支气管肺泡灌洗术对重症肺炎患者感染相关蛋白及呼吸动力学指标水平的影响

探讨支气管肺泡灌洗术对重症肺炎患者感染相关蛋白及呼吸动力学指标水平的影响。方法 2023年3月~2024年3月以随机双盲法将60例我院呼吸内科收治的重症肺炎患者分为两组。予以A组呼吸内科常规治疗,B组联合支气管肺泡灌洗术+呼吸内科常规治疗,对比两组治疗总有效率、感染相关蛋白与呼吸动力学指标水平、症状消失及住院时间。结果 B组治疗总有效率(96.67%)高于A组(80.00%);C反应蛋白(Creactiveprotein,CRP)、降钙素原(Procalcitonin,PCT)和血清淀粉样蛋白A(SerumamyloidA,SAA)水平15.45±2.79ng/L、1.04±0.24ng/mL、105.81±8.96mg/L均低于A组24.87±3.54ng/L、1.93±0.43ng/mL、168.67±14.09mg/L;肺动态顺应性(dynamiclungcompliance,Cydn)36.27±2.10mL?cmH2O-1高于A组33.12±2.06mL?cmH2O-1,气道阻力(resistanceinairways,Raw)及呼吸做功(workofbreath,WOB)6.85±1.18cmH2O?L-1?S-1、0.31±0.10J/L均低于A组9.01±1.43cmH2O?L-1?S-1、0.55±0.14J/L;肺部啰音与咳嗽消失时间10.17±3.23d、15.28±4.83d,以及住院时间12.68±2.02d均短于A组14.32±4.51d、20.41±5.06d、14.52±2.53d;指标对比均有统计学意义P〈0.05。结论 支气管肺泡灌洗术能有效地改善重症肺炎感染状态和呼吸功能,并加快病情康复进程,值得深入研究及推广应用。

体检人群血清现症感染蛋白抗体检测幽门螺杆菌现症感染的评价

传统的血清学方法不能反映幽门螺杆菌现症感染,而血清现症感染蛋白抗体检测试剂盒因含有现症感染条带,针对该抗原的抗体的出现提示幽门螺杆菌现症感染。本研究以13C呼气试验为金标准,通过大样本人群数据分析评价血清现症感染蛋白抗体检测幽门螺杆菌现症感染的临床应用价值。

幽门螺旋杆菌IgG抗体及现症感染条带(CIM)蛋白抗体联合检测在健康查体人群中的临床应用

目的探讨采用胶体金幽门螺旋杆菌IgG抗体和现症感染条带蛋白抗体联合检测在健康查体人群中的临床应用价值,了解查体人群HP现症感染情况及治疗依据。方法采用采胶体金幽门螺旋杆菌IgG抗体和现症感染条带蛋白抗体联合检测试剂盒对1 434名查体者进行HP感染检测,并对HP阳性者随机抽样进行组织学检查以明确诊断,并对两种方法检测结果进行统计学分析。对现正感染者进行内科规范治疗后再次做现正感染条带的复检。结果健康查体人群HP感染率为58.2%,CIM线感染检出率98.4%,组织学检查感染检出率98.8%,二者差异无统计学意义(P>0.05),男女检出率二者无显著差异(P>0.05)。治疗后CIM线消失或减弱说明有效率为89%。结论采用胶体金幽门螺旋杆菌IgG抗体和现症感染条带蛋白抗体联合检测适合各级医院大规模查体需要,也可作为现正感染者的对症治疗依据和疗效观察,具有较高的临床应用价值。

高分化及低分化鼻咽癌细胞株中Epstein－Barr病毒潜伏感染膜蛋白（LMP1）基因的原位杂交与克隆及序列分析

应用染色体原位杂交、ＰＣＲ扩增、克隆及核苷酸序列分析等方法，分析了ＣＮＥ１和ＣＮＥ３细胞株中的潜伏感染膜蛋白（ＬＭＰ１）基因。ＣＮＥ１是来自我国东北的高分化鼻咽癌细胞株，ＣＮＥ３是来自广西的低分化鼻咽癌细胞株。染色体原位杂交结果表明，ＣＮＥ１细胞中ＬＭＰ１基因存在于细胞核内，整合在第一号染色体上，ＣＮＥ３中ＬＭＰ１基因则随机存在于细胞核内及多条染色体上。用ＰＣＲ方法分别从ＣＮＥ１及ＣＮＥ３中扩增得到了ＬＭＰ１基因片段（外显子３），核苷酸序列分析证明，来自ＣＮＥ１的ＬＭＰ１与来自Ｂ９５－８细胞的ＬＭＰ１核苷酸序列同源性极高，达９９．５％，而ＣＮＥ３的ＬＭＰ１基因与Ｂ９５－８的ＬＭＰ１基因同源性为９３％。

