大鼠慢性不可预测温和应激与小鼠社会挫败抑郁症模型的建立与行为学评价

目的:为了研究重度抑郁症(major depressive disorder,MDD)发病机制,有必要建立稳定的抑郁症啮齿类动物模型。目前文献常用的慢性抑郁症动物模型为慢性不可预测温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)和社会挫败(social defeat,SD)两种模型。在该研究中,为了建立更稳定的抑郁症动物模型并比较两种模型的优缺点,对现有两种模型的建立方法和评价指标进行了调整与改进。方法:慢性不可预测应激模型大鼠每天随机接受两种应激因子,进行为期28 d的应激刺激,刺激因素包括通宵照明、夹尾、湿笼、拥挤、冰水游泳、禁水及禁食等。造模过程中将大鼠分为空白对照组,模型组以及氟西汀阳性药对照组(10 mg·kg^(-1))三组。小鼠接受社会挫败应激因素包括攻击鼠对实验鼠5~10 min的身体攻击(physical attack,PA)和24 h的感官接触(sensory interaction,SI),实验时将小鼠分为空白对照和SD应激因素两组。造模后使用糖水偏爱率、强迫游泳不动时间及社会交往率(social interaction ratio,SIR)等指标考察模型是否成功。结果:采用不同组合的慢性不可预测应激条件建立了大鼠CUMS模型,4周造模后,模型组糖水偏爱率(69.3%±3.6%,n=27)和强迫游泳不动时间(131.2±5.8 s,n=27)与非接受刺激的空白对照组大鼠的糖水偏爱率(81.0%±3.2%,n=17)和强迫游泳不动时间(105.1±8.2 s,n=17)比较,糖水偏爱率显著降低,而不动时间显著延长,差异均具有统计学意义(P<0.05);阳性对照氟西汀组大鼠糖水偏爱率(82.1%±3.9%,n=10)和强迫游泳不动时间(108.3±9.7 s,n=10)与空白对照组比较没有显著差异。社会挫败应激经社会交往测试(social interaction test,SIT)后,选取社会交往率小于1(即SIR=有攻击鼠存在时C57BL/6J小鼠在接触区持续时间/无攻击鼠存在时C57BL/6J小鼠在接触区持续时间)的敏感小鼠用于评价糖水偏爱率。糖水偏爱测试结果表明,SD模型组小鼠的糖水偏爱率(69.2%±2.4%,n=16)与对照组(78.6%±3.2%,n=9)相比显著降低(P<0.05)。结论:以糖水偏爱率和强迫游泳不动时间两个核心指标判断大鼠CUMS模型造模成功,小鼠SD模型以社会交往率和糖水偏爱率为指标判断造模成功,且模型相对比较稳定。

木犀草素对慢性不可预知性温和应激所致小鼠抑郁的改善作用

目的探讨木犀草素对慢性不可预知性温和应激抑郁模型(CUMS)所致小鼠脑组织氧化应激损伤的改善作用。方法建立小鼠慢性不可预知性温和应激抑郁模型;用经典的糖水消耗实验检测小鼠快感缺失;旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验检测小鼠的活动能力和绝望程度;采用分光光度法测定小鼠脑组织超氧物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性及丙二醛(MDA)含量。结果与模型组相比,木犀草素能明显改善小鼠抑郁样行为,提高SOD和GSH活性,降低小鼠脑组织MDA含量。结论木犀草素对CUMS小鼠的抑郁样行为有改善作用,作用机制可能与其增强小鼠脑组织的抗氧化活性,改善氧化/抗氧化平衡有关。

交泰丸对慢性温和不可预知性应激抑郁模型大鼠炎性细胞因子的影响

目的探讨交泰丸对慢性温和不可预知性应激(CUMS)抑郁模型大鼠致炎、抗炎细胞因子的影响。方法大鼠采用CUMS方法制备抑郁模型,比较体质量变化,进行糖水消耗实验和开场实验;并采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠血清及海马组织中炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-4、IL-10的水平,尼氏染色法观察大鼠海马神经元形态。结果与对照组比较,模型组大鼠糖水消耗量、穿越横格数和直立次数均明显减少;血清及海马内IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4明显升高,IL-10明显降低;海马神经元分层不清,排列紊乱,尼氏体浅染或消失。与模型组比较,交泰丸给药组大鼠糖水消耗量、穿越横格数和直立次数均明显增加;血清及海马内IL-1β、IL-6、TNF-α明显降低,IL-4、IL-10明显升高;海马神经元分层较明显,尼氏体浅染。结论交泰丸可明显改善大鼠抑郁样行为及海马神经元损伤,其机制可能与下调血清及海马致炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和上调抗炎细胞因子IL-4、IL-10表达有关。

