慢性不可预知温和刺激抑郁模型及其评价指标的研究进展

抑郁症是一种严重的精神疾病,其发病率逐年上升,至2030年,将居全球疾病负担首位。目前,抑郁症的发病机制尚不完全清楚,其治疗手段有限。因此,迫切需要通过能够模拟人类抑郁行为的动物模型来探索其发病机制,继而寻找相应的治疗药物。慢性不可预知温和刺激(CUMS)模型是通过模拟人类生活中的不良应激事件,从而诱发动物抑郁样症状,其病理生理机制更符合人类抑郁症的发病机制,是一个经典的抑郁症动物模型。CUMS模型评价主要通过糖水消耗实验、旷场实验、强迫游泳等行为学评价方法和神经递质、神经营养因子、神经炎症因子等实验室评价指标,这些评价方法的侧重点各自不同,相互联系又相互补充,通常需要采用多种评价方法综合观察,从而保证CUMS模型的可信度。

二仙汤对慢性不可预知温和刺激诱导的抑郁小鼠行为学及神经递质水平的影响

目的:研究二仙汤对慢性不可预知温和刺激诱导的抑郁小鼠行为学及血清激素的影响。方法:将40只雌性昆明小鼠随机分成空白组、模型组、中药组和氟西汀组,每组10只。除空白组外,其余组别使用7种随机慢性不可预知温和刺激造成小鼠的抑郁样模型,为期4周。第5周开始,中药组给予二仙汤2.0g/kg灌胃,氟西汀组给予氟西汀6.0mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水,为期2周。通过观察小鼠的精神状态、体质量变化情况、糖水享乐、悬尾和强迫游泳等来判别小鼠的行为学状态;使用ELISA检测小鼠血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)的激素水平。结果:中药组与氟西汀组的体质量均比模型组高(P<0.01),但依然低于空白组;在享乐行为的蔗糖偏好中,模型组处于一个持续低迷的状态,中药组和氟西汀组的给药介入明显改善这种现象(P<0.01);强迫游泳和悬尾的行为学测试中,相比于模型组,二仙汤可以显著提升小鼠在绝望状态下的挣扎求生欲望,减少其不动时间(P<0.01);血清激素检测结果中,二仙汤可以直观地增强神经递质5-HT、DA的水平含量(P<0.05),从而提升下丘脑的精神愉悦性。结论:二仙汤可以有效改善抑郁小鼠的精神状态、恢复正常的行为欲望,并增加神经递质的表达。

林下参提取物对慢性不可预知温和应激模型小鼠抑郁样行为及HPA轴影响

目的:研究林下参提取物(understory Panax ginseng extract,UPGE)对慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型小鼠抑郁样行为及下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴的影响。方法:超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法鉴别UPGE中的皂苷成分。将60只雄性昆明小鼠随机分为空白组(Control),模型组(CUMS),文拉法辛组(10 mg·kg^(−1)Ven)以及林下参提取物组(100 mg·kg^(−1)UPGE)。除空白组外,均采用CUMS诱导各组小鼠抑郁,灌胃给药21 d后通过小鼠体质量,进行糖水偏好实验,旷场实验,水迷宫实验分析其行为学变化;采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH),促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质酮(corticosterone,CORT)的含量,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察小鼠海马CA1,CA3区神经元细胞病理变化,原位末端标记法(TUNEL)显色法检测海马区细胞凋亡情况。结果:UPGE中含16种皂苷成分。相比于模型组,UPGE给药组小鼠糖水偏好度显著提升(P<0.01)、旷场实验中水平运动距离增加和垂直站立次数增加(P<0.05,P<0.01)、水迷宫实验中逃避潜伏期降低(P<0.05)、增加目标象限停留时间、穿越平台次数(P<0.05,P<0.01)、能够缓解海马神经元细胞的损伤,血浆中ACTH、CORT和CRH水平降低(P<0.05),海马区细胞凋亡率降低(P<0.05,P<0.01)。结论:UPGE有显著的抗抑郁作用,其作用机制可能与调节HPA轴功能有关。

