惠阳胡须鸡IFN-α基因克隆和序列分析

根据红色原鸡IFN A基因设计了引物对 ,采用PCR法克隆并测序了我国地方标准品种惠阳胡须鸡的IFN α基因 ,定名为HyIFNA4。HyIFNA4与红色原鸡类IFN α比较 ,ORF长度均为 582个核苷酸、编码 162个氨基酸 ,相互间同源性在 97 4 %～ 99%。

惠阳胡须鸡Ⅱ型干扰素基因在毕赤酵母中的表达及其产物活性分析

为了确定惠阳胡须鸡IFN-γ基因(chIFN-γ2)在毕赤酵母中表达的重组蛋白的抗病毒活性和蛋白的二级结构,将pGEM-T-chIFN-γ2重组质粒中的chIFN-γ2基因克隆到表达质粒pPICZαB上,经酶切鉴定、PCR鉴定和测序后的序列同源性分析,证明目的基因没有发生缺失、突变,并且插入方向正确。将重组质粒电转化到毕赤酵母感受态细胞GS115中,阳性转化子经甲醇诱导表达,获得了高效分泌表达。重组IFN-γ的分子质量约为33 ku,表达量达0.604 mg/mL,在鸡胚成纤维细胞(CEF)上抑制VSV的抗病毒活性为3.2×104U/mg。圆二色性分析表明,IFN-γ酵母重组蛋白属于典型的α螺旋蛋白,二级结构含量为:α螺旋55.1%,β折叠8.3%,转角13.9%,无规卷曲22.8%。采用毕赤酵母分泌表达了有活性的鸡IFN-γ,并首次证明鸡IFN-γ重组蛋白属于典型的α型蛋白。

惠阳胡须鸡IFN-α基因的克隆 表达和重组蛋白的抗病毒活性圆二色性分析

IFN-α是一种具有很强抗病毒活性的细胞因子。从惠阳胡须鸡肝脏克隆了IFN-α基因,为新的亚型。将IFN-α成熟肽与毕赤酵母pPICZαA连接,经酶切鉴定、PCR鉴定和测序后确定目的基因无突变并且插入方向正确,将重组质粒转化到GS115中,阳性转化子经甲醇诱导表达,获得了高效分泌表达,重组IFN-α分子量约为35kD,表达量达到了0.307mg/ml,在CEF/VSV细胞系上的抗病毒活性为3.2×106U/mg。圆二色实验结果表明IFN-α重组蛋白中含有53.2%α螺旋、3.1%β折叠、10.6%转角和33.1%无规谱卷曲,属于全α型蛋白。结果表明,采用毕赤酵母分泌表达了有活性的鸡IFN-α,并首次证实鸡IFN-α属于全α型蛋白。

惠阳胡须鸡LPL、FASN基因多态性的研究

以惠阳胡须鸡为研究对象,分别以LPL、FASN基因为脂肪性状相关的候选基因,采用限制片段长度多态性(RFLP)检测这2个候选基因在惠阳胡须鸡中的多态性。研究结果表明,(1)用限制性内切酶HinfⅠ对LPL基因第8内含子进行RFLP分析,发现76.3%为已报道的BB型,另发现了两种新的基因型,分别占1.7%和22%,无AA型;(2)用限制性内切酶HaeⅢ对FASN基因进行RFLP分析,发现BB基因型比例为64.8%,BC型12.24%,CC型基因型比例23.4%。B等位基因频率为0.7041,C等位基因频率为0.2959,B等位基因频率明显高于C等位基因频率。

惠阳胡须鸡IGF-Ⅰ和GHRL基因多态性研究

以IGF-Ⅰ和GHRL基因为惠阳胡须鸡生长性状的候选基因,通过测序、酶切等方法对93日龄惠阳胡须鸡IGF-Ⅰ和GHRL基因多态性进行分析,并用GLM模型分析基因型与体质量的关联性。结果表明:IGF-Ⅰ基因在第181位发生碱基突变,A突变为G,属于同义突变,BsmⅠ酶切分析发现,IGF-Ⅰ基因只有1种基因型,表明该位点在胡须鸡保种群中已经纯合;GHRL基因在第124位发生碱基突变,T突变为G,改变了酶切位点,通过pfl MⅠ酶切分析发现,GHRL基因有3种基因型,即AA型、AB型和BB型。统计结果表明,93日龄惠阳胡须鸡3种基因型个体间体质量无显著差异。

惠阳胡须鸡日龄与肌肉脂肪酸组成及含量关系的分析

研究通过气相色谱法测定86、155、213、300日龄惠阳胡须鸡胸肌的脂肪酸含量和组成,并进行多重比较,分析日龄对惠阳胡须鸡肌肉脂肪酸含量和组成的影响。结果表明:日龄对惠阳胡须鸡肌肉脂肪酸组成没有影响,但对其含量有显著影响,这可能是造成不同日龄鸡肉风味差异的主要原因之一。该结果可为惠阳胡须鸡遗传资源的开发利用提供一定的理论依据。

