归脾汤对慢性不可预见温和应激模型大鼠行为学影响的Meta分析

目的:系统评价归脾汤对慢性不可预见温和应激(CUMS)模型大鼠行为学的影响。方法:通过检索期刊数据库包括中文科技期刊数据库、国家知识基础设施数据库、中国学术期刊数据库和PubMed等,筛选归脾汤治疗抑郁症的动物实验研究并提取资料。选用Syrcle动物实验偏倚风险的评估工具作为偏倚风险评估工具,使用RevMan 5.3软件对结局指标(旷场实验数据)进行Meta分析。结果:最后纳入7组随机对照实验研究,总计144只大鼠。通过Meta分析,实验结果显示模型组旷场实验水平得分及垂直得分均显著低于空白组(P<0.01),归脾汤组旷场实验评分显著高于模型组(P<0.01),且归脾汤组旷场实验评分与氟西汀组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:归脾汤对CUMS模型大鼠的自发活动度及兴趣度等行为学表现具有明显改善作用,其疗效与氟西汀相当。

褐藻寡糖对慢性不可预知温和应激诱导的斑马鱼抑郁样行为及肠道菌群的影响

目的:探究褐藻寡糖(AOS)对慢性不可预知温和应激(CUMS)模型斑马鱼抑郁样行为及肠道菌群的影响。方法:将野生型AB品系斑马鱼随机分为正常组、模型组、阳性对照组和AOS低、中、高剂量(AOS-L、AOS-M、AOS-H)组,每组24尾。除正常组外,其余各组均接受14 d的CUMS建立斑马鱼抑郁样模型。除正常组和模型组给予等体积饲养水外,其余各组于第8天开始每天浸泡60 min相应浓度的AOS。14 d后,采用新型水箱测试(NTT)和明暗箱测试(LDB)进行行为实验,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脑组织中5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)水平,16s r RNA测序检测肠道菌群变化。结果:与模型组比较,在NTT中,阳性对照组和AOS-H组斑马鱼第1次进入顶部潜伏期显著缩短,在顶部的时间显著延长,进入顶部的次数显著增加(均P<0.01),活动范围扩大。与模型组比较,在LDB中,阳性对照组和AOS-H组斑马鱼第1次进入光亮区域的潜伏期显著缩短,AOS-M组和AOS-H组在光亮区域的持续时间显著延长,阳性对照组和AOS各剂量组进入光亮区域的次数显著增加(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组体质量指数、5-HT和NE水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,AOS-M组、AOS-H组体质量指数显著增加(P<0.05或P<0.01);阳性对照组和AOS-H组5-HT水平显著提高(P<0.01)。AOS可以提高肠道菌群丰富度和多样性,调节群落组成结构。在门水平上,调节变形菌门、放线菌门、梭杆菌门和厚壁菌门等菌门的相对丰度。在属水平上,调节鲸杆菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属、未分类根瘤菌属和根瘤菌属菌群等菌属的相对丰度。影响肠道中碳代谢、嘌呤代谢和丙酮酸代谢等代谢功能及相关物质转运过程。结论:AOS能改善CUMS斑马鱼抑郁样行为,增加体质量指数,其作用与调节神经递质、肠道菌群组成及其代谢和物质转运功能有关。