迷走神经刺激改善慢性不可预知性温和应激大鼠的抑郁样行为

目的:研究迷走神经刺激(VNS)对慢性不可预知性温和应激(CUMS)模型大鼠抑郁样行为的影响。方法:利用CUMS方法制备大鼠抑郁模型,用VNS对大鼠进行治疗,糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠的抑郁样行为,高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠脑脊液中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)及去甲肾上腺素(NE)的含量。结果:与正常大鼠相比,CUMS组大鼠体重增加缓慢(P<0.05),糖水偏好率降低(P<0.05)且游泳不动时间增加(P<0.05),表现出明显的抑郁样行为,同时其脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE含量显著降低(P<0.05)。经过VNS治疗,大鼠的体重增加明显(P<0.05),糖水偏好率增加(P<0.05)且游泳不动时间减少(P<0.05),与之相适应的是脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE水平显著升高(P<0.05)。结论:VNS能够改善CUMS大鼠的抑郁样行为并提高脑脊液中5-HT和NE的水平。

孕期慢性不可预知温和应激致产后抑郁的实验模型验证

目的模拟孕妇在妊娠期经受的社会心理因素影响来建立产后抑郁模型,为后期从围产期出发研究产后抑郁发生原因及机制提供科学依据。方法32只健康成年SD雌鼠随机分为对照组和模型组,利用21 d慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)进行应激刺激,在应激第3天与雄鼠进行1∶2合笼饲养,确定妊娠后,雌雄分笼,雌鼠单笼饲养。ELISA试剂盒测定血浆皮质酮水平。利用蔗糖偏好实验、旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验进行产后抑郁情绪判定,利用ELISA试剂盒测定雌鼠在应激第21天、产后1周、产后3周血清中雌二醇(estradiol,E_(2))水平。结果应激第7天、21天模型组血浆皮质酮水平增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05),表明孕期雌鼠处于慢性应激状态。与对照组比较,模型组产后1周旷场实验中外周运动时长延长,中心运动时长缩短(P均<0.05);产后1周、3周模型组1%糖水消耗率降低(P均<0.05);模型组产后1周、产后3周的悬尾实验中静止时间增长(P均<0.05);产后1周模型组强迫游泳中静止时间延长(P<0.05)。产后对照组和模型组E2水平均下降,且模型组产后1周和产后3周E2水平均低于对照组(P均<0.05)。结论孕期慢性不可预知温和应激刺激可用来建立产后抑郁大鼠实验模型。

雌马酚(S-equol, Eq)对慢性不可预知温和刺激小鼠抑郁样行为的改善作用

为探究雌马酚(S-equol, Eq)对慢性不可预知温和刺激抑郁模型(Chronic Unpredictable Mild Stress, CUMS)小鼠的改善作用,试验设空白组(Con)、模型组(CUMS)、雌马酚低剂量组(Eq-L,10 mg·kg-1)、雌马酚中剂量组(Eq-M,20 mg·kg-1)和雌马酚高剂量组(Eq-H,40 mg·kg-1),在预防给药14 d后,对模型组和雌马酚组进行CUMS造模刺激,造模42 d之后监测体重,依次进行空场、糖水偏爱、悬尾、强迫游泳和新奇抑制摄食5种行为学试验,并检测血清中皮质酮(CORT)水平。行为学结果显示:与空白组相比,CUMS模型组小鼠的自主活动能力未受到显著影响,体重和糖水偏爱指数显著下降,悬尾、强迫游泳中不动时间和新奇抑制摄食潜伏期显著延长;与模型组相比,雌马酚没有影响小鼠的自主活动,显著提高了小鼠的糖水偏爱指数,缩短了悬尾、强迫游泳不动时间和新奇抑制摄食潜伏期。此外,CUMS模型组小鼠血清中CORT显著上调,雌马酚给药显著改善上述异常指标。该结果表明雌马酚可以改善CUMS小鼠抑郁样行为,并通过抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴的过度亢进发挥改善抑郁的作用。

