慢性束缚与慢性不可预期温和应激抑郁模型小鼠的行为学比较及其发生机制研究

【目的】通过比较慢性束缚应激(Chronic restraint stress,CRS)与慢性不可预期温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)对C57BL/6小鼠行为学指标及大脑海马区相关功能的影响,探讨抑郁症的发生机制。【方法】分别建立CRS及CUMS小鼠模型,通过旷场试验、强迫游泳试验和悬尾试验测定小鼠的行为学指标;取小鼠脑组织,制备常规石蜡切片,运用苏木素-伊红(HE)与免疫组化染色考察小鼠大脑海马区组织形态及5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)的表达情况,并运用荧光分光光度法测定小鼠海马组织单胺氧化酶活性的变化。【结果】与空白对照组相比,CRS组小鼠的水平穿格数、直立次数及体质量均显著减少,悬尾及强迫游泳试验累计不动时间百分比无明显变化(P>0.05);而CUMS组小鼠自发活动无明显改变(P>0.05),但悬尾及强迫游泳试验累计不动时间百分比极显著增加(P<0.01),体质量显著下降。脑组织形态学研究结果显示,CUMS组小鼠海马CA1、CA3区和齿状回均出现萎缩,而CRS组小鼠海马CA1区未受影响,CA3区和齿状回均发生萎缩。与对照组相比,CRS组与CUMS组小鼠大脑海马单胺氧化酶活性升高,5-HT1AR表达均减少,差异均分别达显著和极显著水平。【结论】CRS和CUMS均可不同程度地引起抑郁样症状,CRS对探索性行为的抑制较明显,CUMS则可引发典型的行为绝望状态;CRS与CUMS组小鼠的行为学差异可能与2组抑郁模型动物脑内海马区组织结构及功能变化的差异存在相关性。

褐藻寡糖对慢性不可预知温和应激诱导的斑马鱼抑郁样行为及肠道菌群的影响

目的:探究褐藻寡糖(AOS)对慢性不可预知温和应激(CUMS)模型斑马鱼抑郁样行为及肠道菌群的影响。方法:将野生型AB品系斑马鱼随机分为正常组、模型组、阳性对照组和AOS低、中、高剂量(AOS-L、AOS-M、AOS-H)组,每组24尾。除正常组外,其余各组均接受14 d的CUMS建立斑马鱼抑郁样模型。除正常组和模型组给予等体积饲养水外,其余各组于第8天开始每天浸泡60 min相应浓度的AOS。14 d后,采用新型水箱测试(NTT)和明暗箱测试(LDB)进行行为实验,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脑组织中5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)水平,16s r RNA测序检测肠道菌群变化。结果:与模型组比较,在NTT中,阳性对照组和AOS-H组斑马鱼第1次进入顶部潜伏期显著缩短,在顶部的时间显著延长,进入顶部的次数显著增加(均P<0.01),活动范围扩大。与模型组比较,在LDB中,阳性对照组和AOS-H组斑马鱼第1次进入光亮区域的潜伏期显著缩短,AOS-M组和AOS-H组在光亮区域的持续时间显著延长,阳性对照组和AOS各剂量组进入光亮区域的次数显著增加(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组体质量指数、5-HT和NE水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,AOS-M组、AOS-H组体质量指数显著增加(P<0.05或P<0.01);阳性对照组和AOS-H组5-HT水平显著提高(P<0.01)。AOS可以提高肠道菌群丰富度和多样性,调节群落组成结构。在门水平上,调节变形菌门、放线菌门、梭杆菌门和厚壁菌门等菌门的相对丰度。在属水平上,调节鲸杆菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属、未分类根瘤菌属和根瘤菌属菌群等菌属的相对丰度。影响肠道中碳代谢、嘌呤代谢和丙酮酸代谢等代谢功能及相关物质转运过程。结论:AOS能改善CUMS斑马鱼抑郁样行为,增加体质量指数,其作用与调节神经递质、肠道菌群组成及其代谢和物质转运功能有关。

