利用原子力显微镜探测人正常与慢性淋巴白血病外周血B淋巴细胞

采用Ficoll密度梯度离心法得到人外周血单个核细胞(PBMC),并结合磁珠分选的方法进一步纯化得到正常B淋巴细胞,探索了正常和肿瘤B淋巴细胞之间的差异。通过应用具有高分辨率的原子力显微镜(AFM)对正常人和慢性淋巴白血病人外周血B淋巴细胞进行成像,并对这两种B淋巴细胞的高度、直径、体积及膜表面的颗粒平均高度、平均粗糙度和颗粒分布进行测量,对比观察两组细胞膜表面宏观和纳米结构的变化。结果表明,慢性淋巴白血病B淋巴细胞比正常的B淋巴细胞高大,细胞膜表面颗粒更大且细胞膜粗糙。此外,对这两组淋巴细胞进行了机械性质方面的测量和统计,结果发现慢性淋巴白血病B淋巴细胞粘附力(524.1±160.0)pN比正常B淋巴细胞粘附力(1091±260)pN约小1倍,且癌变的B淋巴细胞硬度明显比正常的小。当正常细胞癌变时,细胞的形貌、超微结构及骨架会发生一定的改变。实验证明应用AFM可在形态学和机械性质上明显区别正常和慢性淋巴白血病B淋巴细胞,为临床诊断慢性淋巴白血病提供新的技术手段。

miR-26a调控PTEN基因降低小鼠慢性淋巴白血病细胞的耐药性

目的观察微小RNA-26a(miR-26a)通过第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)对慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞耐药性的调控作用。方法实验分为4组:对照组(L1210细胞),耐药组(L1210/DDP细胞)、NC组(转染空载质粒+L1210/DDP细胞)和抑制剂组(转染miR-26a-inhibitor质粒+L1210/DDP细胞)。RT-qPCR检测miR-26a和PTEN mRNA表达;双荧光素酶实验检测miR-26a对PTEN的靶向性;MTT法检测细胞对顺铂(DDP)耐药性;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Wetern blot检测细胞中PTEN、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)蛋白表达。结果miR-26a能够抑制细胞中PTEN表达(P<0.05)。miR-26a可靶向作用于PTEN。抑制miR-26a表达可降低细胞对DDP的半数抑制浓度(IC_(50))值,提高细胞凋亡率,上调PI3K蛋白表达及p-AKT/AKT(P<0.05)。结论抑制miR-26a表达可通过上调PTEN表达降低细胞耐药作用。

伊布替尼治疗慢性淋巴细胞白血病引起急性肾损伤不良反应1例

目的探讨伊布替尼致急性肾损伤的临床特征和处置措施。方法以1例伊布替尼治疗慢性淋巴细胞白血病引起急性肾损伤不良反应为切入点,检索FAERS数据库和查阅文献,分析其临床特征和处置措施。结果数据显示,伊布替尼引起急性肾损伤的发生率很低,表现为血清肌酐水平升高,可合并蛋白尿、血尿,肾活检显示为急性间质性肾炎或急性肾小管坏死。及时停药、经糖皮质激素等免疫抑制治疗后,部分患者血清肌酐水平可有所恢复。结论临床医生应权衡利弊,密切监测患者血肌酐,保障患者用药安全。