桂附汤对慢性不可预见性温和应激小鼠抑郁样行为及海马脑源性神经营养因子表达的影响

目的研究桂附汤对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictive mild stress,CUMS)小鼠抑郁样行为的干预作用及对脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法利用CUMS法诱导C57BL/6小鼠构建抑郁模型,通过蔗糖偏好实验、旷场实验、悬尾实验观察桂附汤对小鼠抑郁样行为的影响,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative-polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测小鼠海马组织BDNF mRNA表达,免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测小鼠海马区BDNF蛋白定位表达,苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察海马组织形态学的变化。结果与对照组相比,模型组体质量下降(P<0.01),肾上腺指数升高(P<0.05),糖水偏好度显著降低(P<0.01),旷场实验总静止时间显著升高(P<0.01)、进入中央区域次数显著降低(P<0.01),悬尾实验静止时间显著升高(P<0.01),BDNF蛋白表达和m RNA水平显著降低(P<0.01);与模型组相比,桂附汤高剂量组(P<0.01)、中剂量组和氟西汀组(P<0.05)肾上腺指数显著降低,桂附汤中、高剂量组和氟西汀组旷场实验总静止时间显著降低(P<0.01)、进入中央区域的次数显著增加(P<0.01),各干预组小鼠糖水偏好度显著增加(P<0.05),旷场实验总静止时间显著降低(P<0.01)、进入中央区域的次数显著增加(P<0.01),悬尾实验静止时间显著降低(P<0.01),海马BDNF m RNA及蛋白表达都显著增加(P<0.01),海马组织病理损伤明显改善。结论桂附汤可改善CUMS诱导的小鼠抑郁样行为,上调BDNF表达,保护海马神经元的结构和功能。

孕期慢性不可预知温和应激致产后抑郁的实验模型验证

目的模拟孕妇在妊娠期经受的社会心理因素影响来建立产后抑郁模型,为后期从围产期出发研究产后抑郁发生原因及机制提供科学依据。方法32只健康成年SD雌鼠随机分为对照组和模型组,利用21 d慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)进行应激刺激,在应激第3天与雄鼠进行1∶2合笼饲养,确定妊娠后,雌雄分笼,雌鼠单笼饲养。ELISA试剂盒测定血浆皮质酮水平。利用蔗糖偏好实验、旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验进行产后抑郁情绪判定,利用ELISA试剂盒测定雌鼠在应激第21天、产后1周、产后3周血清中雌二醇(estradiol,E_(2))水平。结果应激第7天、21天模型组血浆皮质酮水平增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05),表明孕期雌鼠处于慢性应激状态。与对照组比较,模型组产后1周旷场实验中外周运动时长延长,中心运动时长缩短(P均<0.05);产后1周、3周模型组1%糖水消耗率降低(P均<0.05);模型组产后1周、产后3周的悬尾实验中静止时间增长(P均<0.05);产后1周模型组强迫游泳中静止时间延长(P<0.05)。产后对照组和模型组E2水平均下降,且模型组产后1周和产后3周E2水平均低于对照组(P均<0.05)。结论孕期慢性不可预知温和应激刺激可用来建立产后抑郁大鼠实验模型。

Tubacin对慢性不可预见性温和应激模型大鼠的抗抑郁作用及其作用机制研究

目的探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)选择性抑制剂tubacin对慢性不可预见性温和应激(CUMS)模型大鼠的抗抑郁作用及其可能的作用机制。方法将50只成年雄性SD大鼠随机分为五组(n=10):对照组(A组),CUMS模型组(B组),氟西汀处理组(C组),tubacin处理组(D组),氟西汀联合tubacin处理组(E组)。应用Morris水迷宫定位航行试验及空间探索试验测试大鼠的空间学习、记忆情况。采用还原型谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒检测各组大鼠血清中GSH水平。结果 Morris水迷宫定位航行试验显示,与A组比较,B组大鼠平均逃避潜伏期显著延长(P<0.05或P<0.01);与B组比较,C、D、E组平均逃避潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01),且E组平均逃避潜伏期显著短于C组和D组(P<0.05或P<0.01)。在空间探索试验中,C、D、E组大鼠在第三象限的停留时间明显长于其他三个象限(P<0.05或P<0.01),E组大鼠在第三象限的停留时间明显长于C组和D组(P<0.05或P<0.01)。B组大鼠血清GSH水平明显低于A组(P<0.05),C组血清GSH水平显著高于B组(P<0.05),E组血清GSH水平较C组进一步提高(P<0.05),并且与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析发现,大鼠的空间学习、记忆能力与血清GSH水平显著相关(P<0.05)。结论 HDAC6选择性抑制剂tubacin可通过调节血清GSH水平以提高大鼠空间学习和记忆能力,从而发挥抗抑郁作用。