小鼠在慢性不可预知应激条件下的学习认知能力与神经肽Y、皮质醇的相关性

目的 探讨慢性不可预知轻度应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)状态下小鼠的学习认知能力与血清神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)、皮质醇等应激因子水平的相关性。方法 将12只C57BL/6小鼠分为对照组和CUMS组,每组各6只。CUMS组小鼠完成30天CUMS造模,对照组小鼠无特殊处理,定期监测两组小鼠的体质量变化。利用Morris水迷宫实验检测两组小鼠水迷宫运动轨迹、潜伏期、第二象限/第四象限路程比值、穿越平台次数。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法检测两组小鼠血清NPY、皮质醇、α淀粉酶、酪氨酸水平。结果 造模后第9天CUMS组小鼠体质量较对照组降低(P<0.05),性情易暴躁,提示应激措施有效果,造模成功。Morris水迷宫实验第2天,两组小鼠运动轨迹、潜伏期、第二象限/第四象限路程比值、穿越平台次数比较差异无统计学意义(P>0.05);Morris水迷宫实验第6天,两组小鼠运动轨迹、潜伏期、第二象限/第四象限路程比值、穿越平台次数比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。与对照组相比,CUMS组小鼠血清NPY、皮质醇水平升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。小鼠血清NPY水平与第二象限/第四象限路程比值存在线性关系(y=-0.001x+1.738,R^(2)=0.586,P=0.004),与潜伏期存在线性关系(y=-0.027x+51.130,R^(2)=0.498,P=0.010)。结论 CUMS状态下,小鼠血清NPY水平的升高与学习认知能力的提高有关。

慢性不可预测轻度应激对大鼠脑电信号及睡眠结构的影响

目的:大鼠慢性不可预测轻度应激(Chronic unpredictable mild stress, CUMS)模型是研究抑郁症发病机制常用的动物模型之一,睡眠障碍是抑郁症的常见伴随症状。本研究通过分析CUMS模型大鼠的脑电信号及睡眠结构变化,为CUMS模型应用于抑郁症睡眠障碍研究提供依据。方法:取雄性SD大鼠分为2组,即正常对照组和模型组,应用7种CUMS进行造模,并使用蔗糖偏好实验、强迫游泳实验及旷场实验进行行为学检测,评价CUMS大鼠的抑郁样行为。采用无线遥测脑电技术对大鼠海马CA3区的脑电信号进行采集和分析。结果:与正常对照组相比,CUMS组大鼠的蔗糖偏好率降低,强迫游泳静止不动时间增加,旷场实验穿越格子数,总移动距离和修饰行为减少,无线遥测脑电数据分析显示CUMS组大鼠Beta和Theta占比明显增加,WAKE占比增加,REM和NREM占比值降低。结论:CUMS大鼠与临床抑郁症患者的EEG和睡眠结构变化有较好一致性,可进一步用于抑郁伴随睡眠障碍的机制研究和药物治疗作用的评价。

腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及BDNF/TrkB/CREB通路的影响

目的:观察腧穴“解郁方”对慢性不可预测轻度应激(CUMS)抑郁大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶B受体(TrkB)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响。方法:40只无特定病原体(SPF)级Sprague Danley(SD)雄性大鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、西药组(10只)、针刺组(10只),除空白组外,其余3组连续28 d构建CUMS抑郁大鼠模型,造模成功后,西药组连续14 d灌胃盐酸帕罗西汀混悬液,每日1次;针刺组针刺百会、太冲、神门,每日1次,每次20 min,连续针刺14 d。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠海马病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)水平;免疫组化(IHC)检测海马BDNF、TrkB表达情况,蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)测定海马BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组血清CRH、ACTH和CORT含量上升(P<0.01),海马病理损伤严重,海马BDNF、TrkB平均光密度降低(P<0.01),BDNF、TrkB、CREB蛋白及mRNA明显下降(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,针刺组血清CRH、ACTH、CORT含量下降(P<0.05),海马病理损害明显减轻,BDNF、TrkB平均光密度明显增加(P<0.05),BDNF、CREB、TrkB蛋白及mRNA表达水平上升(P<0.05)。结论:腧穴“解郁方”可能通过调节HPA轴和调控BDNF/TrkB/CREB信号通路,改善CUMS诱导的大鼠抑郁样行为。

