褐藻寡糖对慢性不可预知温和应激诱导的斑马鱼抑郁样行为及肠道菌群的影响

目的:探究褐藻寡糖(AOS)对慢性不可预知温和应激(CUMS)模型斑马鱼抑郁样行为及肠道菌群的影响。方法:将野生型AB品系斑马鱼随机分为正常组、模型组、阳性对照组和AOS低、中、高剂量(AOS-L、AOS-M、AOS-H)组,每组24尾。除正常组外,其余各组均接受14 d的CUMS建立斑马鱼抑郁样模型。除正常组和模型组给予等体积饲养水外,其余各组于第8天开始每天浸泡60 min相应浓度的AOS。14 d后,采用新型水箱测试(NTT)和明暗箱测试(LDB)进行行为实验,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脑组织中5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)水平,16s r RNA测序检测肠道菌群变化。结果:与模型组比较,在NTT中,阳性对照组和AOS-H组斑马鱼第1次进入顶部潜伏期显著缩短,在顶部的时间显著延长,进入顶部的次数显著增加(均P<0.01),活动范围扩大。与模型组比较,在LDB中,阳性对照组和AOS-H组斑马鱼第1次进入光亮区域的潜伏期显著缩短,AOS-M组和AOS-H组在光亮区域的持续时间显著延长,阳性对照组和AOS各剂量组进入光亮区域的次数显著增加(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组体质量指数、5-HT和NE水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,AOS-M组、AOS-H组体质量指数显著增加(P<0.05或P<0.01);阳性对照组和AOS-H组5-HT水平显著提高(P<0.01)。AOS可以提高肠道菌群丰富度和多样性,调节群落组成结构。在门水平上,调节变形菌门、放线菌门、梭杆菌门和厚壁菌门等菌门的相对丰度。在属水平上,调节鲸杆菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属、未分类根瘤菌属和根瘤菌属菌群等菌属的相对丰度。影响肠道中碳代谢、嘌呤代谢和丙酮酸代谢等代谢功能及相关物质转运过程。结论:AOS能改善CUMS斑马鱼抑郁样行为,增加体质量指数,其作用与调节神经递质、肠道菌群组成及其代谢和物质转运功能有关。

二仙汤对慢性不可预知温和刺激诱导的抑郁小鼠行为学及神经递质水平的影响

目的:研究二仙汤对慢性不可预知温和刺激诱导的抑郁小鼠行为学及血清激素的影响。方法:将40只雌性昆明小鼠随机分成空白组、模型组、中药组和氟西汀组,每组10只。除空白组外,其余组别使用7种随机慢性不可预知温和刺激造成小鼠的抑郁样模型,为期4周。第5周开始,中药组给予二仙汤2.0g/kg灌胃,氟西汀组给予氟西汀6.0mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水,为期2周。通过观察小鼠的精神状态、体质量变化情况、糖水享乐、悬尾和强迫游泳等来判别小鼠的行为学状态;使用ELISA检测小鼠血清5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)的激素水平。结果:中药组与氟西汀组的体质量均比模型组高(P<0.01),但依然低于空白组;在享乐行为的蔗糖偏好中,模型组处于一个持续低迷的状态,中药组和氟西汀组的给药介入明显改善这种现象(P<0.01);强迫游泳和悬尾的行为学测试中,相比于模型组,二仙汤可以显著提升小鼠在绝望状态下的挣扎求生欲望,减少其不动时间(P<0.01);血清激素检测结果中,二仙汤可以直观地增强神经递质5-HT、DA的水平含量(P<0.05),从而提升下丘脑的精神愉悦性。结论:二仙汤可以有效改善抑郁小鼠的精神状态、恢复正常的行为欲望,并增加神经递质的表达。

迷走神经刺激改善慢性不可预知性温和应激大鼠的抑郁样行为

目的:研究迷走神经刺激(VNS)对慢性不可预知性温和应激(CUMS)模型大鼠抑郁样行为的影响。方法:利用CUMS方法制备大鼠抑郁模型,用VNS对大鼠进行治疗,糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠的抑郁样行为,高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠脑脊液中5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)及去甲肾上腺素(NE)的含量。结果:与正常大鼠相比,CUMS组大鼠体重增加缓慢(P<0.05),糖水偏好率降低(P<0.05)且游泳不动时间增加(P<0.05),表现出明显的抑郁样行为,同时其脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE含量显著降低(P<0.05)。经过VNS治疗,大鼠的体重增加明显(P<0.05),糖水偏好率增加(P<0.05)且游泳不动时间减少(P<0.05),与之相适应的是脑脊液中5-HT、5-HIAA和NE水平显著升高(P<0.05)。结论:VNS能够改善CUMS大鼠的抑郁样行为并提高脑脊液中5-HT和NE的水平。