惠阳胡须鸡微卫星多态性研究

为进一步保护和利用惠阳胡须鸡遗传资源,监测保种场保种效果,随机采集96只惠阳胡须公鸡血样,提取总DNA,选用18对微卫星标记进行PCR扩增,并对其基因片段进行扫描,利用Pop Gen 32软件分析扫描结果,结果表明,18个微卫星标记在惠阳胡须鸡群中均表现出较高的多态性,平均等位基因数为10.61个,平均杂合度H为0.5963,平均多态信息含量PIC为0.74。说明惠阳胡须鸡保种群体具有丰富的遗传多样性,具有较大的选育潜力。

惠阳胡须鸡中A-FABP和H-FABP基因单核苷酸多态性的研究

本研究旨在通过分析与脂肪性状相关的A-FABP和H-FABP基因单核苷酸多态性,找出优势基因型个体即保持胡须鸡的肉质口感又能克服生长速度慢的特点,为下一步的基因型选择提供理论基础。本实验以惠阳胡须鸡作为实验材料,从鸡血液中提取DNA,通过PCR扩增、测序等分子生物学技术分析了A-FABP和H-FABP基因单核苷酸多态性。结果表明:1)A-FABP基因发现了两处碱基突变,一个在第1685碱基处由C突变T,但由于不在编码区,没有氨基酸的改变,而另一个在第1830碱基处缺失了G,引起编码氨基酸的改变即缺失了D(天冬酰胺),进而导致蛋白质空间结构发生改变。2)H-FABP基因发现两个碱基突变,其中一个突变位点不在编码区,没有相应氨基酸改变,而另一个在第746碱基处由A突变为G,使得编码的氨基酸由赖氨酸变成谷氨酸,导致蛋白质空间二级结构发生改变。这些结果说明在惠阳胡须鸡中,A-FABP和H-FABP基因存在单核苷酸多态性,为下一步的基因型选择奠定了理论依据。

DLC-1和SGCZ基因单核苷酸多态性对惠阳胡须鸡生长性状的影响

为了解肝癌缺失基因-1(DLC-1)和泽塔-肌聚糖蛋白(SGCZ)基因单核苷酸多态性对惠阳胡须鸡生长性状的影响,以惠阳胡须鸡作为试验材料,从鸡血液中提取DNA,然后通过PCR-RFLP分析DLC-1和SGCZ基因单核苷酸多态性与生长性状的关系。结果表明:93日龄惠阳胡须鸡的DLC-1基因中GG基因型的体重与AA基因型相比差异不显著(P>0.05),但GG基因型个体比AA基因型多16.68 g;93日龄惠阳胡须鸡的SGCZ基因中AG基因型的体重与AA基因型相比差异不显著(P>0.05)。DLC-1和SGCZ基因限制酶切片段长度多态性对93日龄惠阳胡须鸡的体重无显著影响;但DLC-1基因中GG基因型、SGCZ基因中AG基因型的93日龄样本平均体重最大,比DLC-1基因中AA基因型和SGCZ基因中AG基因型的平均体重多49.62 g。说明DLC-1基因的优势基因型为GG基因型,DLC-1和SGCZ基因的优势基因型组合为DLC-1基因中GG基因型和SGCZ基因中AG基因型,可作为惠阳胡须鸡早期基因型选择的参考依据。

中草药对惠阳胡须鸡肌纤维直径和密度的影响分析

肌纤维直径和密度是反映肌肉品质的一个重要指标。为了解在基础日粮中添加不同中草药对惠阳胡须鸡肌纤维直径和密度产生的影响,试验选取100日龄体重相近的惠阳胡须鸡128只,随机分成4组,每组4个重复,每个重复8只鸡。4组分别饲喂基础日粮、基础日粮+2.5%绿茶粉、基础日粮+3%桑叶粉、基础日粮+2%大蒜粉。预试验7 d,正式试验42 d。试验结束,每组随机选取12只鸡宰杀,取胸肌制成石蜡切片,统计分析各组的肌纤维直径与密度。试验结果表明:对照组胸肌肌纤维直径、密度与绿茶粉添加组、大蒜粉添加组、桑叶粉添加组差异不显著(P>0.05)。综上,日粮中添加桑叶粉(3%)、绿茶粉(2.5%)和大蒜粉(2%)对惠阳胡须鸡胸肌肌纤维直径和密度没有直接的影响。

惠阳胡须鸡肌纤维直径、密度生长发育规律的研究

已有研究表明,肌纤维组织特性是反应肉品质的一个重要指标.本研究旨在通过对不同日龄惠阳胡须鸡肌纤维组织特性的研究,了解惠阳胡须鸡肌纤维的生长规律,为以后指导惠阳胡须鸡的生产实践提供理论依据.实验选取了不同日龄惠阳胡须鸡的胸肌、腿肌组织块制作成石蜡切片,对肌纤维直径与密度进行测量,统计分析.结果表明,不同日龄惠阳胡须鸡胸肌、腿肌肌纤维的直径和密度间存在显著性差异(P<0.05).随着日龄的增加,惠阳胡须鸡胸肌、腿肌肌纤维直径不断增大,肌纤维密度不断减少.

