桑白皮多糖介导Nrf2/ARE通路减轻慢性低氧环境大鼠心肌损伤的作用

目的 探讨桑白皮多糖对慢性低氧环境所致的大鼠心肌损伤的影响,并观察其介导转录因子NF-E2相关因子(Nrf)2/抗氧化反应元件(ARE)通路的机制。方法 60只7~9周龄SD大鼠采用随机数字表分为对照组、模型组、阿托伐他汀组、桑白皮多糖低、中、高剂量组。除对照组外,其余各组均置于常压低氧舱内构建心肌损伤大鼠模型,对照组呼吸室内空气。自低氧第1天起,阿托伐他汀组给予20 mg/kg阿托伐他汀腹腔注射给药,桑白皮多糖低、中、高剂量组分别给予0.1、0.2、0.4μg/ml桑白皮多糖腹腔注射给药;对照组和模型组仅腹腔注射生理盐水。给药后24 h,苏木素-伊红(HE)染色观察各组心肌组织病变情况;原位末端标记法(TUNEL)检测各组心肌细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;检测心肌组织Nrf2、血红素加氧酶(HO)-1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA及蛋白、p-Nrf2表达。结果 模型组心肌严重损伤,阿托伐他汀组和桑白皮多糖各剂量组均减轻;与对照组比较,模型组细胞凋亡率、CK、LDH活性和MDA水平、Bax mRNA和蛋白表达和p-Nrf2均明显上升,SOD活性、Nrf2、HO-1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05);与模型组比较,阿托伐他汀组和桑白皮多糖各剂量组细胞凋亡率、CK、LDH活性和MDA水平、Bax mRNA和蛋白表达明显下降,SOD活性、Nrf2、HO-1、Bcl-2 mRNA和蛋白、p-Nrf2表达明显升高(P<0.05);桑白皮多糖对上述指标的作用与剂量有关。结论 桑白皮多糖可减轻慢性低氧环境大鼠心肌损伤,可能与激活Nrf2/ARE通路相关。

没食子酸改善低压低氧诱发心肌损伤的体内外观察及机制探讨

目的观察没食子酸(GA)在低压低氧(HH)诱发心肌损伤的体内、体外模型中的改善作用,并探讨其相关机制。方法体内研究:SD大鼠随机分为正常组、HH模型组及GA低、中、高剂量组,除正常组之外均采用模拟海拔5000 m的HH舱环境暴露30 d建立慢性高原病模型,GA低、中、高剂量组在建模后分别给予12.5、25.0、50.0mg/kg的GA灌胃15 d,正常组及HH模型组给予等量生理盐水灌胃。采用心脏超声检测大鼠心功能指标右心室射血时间(RVET)、右心室射血前时间(RPEP)、射血分数(EF)、肺动脉压加速时间(PAAT);生化试剂盒测定大鼠血清氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px);HE染色观察大鼠心肌组织病理学改变;ELISA法检测大鼠心肌组织血管内皮功能指标一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素1(ET-1)。体外研究:大鼠H9C2心肌细胞分为正常组、模型组及GA低、中、高剂量组,GA低、中、高剂量组分别加入0.075、0.100、0.125μmol/L的GA处理,正常组不做处理正常培养,其余组均采用1%O2环境模式培养24 h构建细胞低氧损伤模型。于倒置显微镜下观察大鼠心肌细胞形态变化;采用AnnexinV-FITC/PI双染法观察大鼠心肌细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;采用DCFH-DA荧光探针染色检测大鼠心肌细胞活性氧(ROS)水平;采用Western blotting法检测大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)。结果体内研究:与正常组比较,HH模型组及GA低、中、高剂量组PAAT均降低,但HH模型组降低更明显;RPEP均升高,但HH模型组升高更明显(P均<0.05);各组大鼠EF、RVET比较差异均无统计学意义。与正常组比较,HH模型组及GA低、中、高剂量组血清SOD、GSH-Px均降低,但HH模型组降低更明显;MDA水平均升高,但HH模型组升高更明显(P均<0.05)。正常组心肌纤维排列整齐,结构正常,炎症细胞较少,少量红细胞浸润;HH模型组心肌纤维排列松散,可见炎症细胞浸润,部分心肌细胞有红细胞浸润;与HH模型组比较,GA低、中、高剂量组病理组织改变均有改善,且随着药物剂量的增加改善更明显。与正常组比较,HH模型组及GA低、中、高剂量组心肌组织ET-1、iNOS均升高,但HH模型组升高更明显(P均<0.05)。体外研究:正常组细胞形态正常,排列整齐,细胞边界清晰;模型组细胞排列紊乱,稀疏拉丝,细胞间隙变宽;与模型组比较,GA低、中、高剂量组缺氧条件导致的拉丝明显改善,细胞数量增加。与正常组比较,模型组及GA低、中、高剂量组心肌细胞凋亡率、ROS均升高,但模型组升高更明显(P均<0.05)。与正常组比较,模型组细胞Caspase-3、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低;与模型组比较,GA低、中、高剂量组Caspase-3、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高(P均<0.05)。结论GA在体内外HH心肌损伤模型中均可改善大鼠的心肌损伤,其机制可能与减轻氧化应激、改善内皮功能、减少细胞凋亡有关。