小鼠在慢性不可预知应激条件下的学习认知能力与神经肽Y、皮质醇的相关性

目的 探讨慢性不可预知轻度应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)状态下小鼠的学习认知能力与血清神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)、皮质醇等应激因子水平的相关性。方法 将12只C57BL/6小鼠分为对照组和CUMS组,每组各6只。CUMS组小鼠完成30天CUMS造模,对照组小鼠无特殊处理,定期监测两组小鼠的体质量变化。利用Morris水迷宫实验检测两组小鼠水迷宫运动轨迹、潜伏期、第二象限/第四象限路程比值、穿越平台次数。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法检测两组小鼠血清NPY、皮质醇、α淀粉酶、酪氨酸水平。结果 造模后第9天CUMS组小鼠体质量较对照组降低(P<0.05),性情易暴躁,提示应激措施有效果,造模成功。Morris水迷宫实验第2天,两组小鼠运动轨迹、潜伏期、第二象限/第四象限路程比值、穿越平台次数比较差异无统计学意义(P>0.05);Morris水迷宫实验第6天,两组小鼠运动轨迹、潜伏期、第二象限/第四象限路程比值、穿越平台次数比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。与对照组相比,CUMS组小鼠血清NPY、皮质醇水平升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。小鼠血清NPY水平与第二象限/第四象限路程比值存在线性关系(y=-0.001x+1.738,R^(2)=0.586,P=0.004),与潜伏期存在线性关系(y=-0.027x+51.130,R^(2)=0.498,P=0.010)。结论 CUMS状态下,小鼠血清NPY水平的升高与学习认知能力的提高有关。

养胃安神方对慢性不可预知应激失眠模型小鼠睡眠质量的改善作用及机制研究

目的通过慢性不可预知应激联合对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导失眠小鼠模型,探讨养胃安神方对失眠小鼠睡眠质量的改善作用及其机制。方法48只ICR小鼠随机分为6组:正常对照组,模型组,阳性药组(地西泮2.5 mg·kg^(-1))及养胃安神方高、中、低剂量组(50、25、12.5 g·kg^(-1),相当于成人临床剂量的18、9、5倍),每组8只。对除对照组外其他组ICR小鼠进行多因素刺激14 d后,连续2 d腹腔注射PCPA悬液(30 mg·mL^(-1)),建立失眠模型。后给予地西泮及3种不同剂量的养胃安神方,持续14 d。分别进行行为学实验和戊巴比妥钠诱导睡眠实验。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定小鼠血清中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)水平。采用蛋白质印迹法(WB)检测下丘脑5-HT1A受体(5-HTR1A)的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠精神状态异常,毛发粗糙,毛色暗沉,暴躁易怒,尿液浑浊,体重增加缓慢;在高架十字迷宫实验中,模型组小鼠进入开放臂的次数和停留时间显著减少(P<0.05);在旷场实验中,模型组小鼠的总路程显著减少(P<0.05),中央区域活动时间明显缩短(P<0.05)。养胃安神方对小鼠的一般状态及紧张和焦虑样行为均有改善作用,且养胃安神方组小鼠的睡眠潜伏期缩短,睡眠时间延长(P<0.05)。模型组小鼠血清中5-HT含量显著降低,而NE和DA含量显著升高(P<0.01),养胃安神方能够调节3种神经递质的稳态;与对照组相比,模型组小鼠下丘脑中5-HTR1A表达量显著降低,养胃安神方中、高剂量组给药后5-HTR1A表达量明显升高。养胃安神方在镇静安神和影响神经递质等方面与阳性药地西泮作用相当。结论养胃安神方对PCPA联合多因素刺激诱导的失眠模型小鼠有良好的催眠作用。养胃安神方可以通过逆转神经递质的改变而改善睡眠质量,表现为减少睡眠潜伏期,增加睡眠时间。

抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响

目的探究抗性糊精对慢性不可预知温和应激大鼠肠道菌群的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和抗性糊精组,大鼠基于慢性不可预知温和应激(CUMS)建立抑郁模型,3周后进行糖水偏好实验和旷场实验检测。模型组筛选应激敏感大鼠,其他两组随机选择等数量大鼠利用16S rRNA测序技术检测其肠道菌群的组成和结构变化。结果与对照组相比,模型组大鼠肠道菌群厚壁菌门[(0.92251±0.02838)vs.(0.82572±0.00761)]、阿克曼菌属[(0.01327±0.00076)vs.(0.00000±0.00000)]、乳球菌属[(0.00029±0.00010)vs.(0.00000±0.00000)]相对丰度显著降低(P<0.05);拟杆菌门[(0.04671±0.00263)vs.(0.12341±0.03576)]、粪杆菌属[(0.00011±0.00004)vs.(0.00057±0.00005)]、Ruminococcaceae_UCG_014[(0.01003±0.00384)vs.(0.10976±0.04364)]相对丰度显著升高(P<0.05)。与模型组相比,抗性糊精可对丰度发生变化的菌群显著回调(P<0.05)。结论抗性糊精能够调节CUMS大鼠的肠道菌群,通过改善益生菌的相对丰度、降低致病菌的相对丰度促使肠道恢复动态平衡,为抑郁症的治疗提供实验基础研究。

林下参提取物对慢性不可预知温和应激模型小鼠抑郁样行为及HPA轴影响

目的:研究林下参提取物(understory Panax ginseng extract,UPGE)对慢性不可预知温和刺激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型小鼠抑郁样行为及下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴的影响。方法:超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法鉴别UPGE中的皂苷成分。将60只雄性昆明小鼠随机分为空白组(Control),模型组(CUMS),文拉法辛组(10 mg·kg^(−1)Ven)以及林下参提取物组(100 mg·kg^(−1)UPGE)。除空白组外,均采用CUMS诱导各组小鼠抑郁,灌胃给药21 d后通过小鼠体质量,进行糖水偏好实验,旷场实验,水迷宫实验分析其行为学变化;采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH),促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质酮(corticosterone,CORT)的含量,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察小鼠海马CA1,CA3区神经元细胞病理变化,原位末端标记法(TUNEL)显色法检测海马区细胞凋亡情况。结果:UPGE中含16种皂苷成分。相比于模型组,UPGE给药组小鼠糖水偏好度显著提升(P<0.01)、旷场实验中水平运动距离增加和垂直站立次数增加(P<0.05,P<0.01)、水迷宫实验中逃避潜伏期降低(P<0.05)、增加目标象限停留时间、穿越平台次数(P<0.05,P<0.01)、能够缓解海马神经元细胞的损伤,血浆中ACTH、CORT和CRH水平降低(P<0.05),海马区细胞凋亡率降低(P<0.05,P<0.01)。结论:UPGE有显著的抗抑郁作用,其作用机制可能与调节HPA轴功能有关。

孕期慢性不可预知温和应激致产后抑郁的实验模型验证

目的模拟孕妇在妊娠期经受的社会心理因素影响来建立产后抑郁模型,为后期从围产期出发研究产后抑郁发生原因及机制提供科学依据。方法32只健康成年SD雌鼠随机分为对照组和模型组,利用21 d慢性不可预知温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)进行应激刺激,在应激第3天与雄鼠进行1∶2合笼饲养,确定妊娠后,雌雄分笼,雌鼠单笼饲养。ELISA试剂盒测定血浆皮质酮水平。利用蔗糖偏好实验、旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验进行产后抑郁情绪判定,利用ELISA试剂盒测定雌鼠在应激第21天、产后1周、产后3周血清中雌二醇(estradiol,E_(2))水平。结果应激第7天、21天模型组血浆皮质酮水平增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05),表明孕期雌鼠处于慢性应激状态。与对照组比较,模型组产后1周旷场实验中外周运动时长延长,中心运动时长缩短(P均<0.05);产后1周、3周模型组1%糖水消耗率降低(P均<0.05);模型组产后1周、产后3周的悬尾实验中静止时间增长(P均<0.05);产后1周模型组强迫游泳中静止时间延长(P<0.05)。产后对照组和模型组E2水平均下降,且模型组产后1周和产后3周E2水平均低于对照组(P均<0.05)。结论孕期慢性不可预知温和应激刺激可用来建立产后抑郁大鼠实验模型。