达沙替尼体外抑制慢性淋巴细胞白血病增殖及BTKC481S功能

目的探讨达沙替尼(BMS-354825)体外对慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)细胞系增殖及野生型/耐药突变型布鲁顿激酶(BTK)活化及功能的影响。方法观察不同浓度的达沙替尼对CLL细胞系的增殖抑制作用。采用不同浓度的达沙替尼及伊布替尼处理外源性表达野生型BTK及常见突变子BTKC481S、BTKT474F及BTKT474I/C481S的细胞系,Western blot检测BTK及其下游靶点PLCγ2的磷酸化水平。结果达沙替尼能显著抑制CLL细胞系MEC-1及JVM3细胞的增殖,且呈剂量依赖性,IC50分别为3.54μmol/L及0.65μmol/L;0.5μmol/L的伊布替尼及0.2μmol/L的达沙替尼可抑制野生型BTK及PLCγ2的磷酸化活化。当BCR信号激活后,BTKC481S、BTKT474F及BTKT474I/C481S均可功能性激活并磷酸化活化下游PLCγ2,这些突变子均对生理浓度的伊布替尼耐药。0.5μmol/L的达沙替尼体外可抑制BTKC481S活化并进而抑制PLCγ2活化,但不能抑制BTKT474F及BTKT474I/C481S的活化,提示沙替尼体可克服BTKC481S导致的耐药而对“守门员”位点突变无效。结论达沙替尼可抑制野生型BTK及BTKC481S激酶活化及功能并抑制CLL细胞增殖,有望解决BTKC481S引发的伊布替尼耐药。

慢性淋巴细胞白血病患者Tfh细胞及其亚群水平的变化和临床意义研究

目的 初步探讨Tfh细胞及其亚群在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者中的变化特点,并分析其临床意义。方法 选取2021年1月-2023年9月新疆医科大学第一附属医院收治的70例初诊CLL患者为CLL组,另选取该院体检健康人员50例为对照组。应用流式细胞术检测Tfh、Tfh1、Tfh2、Tfh17细胞比例,并分析Tfh细胞PD-1和ICOS的表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测BCL-6、Blimp-1、IL-21基因表达;Western blotting检测BCL-6、Blimp-1蛋白表达;酶联免疫吸附试验检测血清细胞因子IL-21的水平。结果 CLL组外周血Tfh、Tfh1、PD-1+Tfh、ICOS+Tfh和PD-1+ICOS+Tfh细胞比例较对照组增加(P <0.05),亚群比值Tfh1/(Tfh2+Tfh17)比值也升高(P <0.05)。与对照组相比,CLL组BCL-6、Blimp-1、IL-21基因和蛋白相对表达量均升高(P <0.05),BCL-6/Blimp-1比值也升高(P <0.05)。Pearson相关性分析结果显示,BCL-6基因和蛋白表达、BCL-6/Blimp-1比值、IL-21水平与Tfh、Tfh1/(Tfh2+Tfh17)均呈正相关(P <0.05)。临床指标分析结果显示,随着IPI评分分组越靠后,Tfh细胞比例、Tfh1/(Tfh2+Tfh17)比值越高,并且与骨髓中B淋巴细胞呈正相关(P <0.05),与免疫球蛋白呈负相关(P <0.05)。结论 CLL患者外周血Tfh细胞参与疾病发病机制,并且Tfh细胞亚群存在偏向于Tfh1细胞的失衡,Tfh细胞的异常分化可能参与CLL的发病和体液免疫紊乱机制。

滋肾化瘀汤治疗慢性淋巴细胞白血病临床观察

目的探讨滋肾化瘀汤在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者中的应用效果。方法选取2021年1月—2023年1月山西省中医院收治的106例CLL患者,采用随机数字表法将其均分为2组,各53例。对照组采用常规一线治疗方案,观察组在此基础上增用滋肾化瘀汤,比较2组血清热休克蛋白70(Hsp70)、Th1/Th2与转化生长因子β(TGF-β)、白细胞计数(WBC)、淋巴细胞绝对数(ALC)、主要症状及体征的持续时间、不良反应情况与总有效率。结果观察组总有效率、Hsp70、Th1/Th2均高于对照组(P<0.05);TGF-β,WBC,ALC水平及发热、乏力、疼痛、水肿持续时间均少于对照组(P<0.05);2组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CLL应用常规化疗方案的同时,增用滋肾化瘀汤可提升疗效,改善症状、外周血象和免疫指标。