SENP-1在慢性间歇性低氧诱导大鼠心肌损伤中的作用

目的探讨小泛素样修饰(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP-1)对慢性间歇性低氧(CIH)诱导大鼠心肌损伤的影响及机制。方法将32只雄性SD大鼠分为对照组、CIH组、阴性对照腺相关病毒干预(AAV-shNC)组和SENP-1 shRNA腺相关病毒干预(AAV-shSENP-1)组,每组8只。CIH诱导6周后,进行超声心动图检查;ELISA检测血清中肌钙蛋白I(cTNI)、肌酸激酶MB同工酶(CKMB)、肌红蛋白(Mb)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;HE染色观察心肌组织病理变化;DCFH-DA荧光探针标记法检测心肌组织活性氧(ROS)水平;试剂盒法检测心肌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白SUMO化水平;qRT-PCR和Western blot法检测心肌组织SENP-1和HIF-1αmRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,CIH组大鼠心肌组织病理损伤严重,左心室舒张阶段末期内径(LVEDD)、左心室收缩阶段末期内径(LVESD)及血清cTNI、CKMB、Mb和LDH水平均升高(P<0.05),心肌组织中ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及SENP-1和HIF-1αmRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),而左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)及血清GSH和SOD水平降低(P<0.05),心肌组织HIF-1α蛋白SUMO化水平降低(P<0.05)。与CIH组比较,AAV-shSENP-1组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVEDD、LVESD及血清cTNI、CKMB、Mb和LDH水平降低(P<0.05),心肌组织中ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及SENP-1和HIF-1αmRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),LVEF、LVFS和血清GSH、SOD水平升高(P<0.05),心肌组织HIF-1α蛋白SUMO化水平升高(P<0.05)。结论抑制SENP-1表达可减轻CIH诱导的大鼠心肌炎症和氧化应激水平,改善心肌损伤和心功能障碍,其作用机制可能与提高HIF-1αSUMO化水平,进而抑制HIF-1α表达有关。

益心方对模拟高原低氧环境大鼠相关指标及心肌损伤的干预作用

目的探讨自拟中药合剂益心方对模拟高原低氧环境下SD大鼠心组织损伤的保护作用及其可能机制。方法 64只SD大鼠随机分为空白对照组、红景天组、丹参组、黄芪组、红景天丹参组、红景天黄芪组、丹参黄芪组及自拟益心方组,每组8只。给药组相对应的中药溶液灌胃,模型对照组灌胃等体积生理盐水,连续给药30天后,将大鼠放置于复合环境模拟实验低压氧舱内,模拟海拔5000米高度,48小时出舱后处死动物,采取血清及心脏组织,化学法测定超氧化物歧化酶(Super oxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量;ELISA 法测定心脏组织低氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)含量及心肌酶五项:肌酸激酶( Creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶( Creatine kinase isoenzyme MB,CK-MB)、乳酸脱氢酶( Lactate dehydrogenase,LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶( Aspartate aminortransferase,AST)、羟丁酸脱氢酶(Hydroxybutyrate dehydrogenase,HBDH)水平。结果 VEGF、EPO、HIF-1α指标在各组间存在差异,差异有统计学意义(P<0.05)。VEGF、EPO、HIF-1α指标结果均提示空白组、益心方组与其余各组之间存在差异,差异有统计学意义(P<0.05)。SOD、MDA指标在各组间存在差异,差异有统计学意义(P<0.05),两指标的空白组、益心方组均与其余各组之间存在差异,差异有统计学意义(P<0.05)。益心方组血清心肌酶谱CK、CK-MB、LDH、AST、HBDH水平明显低于空白组及单味用药组,并且益心方组优于两两组合用药组并存在差异,差异有统计学意义(P<0.05)。结论自拟益心方对模拟低氧环境下损伤大鼠心肌组织具有一定的保护作用,其可能是通过提高SOD含量、降低MDA的生成,其机制可能与增加HIF-1α、VEGF、EPO表达、促进中小血管新生从而保护心肌细胞膜和细胞器的结构和功能,减轻因心肌细胞损伤而引起的CK、CK-MB、HBDH、LDH、AST的释放减少。

