根管生物膜体外模型研究进展

细菌生物膜是导致牙髓根尖周病及根管治疗失败的主要因素。建立体外根管生物膜模型是根管感染控制研究中的重要环节,模型的选择、设计与构建是否科学严谨直接影响研究的结果与意义。本文就近年来体外研究中常用的根管生物膜模型进行综述,讨论模型构建的各项因素,如细菌组成、载体的选择和预处理、细菌接种和培养条件等,以期为根管感染控制研究中选择和设计更科学、合理的模型,研发更能模拟体内情况、稳定可重复的标准模型提供参考。

粪肠球菌感染根管模型评价不同根管封闭剂的抗菌效果

目的:探讨粪肠球菌感染根管模型评价不同根管封闭剂的抗菌效果。方法:选取人单直根管的离体前牙80颗为研究对象,收集前牙并接种粪肠球菌,连续完成4 w孵育后构建粪肠球菌感染根管模型。建模成功后,常规完成根管成形和清理。将离体牙随机分为A组、B组、C组、D组、E组各16颗。A组采用Biodentine联合牙胶根管填充,B组采用iRoot BP联合牙胶根管填充,C组采用MTA联合牙胶根管填充,D组单纯牙胶填充,E组为阴性对照组(给予无菌根管填充),比较各组抗菌效果。结果:取离体牙经处理后,扫描电镜下可见清晰的牙本质小管,并处于开放状态,但是未见明显的细菌;而离体牙经细菌培养及处理后,可见离体牙本质小管中附有大量的粪肠球菌,且菌体形态饱满、均匀;扫描电镜下可见离体牙牙本质小管形成生物膜;随着时间的延长,A组、B组及C组细菌计数呈下降趋势,且不同时间点比较差异具有统计学意义(P<0.05);A组、B组及C组1d、3d、7d及14d细菌计数比较差异无统计意义(P>0.05),且均低于D组(P<0.05)。结论:借助粪肠球菌感染根管模型能评价不同根管封闭剂的抗菌效果,且Biodentine、iRoot BP及MTA具有相似的抗菌能力,能杀灭粪肠球菌,巩固根管治疗效果。

用动物模型法检测感染根管内常见厌氧菌的相互关系

用小鼠皮下接种的方法观察了牙龈类杆菌、中间型类杆菌和产黑色素类杆菌分别与α-溶血性链球菌之间在毒力或致病性上的相互影响。结果显示:混合接种组细菌毒力明显增强,注射区以外转移性脓肿的形成率增加,小鼠死亡率增加,原接种菌的存活力提高,说明这些感染根管内优势厌氧菌与兼性厌氧菌之间存在着明显的协同关系。

利用粪肠球菌感染根管模型评价不同根管封闭剂的抗菌效果

目的体外建立粪肠球菌根管感染模型,比较3种生物陶瓷类根管封闭剂的抗菌性能。方法选择人单直根管的离体前牙48颗,接种粪肠球菌并孵育4周以构建体外根管感染模型。完成根管成形和清理后,随机将样本分为3个实验组和2个对照组,每组按照如下方法进行根管充填:A组,Biodentine+牙胶;B组,iRoot BP+牙胶;C组,MTA+牙胶;D组,阳性对照组(单纯牙胶充填);E组,阴性对照组(无菌根管)。分别于第1、3、7、14天取样,利用涡轮机磨除充填材料和牙本质,收集粉末,梯度稀释后,常规进行细菌培养并计数。结果3个实验组在4个时间点均表现出对粪肠球菌的抗菌性,与阴性及阳性对照组相比,有统计学意义(P<0.05),3个实验组抗菌效果组间无明显差异(P>0.05)。此外,随时间延长3种材料杀菌效果逐渐增强,第14天达到最高值。结论Biodentine、iRoot BP、MTA具有相似的抗菌能力,均能有效杀灭粪肠球菌。

两种方法比较3种根管封闭剂体外抗菌效果的研究

目的:比较3种根管封闭剂的抗菌效果。方法:直接接触(DCT)实验:将封闭剂AH-plus(A)、Gutta Flow(B)、iRoot SP(C)分别放入离心管中,分别于20 min和1、7、14、21 d取出,与粪肠球菌混合1 h后,进行细菌计数。感染根管模型(IRCM)实验:将成功建立感染根管内粪肠球菌模型的100个离体单根管人牙,随机分为A、B、C 3个实验组和1个阳性对照组(n=25)。根管预备充填后,将所有样本置于厌氧环境中分别培养20 min和1、7、14、21 d,每组于各时间点分别随机取出5个样本,收集充填材料和牙本质粉末进行细菌培养计数,并分别检测3种封闭剂的pH值。结果:在DCT中,A、C组与对照组相比,除20 min和1 d时能有效杀灭细菌(P<0.05)外,其他时间点均无统计学差异(P>0.05);A、C组比较P>0.05;B组在各时间点均抗菌效果差(P>0.05)。在IRCM实验中,A、C组抗菌效果的时间较DCT延长,与对照组相比C组除了在21 d抗菌性较差外,在其他各时间点均有较强的抗菌性(P<0.05);A组在20 min和1、7 d时均有较强的抗菌性(P<0.05);而B组在各时间点抗菌效果均较差(P>0.05)。C组在各时间点p H值最高(P<0.05),A、B组pH值比较,P>0.05。结论:pH的高低与封闭剂的抗菌性无直接对应关系。AH-plus和iRoot SP抗菌效果优于Gutta Flow。