鼻咽癌组织中Epstein－Barr病毒潜伏感染膜蛋白基因片段的克隆及分析

从两例鼻咽癌（ＮＰＣ）病人的活检组织切片中，用ＰＣＲ方法扩增出ＥＢ病毒潜伏感染膜蛋白（ＬＭＰ）基因的ＥｘｏｎⅠ、ＩｎｔｒｏｎⅠ、ＥｘｏｎⅡ和ＩｎｔｒｏｎⅡ共５００ｂｐ的片段，克隆入载体ｐＧＥＭ－３ｚｆ（＋）′，测定核苷酸序列，其中有一个样品所测序列段与台湾株相似，另一个样品则与Ｅ９５－８极为相似。由此可知，中国大陆南方的ＮＰＣ组织中ＥＢＶ－ＬＭＰ基因存在不同的变异。

单纯疱疹病毒2型感染细胞蛋白27重组真核表达质粒的构建及表达

目的构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染细胞蛋白27(ICP27)基因与pcDNA3.1(+)真核表达质粒的重组质粒pcDNA3.1(+)/ICP27。方法通过RT-PCR方法从HSV-2培养物中提取RNA制备ICP27的编码基因UL54DNA,将其与载体pcDNA3.1(+)连接。通过双酶切和测序鉴定重组质粒是否构建成功,Western blot法鉴定重组质粒在真核细胞COS-7中表达。结果重组质粒pcDNA3.1(+)/ICP27构建成功,可在COS-7中表达。结论成功构建了可在真核细胞内表达的pcDNA3.1(+)/ICP27重组质粒,为下一步研究该重组质粒作为DNA疫苗的免疫学效应奠定了基础。

EBV潜伏感染膜蛋白1在肺癌组织中的表达及意义

目的探讨潜伏感染膜蛋白1(LMP1)在肺组织中的表达意义。方法采用免疫组化法对手术切除的肺癌组织(108例)及癌旁正常肺组织(22例)中的EB病毒(EBV)潜伏感染膜蛋白1(LMP1)进行检测,并用图像分析法进行形态学定量。结果肺癌及癌旁组织中的LMP1阳性率分别为6.5%和0,两者比较无统计学差异(P>0.05),但癌组织中LMP1的平均面积明显高于癌旁组织(P<0.05),表明癌组织中的LMP1表达量高于癌旁组织。结论LMP1在肺组织细胞的恶性转化中可能起一定作用。

家蚕质型多角体病毒感染应答的假定蛋白基因全长cDNA克隆与表达特征分析

在感染家蚕质型多角体病毒(BmCPV)的家蚕中肠组织中发现一个差异表达的假定蛋白基因。利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了该假定蛋白基因的全长cDNA。用生物信息学方法进行基因序列与结构分析表明:该基因全长cDNA序列为486bp,包含108bp的5′端非翻译区序列(5′-UTR)和153bp的3′端非翻译区序列(3′-UTR),开放阅读框(ORF)为225bp,编码74个氨基酸,蛋白分子质量为6.888kD,等电点为5.27;该基因由3个外显子和2个内含子组成,ORF位于第2外显子内,编码蛋白含二次跨膜结构,多肽链表现为疏水性,在多肽链上的第15～16氨基酸残基可能是信号肽的切割位点。RT-PCR结果显示该基因在家蚕5龄幼虫的丝腺、血液、脂肪体、生殖腺及中肠组织中均有表达;荧光定量PCR结果表明该基因在感染Bm-CPV的家蚕中肠组织中的表达水平为正常家蚕中肠组织的6.28倍。研究结果为进一步解析该基因的功能奠定了基础。

蛋白质感染因子与水产养殖

介绍了蛋白质感染因子的概念、蛋白质感染因子复制机理假说及其证明、蛋白质感染因子多样性等内容 ,并讨论了水产养殖动物中存在蛋白质感染因子疾病的可能性。

牙鲆蛋白质感染因子蛋白基因的克隆和结构分析

采用RT-PCR方法分离牙鲆(Paralichthys olivaceus)蛋白质感染因子蛋白编码基因序列。推测的牙鲆蛋白质感染因子蛋白由472个氨基酸组成,分子量约49.6 kD,具有信号肽、短肽顺接重复、疏水区、糖基化位点、二硫键、糖基缩醛磷肌醇锚定位点等蛋白质感染因子蛋白特征结构域,与红鳍东方(Fugu rubripes)和大西洋鲑(Atlantic salmon)蛋白质感染因子蛋白的相似性分别为71.9%和66.4%。牙鲆蛋白质感染因子蛋白编码基因序列的获得为蛋白质感染因子进化与功能研究以及可能存在的鱼类传染性海绵样脑病研究奠定了基础。