缺血再灌注联合慢性不可预知刺激构建卒中后抑郁新模型

背景:国内外卒中后抑郁动物模型主要以脑卒中叠加抑郁造模方式构建,但其各种造模方式都有其优缺点,在此基础上对卒中后抑郁造模方式进行新的探讨。目的:采用行为学评估及脑组织神经介质检测,探究一种稳定、可复制的卒中后抑郁造模方式。方法:雄性SD大鼠90只,体质量(200±20)g,由西安交通大学动物实验中心提供。(1)将60只大鼠随机分为3组,行30,60,90min的缺血再灌注,24h后观察大鼠存活率,并行神经功能缺损评分及脑梗死体积的评定,确定最佳缺血再灌注的时间点;(2)另将30只大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉栓塞组、卒中后抑郁组,于刺激前及刺激的第1,2,3周进行强迫游泳实验、敞箱实验、糖水消耗实验、新奇抑制摄食实验、体质量变化评价大鼠的抑郁行为;运用ELisa法检测脑组织中的5-羟色胺、去甲肾上腺素及脑源性神经营养因子水平。结果与结论:(1)确定了60 min为后续缺血再灌注的时间点;(2)行为学评估显示,与大脑中动脉栓塞组相比,卒中后抑郁大鼠的体质量、糖水消耗实验和敞箱运动垂直及水平运动得分均于第2周开始降低(P <0.05),新奇抑制摄食实验潜伏时间、强迫游泳实验不动时间出现明显升高(P<0.05);(3)Elisa检测显示,与大脑中动脉栓塞组相比,卒中后抑郁组大鼠的5-羟色胺、去甲肾上腺素及脑源性神经营养因子水平均降低(P <0.05);(4)结果说明,采用60 min的缺血再灌注联合慢性不可预知的刺激,建立卒中后抑郁模型,可表现出明显的抑郁状态,同时,模型稳定、存活率高,符合卒中后抑郁的多种临床特征,可能成为研究卒中后抑郁一种新的、可靠的造模方式。

miRNA132在抑郁症患者及慢性不可预知温和应激抑郁模型大鼠中的表达

目的观察首发抑郁症患者外周血及慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型大鼠血液和前额叶皮层中miRNA132的表达水平。方法以2017年3月至2018年5月在杭州市第七人民医院精神科门诊治疗的首发抑郁症患者(抑郁组)41例及同期招募的健康志愿者(对照组)31例为研究对象,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分评估抑郁症患者严重程度。雄性SD大鼠24只,采用配对比较法随机分为对照组和CUMS组,每组12只;分别用糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为,ELISA法检测大鼠血浆皮质酮水平。采用实时荧光定量PCR法检测受试者外周血白细胞中和大鼠血液及前额叶皮层中miRNA132表达水平。结果抑郁症患者外周血白细胞miRNA132水平为2.37±0.36,明显高于对照组的1.34±0.16(t=2.355,P=0.0213);抑郁症组患者外周血白细胞miRNA132表达水平与HAMD17得分呈显著正相关(P=0.0004,rs=0.5303,n=41)。CUMS组大鼠不动时间为(72.67±2.95)s,明显多于对照组的(40.00±5.49)s(t=2.366,P=0.0395);蔗糖消耗为(55.67±6.42)%,明显低于对照组的(98.21±1.28)%(t=6.502,P<0.0001);血浆皮质酮水平为(1396.0±254.9)nmol/L,明显高于对照组的(557.3±158.4)nmol/L(t=2.795,P=0.0190)。CUMS组大鼠血液中白细胞和前额叶皮层中的miRNA132表达水平分别为2.32±0.88和2.80±0.76,明显高于对照组的1.18±0.36(t=2.273,P=0.0463)和0.99±0.23(t=2.553,P=0.0287)。结论临床抑郁症患者外周血miRNA132表达趋势与CUMS抑郁模型大鼠miRNA132表达趋势一致。CUMS抑郁模型大鼠血液中miRNA132表达与前额叶皮层中表达也一致,血液miRNA132表达可在一定程度上反映前额叶皮层的miRNA132表达变化趋势。