柴胡白芍药对对慢性温和不可预知性应激抑郁模型大鼠行为学的影响

目的观察柴胡白芍药对对慢性温和不可预知性应激(CUMS)抑郁模型大鼠行为学的影响,验证柴胡白芍药对的抗抑郁作用。方法基于CUMS抑郁大鼠模型观察给予柴胡白芍药对后大鼠的行为学改变,包括大鼠的体质量、糖水消耗情况以及旷场实验活动行为情况。结果给大鼠柴胡白芍药对14 d后,柴胡白芍药对低、中、高各剂量组大鼠的体质量、糖水消耗量以及旷场实验中穿越横格数及直立次数均显著增加。说明柴胡白芍药对可以改善大鼠的抑郁行为。单用柴胡和单用白芍也可以不同程度改善部分指标。结论柴胡白芍药对对大鼠有明显抗抑郁作用。

慢性应激抑郁模型大鼠海马神经干细胞的增殖、存活和分化

目的探讨慢性应激抑郁状态对大鼠海马神经干细胞的影响。方法应用慢性不可预知温和应激和孤养法建立抑郁模型，分为对照组、CUMS14d组、CUMS28d组，采用免疫组化、免疫荧光，测定大鼠海马神经干细胞的增殖、存活和分化的改变。结果海马神经干细胞增殖：与对照组（2919．50±188．80）比较，14dCUMS组（2254．17±164．41）和28dCUMS组（1900．33±104．10）海马齿状回BrdU阳性细胞数均减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。海马神经干细胞存活：与对照组（2404．50±148．77）相比，CUMS28d组（1845．33±126．88）BrdU阳性细胞数明显减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。海马神经干细胞分化：与对照组[NeuN／BrdU（71．63±10．21），GFAP/BrdU（14．34±2．03）]比较，CUMS28d组[NeuN／BrdU（69．11±11．30），GFAP／BrdU（17．27±2．93）]细胞分化无明显变化（P〉0．05）。结论慢性应激抑郁模型大鼠海马齿状回神经干细胞的增殖和存活受到抑制，但干细胞的分化无明显改变。

抑郁模型大鼠不同部位miR-16表达及其与5-羟色胺转运体的关联性研究

目的研究miR-16在慢性不可预知温和应激抑郁症模型大鼠神经系统不同部位的表达及其与5-羟色胺(5-HT)转运体的关联性。方法对照组和慢性不可预知温和应激抑郁模型组大鼠各10只,模型组大鼠接受21天的不可预知温和应激刺激,对照组大鼠正常饲养。两组大鼠麻醉后收集脑脊液,测定miR-16。然后断头处死,分离前额叶皮质、中缝核、海马,测定miR-16和5-HT转运体蛋白。结果模型组大鼠脑脊液和中缝核的miR-16相对表达量低于对照组,中缝核miR-16与5-HT胺转运体呈负相关;而前额叶皮质和海马中的miR-16、5-HT转运体分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论中缝核miR-16可能通过调节5-HT转运体的表达,参与抑郁症的病理过程,脑脊液miR-16亦可能与抑郁症相关。

柴胡皂苷A抗抑郁的靶点识别及作用研究

中药柴胡具有改善抑郁患者临床治疗效果的作用,柴胡皂苷A(saikosaponin A,SSA)是柴胡主要药效成分,本研究以SSA为研究对象,利用慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型小鼠悬尾(tail suspension test,TST)和强迫游泳实验(forced swimming test,FST)明确SSA的抗抑郁作用。利用计算机分子对接技术分析并验证SSA的作用靶点,并利用细胞热转移测定实验(cellular thermal shift assay,CETSA)和药物亲和力靶稳定性实验(drug affinity responsive target stability,DARTS)验证SSA的靶标;采用Western blotting等技术研究SSA的抗抑郁作用机制。CUMS模型TST和FST结果表明,与模型组相比,SSA能够显著缩短小鼠的不动时间,表明SSA具有显著的抗抑郁作用。计算机分子对接证明了SSA与催产素受体(oxytocin receptor,OXTR)结合效果较好,表明SSA抗抑郁的作用靶点可能是OXTR。CETSA结果表明在一系列温度梯度处理下,SSA能够明显延缓OXTR的热变性;DARTS实验结果表明,在一系列酶浓度梯度处理下,SSA能够显著降低OXTR对蛋白质水解的敏感性,表明SSA抗抑郁的作用靶点是OXTR。此外,SSA对OXTR下游的ERK通路没有激活作用。本研究表明SSA发挥抗抑郁作用的靶点可能为OXTR,为抑郁症等精神疾病的临床研究治疗和新药开发提供必要的理论与参考依据。