桂附汤对慢性不可预见性温和应激小鼠抑郁样行为及海马脑源性神经营养因子表达的影响

目的研究桂附汤对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictive mild stress,CUMS)小鼠抑郁样行为的干预作用及对脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法利用CUMS法诱导C57BL/6小鼠构建抑郁模型,通过蔗糖偏好实验、旷场实验、悬尾实验观察桂附汤对小鼠抑郁样行为的影响,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测小鼠海马组织BDNF mRNA表达,免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测小鼠海马区BDNF蛋白定位表达,苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察海马组织形态学的变化。结果与对照组相比,模型组体质量下降(P<0.01),肾上腺指数升高(P<0.05),糖水偏好度显著降低(P<0.01),旷场实验总静止时间显著升高(P<0.01)、进入中央区域次数显著降低(P<0.01),悬尾实验静止时间显著升高(P<0.01),BDNF蛋白表达和m RNA水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,桂附汤高剂量组(P<0.01)、中剂量组和氟西汀组(P<0.05)肾上腺指数显著降低,桂附汤中、高剂量组和氟西汀组旷场实验总静止时间显著降低(P<0.01)、进入中央区域的次数显著增加(P<0.01),各干预组小鼠糖水偏好度显著增加(P<0.05),旷场实验总静止时间显著降低(P<0.01)、进入中央区域的次数显著增加(P<0.01),悬尾实验静止时间显著降低(P<0.01),海马BDNF m RNA及蛋白表达都显著增加(P<0.01),海马组织病理损伤明显改善。结论桂附汤可改善CUMS诱导的小鼠抑郁样行为,上调BDNF表达,保护海马神经元的结构和功能。

抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响

目的探究抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和抗性糊精组,大鼠基于慢性不可预知温和应激(CUMS)建立抑郁模型,3周后进行糖水偏好实验和旷场实验检测。模型组筛选应激敏感大鼠,其他两组随机选择等数量大鼠利用16S rRNA测序技术检测其肠道菌群的组成和结构变化。结果与对照组相比,模型组大鼠肠道菌群厚壁菌门[(0.92251±0.02838)vs.(0.82572±0.00761)]、阿克曼菌属[(0.01327±0.00076)vs.(0.00000±0.00000)]、乳球菌属[(0.00029±0.00010)vs.(0.00000±0.00000)]相对丰度显著降低(P<0.05);拟杆菌门[(0.04671±0.00263)vs.(0.12341±0.03576)]、粪杆菌属[(0.00011±0.00004)vs.(0.00057±0.00005)]、Ruminococcaceae_UCG_014[(0.01003±0.00384)vs.(0.10976±0.04364)]相对丰度显著升高(P<0.05)。与模型组相比,抗性糊精可对丰度发生变化的菌群显著回调(P<0.05)。结论抗性糊精能够调节CUMS大鼠的肠道菌群,通过改善益生菌的相对丰度、降低致病菌的相对丰度促使肠道恢复动态平衡,为抑郁症的治疗提供实验基础研究。

迷走神经刺激改善慢性不可预知性温和应激大鼠的抑郁样行为

目的:研究迷走神经刺激(VNS)对慢性不可预知性温和应激(CUMS)模型大鼠抑郁样行为的影响。方法:利用CUMS方法制备大鼠抑郁模型,用VNS对大鼠进行治疗,糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠的抑郁样行为,高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠脑脊液中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)及去甲肾上腺素(NE)的含量。结果:与正常大鼠相比,CUMS组大鼠体重增加缓慢(P<0.05),糖水偏好率降低(P<0.05)且游泳不动时间增加(P<0.05),表现出明显的抑郁样行为,同时其脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE含量显著降低(P<0.05)。经过VNS治疗,大鼠的体重增加明显(P<0.05),糖水偏好率增加(P<0.05)且游泳不动时间减少(P<0.05),与之相适应的是脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE水平显著升高(P<0.05)。结论:VNS能够改善CUMS大鼠的抑郁样行为并提高脑脊液中5-HT和NE的水平。