雌马酚(S-equol, Eq)对慢性不可预知温和刺激小鼠抑郁样行为的改善作用

为探究雌马酚(S-equol, Eq)对慢性不可预知温和刺激抑郁模型(Chronic Unpredictable Mild Stress, CUMS)小鼠的改善作用,试验设空白组(Con)、模型组(CUMS)、雌马酚低剂量组(Eq-L,10 mg·kg-1)、雌马酚中剂量组(Eq-M,20 mg·kg-1)和雌马酚高剂量组(Eq-H,40 mg·kg-1),在预防给药14 d后,对模型组和雌马酚组进行CUMS造模刺激,造模42 d之后监测体重,依次进行空场、糖水偏爱、悬尾、强迫游泳和新奇抑制摄食5种行为学试验,并检测血清中皮质酮(CORT)水平。行为学结果显示:与空白组相比,CUMS模型组小鼠的自主活动能力未受到显著影响,体重和糖水偏爱指数显著下降,悬尾、强迫游泳中不动时间和新奇抑制摄食潜伏期显著延长;与模型组相比,雌马酚没有影响小鼠的自主活动,显著提高了小鼠的糖水偏爱指数,缩短了悬尾、强迫游泳不动时间和新奇抑制摄食潜伏期。此外,CUMS模型组小鼠血清中CORT显著上调,雌马酚给药显著改善上述异常指标。该结果表明雌马酚可以改善CUMS小鼠抑郁样行为,并通过抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴的过度亢进发挥改善抑郁的作用。

慢性温和不可预知性刺激致大鼠抑郁症模型的病理机制研究进展

抑郁症是一种伴有行为学、神经化学和其他生理病理导演的心理障碍。慢性暴露于轻度不可预见性应激(CUMS)已被证实可以导致抑郁竱行为,包括糖水消耗减少等。并且CUMS引起的一系列生化改变类似于人类的抑郁症。我们综述了CUMS致抑郁症动物模型的病理变化,包括了受体、信号转导系统等方面的病理改变。

慢性不可预知温和刺激小鼠内侧前额叶的能量代谢障碍及功能磁共振成像

目的研究慢性不可预知温和刺激(CUMS)小鼠活体状态下内侧前额叶灰质体积和自发活动的变化,及其与mTORC1能量信号通路的关联及机制。方法4周龄健康C57Bl/6小鼠随机分为正常对照组(n=16,未予处理)和抑郁模型组(n=16,CUMS方法造模8周)。旷场实验、强迫游泳实验、悬尾实验、糖水摄取实验检测小鼠抑郁倾向,利用结构功能磁共振探究小鼠脑灰质体积和低频振幅的改变。而后,将抑郁模型组的CUMS小鼠随机分成CUMS治疗组(n=8,氯胺酮活化mTORC1通路)和CUMS对照组(n=8,生理盐水)。取小鼠内侧前额叶组织,蛋白免疫印迹法检测并比较正常对照组、CUMS治疗组及CUMS对照组3组小鼠mTORC1相关蛋白的磷酸化水平,ELISA法检测ATP和NADP+/NADPH为代表的3组小鼠组织能量代谢情况。结果经过CUMS后小鼠出现明显抑郁行为倾向,CUMS小鼠的糖水偏爱百分比下降(P<0.05)、糖和水的总摄取量减低(P<0.01),旷场实验总运动距离(P<0.05)及中央区域运动距离(P<0.01)缩短,在悬尾实验和强迫游泳实验中CUMS小鼠不动时间增加(P>0.05),但不具有统计学意义。磁共振检测发现CUMS小鼠内侧前额叶灰质体积增大,mALFF显著增高(P<0.01,Alphasim矫正);mTORC1相关蛋白的磷酸化水平减低,ATP和NADP+/NADPH降低(P<0.05),经过氯胺酮治疗,mTORC1相关蛋白的磷酸化水平升高,ATP显著升高(P<0.05)。结论CUMS小鼠内侧前额叶存在更高的自发活动以及更低的产能效率,这种自发活动与产能效率的不匹配提示内侧前额叶存在mTORC1磷酸化减低相关的能量代谢方面的障碍,且此障碍可以通过氯胺酮活化mTORC1通路得到缓解。