慢性不可预知性温和应激致抑郁样大鼠模型的研究进展

抑郁症是一种以情感低落、思维迟缓和言语动作减少为典型症状的精神疾病,严重时可引起自杀行为。慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)造模方法目前已被广泛应用于抑郁症研究,该方法造模所引起的模型动物病理生理改变与人类抑郁症相似。本文综述了CUMS的造模方法、模型评价以及病理生理变化,并对上述几方面进行了思考。

抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响

目的探究抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和抗性糊精组,大鼠基于慢性不可预知温和应激(CUMS)建立抑郁模型,3周后进行糖水偏好实验和旷场实验检测。模型组筛选应激敏感大鼠,其他两组随机选择等数量大鼠利用16S rRNA测序技术检测其肠道菌群的组成和结构变化。结果与对照组相比,模型组大鼠肠道菌群厚壁菌门[(0.92251±0.02838)vs.(0.82572±0.00761)]、阿克曼菌属[(0.01327±0.00076)vs.(0.00000±0.00000)]、乳球菌属[(0.00029±0.00010)vs.(0.00000±0.00000)]相对丰度显著降低(P<0.05);拟杆菌门[(0.04671±0.00263)vs.(0.12341±0.03576)]、粪杆菌属[(0.00011±0.00004)vs.(0.00057±0.00005)]、Ruminococcaceae_UCG_014[(0.01003±0.00384)vs.(0.10976±0.04364)]相对丰度显著升高(P<0.05)。与模型组相比,抗性糊精可对丰度发生变化的菌群显著回调(P<0.05)。结论抗性糊精能够调节CUMS大鼠的肠道菌群,通过改善益生菌的相对丰度、降低致病菌的相对丰度促使肠道恢复动态平衡,为抑郁症的治疗提供实验基础研究。

木犀草素对慢性不可预知性温和应激所致小鼠抑郁的改善作用

目的探讨木犀草素对慢性不可预知性温和应激抑郁模型(CUMS)所致小鼠脑组织氧化应激损伤的改善作用。方法建立小鼠慢性不可预知性温和应激抑郁模型;用经典的糖水消耗实验检测小鼠快感缺失;旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠的活动能力和绝望程度;采用分光光度法测定小鼠脑组织超氧物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)含量。结果与模型组相比,木犀草素能明显改善小鼠抑郁样行为,提高SOD和GSH活性,降低小鼠脑组织MDA含量。结论木犀草素对CUMS小鼠的抑郁样行为有改善作用,作用机制可能与其增强小鼠脑组织的抗氧化活性,改善氧化/抗氧化平衡有关。

表没食子儿茶素没食子酸酯改善慢性温和不可预知应激小鼠抑郁样症状的作用及机制研究

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对慢性温和不可预知应激(CUMS)小鼠抑郁样症状的改善作用,并进一步探讨其作用机制。方法通过CUMS建立小鼠抑郁模型。采用糖水偏好实验、悬尾实验以及强迫游泳实验评价小鼠的抑郁样症状。Western Blot检测小鼠海马组织中脑源性神经营养因子BDNF及其受体TrkB、凋亡相关蛋白Bc l-2及Bax以及神经元标记物NeuN的蛋白表达。结果EGCG能显著增加C UMS小鼠的糖水偏好率,减少CUMS小鼠悬尾实验及强迫游泳实验中的累积不动时间。分子生物学结果显示:EGCG能显著上调CUMS小鼠海马组织中BDNF、TrkB、Bcl-2及NeuN蛋白的表达,并下调Bax蛋白的表达。结论EGCG能改善CUMS小鼠的抑郁样症状,其机制可能是通过作用于BDNF/TrkB信号通路,从而缓解细胞凋亡,抑制小鼠海马神经元损伤而发挥的。