EB病毒相关胃癌潜伏感染膜蛋白-1表达的研究

①目的探讨EB病毒阳性胃癌(EBVaGC)中潜伏感染膜蛋白-1(LMP-1)的表达状况。②方法原位杂交法检测胃癌患者石蜡包埋组织标本中EB病毒编码的小RNA(EBV encoded RNA,166bps,EBER-1);免疫组化法检测EBVaGC中LMP-1。③结果EBVaGC中无LMP-1表达。④结论EB病毒阳性胃癌中缺乏潜伏感染膜蛋白LMP1的表达。

鲈鱼蛋白质感染因子蛋白基因的克隆和结构分析

采用RT-PCR方法分离了鲈鱼蛋白质感染因子蛋白编码基因序列,并进行了结构分析.研究证明,该感染因子蛋白由507个氨基酸组成,与红鳍东方、大西洋鲑蛋白质感染因子蛋白的平均相似性为67.9%,预测分子量约54kD,具有信号肽、短肽顺接重复、疏水区、糖基化位点、二硫键、糖基缩醛磷肌醇锚定位点等蛋白质感染因子蛋白的主要特征结构域.鲈鱼蛋白质感染因子蛋白编码基因序列的分离,为蛋白质感染因子的进化、功能研究以及可能存在的鱼类传染性海绵样脑病研究奠定了基础.

大劣按蚊血淋巴中疟原虫感染相关蛋白的cDNA克隆

疟疾是一种严重的传染病,大劣按蚊是我国及东南亚地区的重要传疟媒介。对大劣按蚊抗疟原虫感染分子机制的研究,具有重要意义。我们先前已成功分离了大劣按蚊血淋巴中约氏疟原虫感染相关蛋白(PIRP1),并对该蛋白进行了质谱检测。本研究在已获得PIRP1质谱检测信息的基础上,利用分子生物学技术,成功克隆了该相关蛋白的部分cDNA序列(GenBank序列号为EF409973)。为下一步对该蛋白的功能研究奠定了基础。

日本血吸虫再感染相关蛋白基因的克隆和原核表达(英文)

目的 从日本血吸虫 (S .japonicum )尾蚴文库扩增S .japonicum再感染相关蛋白 (RIRP)基因 ,进行克隆并原核表达出RIRP ,为进一步的功能研究奠定基础。 方法 根据已登陆的S .japonicum成虫期RIRP基因的序列设计两条特异引物 ,以S .japonicum尾蚴cDNA文库为模板扩增RIRP基因cDNA ,将该基因的cDNA克隆入原核表达载体 pGEX 4T 1和真核载体 pcD NA3 .1。转化的克隆通过氨苄青霉素的筛选、PCR扩增、双酶切和最后的测序鉴定。重组的 pGEX 4T 1/RIRP在大肠埃希菌BL2 1(DE3 )中进行表达。SDS PAGE鉴定其在大肠埃希菌中的表达情况和分子质量。用抗 2 6kuGST单抗作western杂交进一步鉴定融合蛋白的表达。 结果 从S .japonicum尾蚴文库中扩增出一条长为 462bp的cDNA片段 ,经测序证实其为RIRP基因的全长cDNA。它编码含 15 3个氨基酸的蛋白质—RIRP ,预测其分子质量单位为 17.5 45ku。RIRPcDNA已被成功克隆入 pGEX 4T 1和pcDNA3 .1载体 ,大肠埃希菌BL2 1(DE3 )编码一个约 17ku的蛋白质。 结论 RIRP基因首次从S .japonicum尾蚴文库中扩增出来 ,并成功构建了原核和真核表达载体 ,而且 ,它首次由大肠埃希菌表达 ,表达蛋白的分子质量单位约 17ku。

C-反应蛋白在新生儿感染性疾病诊断与治疗中的作用

目的探讨C-反应蛋白在新生儿感染性疾病中的应用价值。方法应用免疫透射比浊法对65例患细菌感染性疾病新生儿及30例生理性黄疸新生儿于治疗前抽取静脉血进行C-反应蛋白测定,并比较其临床意义。结果细菌感染组血清C-反应蛋白值明显高于对照组,2组间比较,P<0.01,差异有统计学意义。结论测定C-反应蛋白能有效地帮助临床对新生儿细菌感染进行诊断。并且动态检测C-反应蛋白可作为感染程度和疗效的判断标准,从而提高新生儿早期感染性疾病的诊疗率,有效减少抗菌药物的使用率。