慢性不可预知温和刺激抑郁模型及其评价指标的研究进展

抑郁症是一种严重的精神疾病,其发病率逐年上升,至2030年,将居全球疾病负担首位。目前,抑郁症的发病机制尚不完全清楚,其治疗手段有限。因此,迫切需要通过能够模拟人类抑郁行为的动物模型来探索其发病机制,继而寻找相应的治疗药物。慢性不可预知温和刺激(CUMS)模型是通过模拟人类生活中的不良应激事件,从而诱发动物抑郁样症状,其病理生理机制更符合人类抑郁症的发病机制,是一个经典的抑郁症动物模型。CUMS模型评价主要通过糖水消耗实验、旷场实验、强迫游泳等行为学评价方法和神经递质、神经营养因子、神经炎症因子等实验室评价指标,这些评价方法的侧重点各自不同,相互联系又相互补充,通常需要采用多种评价方法综合观察,从而保证CUMS模型的可信度。

慢性不可预知性温和刺激对雄性大鼠生殖系统的影响

目的:研究慢性不可预知性温和刺激对雄性大鼠生殖系统的影响。方法:将SD雄性大鼠随机分为正常对照组和模型组。模型组大鼠每天给予多种低强度刺激,连续28d,构建模型。称量大鼠体重、睾丸和附睾重量。取出附睾计数精子、观察精子活率。HE染色观察大鼠睾丸组织结构。结果:与正常对照组相比,模型大鼠体重、睾丸重量、附睾重量显著减少,精子活率显著下降,a、c级精子所占比例明显下降;组织形态学与对照组相比,模型组大鼠睾丸组织受到明显损伤。结论:慢性不可预知性温和刺激可损伤雄性大鼠的生殖功能。

木犀草素对慢性不可预知性温和应激所致小鼠抑郁的改善作用

目的探讨木犀草素对慢性不可预知性温和应激抑郁模型(CUMS)所致小鼠脑组织氧化应激损伤的改善作用。方法建立小鼠慢性不可预知性温和应激抑郁模型;用经典的糖水消耗实验检测小鼠快感缺失;旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠的活动能力和绝望程度;采用分光光度法测定小鼠脑组织超氧物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)含量。结果与模型组相比,木犀草素能明显改善小鼠抑郁样行为,提高SOD和GSH活性,降低小鼠脑组织MDA含量。结论木犀草素对CUMS小鼠的抑郁样行为有改善作用,作用机制可能与其增强小鼠脑组织的抗氧化活性,改善氧化/抗氧化平衡有关。

miRNA132在抑郁症患者及慢性不可预知温和应激抑郁模型大鼠中的表达

目的观察首发抑郁症患者外周血及慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型大鼠血液和前额叶皮层中miRNA132的表达水平。方法以2017年3月至2018年5月在杭州市第七人民医院精神科门诊治疗的首发抑郁症患者(抑郁组)41例及同期招募的健康志愿者(对照组)31例为研究对象,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分评估抑郁症患者严重程度。雄性SD大鼠24只,采用配对比较法随机分为对照组和CUMS组,每组12只;分别用糖水偏好实验和强迫游泳实验检测大鼠抑郁样行为,ELISA法检测大鼠血浆皮质酮水平。采用实时荧光定量PCR法检测受试者外周血白细胞中和大鼠血液及前额叶皮层中miRNA132表达水平。结果抑郁症患者外周血白细胞miRNA132水平为2.37±0.36,明显高于对照组的1.34±0.16(t=2.355,P=0.0213);抑郁症组患者外周血白细胞miRNA132表达水平与HAMD17得分呈显著正相关(P=0.0004,rs=0.5303,n=41)。CUMS组大鼠不动时间为(72.67±2.95)s,明显多于对照组的(40.00±5.49)s(t=2.366,P=0.0395);蔗糖消耗为(55.67±6.42)%,明显低于对照组的(98.21±1.28)%(t=6.502,P<0.0001);血浆皮质酮水平为(1396.0±254.9)nmol/L,明显高于对照组的(557.3±158.4)nmol/L(t=2.795,P=0.0190)。CUMS组大鼠血液中白细胞和前额叶皮层中的miRNA132表达水平分别为2.32±0.88和2.80±0.76,明显高于对照组的1.18±0.36(t=2.273,P=0.0463)和0.99±0.23(t=2.553,P=0.0287)。结论临床抑郁症患者外周血miRNA132表达趋势与CUMS抑郁模型大鼠miRNA132表达趋势一致。CUMS抑郁模型大鼠血液中miRNA132表达与前额叶皮层中表达也一致,血液miRNA132表达可在一定程度上反映前额叶皮层的miRNA132表达变化趋势。