慢性淋巴细胞白血病靶向治疗的研究进展

慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)是小B细胞淋巴瘤和白血病的一种,也是B细胞克隆增殖性肿瘤。该病具有明显的异质性,大多数患者的病程趋于惰性,但目前仍不可治愈。异常的信号转导机制是CLL发病机制中不可或缺的。在CLL中,常见的异常信号通路包括B细胞受体信号、细胞凋亡、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号以及Notch信号通路等。针对这些信号通路,研发了一系列的靶向药物,如布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂(伊布替尼、泽布替尼)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶抑制剂(杜韦利西布)、B细胞淋巴瘤2抑制剂(维奈克拉)等,在临床上显著改变了患者的预后。其他靶向药物如fenebrutinib、nemtabrutinib、厄布利塞等,还有免疫肿瘤学和T细胞工程领域发展的嵌合抗原受体T细胞疗法,目前尚在临床试验阶段。更加个体化的治疗方式正在探索,未来可能成为潜在的治疗选择。该文对CLL领域的相关文献进行梳理,就CLL分子机制及靶向治疗的最新研究进行综述。

XPO1基因突变的慢性淋巴细胞白血病临床特征及预后研究

目的:探讨携带exportin 1(XPO1)基因突变的慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)患者的临床特征,为临床诊治提供线索。方法:回顾性分析2006年11月—2022年3月就诊于南京医科大学第一附属医院血液科、且检测出XPO1基因突变的CLL患者临床资料,比较初诊未治(treatment native,TN)和复发/难治(relapsed/refractory,R/R)XPO1突变患者的临床数据、治疗反应及生存结局。结果:在543例CLL患者中,15例(2.8%)患者XPO1基因突变检测阳性,TN组(368例)、R/R组(175例)中患者的突变率分别为9例(2.4%)及6例(3.4%),存在热点突变(E571K)。患者疾病分期多为RaiⅢ/Ⅳ期,Binet B/C组,且免疫球蛋白重链可变区基因(immunoglobulin heavy⁃chain variable region,IGHV)无突变。XPO1基因突变与NOTCH1、SF3B1、KMT2D、TP53等基因可同时出现,且与疾病状态无关,而TP53与XPO1基因突变同时发生多见于R/R组(TN:11.1%;R/R:50.0%)。XPO1突变患者的中位至首次治疗时间(time to first treatment,TTFT)为1.8个月,中位无进展生存期(progression⁃free survival,PFS)为19.8个月,中位总生存时间(overall survival,OS)为40.0个月;XPO1无突变组患者TTFT为8.1个月,PFS为32.5个月,OS为49.8个月。结论:XPO1突变在CLL中为低频突变且常伴随其他基因突变同时发生。R/R患者携带XPO1突变多于TN患者,且肿瘤负荷更高。XPO1突变组患者的TTFT、PFS较XPO1无突变组患者趋向于更短。

γδT17/Th17/Tc17细胞在维吾尔族慢性淋巴细胞白血病患者外周血中的比例及临床意义

目的:探讨维吾尔族慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者外周血中γδT17/Th17/Tc17细胞的比例分布及临床意义。方法:选取53例初诊维吾尔族CLL患者及30例健康者,采用ELISA法检测患者和对照者外周血血清中IL-17、IL-23、IL-6、IFN-γ的水平,采用流式细胞术检测维吾尔族CLL患者与对照组外周血中γδT/γδT17/Th17/Tc17细胞的比例,观察上述指标在CLL Binet分期中的变化差异。结果:与对照组相比,维吾尔族CLL患者外周血γδT细胞、γδT17细胞、Th17细胞比例均明显增高(P<0.05),其中γδT17细胞占总淋巴细胞比例较Th17细胞、Tc17细胞均明显增高(P<0.05),且随着疾病分期进展,γδT及γδT17细胞比例均增高(P<0.05)。维吾尔族CLL患者外周血IL-17、IL-23、IL-6均较对照组明显增高(P<0.05),而细胞因子IFN-γ的水平较对照组明显减低(P<0.05),且随着疾病分期进展,外周血IL-17水平逐渐减低(P<0.05)。结论:γδT及γδT17在维吾尔族CLL中异常高表达,并与疾病分期有关,参与了CLL发生发展。