孕期慢性不可预知温和应激致产后抑郁的实验模型验证

目的模拟孕妇在妊娠期经受的社会心理因素影响来建立产后抑郁模型,为后期从围产期出发研究产后抑郁发生原因及机制提供科学依据。方法32只健康成年SD雌鼠随机分为对照组和模型组,利用21 d慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)进行应激刺激,在应激第3天与雄鼠进行1∶2合笼饲养,确定妊娠后,雌雄分笼,雌鼠单笼饲养。ELISA试剂盒测定血浆皮质酮水平。利用蔗糖偏好实验、旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验进行产后抑郁情绪判定,利用ELISA试剂盒测定雌鼠在应激第21天、产后1周、产后3周血清中雌二醇(estradiol,E_(2))水平。结果应激第7天、21天模型组血浆皮质酮水平增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05),表明孕期雌鼠处于慢性应激状态。与对照组比较,模型组产后1周旷场实验中外周运动时长延长,中心运动时长缩短(P均<0.05);产后1周、3周模型组1%糖水消耗率降低(P均<0.05);模型组产后1周、产后3周的悬尾实验中静止时间增长(P均<0.05);产后1周模型组强迫游泳中静止时间延长(P<0.05)。产后对照组和模型组E2水平均下降,且模型组产后1周和产后3周E2水平均低于对照组(P均<0.05)。结论孕期慢性不可预知温和应激刺激可用来建立产后抑郁大鼠实验模型。

氢自由基水对慢性应激诱导的抑郁样行为的改善作用研究

目的:观察氢自由基水的安全性及其对大鼠抑郁样行为的改善效果。方法:将20只雌雄各半的6周龄Sprague-Dawley(SD)大鼠基于体重随机分为实验组和对照组,实验期间分别给予高浓度氢自由基水和等量蒸馏水灌胃,观察并记录各组大鼠的一般情况、体重变化并进行相关病理学检查。将32只雄性4周龄SD大鼠基于体重随机分为正常对照组、模型组、低浓度组、高浓度组,对模型组、低浓度组、高浓度组大鼠进行慢性不可预测轻度应激干预6周,构建慢性不可预测轻度应激大鼠抑郁模型,通过观察各组大鼠行为学指标、血清皮质酮水平评估氢自由基水对抑郁大鼠的影响;通过比较各组大鼠血常规、血生化及病理切片结果初步评价氢自由基水的短期安全性。结果:相同性别时,实验组与对照组同期体重增长率、重要器官脏器指数比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。为期6周的慢性不可预测轻度应激干预大鼠呈现了抑郁样行为,低浓度组、高浓度组能有效缓解;各组血常规结果均在正常范围内;低浓度组、高浓度组碱性磷酸酶水平虽低于正常对照组(均P<0.05),但与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);正常对照组、模型组、低浓度组、高浓度组γ-谷氨酰氨基转移酶、尿素、肌酐、天门冬氨酸氨基转移酶、血清白蛋白比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);镜下发现,模型组肾小管上皮细胞变性坏死程度较高浓度组更严重,模型组膀胱黏膜下层局部可见轻微炎症细胞浸润,而高浓度组未见,其余脏器组织高浓度组与正常对照组比较均未见明显异常。结论:在本实验条件下,实验结果未显示出氢自由基水有急性和短期毒性效应及毒作用特征,并发现其对慢性不可预测轻度应激诱导的抑郁样行为有一定保护作用,可能具有剂量效应。

白果内酯对慢性应激导致小鼠抑郁的保护作用及机制研究

为了探究白果内酯(BB)对抑郁小鼠的保护作用及其作用机制,文章以40%白果内酯粗品为原料,通过分子印迹固相萃取法(molecular imprinting solid phase extraction,MISPE)制备纯度为98.21%白果内酯。采用6~8周龄ICR小鼠36只,随机分为对照组、模型组、氟西汀组(10 mg/kg)、低剂量组(BB 3.5 mg/kg)、中剂量组(BB 7.0 mg/kg)、高剂量组(BB 14.0 mg/kg)6组。除对照组外,其余组均通过慢性不可预测性轻度应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型构建小鼠抑郁模型。实验过程中观察白果内酯干预后小鼠抑郁行为的变化,并记录小鼠体质量。实验结束检测小鼠血清中炎症因子、脑组织内单胺类神经递质和海马区脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的相对表达量。研究发现,白果内酯的干预使得小鼠抑郁情况得到改善,能够显著降低炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的质量浓度,提高单胺类神经递质多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的质量比,并促进BDNF的表达。结果表明,白果内酯能够通过抑制炎症促进脑内单胺类神经递质的发生和BDNF的表达,从而发挥对抑郁小鼠的保护作用。