缺血再灌注联合慢性不可预知刺激构建卒中后抑郁新模型

背景:国内外卒中后抑郁动物模型主要以脑卒中叠加抑郁造模方式构建,但其各种造模方式都有其优缺点,在此基础上对卒中后抑郁造模方式进行新的探讨。目的:采用行为学评估及脑组织神经介质检测,探究一种稳定、可复制的卒中后抑郁造模方式。方法:雄性SD大鼠90只,体质量(200±20)g,由西安交通大学动物实验中心提供。(1)将60只大鼠随机分为3组,行30,60,90min的缺血再灌注,24h后观察大鼠存活率,并行神经功能缺损评分及脑梗死体积的评定,确定最佳缺血再灌注的时间点;(2)另将30只大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉栓塞组、卒中后抑郁组,于刺激前及刺激的第1,2,3周进行强迫游泳实验、敞箱实验、糖水消耗实验、新奇抑制摄食实验、体质量变化评价大鼠的抑郁行为;运用ELisa法检测脑组织中的5-羟色胺、去甲肾上腺素及脑源性神经营养因子水平。结果与结论:(1)确定了60 min为后续缺血再灌注的时间点;(2)行为学评估显示,与大脑中动脉栓塞组相比,卒中后抑郁大鼠的体质量、糖水消耗实验和敞箱运动垂直及水平运动得分均于第2周开始降低(P <0.05),新奇抑制摄食实验潜伏时间、强迫游泳实验不动时间出现明显升高(P<0.05);(3)Elisa检测显示,与大脑中动脉栓塞组相比,卒中后抑郁组大鼠的5-羟色胺、去甲肾上腺素及脑源性神经营养因子水平均降低(P <0.05);(4)结果说明,采用60 min的缺血再灌注联合慢性不可预知的刺激,建立卒中后抑郁模型,可表现出明显的抑郁状态,同时,模型稳定、存活率高,符合卒中后抑郁的多种临床特征,可能成为研究卒中后抑郁一种新的、可靠的造模方式。

复方柴金解郁片对慢性温和不可预知性应激抑郁大鼠海马突触可塑性的影响

目的观察复方柴金解郁片对慢性温和不可预知性应激抑郁大鼠海马神经元突触可塑性的影响,探讨其抗抑郁的作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、文拉法辛组和复方柴金解郁片高、中、低剂量组,每组10只,除空白组外,采用慢性温和不可预知性应激结合孤养建立抑郁大鼠模型,同时灌胃相应药物,连续42 d。采用糖水消耗实验、旷场实验、强迫游泳实验进行行为学评价,HE染色观察大鼠海马组织病理变化,高尔基染色观察海马神经元树突棘变化,Western blot检测海马组织胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、树突棘素(Spinophilin)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠糖水偏好度降低,总活动次数显著减少,游泳不动时间显著增加(P<0.05,P<0.01),海马神经元突触损伤,排列紊乱,树突棘数量减少或缺失,海马组织GDNF、Spinophilin蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,文拉法辛组和复方柴金解郁片中、低剂量组大鼠糖水偏好度升高,总活动次数显著增加,游泳不动时间显著减少(P<0.05,P<0.01),海马神经元突触损伤减轻,树突分支和树突棘数量增加,海马组织GDNF、Spinophilin蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论复方柴金解郁片可改善慢性温和不可预知性应激大鼠抑郁样行为,其机制可能与上调海马组织GDNF、Spinophilin蛋白表达,调控海马神经元突触可塑性有关。

养生保健1号对慢性不可预知应激刺激大鼠学习记忆能力的影响

目的:观察养生保健1号对慢性不可预知应激刺激大鼠学习记忆能力的影响。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、保健方组(7.26 g/kg组、4.84 g/kg组、3.23 g/kg组),除正常组外建立慢性不可预知应激温和刺激模型(CUMS)。采用旷场实验、糖水消耗实验评价大鼠行为学变化,采用Morris水迷宫考察CUMS大鼠的学习记忆能力,同时测定大脑Ach和Ach E含量变化。结果:应激刺激3周,与正常组相比,大鼠糖水偏嗜度显著下降(P<0.05),模型建立成功。保健方给药8 d后各剂量组糖水的偏嗜度较模型组明显增加(P<0.01)。旷场实验中,模型组大鼠运动的总得分低于正常组(P<0.01),保健方各个剂量组的运动总路程均明显高于模型组(P<0.01)。Morris水迷宫定位导航实验中模型组大鼠平均潜伏期长于正常组(P<0.05),与模型组比较,保健方各剂量组的潜伏期缩短(P<0.05)。Morris水迷宫空间探索实验中模型组大鼠的穿越平台次数、原台所在象限游泳距离和时间明显少于正常组(P<0.05,P<0.01),而保健方各剂量组较模型组均明显增加(P<0.01)。保健方3个剂量组大鼠脑浆上清中Ach含量均显著升高(P<0.05),而Ach E含量均明显降低(P<0.05)。结论:养生保健1号具有改善CUMS大鼠学习障碍、提高空间学习记忆能力的作用,其机制与对调节胆碱能系统有关。