中医药治疗慢性淋巴细胞白血病及伊布替尼不良反应个案报道

回顾性分析北京中医药大学东直门医院收治的1例伊布替尼治疗慢性淋巴细胞白血病致肺部感染患者的临床资料,并复习相关文献。该患者在服用伊布替尼治疗时并发肺部感染,遂停药,结合中医药治疗后感染症状得到控制,后继续坚持口服中药治疗,慢性淋巴细胞白血病的相关症状得到改善,且未再发生感染。针对长时间应用伊布替尼治疗慢性淋巴细胞白血病的患者,需警惕肺部真菌感染的发生。中医药在治疗慢性淋巴细胞白血病中,能够防止各类感染的发生,提高机体耐受力,延长患者生存期。

慢性淋巴细胞白血病BTKi治疗后免疫功能重建研究

目的:分析慢性淋巴细胞白血病(CLL)经布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂(BTKi)治疗后的免疫功能重建情况。方法:收集2017年1月至2022年3月在福建医科大学附属协和医院血液科就诊的59例CLL患者的病历信息,对其诊断、治疗和实验室检查资料进行回顾性分析研究。结果:59例CLL患者中位年龄为60.5(36-78)岁;BTKi治疗1年后,51例(86.4%)的CLL肿瘤克隆(CD5+/CD19+)明显缩小,治疗前后分别为(46±6.1)×10^(9)/L和(2.3±0.4)×10^(9)/L(P=0.0013),而非肿瘤克隆(CD19+减去CD5+/CD19+)无明显变化;免疫球蛋白IgA明显升高,治疗前后分别为(0.75±0.09)g/L和(1.31±0.1)g/L(P<0.001),但IgG和IgM下降,分别为(8.1±0.2)g/L和(7.1±0.1)g/L(P<0.001)、(0.52±0.6)g/L和(0.47±0.1)g/L(P=0.002)。BTKi治疗前后CLL患者的T细胞亚群出现明显变化,表现为总T细胞数从(2.1±0.1)×10^(9)/L减少至(1.6±0.4)×10^(9)/L(P=0.042),CD4+细胞数从(0.15±6.1)×10^(9)/L增加至(0.19±0.4)×10^(9)/L(P<0.001),CD8+细胞数从(0.27±0.01)×10^(9)/L增加至(0.41±0.08)×10^(9)/L(P<0.001),NK/T细胞数从(0.11±0.1)×10^(9)/L下降至(0.07±0.01)×10^(9)/L(P=0.038);白细胞介素(IL)-2表达上调、IL-4和干扰素γ表达下降,但IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子α表达变化不大;TCR和BCR组库多样性都得到恢复,完全缓解患者比部分缓解患者恢复更明显,完全缓解患者BTKi治疗前后TCR组库香农指数分别为0.02±0.008和0.14±0.01(P<0.001),部分缓解患者分别为0.01±0.03和0.05±0.02(P>0.05),而BCR组库香农指数分别是0.19±0.003和0.33±0.15(P<0.001)、0.15±0.009和0.23±0.18(P<0.05)。结论:BTKi治疗可以缩小CLL克隆,促进IgA表达,增加功能性T细胞数量,调节IL-2、IL-4、干扰素γ等分泌,改善肿瘤微环境的免疫调节状态;BTKi治疗还能促进TCR和BCR免疫组库多样性的恢复。BTKi治疗有助于CLL患者的免疫功能重建。