重复性经颅磁刺激与舍曲林改善CUMS大鼠焦虑抑郁样行为的比较及其机制研究

目的:比较重复性经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS)和舍曲林处理对慢性不可预见温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠焦虑抑郁样行为的改善作用及其可能的作用机制。方法:32只SD大鼠随机分为对照组、CUMS组、CUMS+rTMS组以及CUMS+舍曲林组,每组8只。采用糖水偏好实验、强迫游泳实验及旷场实验观察各组大鼠行为,并以蛋白质印迹法(Western blot)检测各组大鼠海马内源性大麻素I型受体(cannabinoid type 1 receptor,CB1R)的表达。结果:CUMS组糖水偏好值、水平活动度、中央活动次数以及CB1R的表达水平均显著低于对照组、CUMS+rTMS组和CUMS+舍曲林组,而CUMS+rTMS组和CUMS+舍曲林组两者之间没有统计学差异;CUMS组的强迫游泳不动时间大于其它三组,而CUMS+rTMS组和CUMS+舍曲林组两者之间没有统计学差异。结论:rTMS与舍曲林均能改善CUMS大鼠的焦虑抑郁样行为,二者的改善作用没有统计学差异,其作用可能是通过上调海马CB1R的表达实现的。

丹参多酚酸对慢性应激大鼠抑郁相关行为改善的研究

目的 观察丹参多酚酸对慢性温和应激抑郁模型大鼠抑郁行为的影响.方法 将33只健康雄性,体质量150～200 g的清洁级Sprague Dawley （SD）大鼠按随机数字表法分为5组,分别为非应激＋生理盐水组（对照组,6只）,应激＋生理盐水组（生理盐水组,6只）,应激＋氟西汀组（氟西汀组,7只）,应激＋丹参多酚酸组（丹酚酸组,7只）,应激＋氟西汀＋丹酚酸组（联合组,7只）.除对照组外,其他4组连续21d进行慢性温和应激造模.造模成功后,每天下午各组分别腹腔注射相对应的0.9％氯化钠10 ml/kg,氟西汀20 mg/kg,丹参多酚酸40 mg/kg,丹酚酸40 mg/kg＋氟西汀20 mg/kg,体积体质量比10 ml/kg,每周进行蔗糖偏好试验,称重,给药21d后进行旷场试验、强迫游泳测试以评价药物对大鼠抑郁样行为的作用.对基线水平体质量（g）、应激21d后与给药21d后体质量、蔗糖偏好率（％）、强迫游泳后4 min静止不动时间（s）、旷场探究活动（爬格个数、站立次数、修饰次数及粪便粒数）进行单因素方差分析和LSD法两两比较.结果 （1）应激21d后,5组大鼠体质量、蔗糖偏好率、强迫游泳静止不动时间、旷场试验中爬格个数和站立次数的差异有统计学意义（F分别为3.747,14.968,8.439,38.925,7.893,均P＜0.05）,应激的4组大鼠体质量、蔗糖偏好率、爬格个数、站立次数均低于对照组,静止不动时间高于对照组,差异有统计学意义（均P＜0.05）.两两比较结果显示,应激的4组大鼠均值低于对照组（均P＜0.01）,但4组间差异无统计学意义.（2）给药21d后,5组大鼠的体质量、蔗糖偏好率、强迫游泳静止不动时间、旷场试验中站立次数和爬格数差异有统计学意义（F分别为8.179,6.609,27.608,34.149,4.341,均P＜0.01）,氟西汀组、丹酚酸组、联合组及对照组体质量、蔗糖偏好率均高于生理盐水组（均P＜0.05）,静止不动时间低于生理盐水组（P均＜0.05）,但4组间两两比较体质量、蔗糖偏好率、不动时间的差异无统计学意义.旷场试验中氟西汀组、丹酚酸组、联合组的站立次数均值高于对照组和生理盐水组（均P＜0.01）,而3组间站立次数差异无统计学意义.结论 丹参多酚酸能改善大鼠抑郁相关行为,疗效与氟西汀相当.