灯盏花注射液对大鼠慢性低氧性心肌损伤的预防作用

目的 :探讨预防性使用灯盏花注射液对大鼠慢性低氧心肌损伤的防治作用及可能机制。方法 :复制大鼠间断低氧4周模型 ,采用透射电镜和生化技术研究灯盏花注射液对慢性低氧性心肌损伤的治疗效果。结果 :低氧 4周大鼠心肌组织匀浆丙二醛 (malondialdehyde ,MDA)、Ca2 + 含量明显升高 ,心肌组织匀浆超氧化物歧化酶 (superoxidedismutase ,SOD)、一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase ,NOS)及血浆NO的水平明显下降 ;灯盏花注射液能降低MDA、Ca2 + 的含量 ,升高SOD、NOS及NO的水平 ;透射电镜观察表明灯盏花注射液能对抗低氧大鼠的心肌组织损伤。结论 :灯盏花注射液对慢性低氧心肌损伤有一定防治作用 ,其作用机制与抵抗氧自由基的损伤 ,增强抗氧化系统的活性 ,减少钙超载 。

锻炼复合中药措施对急性低氧环境下小鼠心肌损伤的调节作用

目的：采用锻炼与中药组方的复合措施给小鼠以预处理，观察采用复合措施在平原（３００ｍ），高原（５０００ｍ）暴露４８ｈ，其心肌组织的变化。方法：形态采用病理切片ＨＥ染色，Ｌｉｅ氏特染及细胞色素氧化酶染色并用图像分析给予定量反映。结果：进行复合措施处理的高原与平原组都能改善心肌结构功能，无措施急进高原组则心肌有轻度病理损伤，细胞色素氧化酶活性显著升高。结论：复合措施对心肌具有保护作用。

消痰化瘀利窍方对慢性间歇性低氧暴露大鼠血压与心肌损伤的影响

目的:观察消痰化瘀利窍方对慢性间歇性低氧(CIH)暴露大鼠血压和心肌损伤的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为常氧组、CIH组、CIH+中药干预组和常氧+中药干预组,每组12只。CIH组和CIH+中药干预组大鼠于舱内暴露于CIH环境21 d。每天暴露前给予CIH+中药干预组和常氧+中药干预组大鼠消痰化瘀利窍方灌胃(生药量24 g/kg)。实验前和实验第7、14、21天测定大鼠尾动脉收缩压。造模结束后,应用Power Lab信号采集系统记录大鼠肾交感神经活性(RSNA),应用ELISA法检测血清去甲肾上腺素(NE)水平,取左心室称重并行HE、Masson染色观察。结果:常氧组和常氧+中药干预组大鼠尾动脉压无明显变化,CIH组和CIH+中药干预组大鼠尾动脉收缩压逐渐升高(P<0.05),CIH+中药干预组升高幅度小于CIH组(P<0.05)。CIH暴露可使大鼠RSNA、血清NE水平、左心室质量/体重的比值增加(P<0.05),中药干预可拮抗CIH暴露导致的上述变化(P<0.05)。CIH组大鼠左心室心肌细胞排列紊乱,纤维化增多;CIH+中药干预组心肌组织学变化较CIH组明显减轻。结论:消痰化瘀利窍方可以通过降低RSNA,改善CIH诱导的高血压状态和心肌损伤。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期心肌损伤血清生物学指标变化及其临床意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者低氧血症对心肌损伤血清生物学指标的影响及临床意义。方法对72例COPD急性加重期患者的动脉血氧分压(PaO2)和心肌损伤的血清生物学指标进行检测。根据PaO2的水平分成3组,观察心肌损伤血清生物学指标的变化,并分析PaO2和各种心肌损伤血清生物学指标的关系。结果三个低氧血糖组CK-MB、Mb任意两组比较均不同,轻度与中度CTnI、LDH均相近,其余任意两组比较均不同。结论低氧血症可导致血清CK-MB、LDH、Mb水平增高,且随着缺氧程度加重而加重。重度低氧血症可出现cTnI水平增高,提示患者病情危重。