木犀草素对慢性不可预知性温和应激所致小鼠抑郁的改善作用

目的探讨木犀草素对慢性不可预知性温和应激抑郁模型(CUMS)所致小鼠脑组织氧化应激损伤的改善作用。方法建立小鼠慢性不可预知性温和应激抑郁模型;用经典的糖水消耗实验检测小鼠快感缺失;旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠的活动能力和绝望程度;采用分光光度法测定小鼠脑组织超氧物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)含量。结果与模型组相比,木犀草素能明显改善小鼠抑郁样行为,提高SOD和GSH活性,降低小鼠脑组织MDA含量。结论木犀草素对CUMS小鼠的抑郁样行为有改善作用,作用机制可能与其增强小鼠脑组织的抗氧化活性,改善氧化/抗氧化平衡有关。

乌灵胶囊增加慢性不可预见性温和应激大鼠海马连接蛋白43的表达改善神经再生(英文)

目的:探讨乌灵胶囊对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress , CMS)抑郁模型大鼠海马齿状回脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor , BDNF)、神经再生,以及连接蛋白43(connexin 43 ,Cx43)表达的影响。方法:45只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入对照组(n=15)、模型组(n=15)和乌灵胶囊组(n=15)。模型组和乌灵胶囊组大鼠接受连续3周的CMS,造模期间,乌灵胶囊按100 mg/(kg.d)加入乌灵胶囊组大鼠的膳食中,连续治疗21 d。采用糖水偏爱实验评价大鼠的抑郁程度。抑郁行为测试结束后,取双侧海马组织,用免疫组织化学法检测BDNF与5-溴脱氧尿苷(5-bromodeoxyuridine ,BrdU)的表达;用逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹法检测海马中Cx43 mRNA与蛋白表达。结果:慢性应激大鼠齿状回BDNF阳性表达、新生细胞数及Cx43 mRNA和蛋白表达水平均较正常大鼠明显下降。乌灵胶囊治疗后,CMS大鼠抑郁行为得到改善,异常的海马神经再生恢复,Cx43 mRNA和蛋白表达变得正常,但BDNF表达无明显改变。结论:乌灵胶囊可增加CMS模型大鼠海马神经再生及改善抑郁症状,其机制可能与增加Cx43表达有关,与BDNF无关。

宁夏无果枸杞芽提取物对慢性温和不可预见性应激小鼠学习、记忆的影响

目的:探讨宁夏无果枸杞芽提取物(fruitless lycium-sprout extracts,FLE)对成年慢性应激小鼠学习、记忆功能,血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织中神经细胞粘附分子(NCAM)表达的影响。方法:将40只成年昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、FLE低剂量组(FLE1组)和高剂量组(FLE2组),每组10只;采用慢性温和不可预见性应激(chronic mild unpredictable stress,CUMS)方法建立小鼠抑郁模型。在造模完成后灌胃给药,1次/d,连续灌胃6周,FLE1组、FLE2组分别用质量体积百分比为10%、20%的FLE每日0.2 ml/10 g灌胃,正常对照组及模型组灌胃等量生理盐水。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠的学习记忆能力,黄嘌呤氧化酶法测定血清和脑组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,免疫组化染色法检测脑组织中N-CAM蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠的目标象限停留时间减少,隐藏平台象限获得时间延长,血清SOD活性降低,MDA水平提高,脑组织中N-CAM表达下调(P<0.01);与模型组比较,FLE2组的目标象限停留时间延长,隐藏平台象限获得时间缩短,血清和脑组织中SOD活性均增加,MDA含量均降低(P<0.05),脑组织中N-CAM表达均上调(P<0.001)。结论:FLE可以提高CUMS小鼠学习和记忆的能力,其机制可能与抗氧化作用有关。