定志小丸和开心丸对CUMS模型大鼠的抗抑郁作用及机制研究

目的比较《备急千金药方》定志小丸和《医门方》开心丸对慢性不可预知性温和应激抑郁模型(chronic unpredictable mild stress,CUMS)大鼠的影响及可能的作用机制。方法建立CUMS大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、定志小丸组、开心丸组,连续灌胃2周;通过体重、糖水偏嗜度、旷场实验评价两组药物抗抑郁作用,并测定各组大鼠海马和皮层中谷氨酸(glutamic acid,GLU)、γ-氨基丁酸(gama-aminobutyric acid,GABA)及血清下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴递质、IL-1等细胞因子的含量变化,分析定志小丸和开心丸的化学成分差异。结果定志小丸可明显增加CUMS大鼠的体重、糖水偏嗜度和旷场得分,降低大鼠海马和皮层中GLU含量,升高GABA含量,降低HPA轴递质,并调节血清细胞因子的水平。开心丸可升高大鼠海马和皮层中的GABA含量,降低血清细胞因子水平。结论定志小丸具有明显的抗抑郁作用,开心丸在行为学实验中抗抑郁作用不明显。定志小丸的抗抑郁作用可能与调节中枢神经元氨基酸的分泌、逆转HPA轴功能的亢进、降低IL-1等细胞因子的免疫调节有关,组方的抗抑郁作用可能与人参皂苷等主要化学成分的含量密切相关。

负性注意偏向的神经递质基础:来自大鼠抑郁症模型的证据

目的探讨神经化学物质对大鼠负性注意偏向的影响。方法应用不可预知慢性温和应激(CUMS)建立大鼠抑郁症模型(实验组)。对实验组和对照组大鼠进行注意偏向测试;采集2组大鼠海马附近神经组织,利用高效液相色谱检测神经递质5-羟色胺(5-HT)、5-羟(基)吲哚乙酸(5-HIAAA)、去甲肾上腺素(NE)、3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)、内啡肽(EP)、高香草酸(HVA)水平;分析神经递质水平与注意偏向的相关性。结果CUMS抑郁症大鼠模型造模成功;实验组大鼠出现了抑郁症状;实验组大鼠出现了明显的负性偏向;实验组大鼠5-HIAA、DOPAC水平明显高于对照组,5-HT、EP和HVA水平则明显低于对照组,而NE水平无统计学差异;实验组大鼠5-HIAA和HVA与注意偏向的变化有显著关联,5-HT和DOPAC水平的变化对注意偏向有影响。结论CUMS抑郁症模型适用于大鼠。抑郁症大鼠神经递质水平明显不同于正常大鼠,神经递质对抑郁症大鼠的注意偏向有直接影响。

油莎草须根油树脂成分及抗抑郁作用分析

揭示油莎草须根油树脂抗抑郁作用及成分。采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱联用技术分析油莎草须根油树脂化学成分;建立慢性不可预见温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁小鼠模型,从动物行为学、神经递质含量变化、海马组织病理学考察油莎草须根油树脂抗抑郁作用。结果表明:油莎草须根油树脂含有酮类(68.891%)、酯类(8.787%)、醇类(4.258%)、烯类(0.374%)及其他物质(12.879%),主要成分为α-香附酮(59.536%)、吉马酮(5.875%)。CUMS抑郁模型小鼠给药后,油莎草须根油树脂显著缩短了小鼠强迫游泳静止时间,悬尾静止时间;显著提高了中央总路程、平均速度、中央持续时间,油莎草须根油树脂高剂量组明显提升了小鼠血清中5-羟色胺(5-HT)含量、去甲肾上腺素(NE)含量,油莎草须根油树脂高剂量组小鼠海马细胞排列整齐,神经元细胞膜基本完整。油莎草须根油树脂可能通过参与调节CUMS抑郁模型小鼠血清中5-HT和NE的表达,修复小鼠海马组织损伤来改善抑郁样行为。

