基于UPLC-Q-TOF/MS探讨感咳方药效物质基础及作用机制的研究

目的 探讨感咳方的药效物质基础及其止咳作用的相关机制。方法 用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS),分析鉴定感咳方入血成分。将30只大鼠随机分为对照组、模型组和低、中、高剂量实验组,每组6只。用烟熏法+冷刺激建立急性支气管炎大鼠模型。低、中、高剂量实验组分别按1.86、4.66、9.32 g·kg^(-1)(生药/体质量)的剂量灌胃给予感咳方,对照组和模型组均灌胃给予等体积0.9%NaCl,每天给药1次,连续7 d。用酶联免疫吸附试验法检测大鼠肺组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,用蛋白质印迹法检测大鼠肺组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白的表达水平。结果 UPLC-Q-TOF/MS分析鉴定得到26个入血成分。对照组、模型组和中、高剂量实验组的IL-1β含量分别为(57.80±7.67)、(186.48±8.50)、(166.05±9.90)和(143.19±6.31)pg·mL^(-1),TNF-α含量分别为(47.14±8.55)、(316.22±9.49)、(68.93±7.94)和(65.93±7.10)pg·mL^(-1),PI3K蛋白相对表达水平分别为0.38±0.05、0.97±0.10、0.68±0.15和0.56±0.10,p-Akt蛋白相对表达水平分别为0.34±0.14、0.93±0.05、0.63±0.16和0.49±0.14。模型组的上述指标与对照组和高剂量实验组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 感咳方可通过调控PI3K/Akt信号通路,干预炎症和免疫调节因子表达,改善气道炎症,从而发挥止咳作用。