miRNA132在抑郁症患者及慢性不可预知温和应激抑郁模型大鼠中的表达

目的观察首发抑郁症患者外周血及慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型大鼠血液和前额叶皮层中miRNA132的表达水平。方法以2017年3月至2018年5月在杭州市第七人民医院精神科门诊治疗的首发抑郁症患者(抑郁组)41例及同期招募的健康志愿者(对照组)31例为研究对象,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分评估抑郁症患者严重程度。雄性SD大鼠24只,采用配对比较法随机分为对照组和CUMS组,每组12只;分别用糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为,ELISA法检测大鼠血浆皮质酮水平。采用实时荧光定量PCR法检测受试者外周血白细胞中和大鼠血液及前额叶皮层中miRNA132表达水平。结果抑郁症患者外周血白细胞miRNA132水平为2.37±0.36,明显高于对照组的1.34±0.16(t=2.355,P=0.0213);抑郁症组患者外周血白细胞miRNA132表达水平与HAMD17得分呈显著正相关(P=0.0004,rs=0.5303,n=41)。CUMS组大鼠不动时间为(72.67±2.95)s,明显多于对照组的(40.00±5.49)s(t=2.366,P=0.0395);蔗糖消耗为(55.67±6.42)%,明显低于对照组的(98.21±1.28)%(t=6.502,P<0.0001);血浆皮质酮水平为(1396.0±254.9)nmol/L,明显高于对照组的(557.3±158.4)nmol/L(t=2.795,P=0.0190)。CUMS组大鼠血液中白细胞和前额叶皮层中的miRNA132表达水平分别为2.32±0.88和2.80±0.76,明显高于对照组的1.18±0.36(t=2.273,P=0.0463)和0.99±0.23(t=2.553,P=0.0287)。结论临床抑郁症患者外周血miRNA132表达趋势与CUMS抑郁模型大鼠miRNA132表达趋势一致。CUMS抑郁模型大鼠血液中miRNA132表达与前额叶皮层中表达也一致,血液miRNA132表达可在一定程度上反映前额叶皮层的miRNA132表达变化趋势。

复方柴金解郁片对慢性温和不可预知性应激抑郁大鼠海马突触可塑性的影响

目的观察复方柴金解郁片对慢性温和不可预知性应激抑郁大鼠海马神经元突触可塑性的影响,探讨其抗抑郁的作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、文拉法辛组和复方柴金解郁片高、中、低剂量组,每组10只,除空白组外,采用慢性温和不可预知性应激结合孤养建立抑郁大鼠模型,同时灌胃相应药物,连续42 d。采用糖水消耗实验、旷场实验、强迫游泳实验进行行为学评价,HE染色观察大鼠海马组织病理变化,高尔基染色观察海马神经元树突棘变化,Western blot检测海马组织胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、树突棘素(Spinophilin)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠糖水偏好度降低,总活动次数显著减少,游泳不动时间显著增加(P<0.05,P<0.01),海马神经元突触损伤,排列紊乱,树突棘数量减少或缺失,海马组织GDNF、Spinophilin蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,文拉法辛组和复方柴金解郁片中、低剂量组大鼠糖水偏好度升高,总活动次数显著增加,游泳不动时间显著减少(P<0.05,P<0.01),海马神经元突触损伤减轻,树突分支和树突棘数量增加,海马组织GDNF、Spinophilin蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论复方柴金解郁片可改善慢性温和不可预知性应激大鼠抑郁样行为,其机制可能与上调海马组织GDNF、Spinophilin蛋白表达,调控海马神经元突触可塑性有关。