中药对慢性温和不可预见性的应激抑郁症模型干预作用的研究现状

抑郁症是一类严重危害人体身心健康的精神疾病,发病机制具有复杂性。而慢性温和不可预见性的应激(CUMS)抑郁模型更能模拟人类抑郁症的发生过程,因此可作为研究抑郁及相关问题的有效手段。中药包括单方、药对、复方中药,具有多靶点、多方位的治疗作用。本文对采用CUMS抑郁模型研究中药抗抑郁作用及其作用机制的文章进行综述。

基于文献数据库的慢性不可预见性温和应激诱发抑郁症动物模型研究

目的综述CUMS模型常用的刺激因子、造模时长以及主要的行为学评价方法,为CUMS模型在抑郁症研究中的应用提供参考。方法查阅10年来中国知网和PubMed中与CUMS相关的文献,并对其按一定标准筛选后整理归纳CUMS造模动物、刺激因子、造模时长。结果雄性大鼠的使用频率高;实验宜选择7~9种刺激因子且3~7 d内不重复,刺激因子中推荐禁食禁水、潮湿垫料、冰水游泳、笼倾斜、光照节律改变;造模时长建议3~4周;最后行为学评价方法宜采用糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验。结论本文通过综述CUMS模型中的造模动物、刺激因子、造模时长等方面,为CUMS模型在抑郁症研究中的应用提供有益参考。

慢性不可预见性应激致大鼠髁突软骨组织学变化的自然转归

目的探讨慢性不可预见性应激引起的颞下颌关节髁突软骨的组织学受损的转归,为颞下颌关节紊乱病的防治提供实验依据。方法本动物实验经第四军医大学口腔医院实验动物管理伦理委员会批准(批准号:2020伦审字081号)。将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、应激组、应激去除2周组、应激去除4周组、应激去除8周组。对大鼠施加的慢性不可预见性应激(chronic unpredictable moderate stress,CUMS)包括24 h潮湿垫料、12 h倾斜饲养、4 h噪音、昼夜颠倒、强迫浸水、夹尾、束缚应激,持续8周;在去除应激2周、4周、8周后观察其血清学、行为学以及髁突软骨组织学与超微结构的变化,其中采用酶联免疫法观察大鼠的血清促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质酮(corticosterone,CORT)水平的变化,采用糖水偏好实验和强迫游泳实验观察大鼠抑郁样情绪的行为学变化,运用免疫组织化学染色法和Western blot法检测髁突软骨白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)和基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)的表达。结果应激组在CUMS刺激持续8周末时,与对照组相比大鼠血清中CORT和ACTH水平增高(P<0.01),行为学表现为摄糖减少、强迫游泳实验中“不动”时间延长(P<0.01),说明出现了明显的快感缺失、抑郁、绝望情绪,证明CUMS模型建立成功;并且髁突软骨表现出明显的退行性改变,软骨表面胶原纤维排列紊`乱,蛋白多糖合成减少;髁突中的IL-1α和MMP-3在各层软骨的胞内和细胞外基质中均有表达,且表达水平升高(P<0.01)。应激去除2周后CORT和ACTH血清学水平下降,但高于对照组(P<0.01),行为学检测与对照组相比仍有差异(P<0.01);髁突软骨表面仍可看到松解的胶原纤维,增殖层内可见一些游离细胞区;髁突中的IL-1α和MMP-3在各层软骨的表达较应激组降低,但仍高于对照组(P<0.01)。应激去除4周后,CORT和ACTH血清学变化恢复到正常水平,行为学测试与对照组仍有差异(P<0.05),髁突软骨表面有少量胶原纤维,IL-1α和MMP-3的表达与应激组相比显著下降(P<0.01),其中IL-1α水平接近对照组水平(P>0.05),但MMP-3的表达仍高于对照组(P<0.01)。应激去除8周后,行为学变化也恢复到正常水平,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),髁突胶原纤维增多,呈现波纹状,并未发生严重的软骨下骨的损伤,未发生不可逆损害,IL-1α和MMP-3的表达水平均接近对照组水平(P>0.05)。结论CUMS引起的行为学改变和髁突软骨损伤在应激因素去除后可以随时间自然恢复,IL-1α和MMP-3表达的下降可能是这种自我修复过程的内在机制之一。

抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响

目的探究抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和抗性糊精组,大鼠基于慢性不可预知温和应激(CUMS)建立抑郁模型,3周后进行糖水偏好实验和旷场实验检测。模型组筛选应激敏感大鼠,其他两组随机选择等数量大鼠利用16S rRNA测序技术检测其肠道菌群的组成和结构变化。结果与对照组相比,模型组大鼠肠道菌群厚壁菌门[(0.92251±0.02838)vs.(0.82572±0.00761)]、阿克曼菌属[(0.01327±0.00076)vs.(0.00000±0.00000)]、乳球菌属[(0.00029±0.00010)vs.(0.00000±0.00000)]相对丰度显著降低(P<0.05);拟杆菌门[(0.04671±0.00263)vs.(0.12341±0.03576)]、粪杆菌属[(0.00011±0.00004)vs.(0.00057±0.00005)]、Ruminococcaceae_UCG_014[(0.01003±0.00384)vs.(0.10976±0.04364)]相对丰度显著升高(P<0.05)。与模型组相比,抗性糊精可对丰度发生变化的菌群显著回调(P<0.05)。结论抗性糊精能够调节CUMS大鼠的肠道菌群,通过改善益生菌的相对丰度、降低致病菌的相对丰度促使肠道恢复动态平衡,为抑郁症的治疗提供实验基础研究。

皮质酮与慢性不可预见性应激诱导的两种抑郁症模型比较

目的从行为学及分子水平比较皮质酮(CORT)与慢性不可预见性应激(CUMS)诱导的抑郁症模型的异同,为抑郁症发病机制研究及抗抑郁药物的筛选与评价模型提供一定的参考。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组(Ctrl)、慢性不可预见应激组(CUMS)和皮质酮注射应激组(CORT)组,制作应激模型21d,期间每3d对小鼠进行称重。21d模型制作结束后,对小鼠进行行为学测试,并于第22天,通过眼眶取血收集动物血清,并用ELISA法测定血清皮质酮含量。眼眶取血后脱颈椎处死动物,取出动物的胸腺和脾脏进行称重,计算脏器指数;取出脑组织,置于液氮罐保存,尼氏(Nissl)染色法观察小鼠大脑海马区神经元损伤情况;采用Western blotting、RT-PCR方法测定抑郁症相关蛋白及基因的表达。结果与对照组相比,两种抑郁症模型组开场实验中的行为学指标均改变,强迫游泳和悬尾实验的累积不动时间显著升高。两个模型组的胸腺指数无明显变化,而CORT组的脾脏指数较对照组下降。CUMS和CORT组小鼠血清皮质酮含量高于对照组,CORT组与CUMS组相比有升高趋势,但差异无显著性。CUMS和CORT两种模型均使海马CA1、CA3和DG区神经元密度降低,CORT模型变化更明显。两模型组的促肾上腺素释放激素(CRH)的mRNA和蛋白的表达量均显著性增加,脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化转录因子环磷腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的蛋白表达水平均呈现明显地抑制,但CUMS和CORT两组之间差异无显著性。结论 CORT模型和CUMS模型均能成功构建抑郁症模型,且与下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴紊乱有关,两种模型在小鼠海马结构改变及大脑BDNF-pCREB和ERK信号通路激活等方面差异无显著性。提示,CORT模型可用于抑郁症机制的研究及抗抑郁药的筛选与评价,尤其可用于以HPA轴功能紊乱所引起的抑郁症分子机制探讨。