温肾助阳法对慢性应激性抑郁症大鼠学习记忆功能及海马神经增殖分化功能的影响

目的通过观察温阳解郁(Wenyang Jieyu,WYJY)颗粒对慢性不可预见性温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠学习记忆功能和海马神经增殖分化功能的影响,探究温阳助肾法治疗抑郁症的作用机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、温阳解郁颗粒低(1.89g/kg)、中(3.78g/kg)、高(7.56g/kg)剂量组和氟西汀(3.33mg/kg)组,除正常组外,其余各组构建CUMS大鼠模型。采用Morris水迷宫实验评价各组大鼠给药后的学习记忆能力,苏木精--伊红(hematoxylin-eosin HE)染色法观察海马CA1区和齿状回(DG)区神经元的形态变化,5-溴脱氧尿嘧啶核苷/神经核抗原(BrdU/NeuN)免疫荧光双重染色法检测海马神经元的增殖、分化能力。结果Morris水迷宫实验结果显示,与正常组相比,CUMS模型组大鼠的逃避潜伏期显著延长(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01),目标象限的游程占比和游泳时间占比显著降低(P<0.01);温阳解郁颗粒各剂量组所需的逃避潜伏期与正常组无显著差异(P>0.05);温阳解郁颗粒高剂量组穿越平台次数较模型组显著增加(P<0.05),目标象限的游程占比和游泳时间占比较模型组显著提高(P<0.01,P<0.05);HE染色结果显示,温阳解郁颗粒可显著改善CUMS抑郁大鼠海马组织的病理损伤;免疫荧光结果显示,中剂量的温阳解郁颗粒可以增加CUMS抑郁大鼠新生和成熟的海马神经元数量(P<0.01),促进受损的海马神经元再生与分化。结论具备温肾助阳功效的方药可显著改善抑郁症大鼠的学习记忆功能,增强成年大鼠海马神经的增殖与分化能力,这可能是温肾助阳法抗抑郁的重要作用机制。

基于^(1)H-NMR代谢组学探讨柴胡-白芍药对“疏肝解郁”的代谢调控途径

目的:利用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术,分析慢性不可预知温和应激(CUMS)抑郁模型大鼠肝脏内源性代谢物的变化,观察柴胡-白芍药对对此的调节作用,分析柴胡-白芍药对疏肝解郁相关的代谢通路。方法:将SD大鼠随机分为对照组、CUMS模型组、阳性药文拉法辛组和柴胡-白芍药对高(CBH)、低(CBL)剂量组。通过抑郁症的传统药效学指标(大鼠体质量、旷场测试、糖水偏爱实验及强迫游泳实验)评价柴胡-白芍药对的药效。采用1H-NMR代谢组学技术结合多元统计分析方法,分析CBH、CBL组大鼠肝脏代谢物的变化,鉴定可靠的生物标志物并进行代谢通路分析。结果:与对照组比较,模型组大鼠药效学指标均有显著变化,即体质量,旷场穿越格数、直立次数,糖水偏爱率降低(P<0.001)及强迫游泳不动时间增加(P<0.001);柴胡-白芍药对能显著改善模型组大鼠的抑郁样行为。1H-NMR代谢组学分析显示,CUMS会使大鼠体内24个代谢物和10条代谢通路紊乱,柴胡-白芍药对能显著回调其中的21个差异代谢物,对其中7条代谢通路产生影响。结论:柴胡-白芍药对能够改善CUMS抑郁模型大鼠的抑郁样症状,可能是通过调节大鼠体内氨基酸代谢和能量代谢等通路实现的。

苍艾挥发油对大鼠抑郁样行为的影响及机制研究

目的研究苍艾挥发油(Volatile oil of Cang Ai,VOCA)对不可预知慢性温和应激所致的大鼠抑郁样行为的影响及其可能的作用机制.方法将40只SD大鼠,随机分为4组,正常对照组、模型对照组、阳性药组(氯米帕明,20 mg/kg)和苍艾挥发油组(14.6μL/kg)各10只;后3组大鼠均采用6种不同刺激方式复制慢性不可预知温和应激模型(CUMS).在CUMS造模第15~42天进行药物干预,除阳性药灌胃给药外,其他各组均雾化吸入相应剂量的药物或溶媒.于造模后第21、28、35、42天进行体质量、食量和毛态检测,造模结束后的第1天进行旷场实验和蔗糖偏好实验,以评价苍艾挥发油对应激所导致的抑郁样行为的作用.用免疫荧光染色检测大鼠海马齿状回BDNF阳性细胞数、蛋白免疫印迹法检测大鼠海马中突触囊泡蛋白(Synaptophysin)和突触后致密物质-95(PSD-95)的蛋白表达水平.结果与模型组比较,VOCA可明显增加模型大鼠的水平运动总路程、穿行格子数和移动速度,同时缩短静止时间(P<0.01),提高蔗糖偏好度(P<0.05).VOCA在给药第7、14、21和28天可显著增加造模动物体质量增幅和进食量(P<0.05~0.01),毛态评分则明显低于模型组(P<0.01).同时,VOCA能够明显增加海马齿状回中BDNF阳性细胞数和海马组织中Synaptophysin表达量(P<0.01).结论苍艾挥发油对抗大鼠慢性不可预见应激抑郁的机制可能与增加BDNF含量进而增加突触囊泡膜蛋白表达从而改善突触传递效能有关.