慢性淋巴细胞白血病合并肾病综合征、急性肾功能不全治疗1例并文献复习

本文报道了1例确诊为慢性淋巴细胞白血病(CLL)2年的患者,以肾病综合征为首发表现,因患者初始拒绝使用糖皮质激素,临床采用了先给予环磷酰胺静滴而后因出现急性肾功能不全给予甲泼尼龙治疗的个体化方案,在治疗肾病的同时,仔细观察了甲泼尼龙及环磷酰胺在使用过程中对患者淋巴细胞的影响,特别是在疾病的诱导缓解期对淋巴细胞的骤升给予了及时合理的对症处理,经过积极治疗,患者肾病完全缓解。本文还通过文献复习,汇总归纳了CLL合并肾病时的治疗选择,分析认为CLL和肾病之间是否存在因果关系以及CLL是否需要治疗,很大程度上决定了肾脏病的治疗策略,同时肯定了糖皮质激素在CLL合并肾病综合征患者中的正向作用,以期为临床诊疗此类疾病提供参考依据。

慢性淋巴细胞白血病伴唇鼻部反复肿胀表现一例

慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)是一种罕见的、进展缓慢的、具有特定免疫表型特征的成熟B淋巴细胞克隆增殖性肿瘤,以大量克隆性B淋巴细胞在外周血、骨髓、脾脏和淋巴结组织中聚集为主要特征;好发于50岁以上中老年,男性多见,起病缓慢,超过半数病例因体检或其他疾病表现被发现[1-2]。诊断时多无自觉症状,乏力、疲倦、消瘦、低热、盗汗、淋巴结肿大、肝脾肿大等可作为有症状者的早期临床表现[3];CLL的口腔颌面部表现比较罕见,相关文献报道稀少。本文报告一例以唇鼻反复肿胀为主要表现的慢性淋巴细胞白血病,结合文献复习,对其可能的头面部症状进行讨论,为口腔专业医师接诊该类患者提供参考,避免误诊。

Tfh细胞及其分泌的IL-21、IFN-γ在慢性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

目的:探讨Tfh细胞及其分泌的细胞因子IL-21、IFN-γ在慢性淋巴细胞白血病(CLL)中的表达及临床相关诊断、预后意义。方法:选取2022年12月至2023年6月期间于新疆医科大学第一附属医院血液科住院接受治疗的30例CLL患者作为研究对象,选取同期健康体检者20例设为对照组。收集两组患者外周血,用流式细胞术胞内染色法检测Tfh细胞比例及其IL-21、IFN-γ表达水平。比较IL-21 IFN-γ−Tfh/Tfh (%)、IL-21−IFN-γ Tfh/Tfh (%)、IL-21 IFN-γ Tfh/Tfh (%)在两组间的差异。结合临床资料比较Tfh细胞表达IL-21、IFN-γ水平在不同CLL临床指标分组、预后分期间的不同。结果:CLL组的Tfh细胞比例、IL-21 IFN-γ−Tfh/Tfh (%)、IL-21 IFN-γ Tfh/Tfh (%)均高于HC组(P IFN-γ−Tfh/Tfh细胞比例均较高(P IFN-γ−Tfh/Tfh细胞比例高于IGVH突变CLL患者(P IFN-γ Tfh/Tfh细胞比例高于IPI指数低危、中危组(P γ水平更高,并与疾病分期、临床高危指标存在相关性。异常的Tfh细胞、IL-21水平累积可能有助于支持CLL细胞的增殖,参与CLL的免疫发病机制。

慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤靶向治疗的最新研究进展

慢性淋巴细胞白血病(CLL)/小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)是一种相对惰性的B淋巴细胞增殖性疾病。近年来,随着新药的上市,化疗逐渐被靶向治疗所取代,明显延长了患者生存期并减低了治疗副作用。目前研究较多的CLL/SLL靶向治疗药物有BTK抑制剂、PI3K抑制剂、SYK抑制剂和BCL-2抑制剂。本文就不同种类靶向治疗药物在CLL/SLL治疗中的最新研究进展作一综述。