蛋白质感染颗粒与二价铜离子

蛋白质感染颗粒 (PrP)的错误折叠被认为是引起一些神经退化性疾病的主因 ,但其正常构象 (PrPC)的功能却一直不为人所知 .近年来研究发现 ,在正常细胞中 ,尤其是脑细胞中 ,细胞膜PrPC 可通过内吞作用进入细胞质而将Cu2 + 载运至SOD1,从而参与调节SOD1的活性及细胞铜代谢 .另有研究表明 ,Cu2 + 对于PrPSc (错误构象 )的蛋白水解酶K抗性的恢复及不同“病株”

人巨细胞病毒感染对宿主细胞周期蛋白表达影响的实验研究

目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对宿主细胞周期蛋白(Cyclins)表达的影响。方法用HCMV感染同步化于G0/G1期的人胚肺成纤维细胞(HEL),分别于感染后0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h终止培养。用免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测CyclinE、CyclinA、CyclinD1蛋白的表达。结果HCMV感染接触抑制细胞12 h时CyclinE蛋白被诱导,感染后24 h出现CyclinE峰值;HCMV不能诱导CyclinA蛋白表达;CyclinD1没有被诱导,且在感染后24 h开始下降。结论HCMV感染同步化于G0/G1期的细胞后,诱导CyclinE蛋白明显升高,激活CyclinE/Cdk2激酶,使细胞周期越过G1/S限制点,将细胞周期阻止于晚G1期。

嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强蛋白的表达和纯化及其在血清学诊断中的应用

目的表达和纯化出嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强(MIP)蛋白,研究其在军团菌肺炎血清学诊断中应用价值。方法将已构建成功的重组质粒pET-mip转化E.coli BL21感受态细胞,诱导MIP蛋白表达,运用SDS-PAGE分析和亲和层析法纯化。用DRG军团菌IgG/IgM/IgA的ELISA检测试剂盒筛出40份阳性血清和30份阴性血清,用纯化的MIP蛋白建立间接ELISA,同时与R&D的ELISA IgG、IgM、IgA试剂盒分别检测已筛选血清中的IgG、IgM、IgA抗体,然后对这两种方法进行比较,通过敏感性、特异性以及不同检测结果的一致性,来评价该方法的应用价值。结果诱导相对分子质量(Mr)大约40 000的MIP融合蛋白在E.coli BL21中表达并纯化。纯化蛋白建立的间接ELISA分别检测筛选血清中IgG、IgM、IgA抗体与国外ELISA试剂盒(R&D)进行比较,IgG抗体的灵敏度88.5%,特异度95.5%,一致性Kappa值0.846(P<0.05),ROC曲线下面积0.927。IgM抗体的灵敏度89.3%,特异度97.6%,一致性Kappa值0.88(P<0.05),ROC曲线下面积0.947。IgA抗体的灵敏度90%,特异度95.2%,一致性Kappa值0.856(P<0.05),ROC曲线下面积0.931。结论成功诱导了嗜肺军团菌MIP蛋白稳定表达并纯化,运用MIP作为包被抗原的军团菌肺炎的血清学诊断方法具有较高的诊断价值。

朊蛋白感染与神经退行性疾病关系的研究

根据山东大学与美国肯塔基大学(University of Kentucky，Lexington)协议，笔者于2002年3月至2003年6月在美国肯塔基大学医学中心Sanders Brown老年病研究中心微生物学免疫学系进修学习，在Glenn Telling副教授的实验室从事朊蛋白(Prion)

单纯疱疹病毒Ⅱ型感染细胞蛋白22在Vero细胞中的表达特性及其对细胞凋亡的影响

目的:通过单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染细胞蛋白22(ICP22)真核表达质粒在Vero细胞中瞬转表达以及放线菌素D诱导凋亡的方式研究ICP22对Vero细胞凋亡的影响。方法:将含有ICP22基因的重组质粒转染至Vero细胞后,经放线菌素D诱导细胞凋亡,通过MTT法、Caspase3活性检测法检测细胞凋亡水平。结果:放线菌素D诱导处理48 h后,重组质粒组Vero细胞存活率为(0.860±0.110)%,Caspase3活性为(0.065±0.009)%。结论:在Vero细胞中,ICP22可有效降低由放线菌素D诱导的凋亡率,即ICP22可能具有抗细胞凋亡的作用。