归脾汤对抑郁模型大鼠行为学及海马CA3区BDNF水平的影响

目的:观察归脾汤的抗抑郁作用,并探讨其抗抑郁的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠60只,进行糖水适应,建立糖水偏好基线,随机分为对照组和模型组,对照组常规饲养,模型组采用慢性不可预见性温和应激方法结合孤养3周建立抑郁模型。模型建立后,将模型组大鼠随机分为模型组、氟西汀组、归脾汤组,分别给予0.9%氯化钠溶液、氟西汀、归脾汤灌胃。给药4周后,对各组大鼠进行糖水偏好实验、强迫游泳实验、旷场实验、新奇摄食抑制实验等行为学检测,并观察各组大鼠海马CA3区脑源性神经营养因子(BDNF)水平的表达。结果:归脾汤组糖水偏好较模型组明显增高(ANOVA,F=12.55,P<0.01)。新奇摄食抑制实验中,归脾汤组的摄食时间与对照组相近,较模型组明显缩短(ANOVA,F=3.98,P=0.02);旷场实验中,归脾汤组大鼠中央区穿越次数较模型组明显增多(ANOVA,F=4.53,P=0.01)。归脾汤组的BDNF蛋白和细胞表达较模型组显著增多。结论:归脾汤可能通过增加抑郁大鼠海马CA3区BDNF水平发挥抗抑郁作用。

Notch1信号系统与抑郁模型大鼠海马神经重塑障碍

目的 探讨Notch1信号系统在抑郁海马神经再生障碍中的作用.方法 选择行为学评分相近的68只Sprague-Dawley大鼠,分为对照组、对照＋氟西汀组、慢性不可预知温和应激（CUMS）组,CUMS＋氟西汀组,每组17只.应用CUMS建立抑郁模型后进行行为学评估;采用免疫组织化学方法检测大鼠海马神经干细胞的增殖和存活;采用实时定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹方法测定Notchl信号通路各个因子（NICD、Hes1、Hes5、Jag1）的基因及蛋白表达水平的改变.结果 （1）干预前,各组体质量、糖水偏好、旷场试验、强迫游泳评分的差异均无统计学意义（P〉0.05）;干预后,与对照组比较,CUMS组糖水偏好、水平得分和垂直得分降低,漂浮不动时间增加,差异均有统计学意义（P〈0.001）;与CUMS组比较,CUMS＋氟西汀组糖水偏好、水平得分和垂直得分增加,漂浮不动时间降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）;（2）神经干细胞的增殖和存活：与CUMS组（1900.33±104.10）比较,CUMS＋氟西汀组（3047.61±158.29）神经干细胞的增殖数显著上升,差异有统计学意义（P〈0.01）;与CUMS组（1845.33±126.88）比较,CUMS＋氟西汀组（2704.21±154.31）神经干细胞的存活数显著上升,差异有统计学意义（P〈0.01）;（3）海马Notch1信号通路基因和蛋白的表达：CUMS＋氟西汀组小鼠抗大鼠Notch1（NICD）mRNA、Hes1 mRNA、Hes5 mRNA、Jag1 mRNA基因表达与CUMS组比较显著上升,差异均有统计学意义（P〈0.01）;CUMS＋氟西汀组NICD、Hes5、Jag1蛋白水平与CUMS组比较显著上升,差异均有统计学意义（P〈0.01）.结论 Notch1信号系统可能参与慢性应激模型大鼠海马神经再生障碍;氟西汀可能通过上调Notch1信号系统改善海马神经再生,从而缓解大鼠抑郁症状.