慢性不可预见性应激致大鼠髁突软骨组织学变化的自然转归

目的探讨慢性不可预见性应激引起的颞下颌关节髁突软骨的组织学受损的转归,为颞下颌关节紊乱病的防治提供实验依据。方法本动物实验经第四军医大学口腔医院实验动物管理伦理委员会批准(批准号:2020伦审字081号)。将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、应激组、应激去除2周组、应激去除4周组、应激去除8周组。对大鼠施加的慢性不可预见性应激(chronic unpredictable moderate stress,CUMS)包括24 h潮湿垫料、12 h倾斜饲养、4 h噪音、昼夜颠倒、强迫浸水、夹尾、束缚应激,持续8周;在去除应激2周、4周、8周后观察其血清学、行为学以及髁突软骨组织学与超微结构的变化,其中采用酶联免疫法观察大鼠的血清促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质酮(corticosterone,CORT)水平的变化,采用糖水偏好实验和强迫游泳实验观察大鼠抑郁样情绪的行为学变化,运用免疫组织化学染色法和Western blot法检测髁突软骨白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)和基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)的表达。结果应激组在CUMS刺激持续8周末时,与对照组相比大鼠血清中CORT和ACTH水平增高(P<0.01),行为学表现为摄糖减少、强迫游泳实验中“不动”时间延长(P<0.01),说明出现了明显的快感缺失、抑郁、绝望情绪,证明CUMS模型建立成功;并且髁突软骨表现出明显的退行性改变,软骨表面胶原纤维排列紊`乱,蛋白多糖合成减少;髁突中的IL-1α和MMP-3在各层软骨的胞内和细胞外基质中均有表达,且表达水平升高(P<0.01)。应激去除2周后CORT和ACTH血清学水平下降,但高于对照组(P<0.01),行为学检测与对照组相比仍有差异(P<0.01);髁突软骨表面仍可看到松解的胶原纤维,增殖层内可见一些游离细胞区;髁突中的IL-1α和MMP-3在各层软骨的表达较应激组降低,但仍高于对照组(P<0.01)。应激去除4周后,CORT和ACTH血清学变化恢复到正常水平,行为学测试与对照组仍有差异(P<0.05),髁突软骨表面有少量胶原纤维,IL-1α和MMP-3的表达与应激组相比显著下降(P<0.01),其中IL-1α水平接近对照组水平(P>0.05),但MMP-3的表达仍高于对照组(P<0.01)。应激去除8周后,行为学变化也恢复到正常水平,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),髁突胶原纤维增多,呈现波纹状,并未发生严重的软骨下骨的损伤,未发生不可逆损害,IL-1α和MMP-3的表达水平均接近对照组水平(P>0.05)。结论CUMS引起的行为学改变和髁突软骨损伤在应激因素去除后可以随时间自然恢复,IL-1α和MMP-3表达的下降可能是这种自我修复过程的内在机制之一。

慢性不可预见性温和应激对大鼠行为及下丘脑胃泌素释放肽mRNA表达的影响

目的:研究慢性不可预见性温和应激(CUMS)对动物行为学和下丘脑胃泌素释放肽(GRP)mRNA表达的影响。方法:将14只大鼠随机分为抑郁组和对照组各7只,抑郁组采用CUMS制备抑郁模型。对2组大鼠进行行为学观察,使用荧光定量PCR检测GRP mRNA表达。结果:与对照组比较,抑郁组大鼠在应激后的糖水偏好和自主活动显著减低(P<0.001),GRP mR-NA表达升高(P<0.05)。结论:慢性应激后,出现抑郁样行为改变与GRP mRNA表达上调相关。

氟西汀对小鼠慢性不可预知温和应激所致学习记忆减退的改善作用

目的探讨抗抑郁药氟西汀对小鼠慢性不可预知温和应激所致的学习、记忆能力减退的影响。方法将30只健康雄性昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组,每组10只。模型组、氟西汀组均给予慢性不可预知温和应激刺激,11种应激因子随机给予,共6周。在刺激过程中,氟西汀组每天给予氟西汀20 mg/kg灌胃,模型组给予同等体积的双蒸水灌胃。刺激结束后,应用水迷宫实验方法评价小鼠学习、记忆能力。结果刺激6周后,模型组小鼠空间学习、记忆能力均显著低于正常组(P均<0.05),氟西汀组学习、记忆能力均较模型组明显改善(P均<0.05)。结论氟西汀对慢性不可预知温和应激所致学习、记忆能力损伤具有明显改善作用。

不同时程的慢性不可预计温和应激对大鼠海马神经可塑性相关蛋白水平的影响

目的:探讨不同时程的慢性不可预计温和应激对大鼠海马区神经可塑性相关蛋白水平的影响。方法:24只大鼠随机分为4组,各6只:正常对照组、应激1周组、应激2周组、应激3周组,分别给予应激0、1、2、3周。采用Western blot方法检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的蛋白水平。结果:与正常对照组对比,应激1周组、应激3周组的BDNF、CREB、Bcl-2的蛋白水平较低(P<0.05),应激2周组无明显差异;应激1周组和应激3周组之间的BDNF、CREB、Bcl-2蛋白水平无明显差异。结论:海马区的神经可塑性相关蛋白BDNF、CREB、Bcl-2的水平变化可能与抑郁行为的变化存在一定的关联性。