黄芪多糖对慢性轻度不可预见性应激抑郁小鼠核因子E2相关因子2通路和血清氧化指标的影响

目的 探讨黄芪多糖(APS)对慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁模型小鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)通路和血清氧化指标的影响。方法 将36只BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组、CUMS组、CUMS+氟西汀组(CUMS+F组)、CUMS+APS组,每组9只。CUMS、CUMS+F和CUMS+APS组小鼠采用CUMS刺激4周构建抑郁症模型。造模成功后,CUMS+F组小鼠每天给予氟西汀10 mg/kg腹腔注射,CUMS+APS组小鼠每天给予APS 400 mg/kg灌胃,正常对照组和CUMS组给予等体积的生理盐水,共干预治疗4周。通过行为学实验观察药物干预后小鼠抑郁状态是否改善。小鼠药物干预4周后经眼眶取血,采用ELISA检测血清丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧阴离子■、羟自由基(·OH)水平。采用蛋白质印迹法检测小鼠海马组织中Nrf2蛋白的表达。结果 与CUMS组比较,CUMS+F组和CUMS+APS组小鼠悬尾实验不动时间缩短(P均<0.01),蔗糖偏好率、旷场实验穿越次数、高架十字迷宫实验开放臂的进入次数和停留时间均增加(P<0.05,P<0.01);小鼠血清丙二醛含量下降(P均<0.05),SOD、GSH-Px、■和·OH含量升高(P<0.05,P<0.01);小鼠海马组织中Nrf2蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01)。结论 APS对CUMS抑郁模型小鼠的抑郁状态具有改善作用,其作用可能是通过调节海马组织Nrf2通路和血清中的氧化指标实现的。

慢性束缚与慢性不可预期温和应激抑郁模型小鼠的行为学比较及其发生机制研究

【目的】通过比较慢性束缚应激(Chronic restraint stress,CRS)与慢性不可预期温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)对C57BL/6小鼠行为学指标及大脑海马区相关功能的影响,探讨抑郁症的发生机制。【方法】分别建立CRS及CUMS小鼠模型,通过旷场试验、强迫游泳试验和悬尾试验测定小鼠的行为学指标;取小鼠脑组织,制备常规石蜡切片,运用苏木素-伊红(HE)与免疫组化染色考察小鼠大脑海马区组织形态及5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)的表达情况,并运用荧光分光光度法测定小鼠海马组织单胺氧化酶活性的变化。【结果】与空白对照组相比,CRS组小鼠的水平穿格数、直立次数及体质量均显著减少,悬尾及强迫游泳试验累计不动时间百分比无明显变化(P>0.05);而CUMS组小鼠自发活动无明显改变(P>0.05),但悬尾及强迫游泳试验累计不动时间百分比极显著增加(P<0.01),体质量显著下降。脑组织形态学研究结果显示,CUMS组小鼠海马CA1、CA3区和齿状回均出现萎缩,而CRS组小鼠海马CA1区未受影响,CA3区和齿状回均发生萎缩。与对照组相比,CRS组与CUMS组小鼠大脑海马单胺氧化酶活性升高,5-HT1AR表达均减少,差异均分别达显著和极显著水平。【结论】CRS和CUMS均可不同程度地引起抑郁样症状,CRS对探索性行为的抑制较明显,CUMS则可引发典型的行为绝望状态;CRS与CUMS组小鼠的行为学差异可能与2组抑郁模型动物脑内海马区组织结构及功能变化的差异存在相关性。

乌灵胶囊增加慢性不可预见性温和应激大鼠海马连接蛋白43的表达改善神经再生(英文)