逍遥散对慢性不可预知温和应激肝郁脾虚型抑郁症大鼠海马区IL-6、TNF-α影响

目的观察逍遥散对慢性不可预知温和应激肝郁脾虚型抑郁症大鼠海马区炎性因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响,研究逍遥散治疗肝郁脾虚型抑郁症的可能作用机理。方法30只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、逍遥散组(C组),逍遥散组在每天下午造模前灌服逍遥散悬浊液(0.0925 g/100 g),模型组及正常组灌服等量的超纯水。7周后观察各组大鼠的宏观表现、进食量、体质量变化、糖水实验及旷场实验。第51天,用免疫组化方法记录大鼠海马区IL-6、TNF-α的变化。结果实验第50天,B组进食量明显减少,体质量减轻,行为学检测明显,同时,B组大鼠海马区IL-6、TNF-α平均光密度明显高于A组及C组,而C组大鼠海马区IL-6、TNF-α介于A组及B组间,A组与B组,B组与C组,两两比较,P<0.05,差异有统计学意义。结论慢性不可预知温和刺激肝郁脾虚型抑郁症模型可引起大鼠海马区IL-6、TNF-α分泌增加;逍遥散可以有效地抑制肝郁脾虚抑郁症大鼠海马区IL-6、TNF-α的分泌,这可能是逍遥散治疗肝郁脾虚型抑郁症的作用机理之一。

葵花籽蛋白对慢性不可预知温和应激小鼠的抗抑郁作用

葵花籽蛋白富含芳香族氨基酸。本研究旨在考察其作为食物主要蛋白来源时,对抑郁模型小鼠大脑多巴胺(dopamine,DA)和五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)产生的影响,及缓解抑郁发生的作用。将C57BL/6J小鼠分别用大豆蛋白(模型对照,MOD)、葵花籽蛋白(SFSP)和乳清蛋白组(WPC,阳性对照)为主要蛋白源饲料饲养2月,进行慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)造模处理,用未造模动物作为正常对照(CON,10只/组)。SFSP显著预防CUMS引起的糖水偏好率降低、悬尾或强迫游泳不动时间延长,预防在旷场和高架十字迷宫的焦虑行为,效果与WPC相当。SFSP也提高了大脑海马组织5-HT、DA、去甲肾上腺素水平和脑源性神经营养因子,提高了血清色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸浓度和色氨酸与中性氨基酸比值。同时降低了血清皮质酮水平,提高抑郁小鼠皮层中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活性,降低丙二醛和活性氧自由基水平。SFSP通过增加芳香族氨基酸吸收、提高海马单胺类神经递质浓度,和预防大脑皮层氧化应激发挥预防抑郁发生的作用。

慢性不可预知温和刺激小鼠内侧前额叶的能量代谢障碍及功能磁共振成像

目的研究慢性不可预知温和刺激(CUMS)小鼠活体状态下内侧前额叶灰质体积和自发活动的变化,及其与mTORC1能量信号通路的关联及机制。方法4周龄健康C57Bl/6小鼠随机分为正常对照组(n=16,未予处理)和抑郁模型组(n=16,CUMS方法造模8周)。旷场实验、强迫游泳实验、悬尾实验、糖水摄取实验检测小鼠抑郁倾向,利用结构功能磁共振探究小鼠脑灰质体积和低频振幅的改变。而后,将抑郁模型组的CUMS小鼠随机分成CUMS治疗组(n=8,氯胺酮活化mTORC1通路)和CUMS对照组(n=8,生理盐水)。取小鼠内侧前额叶组织,蛋白免疫印迹法检测并比较正常对照组、CUMS治疗组及CUMS对照组3组小鼠mTORC1相关蛋白的磷酸化水平,ELISA法检测ATP和NADP+/NADPH为代表的3组小鼠组织能量代谢情况。结果经过CUMS后小鼠出现明显抑郁行为倾向,CUMS小鼠的糖水偏爱百分比下降(P<0.05)、糖和水的总摄取量减低(P<0.01),旷场实验总运动距离(P<0.05)及中央区域运动距离(P<0.01)缩短,在悬尾实验和强迫游泳实验中CUMS小鼠不动时间增加(P>0.05),但不具有统计学意义。磁共振检测发现CUMS小鼠内侧前额叶灰质体积增大,mALFF显著增高(P<0.01,Alphasim矫正);mTORC1相关蛋白的磷酸化水平减低,ATP和NADP+/NADPH降低(P<0.05),经过氯胺酮治疗,mTORC1相关蛋白的磷酸化水平升高,ATP显著升高(P<0.05)。结论CUMS小鼠内侧前额叶存在更高的自发活动以及更低的产能效率,这种自发活动与产能效率的不匹配提示内侧前额叶存在mTORC1磷酸化减低相关的能量代谢方面的障碍,且此障碍可以通过氯胺酮活化mTORC1通路得到缓解。