3种植物添加剂对惠阳胡须鸡肌肉氨基酸、脂肪酸组成与含量的影响

本试验旨在研究绿茶粉、桑叶粉和大蒜粉对鸡肌肉中氨基酸、脂肪酸含量和组成的影响,为植物添加剂在惠阳胡须鸡生产中的应用提供理论依据。选取120只120日龄体重相同、健康的惠阳胡须母鸡,随机分成4个处理,每个处理3个重复,每个重复10只。试验Ⅰ组,饲喂基础日粮+2%绿茶粉;试验Ⅱ组,饲喂基础日粮+4%桑叶粉;试验Ⅲ组,饲喂基础日粮+1.5%大蒜粉;对照组,饲喂基础日粮,预试验7d,正式试验30d。饲养试验结束后,每个处理随机选取10只鸡进行屠宰。每只屠宰鸡取同一部位胸肌100g,通过氨基酸自动分析仪测定肌肉中氨基酸的组成和含量,通过气相色谱仪测定肌肉中脂肪酸的组成和含量。试验结果表明:(1)日粮中添加植物添加剂对肌肉中氨基酸的组成没有影响,但对肌肉中氨基酸的含量有影响,试验组必需氨基酸含量均显著高于对照组(P<0.05);(2)日粮中添加植物添加剂对肌肉中脂肪酸的组成没有影响,但对肌肉中脂肪酸的含量有影响,对照组总饱和脂肪酸含量显著高于3个试验组(P<0.05),而3个试验组总多不饱和脂肪酸含量/总饱和脂肪酸含量的比值显著高于对照组(P<0.05)。本试验结果表明,日粮中添加植物添加剂不影响肌肉中氨基酸和脂肪酸的组成,但影响肌肉中两者的含量,显著降低鸡肌肉中饱和脂肪酸的含量,提高多不饱和脂肪酸的比例,增加必需氨基酸含量。因此,日粮中添加植物添加剂可改善惠阳胡须鸡肌肉品质。

不同日龄惠阳胡须鸡肌肉中IGF1、MyoD基因表达研究

已有研究表明,IGF1(胰岛素样生长因子1)、MYOD(肌分化因子)基因在肌细胞的生长、增殖、分化上具有重要的调控作用.本研究以在惠阳胡须鸡为研究对象,采集不同日龄(86、155、213、300、394、454)的惠阳胡须鸡的胸肌和腿肌,然后通过提取RNA、反转录、聚合酶链式反应(PCR)、荧光定量PCR分析了这两个基因在不同日龄惠阳胡须鸡的胸肌和腿肌中的表达情况.半定量结果发现,MYOD基因只在86日龄的腿肌中表达,而IGF1基因在不同日龄的胡须鸡胸腿肌中均有表达,而荧光定量PCR的结果显示IGF1基因在胸腿肌的相对表达量存在差异,但没有达到显著性.这些结果为深入了解IGF1基因在鸡肌纤维生长发育过程的作用提供了新的证据.

中草药对惠阳胡须鸡肌肉中MyoG、IGF-1基因表达量的影响

为了研究日粮中添加中草药对肌肉中肌细胞生成素（MyoG）、类胰岛素生长因子（IGF-1）基因表达的影响,试验选取120只120日龄惠阳胡须母鸡,随机分成4组,每组3个重复,每个重复10只,对照组饲喂基础日粮,绿茶粉添加组饲喂基础日粮＋2%绿茶粉,桑叶粉添加组饲喂基础日粮＋4%桑叶粉,大蒜粉添加组饲喂基础日粮＋1. 5%大蒜粉,饲养试验结束后,每组随机选取10只鸡,取胸肌、腿肌通过RNA提取、反转录、PCR、荧光定量PCR分析MyoG、IGF-1基因的表达情况。结果表明：MyoG、IGF-1基因在不同试验组惠阳胡须鸡胸肌、腿肌中均有表达,表达量不存在显著差异（P〉0. 05）。说明三种中草药对惠阳胡须鸡肌肉中MyoG、IGF-1基因表达量没有影响。