目的:探讨乌灵胶囊对慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress , CMS)抑郁模型大鼠海马齿状回脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor , BDNF)、神经再生,以及连接蛋白43(connexin 43 ,Cx43)表达的影响。方法:45只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分入对照组(n=15)、模型组(n=15)和乌灵胶囊组(n=15)。模型组和乌灵胶囊组大鼠接受连续3周的CMS,造模期间,乌灵胶囊按100 mg/(kg.d)加入乌灵胶囊组大鼠的膳食中,连续治疗21 d。采用糖水偏爱实验评价大鼠的抑郁程度。抑郁行为测试结束后,取双侧海马组织,用免疫组织化学法检测BDNF与5-溴脱氧尿苷(5-bromodeoxyuridine ,BrdU)的表达;用逆转录聚合酶链反应和蛋白印迹法检测海马中Cx43 mRNA与蛋白表达。结果:慢性应激大鼠齿状回BDNF阳性表达、新生细胞数及Cx43 mRNA和蛋白表达水平均较正常大鼠明显下降。乌灵胶囊治疗后,CMS大鼠抑郁行为得到改善,异常的海马神经再生恢复,Cx43 mRNA和蛋白表达变得正常,但BDNF表达无明显改变。结论:乌灵胶囊可增加CMS模型大鼠海马神经再生及改善抑郁症状,其机制可能与增加Cx43表达有关,与BDNF无关。

慢性不可预见性应激模型大鼠海马形态及其糖皮质激素受体表达的动态观察

目的:观察慢性不可预见性刺激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)所致抑郁症模型大鼠海马形态和神经元糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的表达变化。方法:用CUMS法刺激大鼠建立抑郁模型。取CUMS后2周,4周,6周大鼠海马组织,以未经刺激的大鼠海马组织为对照组,利用免疫荧光技术以及RT-PCR方法分别检测各组大鼠海马神经元GR表达的分布和GR m RNA的表达;采用MRI和HE染色观察海马形态结构。结果:激光共聚焦显微镜下,对照组可见海马CA1区、CA3区及齿状回区细胞GR表达丰富,荧光强度较高,表达GR的细胞排列紧密有序,形态饱满。与对照组比较,随着应激时间的增加,模型组大鼠海马各区GR的荧光表达强度依次减弱,GR阳性细胞数量减少,形态趋向紊乱。GR免疫反应细胞计数显示模型组海马GR阳性细胞数量明显低于对照组(P<0.01)。RT-PCR显示模型组海马组织GR m RNA表达较对照组明显降低(P<0.01)。与对照组比较,模型组大鼠海马形态发生显著变化,随着刺激时间的延长,2周,4周,6周模型组大鼠海马细胞排列逐渐紊乱,细胞数量逐渐减少,形态不规则。结论:CUMS抑郁模型大鼠海马神经元内GR表达明显减少,此可能为大鼠海马神经元受损的机制之一。

宁夏无果枸杞芽提取物对慢性温和不可预见性应激小鼠学习、记忆的影响

目的:探讨宁夏无果枸杞芽提取物(fruitless lycium-sprout extracts,FLE)对成年慢性应激小鼠学习、记忆功能,血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)含量及脑组织中神经细胞粘附分子(NCAM)表达的影响。方法:将40只成年昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、FLE低剂量组(FLE1组)和高剂量组(FLE2组),每组10只;采用慢性温和不可预见性应激(chronic mild unpredictable stress,CUMS)方法建立小鼠抑郁模型。在造模完成后灌胃给药,1次/d,连续灌胃6周,FLE1组、FLE2组分别用质量体积百分比为10%、20%的FLE每日0.2 ml/10 g灌胃,正常对照组及模型组灌胃等量生理盐水。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠的学习记忆能力,黄嘌呤氧化酶法测定血清和脑组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平,免疫组化染色法检测脑组织中N-CAM蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠的目标象限停留时间减少,隐藏平台象限获得时间延长,血清SOD活性降低,MDA水平提高,脑组织中N-CAM表达下调(P<0.01);与模型组比较,FLE2组的目标象限停留时间延长,隐藏平台象限获得时间缩短,血清和脑组织中SOD活性均增加,MDA含量均降低(P<0.05),脑组织中N-CAM表达均上调(P<0.001)。结论:FLE可以提高CUMS小鼠学习和记忆的能力,其机制可能与抗氧化作用有关。

