培养体系为茄子生物技术研究提供了一条途径,可应用该体系进行遗传转化等方面的研究。

小叶丁香的悬浮细胞培养研究

小叶丁香(SyringapubescensTurcz.)为木犀科(Oleaceae)丁香属(Syringa)植物,其中主要药用有效成分为属于裂环环烯醚萜苷类化合物的橄榄苦甙.选择小叶丁香的叶、茎、芽为外植体,在MS和LS等培养基上进行愈伤组织诱导与培养,并在继代3次以后转入悬浮细胞培养,测定了悬浮培养的细胞生长周期,首次建立了小叶丁香的悬浮细胞培养体系;采用RP-HPLC方法测定悬浮细胞培养物和培养液中橄榄苦苷的含量,并且利用1HNMR和13CNMR确定其结构.

茉莉花愈伤组织诱导及悬浮细胞培养

以茉莉花(Jasminum sambac)花瓣为外植体在不同培养基上诱导出愈伤组织,通过对其类型的筛选从中选择疏松愈伤组织进行悬浮培养后,初步建立悬浮细胞培养系。结果表明,不同激素可诱导出疏松型(CA)、泥状型(CB)和绿色块状型(CC)愈伤组织,其分化方向也不同。用CA型和CB型愈伤组织均能建立悬浮细胞培养系,其中以泥状愈伤组织为起始材料较佳,大约11 d可建立初步的悬浮细胞培养系。

白木香悬浮细胞培养的研究

目的:建立稳定、活力高的白木香悬浮细胞培养体系。方法:以1/2MS培养基为基本培养基,比较了植物生长激素浓度及其组合、光照时间、转速等对白木香悬浮细胞鲜重、细胞沉降体积、细胞密度、细胞活力等的影响。结果:适合白木香悬浮细胞生长的最佳条件为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+蔗糖30 g/L,光照/黑暗12 h/12 h,转速130 r/min,温度(25±1)℃。结论:通过对白木香细胞培养过程中的鲜重变化的检测发现白木香悬浮细胞体系的适应期是0～4 d,对数生长期是4～8 d,8～12 d为稳定期,12 d以后为细胞衰亡期。

黄芩悬浮细胞培养过程中黄芩苷含量与苯丙氨酸解氨酶活性分析

以黄芩悬浮细胞为试材,研究了悬浮培养过程中黄芩苷含量与苯丙氨酸解氨酶活性变化,采用均匀设计法分析了不同激素配比对黄芩生物量积累的影响。结果表明:黄芩细胞悬浮系生长呈较典型的"S形"曲线,黄芩苷变化与生物量积累基本一致;在黄芩悬浮培养周期中,苯丙氨酸解氨酶的活性强弱与黄芩苷的积累有一定相关性,培养第12天时活性最强。经均匀设计实验法得到最适宜黄芩悬浮培养生物量积累的激素配比为MS培养基附加6-BA 0.75mg/L,NAA0.5mg/L,KT 1.5mg/L。

降香黄檀的悬浮细胞培养

本研究比较了不同生长调节物质配比诱导降香黄檀愈伤组织和悬浮细胞的结果表明:嫩叶是获得愈伤组织的最佳材料,MS附加2.0mg/L2,4-D,0.2mg/LKT有利于形成大量结构疏松的愈伤组织;MS附加0.2mg/L2,4-D,0.2mg/L6-BA有利于悬浮细胞生长。

外源诱导子和温度对黑果枸杞悬浮细胞花青素积累的影响

黑果枸杞富含花青素,是一种具有很高开发利用价值的药食同源植物。以黑果枸杞无菌苗的叶片为外植体诱导愈伤组织建立细胞悬浮体系,研究不同外源激素和温度对黑果枸杞悬浮细胞中花青素含量的影响。黑果枸杞愈伤组织诱导的最佳培养体系为WPM+0.5 mg/L激动素+2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸+20.0 g/L蔗糖+6.0 g/L琼脂,悬浮细胞培养的最优体系为WPM+0.5 mg/L激动素+2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸+0.01 mg/L萘乙酸+20.0 g/L蔗糖,其生长曲线呈“S”形,活细胞数量在悬浮培养第18天时达到峰值,为7.93×10^(5)个/mL。30 g/L蔗糖、200 mg/L茉莉酸甲酯、2 mg/L脱落酸及16℃单一处理均能显著促进悬浮细胞花青素产量的提升(P<0.05),2 mg/L脱落酸诱导效果最佳。在16℃和3种外源激素的复合处理下,200 mg/L茉莉酸甲酯+16℃的复合诱导处理能显著促进细胞花青素积累(P<0.05),含量是16℃单因素处理的1.13倍。研究结果为进一步优化黑果枸杞悬浮细胞培养体系、促进花青素积累奠定了基础。

长春花悬浮细胞培养体系生物转化生成大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的研究

目的探讨长春花悬浮细胞培养体系生物转化生成大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的基本条件。方法长春花细胞在6,7-V液体培养基中悬浮培养一段时间后,将大黄素投入培养基中进行生物转化,测定大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷含量和大黄素的转化率。结果大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量占细胞干重的0.31%,大黄素转化率为46.58%。结论以长春花悬浮细胞为生物转化体系,可获得长春花属植物所不具有的大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷。

植物悬浮细胞培养体系对大黄素的生物转化

目的利用植物悬浮细胞培养体系对大黄素进行生物转化生成大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷。方法利用4种植物悬浮细胞培养体系转化外源大黄素生成大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷,应用薄层色谱法进行检识。结果一叶萩、长春花和何首乌悬浮细胞培养体系均可使大黄素生物转化为大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷。结论首次利用植物悬浮细胞培养体系生物转化生成大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷。

银杏液体悬浮细胞培养产生黄酮的研究

探讨了光照与黑暗、培养时间、细胞聚集体大小、前体物对银杏液体悬浮细胞系产生黄酮的影响。试验结果表明:光照条件下培养14 d黄酮含量最高,3～4 mm粒径的细胞聚集体是黄酮合成的适宜细胞聚集体,前体物L-苯丙氨酸和乙酸钠对黄酮合成无明显的促进作用,且对细胞生长有抑制作用。

前体及真菌诱导子对银杏悬浮培养细胞产生银杏内酯B的影响

目的:探索前体及真菌诱导子对银杏悬浮培养细胞产生银杏内酯B的影响。方法:通过向培养基中补加前体及真菌诱导子,考察它们对悬浮培养细胞生物量及银杏内酯B产量的影响。结果:于培养基中添加100mg·L-1异戊二烯及低浓度(10mg·L-1,50mg·L-1)的牛儿醇能提高GKB的产量,分别比对照增加了69%,138%和114%。从10种真菌诱导子中筛选出效果较好的日本根霉诱导子,当添加浓度为5mgGE·L-1,诱导培养3d时,悬浮细胞的GKB产量比对照增加约1倍。结论:在银杏悬浮细胞培养过程中,添加前体物质及应用真菌诱导子是提高银杏内酯B的有效手段之一。