惠阳胡须鸡

又称惠阳鸡、三黄胡须鸡、龙岗鸡、龙门鸡、惠州鸡，属肉用型地方品种。

16SrDNA克隆文库方法分析两纯系鸡回肠及盲肠黏膜细菌的组成

以1日龄纯系的优质肉鸡A系(♂,A组)和惠阳胡须鸡(♂,B组)为试验动物,研究比较两纯系鸡28日龄回肠与盲肠黏膜菌群的组成及多样性。于第28日龄分别从2组中采集鸡2个肠段并提取黏膜细菌基因组DNA,应用16S rDNA基因序列技术,建立2个肠段黏膜细菌16S rDNA V3区的随机克隆文库。回肠文库分析发现,A组文库有86个序列共产生6个OTUs()perational taxonomic units),其已知序列主要属于肠球菌属、乳杆菌属、粪球菌属及梭菌属类序列,而B组文库有97个序列共产生2个OTUs,主要属于梭菌类序列;盲肠文库分析发现,A组文库有93个序列共产生44个OTUs,其优势菌群是未分类瘤胃球菌属(18.28%)、粪球菌属(13.98%)、拟杆菌属(10.75%)、Blautia(10.75%)及未分类毛螺菌属(7.53%);B组文库有97个序列共产生42个OTUs,其优势菌群是普拉梭杆菌属(17.53%)、粪球菌属(11.34%)、拟杆菌属(9.28%)及未分类瘤胃球菌属(8.25%);2组盲肠文库中其他菌属的数量存在较大差异,且未发现与大肠杆菌相关的序列。优质肉鸡A系和惠阳胡须鸡28日龄回肠与盲肠黏膜细菌的组成差异明显,尤其是瘤胃球菌属与产丁酸菌的组成比例,这种差异可能是宿主遗传的影响所致。

鸡干扰素受体基因在外周血淋巴细胞和组织中的表达

提取惠阳胡须鸡脾脏、胸腺、盲肠扁桃体、胸肌、肝脏、肾脏、心脏、未刺激的外周血淋巴细胞(PBL)和ConA刺激后的PBL的总RNA,采用RT-PCR的方法检测IFN-α/β受体α链(IFNAR1)、IFN-α/β受体β链(IFNAR2)和IFN-γ受体β链(IFNGR2)基因的表达情况。在未经刺激的PBL中未检测到IFNAR1、IFNAR2的表达,ConA刺激后的淋巴细胞中IFNAR1、IFNAR2的表达量比较高;在组织中,仅在脾脏、盲肠扁桃体、肝脏和胸腺中检测到了IFNAR1、IFNAR2的表达。在未刺激的PBL、ConA刺激后的PBL、脾脏、盲肠扁桃体、肝脏、胸腺、胸肌中均检测到了IFNGR2的表达,在肾脏和心脏中未检测到IFNGR2的表达。IFNAR1、IFNAR2、IFNGR2在刺激后的PBL、免疫器官和肝脏中分布,表明IFNAR1、IFNAR2、IFNGR2可能参与机体的免疫调节和肝脏的代谢过程。不同的干扰素受体在PBL和各组织中分布情况的差异可能与其各自功能的差异有关。

鸡年说鸡

2017年适逢农历丁酉年,即鸡年。鸡乃家禽,品种很多,嘴短,上嘴稍有弯曲,头部有鲜红色肉质的冠,翅膀短,不能高飞,也叫家鸡。鸡属鸟纲,雉科家禽,它是天下最普通、饲养量最大的家禽。公鸡能报晓,母鸡能生蛋。母鸡下完蛋,感到很自豪,便＂咯咯＂地叫起来。

优质型肉鸡的肥育

优质型肉鸡品种的要求：①生产性能好，生长快，饲料转化率高；②品种适应性强，对环境要求不高，好饲养；③对饲料的要求不十分严格。优质型肉鸡前期生长速度缓慢．出售时体重为1．1～1．3千克．接近或已达到性成熟。目前，比较适宜肥育的鸡种有杏花鸡、雪山鸡、惠阳胡须鸡、新兴黄鸡、固始鸡、皖南麻鸡、华青麻鸡、维扬麻鸡、江村麻鸡、霞烟鸡、石歧杂鸡等。

养土鸡有哪些鸡种可选

养土鸡可根据实际情况选如下品种：浦东鸡、仙居鸡、萧山鸡、白耳黄鸡、丝毛乌骨鸡、江山白羽乌骨鸡、崇仁麻鸡、河田鸡、惠阳胡须鸡、杏花鸡、清远麻鸡、霞烟鸡、桃源鸡、溧阳鸡、鹿苑鸡、狼山鸡、中原斗鸡、漳州斗鸡、北京油鸡、寿光鸡、济宁鸡、固始鸡、彭县黄鸡、峨眉黑鸡、武定鸡、版纳斗鸡、林甸鸡、大骨鸡、静原鸡、边鸡、阳鸡、正阳三黄鸡、藏鸡、吐鲁番鸡等。