慢性轻度不可预见性应激抑郁模型大鼠脑组织谷氨酸和γ-氨基丁酸浓度的变化

目的通过分析抑郁模型大鼠脑组织谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)浓度的变化,探讨抑郁症发病的神经化学机制。方法 54只雄性SD大鼠随机分成2批,每批分为正常对照组、模型组和氟西汀组。正常对照组合笼饲养,其余各组单笼孤养。模型组和氟西汀组建立慢性轻度不可预见性应激(CUMS)大鼠模型。氧西汀组大鼠于造模开始即接受0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)悬浮液配制的氟西汀[1.54 mg/(kg·d)]灌服21 d,正常对照组和模型组大鼠灌服0.5%CMC悬浮液21 d,1次/d。采用CUMS结合孤养建立抑郁大鼠模型,第1批30只大鼠用于自发活动、糖水消耗和强迫游泳测试;第2批24只大鼠用于库仑阵列-电化学高效液相色谱法测定内侧前额叶皮质(mPFC)和海马Glu及GABA的浓度。结果与正常对照组或氟西汀组比较,模型组大鼠自发活动显著减少(P<0.01),糖水消耗量及糖水偏爱百分比明显降低(均P<0.05),强迫游泳不动时间延长(P<0.01);mPFC和海马Glu浓度均明显升高(P<0.05,P<0.01),GABA浓度明显降低(P<0.05,P<0.01)。氟西汀组与正常对照组比较,上述各项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CUMS抑郁模型大鼠mPFC和海马存在Glu和GABA递质系统功能紊乱,氟西汀治疗可改善上述神经递质异常。

miRNA132在抑郁症患者及慢性不可预知温和应激抑郁模型大鼠中的表达

目的观察首发抑郁症患者外周血及慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型大鼠血液和前额叶皮层中miRNA132的表达水平。方法以2017年3月至2018年5月在杭州市第七人民医院精神科门诊治疗的首发抑郁症患者(抑郁组)41例及同期招募的健康志愿者(对照组)31例为研究对象,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分评估抑郁症患者严重程度。雄性SD大鼠24只,采用配对比较法随机分为对照组和CUMS组,每组12只;分别用糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为,ELISA法检测大鼠血浆皮质酮水平。采用实时荧光定量PCR法检测受试者外周血白细胞中和大鼠血液及前额叶皮层中miRNA132表达水平。结果抑郁症患者外周血白细胞miRNA132水平为2.37±0.36,明显高于对照组的1.34±0.16(t=2.355,P=0.0213);抑郁症组患者外周血白细胞miRNA132表达水平与HAMD17得分呈显著正相关(P=0.0004,rs=0.5303,n=41)。CUMS组大鼠不动时间为(72.67±2.95)s,明显多于对照组的(40.00±5.49)s(t=2.366,P=0.0395);蔗糖消耗为(55.67±6.42)%,明显低于对照组的(98.21±1.28)%(t=6.502,P<0.0001);血浆皮质酮水平为(1396.0±254.9)nmol/L,明显高于对照组的(557.3±158.4)nmol/L(t=2.795,P=0.0190)。CUMS组大鼠血液中白细胞和前额叶皮层中的miRNA132表达水平分别为2.32±0.88和2.80±0.76,明显高于对照组的1.18±0.36(t=2.273,P=0.0463)和0.99±0.23(t=2.553,P=0.0287)。结论临床抑郁症患者外周血miRNA132表达趋势与CUMS抑郁模型大鼠miRNA132表达趋势一致。CUMS抑郁模型大鼠血液中miRNA132表达与前额叶皮层中表达也一致,血液miRNA132表达可在一定程度上反映前额叶皮层的miRNA132表达变化趋势。