超声、声波、激光辅助根管冲洗技术在体外根管感染模型中消毒作用的研究

目的通过体外根管感染模型评估超声、声波、激光辅助根管冲洗技术的根管消毒效果。方法选择2021年2—4月于第四军医大学口腔医院口腔外科门诊因重度牙周炎拔除的48颗单直根管前牙并进行灭菌处理,随机抽取3颗离体牙对根管灭菌处理进行确认;而后接种粪肠球菌并培养4周以构建体外根管感染模型,并随机抽取5颗离体牙进行确认。将余下的40颗离体牙根管预备后随机分为5组,每组8颗。根据根管冲洗方法分别记为:超声+冲洗剂组、EDDY声波+冲洗剂组、激光+冲洗剂组、侧方冲洗针头+冲洗剂组及侧方冲洗针头+生理盐水组。通过扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜观察各组玷污层清除效果和杀菌效果。结果玷污层清除效果从强到弱依次为:EDDY声波+冲洗剂组>激光+冲洗剂组>超声+冲洗剂组>侧方冲洗针头+冲洗剂组>侧方冲洗针头+生理盐水组;杀菌效果从强到弱依次为:激光+冲洗剂组>EDDY声波+冲洗剂组>超声+冲洗剂组>侧方冲洗针头+冲洗剂组>侧方冲洗针头+生理盐水组。其中超声+冲洗剂组与侧方冲洗针头+冲洗剂组清除效果评分和杀菌率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);其他组间比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论激光和EDDY声波辅助根管冲洗技术具有较好的根管消毒效果,其中激光的根管杀菌效果较明显,EDDY声波的玷污层清除效果较佳。

牙髓再生术对Beagle犬牙体牙髓病模型中炎症微环境的作用

目的探讨牙髓病变程度与炎性因子水平的关系以及牙髓再生术对犬牙体牙髓病炎性因子的影响。方法4个月龄雄性比格犬10只,随机分为根尖感染组和去牙髓组各5只(每组各20颗牙)。每组再根据手术方式分为牙髓再生术亚组和根尖诱导成形术亚组各10颗牙。4个亚组患牙均行X线检查,并行组织病理学检查HE染色,采用ELISA法检测牙髓P物质(substance P,SP)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)水平。结果造模4周时,根尖感染组和去牙髓组X线检查可见患牙根尖暗影;术后12周,4个亚组患牙根尖病变区范围均有不同程度减小或消失,根尖孔闭合,根尖感染组牙髓再生术亚组较根尖诱导成形术亚组牙髓组织炎症细胞明显减少;术后12周,4个亚组犬牙髓组织SP、VEGF、TNF-α和IL-1水平均低于术前(P<0.05);根尖感染组的根尖诱导成形术亚组牙髓组织SP[(33.28±2.39)ng/L]、VEGF[(41.35±9.35)ng/L]、TNF-α[(67.08±10.62)ng/L]和IL-1[(85.26±4.23)ng/L]水平低于牙髓再生术亚组[(82.12±2.66)、(98.18±7.82)、(124.62±9.20)、(120.75±5.40)ng/L](P<0.05);去牙髓组的牙髓再生术亚组牙髓组织SP[(48.64±3.90)ng/L]、VEGF[(56.38±4.46)ng/L]、TNF-α[(58.25±9.04)ng/L]和IL-1[(42.42±5.68)ng/L]水平低于根尖诱导成形术亚组[(88.05±3.56)、(110.20±6.90)、(96.38±7.85)、(90.28±6.40)ng/L](P<0.05);去牙髓组的牙髓再生术亚组牙髓组织SP、VEGF、TNF-α和IL-1水平低于根尖感染组的牙髓再生术亚组(P<0.05),根尖诱导成形术亚组牙髓组织SP、VEGF、TNF-α和IL-1水平高于根尖感染组的根尖诱导成形术亚组(P<0.05)。结论牙髓病变程度与牙髓组织炎症细胞因子IL-1、TNF-α、SP和VEGF水平具有一定相关性,牙髓再生术和根尖诱导成形术均可修复牙髓病变,但牙髓再生术对去牙髓患牙的治疗效果更佳。

四种冲洗剂对根管内粪肠球菌清除效果的体外实验

目的比较常用的根管冲洗剂对根管内粪肠球菌感染的清除效果。方法建立粪肠球菌根管内感染模型,实验组用4种常用的化学冲洗剂、对照组用0.9%NaCl 溶液冲洗根管。冲洗前、后计数根管内的细菌量,检测残余细菌并观察72h 细菌复苏情况。结果化学冲洗剂的杀菌效果明显好于0.9%Nacl 溶液(P<0.05),2.5%次氯酸钠及2%氯己定明显好于3% H_2O(P<0.05)。结论 2%氯己定、2%氯胺-T 的杀菌效果与2.5%次氯酸钠相似,3%H_2O 杀菌效果较弱。