藏药佐太的抗抑郁抗焦虑作用研究

目的观察藏药佐太的抗抑郁和抗焦虑作用,并探讨其可能作用机制。方法 1)初步评价实验:在小鼠ig给予6.07、60.70、303.49、606.97 mg/kg佐太14 d后,通过强迫游泳实验和开场实验初步评价佐太对抑郁和焦虑的影响,同时通过检测小鼠血清中5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)水平来探讨佐太产生影响的可能作用机制。2)不可预测性慢性温和应激模型(CUMS)实验:建立CUMS模型,ig给予6.07、60.70、606.97 mg/kg佐太后,通过小鼠体质量变化、糖水偏爱实验、小鼠悬尾实验、开场实验和埋珠实验评价佐太对CUMS模型小鼠的抗抑郁和抗焦虑作用,同时检测小鼠血清中皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和下丘脑中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平,测定佐太对CUMS模型小鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响。结果 1)佐太能够显著减少小鼠强迫游泳实验中不动时间(6.07、60.70、303.49、606.97 mg/kg);增加小鼠在开场实验中中央区停留时间百分率(606.97 mg/kg)和中央区运动百分比(303.49、606.97mg/kg);增加小鼠血清中5-HT(6.07、606.97 mg/kg)和NE(6.07、303.49、606.97 mg/kg)水平。2)CUMS实验中,与对照组比较,经过42 d CUMS慢性应激小鼠表现出明显的抑郁和焦虑样行为,包括糖水偏爱率的降低、悬尾不动时间显著增加、开场实验中运动时间、中央区域停留时间及运动距离的减少和周边区域运动距离的增加、埋珠实验中埋珠个数的增加。而ig给予佐太(6.07、60.70、606.97 mg/kg)能够显著改善CUMS模型引起的上述症状,并且佐太(6.07、60.70 mg/kg)能够显著降低CORT、ACTH和CRH水平,抑制CUMS模型引起的HPA轴亢进。结论佐太具有一定的抗抑郁和抗焦虑作用,并且其作用机制可能与升高5-HT、NE水平和抑制HPA轴亢进有关。

交泰丸在正常大鼠及抑郁大鼠体内的药代动力学比较研究

研究交泰丸中表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱在正常和慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型大鼠体内的药代动力学特性。根据Katz法建立CUMS大鼠抑郁模型,对正常大鼠和模型大鼠灌胃交泰丸混悬液,在不同时间点眼眶取血,采用LC-MS/MS法测定血浆中表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的含量,运用DAS1.0软件计算药代动力学参数。结果表明,交泰丸中巴马汀、黄连碱、小檗碱、药根碱的C_(max)在抑郁大鼠体内分别为正常大鼠的1.99、2.14、2.3、1.82倍,AUC_(0-t)分别为1.23、1.25、1.29、1.46倍,AUC_(0-∞)分别为1.21、1.25、1.30、1.43倍,均具有极显著性差异。

郁心效的抗抑郁作用及其机制研究

目的:确认郁心效的抗抑郁作用,并初步探讨其抗抑郁作用的机制。方法:小鼠随机分5组:模型组、阳性药物对照组、郁心效低、中、高剂量(320,640,1 280 mg.kg-1)组,均ig 7 d,于末次给药后建立5-羟色氨酸(5-HTP)诱导小鼠甩头和育亨宾小鼠致死增强模型,观察郁心效对5-HTP(10 mg.kg-1,iv)诱导小鼠甩头行为和对小鼠皮下注射(sc)育亨宾(35 mg.kg-1)致死增强的影响;大鼠随机分6组:正常组、模型组、盐酸舍曲林(10 mg.kg-1)组、郁心效低、中、高剂量(220,440,880mg.kg-1)组,建立慢性不可预知性温和应激模型(CUMS),造模同时ig给药8周,观察郁心效对大鼠糖水偏嗜度、旷场行为和海马中5-羟色胺(5-HT),多巴胺(DA),去甲肾上腺素(NE)含量的影响。结果:郁心效可显著增加5-HTP诱导的小鼠甩头次数,对育亨宾诱导的小鼠致死量没有显著影响;可显著提高CUMS大鼠的糖水偏嗜度、旷场行为总评分和海马中5-HT,DA的含量。结论:郁心效具有明确的抗抑郁作用,其作用机制可能与5-HT系统有关。