刺芒柄花素通过阻断海马组织NF-κB通路抑制炎症因子释放改善慢性轻度不可预见性应激老龄大鼠认知行为

目的 探讨刺芒柄花素(FMN)在慢性轻度不可预见性应激(CUMS)老龄大鼠认知行为和炎症中的调节作用。方法约70周龄的SD大鼠分为健康对照组、 CUMS模型组、 CUMS联合10 mg/kg FMN组、 CUMS联合20 mg/kg FMN组和CUMS联合1.8 mg/kg盐酸氟西汀(Flu)组。除健康对照组外,其余各组大鼠以CUMS刺激并根据分组给药,持续28 d。糖水偏好、强制游泳实验和旷场实验观测各组大鼠情绪行为。Y迷宫实验检测大鼠学习、记忆和空间认知。HE染色观察脑海马区病理损伤程度,试剂盒检测5-羟色胺(5-HT)和5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡,ELISA检测外周血中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素6(IL-6)含量,Western blot法检测脑组织中B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、活化的胱天蛋白酶9(cleaved caspase-9)、 cleaved caspase-3、 Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和磷酸化的核因子κB p65(p-NF-κB p65)蛋白水平。结果 与CUMS模型组比较,CUMS联合20 mg/kg FMN组和CUMS联合1.8 mg/kg Flu组大鼠糖水消耗、旷场中心区域活动时间、旷场移动路程和游泳活动时间均显著增长;新异臂进入次数显著增多,起始臂进入次数和其他臂进入次数显著减少;脑海马区病理损伤得到改善,5-HT和5-HIAA含量显著增高;凋亡细胞及BAX/Bcl2比值、 cleaved caspase-9、 cleaved caspase-3蛋白水平显著降低;TNF-α、 iNOS和IL-6含量显著降低;TLR4、 MyD88和p-NF-κB p65蛋白水平显著降低。结论 FMN能通过阻断海马组织NF-κB通路抑制炎症因子释放改善CUMS老龄大鼠认知行为能力。

迷走神经刺激改善慢性不可预知性温和应激大鼠的抑郁样行为

目的:研究迷走神经刺激(VNS)对慢性不可预知性温和应激(CUMS)模型大鼠抑郁样行为的影响。方法:利用CUMS方法制备大鼠抑郁模型,用VNS对大鼠进行治疗,糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠的抑郁样行为,高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠脑脊液中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)及去甲肾上腺素(NE)的含量。结果:与正常大鼠相比,CUMS组大鼠体重增加缓慢(P<0.05),糖水偏好率降低(P<0.05)且游泳不动时间增加(P<0.05),表现出明显的抑郁样行为,同时其脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE含量显著降低(P<0.05)。经过VNS治疗,大鼠的体重增加明显(P<0.05),糖水偏好率增加(P<0.05)且游泳不动时间减少(P<0.05),与之相适应的是脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE水平显著升高(P<0.05)。结论:VNS能够改善CUMS大鼠的抑郁样行为并提高脑脊液中5-HT和NE的水平。

一贯煎加味对大鼠慢性不可预见应激模型更年期抑郁症的治疗

目的探讨一贯煎加味对更年期抑郁症大鼠海马、皮质5-HTR1A mRNA表达的影响,进而明确其治疗更年期抑郁症的作用机理。方法对雌性成年大鼠采用去势+孤养+改良的慢性不可预见应激方法建立更年期抑郁症模型;将去势大鼠随机分为更年期组、模型组、西药组(百优解联用雌激素)、中药组(一贯煎加味),并以假手术组为对照。采用RT-PCR法测定海马、皮质神经元中5-HTR1A mRNA转录水平,应用GIS-2010凝胶图像分析系统采集图像、读取灰度值。比较分析各组灰度值之间的差异。结果模型组大鼠海马、皮质5-HTR1A mR-NA转录水平低于假手术组,有显著性差异(P<0.01);中药组大鼠海马、皮质5-HTR1A mRNA转录水平显著高于模型组、西药组,有显著性差异(P<0.01)。结论一贯煎加味从基因水平影响5-HTR1A mRNA转录功能,从而发挥其抗抑郁作用。