慢性间歇性低氧对麻醉大鼠心血管系统的影响

目的观察慢性间歇低氧对麻醉大鼠心血管系统的影响。方法通过随机数字表法将72只SD雄性大鼠分为3组,每组24只,分别为常氧对照组(对照组)、常氧麻醉组(模型组)和慢性间歇低氧组(低氧组)。对照组呼吸正常空气,模型组给予用10%水合氯醛0.3 m L/kg腹腔注射麻醉,低氧组在模型组的基础上给予8 h/d慢性间歇低氧刺激。比较各组大鼠的超声心动数据、血压、内皮素-1、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的差异。28 d后处死大鼠,观察各组大鼠心肌细胞结构的改变。结果对照组大鼠心肌形态正常,细胞排列均匀,未见肿胀和炎症;模型组大鼠心肌细胞排列较均匀,未出现肥大和炎性改变;低氧组大鼠心肌细胞排列不均匀,肥大、肿胀、变形,核大深染,心肌组织有明显炎性改变。对照组大鼠心肌细胞核及胞浆呈均匀排列,形态较均一,与对照组比较,模型组细胞形态变化不大,低氧组大鼠心肌细胞形态明显改变,细胞形态、大小的不均一增加,凋亡细胞的颜色由浅变深。低氧组大鼠尾动脉收缩压明显高于对照组和模型组,LVEF显著低于对照组和模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。超声检测值提示低氧组大鼠LVID稍微变大,左心腔扩大,舒张功能尚正常,低氧组和模型组的LVDs均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),低氧组大鼠的RBC、HCT显著高于对照组和模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),而低氧组大鼠的dp/dtmax和-dp/dtmax显著高于对照组和干预组,差异具有统计学意义(P<0.05),低氧组的血清内皮素-1水平显著高于对照组和模型组,而低氧组的血清NO_2^-/NO_3^-总和与eNOS显著低于对照组和模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论慢性间歇低氧可造成麻醉大鼠心功能损伤,此种损伤可能通过氧化应激引起血清内皮素-1、NO含量失衡,导致内皮功能障碍,进而损伤心肌。

慢性阻塞性肺疾病患者低氧血症对脂肪酸结合蛋白的影响

文献报道,慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者低氧血症能够使心肌酶活力增加,肌酸磷酸激酶同功酶(CK-MB)增高显著,CK-MB主要存在于心肌细胞中,是心肌特异而敏感的标志。说明COPD低氧血症患者存在心肌细胞损伤。脂肪酸结合蛋白(fat-ty acid-binding protein,FABP)

加味涤痰汤对慢性间歇低氧模型大鼠心肌组织损伤及Keap1-Nrf2信号通路的影响

目的探讨加味涤痰汤对慢性间歇性低氧诱导大鼠心肌损伤的影响及可能作用机制。方法30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、加味涤痰汤组,每组10只。模型组和加味涤痰汤组放入低氧舱内建立慢性间歇性低氧大鼠模型。加味涤痰汤组每天放进低氧舱前30 min按14.8 g/(kg·d)灌胃给药,正常组和模型组则按相同体积予生理盐水灌胃,共干预12周。检测血清心肌酶指标[包括肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)]、氧化应激指标[包括丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)]和组织铁含量;检测心肌组织中kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、核红系转录因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(Acsl4)蛋白和mRNA的表达;HE染色观察心肌细胞的形态。结果与正常组比较,模型组大鼠血清CK、CK-MB、LDH、MDA上升,GSH表达和组织铁含量降低,心肌组织Keap1、Acsl4蛋白和mRNA表达增加,Nrf2、Gpx4蛋白和mRNA表达减少(P<0.05);HE染色结果显示模型组大鼠心肌组织内血管充血,淋巴细胞浸润,心肌细胞轻微水肿。与模型组比较,加味涤痰汤组大鼠血清CK、CK-MB、LDH、MDA下降,GSH表达和组织铁含量升高,心肌组织Keap1、Acsl4蛋白和mRNA表达降低,Nrf2、Gpx4蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);HE染色显示心肌细胞病理形态有所改善。结论加味涤痰汤能有效改善慢性间歇性低氧过程中氧化应激对大鼠心脏造成的损伤,其机制可能是通过影响Keap1-Nrf2通路介导的铁死亡而发挥作用。