美国FDA批准吡托布鲁替尼(pirtobrutinib/Jaypirca)治疗慢性淋巴细胞白血病或小淋巴细胞淋巴瘤

美国FDA于2023年12月3日通过加速审批程序(一种临时性批准)批准礼莱公司(Eli Lilly and Company)的pirtobrutinib/吡托布鲁替尼(商品名为Jaypirca)用于成人治疗慢性淋巴细胞白血病或者小淋巴细胞淋巴瘤,适用于此前已经用过至少2种药物(包括1种BTK抑制剂和1种BCL-2抵制剂)进行治疗的患者。pirtobrutinib在临床试验中最常见(受试者发生率≥20%)的毒副作用有疲劳、皮下出血(瘀斑)、咳嗽、肌肉骨骼痛、新冠肺炎、腹泻、肺炎、腹痛、呼吸困难、出血、气肿、恶心、发热、头痛。

慢性淋巴细胞白血病分子诊断新靶点的研究进展

慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)是一种常见的致命性恶性血液病。由于CLL的病理性质复杂多样,其诊断与治疗监测在临床上一直被视为棘手的问题。随着分子诊断技术的进步,针对染色体异常、基因突变及融合等方向的诊断技术已逐步应用于临床诊疗过程,有力推动了CLL诊断的进展,使一些新的靶点,如淋巴细胞增强结合因子1(lymphoid enhancer binding factor 1,LEF1)、T细胞受体相关蛋白激酶70 Zeta链(zeta chain of T cell receptor associated protein kinase 70,ZAP70)等广泛应用于CLL与淋巴瘤的鉴别诊断及其预后判断。鉴于近期在CLL领域取得的多项突破性研究进展,有必要对目前有关CLL分子机制、诊断以及预后评估的生物学标志物进行全面总结和分析。该文旨在介绍有关CLL分子诊断方法的最新报道,并着重阐明了可能应用于分子诊断技术的新靶点以及在临床辅助诊断、耐药性监测和预后判断等方面值得进一步研究的领域。

含伊布替尼方案治疗高龄进展期小淋巴细胞淋巴瘤/慢性淋巴细胞白血病一例

1 临床资料患者男性,82岁,2008年6月以右侧颈部肿大包块入院。超声提示双侧颈部、腋窝、腹股沟淋巴结肿大,其内可见丰富的血流信号。血象各系为正常范围,且无发热、消瘦、盗汗等症状,未给予治疗,随访观察。2009年1月复查超声提示双侧颈部、腋窝、腹股沟区淋巴结为异常肿大淋巴结。左侧腋窝淋巴结穿刺活检病理为“B小淋巴细胞淋巴瘤/B慢性淋巴细胞性白血病”.

泽布替尼治疗伴中枢神经系统侵犯TP53突变的复发慢性淋巴细胞白血病1例

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一种慢性淋巴细胞增殖性疾病,以克隆性小B淋巴细胞在外周血、骨髓、脾脏和淋巴结聚集为特征。CLL具有惰性倾向,患者中位生存期约为10年,但不同患者的预后呈高度异质性[1]。临床上,根据患者的年龄、功能状态、TP53突变状态、核型进行评估,选择合适的治疗方案。本文报道伴中枢神经系统侵犯TP53突变的复发慢性淋巴细胞白血病患者经泽布替尼治疗后获得缓解1例,并行相关文献复习。

慢性淋巴细胞白血病治疗研究最新进展

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是好发于中老年人群的一种低级别淋巴增殖性肿瘤,早期精准干预可以有效改善CLL患者的临床预后。既往治疗方案主要以化学治疗为主,随着分子生物学发展及免疫靶向药物的不断问世,针对B细胞受体信号通路的靶向药物在CLL诊治路径中表现出较高的临床应用价值。CAR-T等细胞免疫疗法也为复发难治CLL患者带来了希望。异基因造血干细胞移植和多药联合手段也在临床实践中表现出较为显著的效果。本文旨在就慢性淋巴细胞白血病的最新治疗研究进展作一综述。