3xTg-AD转基因小鼠抑郁模型的建立及认知相关病理改变与比较

目的:为分析抑郁状态对阿尔茨海默病(AD)小鼠病理变化的影响,对3xTg-AD小鼠进行慢性社交挫败应激(CSDS)与慢性温和不可预知性应激(CUMS)刺激,建立早期AD诱发抑郁小鼠模型,并检测小鼠认知行为改变、海马区小胶质细胞的活化及神经元的丢失情况。方法:3xTg-AD小鼠3月龄时交替进行为期8 d的应激刺激,通过行为学评估小鼠抑郁状态并制订评价标准,进行认知行为的检测及分析,取海马部位脑组织切片进行免疫荧光染色,观察β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积和微管相关蛋白(tau)的聚集情况、小胶质细胞活化及神经元的丢失情况。结果:抑郁相关行为学结果提示CSDS+CUMS组小鼠出现抑郁相关表型。认知行为检测发现CSDS+CUMS组小鼠的新物体识别指数明显降低(P<0.05),Morris水迷宫显示CSDS+CUMS组的空间记忆能力显著降低(P<0.05),但条件恐惧实验中CSDS+CUMS组小鼠无明显恐惧记忆丧失。免疫荧光染色结果显示CSDS+CUMS组小鼠海马区4月龄出现Aβ沉积,小胶质细胞的活化增加(P<0.001),并出现一定程度的神经元丢失(P<0.001);8月龄时CSDS+CUMS组小鼠提早出现tau蛋白聚集。结论:我们建立了一种AD诱发抑郁小鼠模型,3xTg-AD小鼠抑郁后提早出现学习记忆能力下降,海马区神经元AD相关病理沉积增多,并伴随小胶质细胞活化及神经元丢失。

牡蛎酶解物对慢性不可预知温和应激斑马鱼抑郁行为改善作用研究

为探究牡蛎酶解物的抗抑郁作用,采用慢性不可预知温和应激斑马鱼模型,将牡蛎酶解物分为低、中和高浓度三个剂量组,检测其对斑马鱼行为学、体重指数产生的影响,进而通过酶联免疫法测定斑马鱼外周皮质醇含量和脑部细胞因子表达水平。结果表明,经过5周慢性不可预知温和应激后,斑马鱼出现了明显的抑郁样行为,而牡蛎酶解物可以有效改善斑马鱼抑郁样行为,并能有效改善应激后斑马鱼体重减小的现象;同时,牡蛎酶解物可降低斑马鱼外周皮质醇的水平,降低TNF-α在脑部的表达。研究结果表明,牡蛎酶解物可以通过调节应激激素水平以及抑制慢性不可预知温和应激诱导的炎症细胞因子的表达来改善慢性不可预知温和应激诱导抑郁样行为。本研究旨在深入探究牡蛎酶解产物的神经保护作用,并为其活性成分的进一步开发提供理论依据。