基于PGC-1α调控线粒体功能在紫檀芪减轻慢性不可预知军事应激暴露小鼠记忆损伤中的作用研究

目的探讨紫檀芪(pterostilbene,PTE)对慢性不可预知军事应激(chronic unpredictable military stress,CUMS)暴露小鼠记忆功能的影响及其作用机制。方法将36只健康7~8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(CON)、慢性不可预知军事应激暴露组(CUMS)和紫檀芪干预组(PTE)。CUMS组及PTE组小鼠连续30d暴露于不可预知军事应激条件下,PTE组小鼠每日给予紫檀芪(100mg/kg.BW)灌胃干预。暴露期间,记录小鼠体质量及进食量变化;暴露结束后,检测各组小鼠血清皮质酮水平,水迷宫记忆测试实验检测小鼠空间记忆功能,透射电镜观察海马神经元超微结构,SeahorseXFHSMini分析仪检测离体小鼠海马线粒体呼吸功能,RT-qPCR检测海马mtDNA相对拷贝数及Pgc-1α、Tfam基因表达,以及Western Blot检测海马PGC-1α蛋白表达。结果与CON组相比,CUMS组小鼠体质量及进食量显著下降(P<0.05),血清皮质酮含量升高(P<0.0001),PTE组小鼠较CUMS组小鼠体重及进食量下降减少(P<0.05),血清皮质酮升高程度减低(P<0.001);水迷宫探查实验发现,与CON组相比,CUMS组小鼠对平台的记忆准确性降低,而PTE组小鼠表现优于CUMS组。透射电镜显示CUMS暴露后,小鼠海马神经元脂褐素增多、线粒体肿胀和嵴消失,而PTE组脂褐素较CUMS组少,线粒体肿胀较轻。CUMS组离体海马线粒体基础呼吸(P<0.05)、最大呼吸(P<0.001)、储备呼吸(P<0.01)较CON组显著下降;而PTE组最大呼吸(P<0.05)、ATP生成能力(P<0.05)及呼吸控制率(P<0.05)较CUMS组明显改善。同时,发现CUMS组海马mtDNA拷贝数降低(P<0.01),Pgc-1α(P<0.0001)、Tfam(P<0.01)基因相对表达量及PGC-1α蛋白(P<0.01)含量降低,PTE组较CUMS组海马mtDNA拷贝数升高(P<0.05),Pgc-1α、Tfam基因相对表达量及PGC-1α蛋白含量升高(P<0.05)。结论紫檀芪可改善CUMS暴露小鼠记忆功能,可能与其有效遏制CUMS暴露所致PGC-1α表达下降,进而减轻海马线粒体结构及功能损伤有关。

姜黄素对慢性不可预知性刺激诱发小鼠肾损伤的保护作用

目的研究姜黄素对慢性不可预知性刺激诱发小鼠肾损伤的保护作用及机制。方法采用慢性不可预知性刺激诱发小鼠肾损伤模型,经5周慢性不可预知性刺激诱发小鼠肾损伤,检测小鼠血清肌酐(Scr)、血清尿素氮(BUN)的含量、肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量,观察肾病理组织形态学变化。结果与慢性不可预知性刺激诱发小鼠肾损伤模型组相比,姜黄素组可明显降低小鼠血清中Scr和BUN的含量,降低肾组织中MDA的含量,提高肾组织中SOD和CAT的活性、提高GSH的含量。同时光镜发现模型组小鼠肾小管损伤明显,肾小球体积增大,内皮细胞肿胀脱落,间质炎性浸润,给予姜黄素后肾组织损伤明显降低。结论姜黄素对慢性不可预知性刺激诱发的小鼠肾损伤具有保护作用,其作用机制可能部分来自于清除自由基和抑制脂质过氧化过程。