CD73在慢性间歇性低氧合并高脂饮食条件下大鼠心脏损伤中的作用

目的研究CD73在间歇性低氧合并高脂饮食条件下大鼠心脏损伤中的表达及意义。方法建立大鼠慢性间歇性低氧合并高脂饮食模型。将SPF级健康雄性Wistar大鼠24只随机分为4组,每组6只。A组(常氧及普通饮食);B组(常氧及高脂饮食);C组(间歇性低氧及普通饮食);D组(间歇性低氧及高脂饮食)。在实验6周后,取各组大鼠血清检测血脂(甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇)水平,光镜下观察大鼠心肌形态学变化,免疫组化和蛋白印迹检测CD73蛋白在各组大鼠心肌细胞中的表达水平。结果 4组大鼠血脂水平比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。HE结果显示:A组心肌细胞未见明显异常;B组和C组中可见部分心肌纤维排列紊乱,局灶性变性坏死;D组心肌细胞损伤最为明显,可见肌纤维排列紊乱,纵横纹不清,部分肌纤维明显溶解。免疫组化显示,与A组比较,B、C、D组心肌细胞CD73蛋白表达水平均明显升高(均P<0.01);与B组和C组比较,D组CD73蛋白表达水平明显升高(均P<0.01)。蛋白印迹也显示出一致的结果:与A组比较,B、C组CD73蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05),D组CD73蛋白表达水平升高更为显著(P<0.01);与B组和C组比较,D组CD73蛋白表达水平明显升高(均P<0.01)。结论慢性间歇性低氧、高脂饮食可以引起心肌细胞的损伤和心肌细胞中CD73表达上调。

成人HAHD心衰80例临床报告

成人高原心脏病(hish oltitude hearfolisease HAHD是高原地区一种特发性心血管疾病,包括急慢性两种,在其发展中常出现心功不全,若不及时正确诊治,常危及病人生命。既往已有关于HAHD的报道,但尚未见HAHD心衰的分析报道,我院地处3658m高原,1956年—1992年共收治资料完整的80例,仅死亡1例,现报告如下。

模拟高原训练对大鼠血清肌钙蛋白T的影响

以航空航天医学对海拔高度区域的划分为依据,以SD大鼠为实验对象,观察摸拟海拨4000米高原训练前后大鼠血清肌钙蛋白T(cTn-T)的浓度变化。结果表明,模拟海拔4000米,为期4周,每周7天,每天1小时的游泳训练未造成大鼠心肌不可逆转的严重损伤,且心肌重量较高原对照组有所增加,大鼠心肌产生了适应性变化。单独处于海拔4000米高度的低氧环境未引起大鼠血清肌钙蛋白明显升高,而低氧加训练双重影响导致cTn-T显著增加。

高原衰退症的研究进展

高原地区缺氧、高寒、干燥、紫外线强，生存环境恶劣，使得很多人遭受着低氧损伤引起的各类急、慢性疾病。高原衰退症（High Altitude Deterioration，HADT）是因长期暴露于高原缺氧环境下，机体多器官功能逐渐减退而出现的一系列综合征。

我国高原医学的研究现状与展望

青藏高原号称“世界屋脊”和“地球第三极”，平均海拔4000m，占我国陆地总面积的26％。高寒、缺氧、干燥、紫外线强，生存环境恶劣。有千余万人蒙受着低氧损伤引起的各类急、慢性疾病。恶劣的低氧环境，使得人们对进入高原心存畏惧，这成为阻碍高原地区生产力发展的主要因素之一，严重阻碍了高原地区经济社会发展和国防建设。近年来，