养生保健1号对慢性不可预知应激刺激大鼠学习记忆能力的影响

目的:观察养生保健1号对慢性不可预知应激刺激大鼠学习记忆能力的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、保健方组(7.26 g/kg组、4.84 g/kg组、3.23 g/kg组),除正常组外建立慢性不可预知应激温和刺激模型(CUMS)。采用旷场实验、糖水消耗实验评价大鼠行为学变化,采用Morris水迷宫考察CUMS大鼠的学习记忆能力,同时测定大脑Ach和Ach E含量变化。结果:应激刺激3周,与正常组相比,大鼠糖水偏嗜度显著下降(P<0.05),模型建立成功。保健方给药8 d后各剂量组糖水的偏嗜度较模型组明显增加(P<0.01)。旷场实验中,模型组大鼠运动的总得分低于正常组(P<0.01),保健方各个剂量组的运动总路程均明显高于模型组(P<0.01)。Morris水迷宫定位导航实验中模型组大鼠平均潜伏期长于正常组(P<0.05),与模型组比较,保健方各剂量组的潜伏期缩短(P<0.05)。Morris水迷宫空间探索实验中模型组大鼠的穿越平台次数、原台所在象限游泳距离和时间明显少于正常组(P<0.05,P<0.01),而保健方各剂量组较模型组均明显增加(P<0.01)。保健方3个剂量组大鼠脑浆上清中Ach含量均显著升高(P<0.05),而Ach E含量均明显降低(P<0.05)。结论:养生保健1号具有改善CUMS大鼠学习障碍、提高空间学习记忆能力的作用,其机制与对调节胆碱能系统有关。

慢性不可预知轻度应激对大鼠旷场行为和糖水偏爱度影响的观察

目的探讨慢性不可预知轻度应激对大鼠旷场行为的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为3组：A为对照组、B为应激组、C为应激＋用药组，每组8只。A组不予以刺激，B、c两组采用慢性不可预知轻度应激（CUMS）模型的实验方法，每日予以1～2种刺激；A、B两组每日腹腔注射生理盐水2ml，c组每日腹腔注射西酞普兰2ml（10mg／kg）。实验为期6周，每周为大鼠称重，每3周测大鼠的糖水偏爱性、旷场试验评价大鼠行为，6周后施行安死术。结果B组及C组与A组相比，体重增长明显较少（均值分别为153．05g、127．69g、232．572）；B组与A组及c组比较，糖水偏爱度显著降低（均值分别为60％，73％，71％）；且B组大鼠在旷场中的总移动里程、总运动时间、越线次数等行为指标增大，而另两组在这些指标上均减小。结论慢性不可预知轻度应激诱发大鼠抑郁症状的同时，可能导致其行为增多等类焦虑症状。

“通督解郁”针刺在CUMS抑郁模型大鼠前额叶皮质BDNF/TrkB/CREB通路的作用效应

目的:探究K252a的作用下,“通督解郁”针刺在慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠前额叶皮质BDNF/TrkB/CREB通路的作用机理。方法:64只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组、针刺组、模型+DMSO组、模型+K252a组、氟西汀+K252a组和针刺+K252a组,每组8只。造模在CUMS结合孤养法外,针刺组、针刺+K252a组和氟西汀组、氟西汀+K252a组在造模前30 min分别施行手针百会、神庭,电针内关、太冲治疗(频率2 Hz,连续波,电流1 mA,留针30 min)和灌胃治疗;模型+DMSO组和模型+K252a组、氟西汀+K252a组及针刺+K252a组分别在造模前1 h侧脑室注射DMSO溶液和K252a,共21 d。行为学采用体质量、糖水偏好实验以及强迫游泳实验进行评价;免疫组化检测大鼠前额叶组织BDNF、TrkB和CREB阳性细胞平均光密度值IOD;Western blot及PCR法检测大鼠前额叶皮质中相关蛋白及mRNA表达。统计学分析采用LSD检验和非参数检验。结果:与空白组比较,模型组大鼠的体质量差、糖水偏好指数SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达均明显下调,差异具有统计学意义(P<0.01),强迫游泳的不动时间IT明显上调,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,针刺组、氟西汀组大鼠的体质量差、SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达均明显上调,差异具有统计学意义(P<0.01),IT下调,差异具有统计学意义(P<0.01),模型+K252a组大鼠的体质量差、SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达减少,差异具有统计学意义(P<0.05),IT增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。与针刺组比较,针刺+K252a组大鼠的体质量差、SPI和BDNF、TrkB、CREB的阳性细胞IOD、蛋白及mRNA表达均减少,差异具有统计学意义(P<0.05),IT增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:“通督解郁”针刺对CUMS模型大鼠的抑郁行为有明显改善作用,其机制可能上调了前额叶皮质上的BDNF/TrkB/CREB通路,从而起到治疗抑郁症的作用。