慢性移植排斥反应诱导的小鼠肾炎发生因素的初步探讨

目的探究慢性移植排斥反应诱导小鼠肾炎的发生机制,为下一步药物治疗提供实验依据。方法建立DBA/2→B6D2F1(DBA/2J×C57BL/6)移植小鼠模型,通过尿蛋白检测以及组织病理学分析确定小鼠肾炎的发生;利用直接免疫荧光标记技术以及实时定量PCR分析慢性移植排斥反应诱导小鼠肾炎发生过程中T、B淋巴细胞的活化情况,以及靶组织器官中各种因子或蛋白的变化。结果与同系基因型移植对照组(B6D2F1→B6D2F1)小鼠相比,异体移植实验组(DBA/2→B6D2F1)小鼠脾细胞中CD4+CD69+、CD8+CD69+双阳性细胞百分比均明显增加,B220+I-Ab+双阳性细胞的I-Ab表达显著增强,提示T、B淋巴细胞的活化;另外,在实验组小鼠肾组织中,趋化因子如单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、B淋巴细胞趋化因子(BLC)以及淋巴细胞趋化因子(Ltn)表达上升;炎性细胞因子(如IL-6、IL-1β)表达显著增强;促纤维生长因子如转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)以及纤维增生相关蛋白如Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)的mRNA表达水平明显上升,提示组织炎症以及纤维化的发生。结论慢性移植排斥反应诱导肾炎发生可能与激活淋巴细胞以及炎症因子、趋化因子和促纤维生长因子的分泌表达有关。

RNA干扰ROR-γt表达对大鼠肾移植模型中Th17细胞功能和慢性排斥反应的作用

目的探讨RNA干扰Th17关键转录因子ROR-γt表达后,对大鼠肾移植慢性排斥模型中Th17细胞功能以及慢性排斥反应的影响。方法构建ROR-γt特异性干扰腺病毒,将其通过尾静脉注入大鼠慢性排斥反应模型,监测大鼠血肌酐变化,酶联免疫吸附试验检测Th17相关细胞因子IL-17、IL-6和TNF-γ改变。4周后检测大鼠肾组织病理改变。结果成功构建ROR-γt特异性干扰腺病毒pSES-HUS-ROR-γt。大鼠慢性排斥反应模型尾静脉注入pSES-HUS-ROR-γt,大鼠血清肌酐水平下降,IL-17、IL-6和TNF-γ水平下降,肾小球纤维化病变减轻。结论 pSES-HUS-ROR-γt特异性干扰腺病毒可以抑制Th17细胞功能,减轻肾移植慢性排斥反应。

小鼠气管异位移植后肺移植慢性排斥反应模型的建立

目的通过建立小鼠的气管异位移植模型来模拟肺移植慢性排斥反应,为国内的闭塞性细支气管炎研究提供一种新的模型选择。方法同种异体移植组(Allograft组)以BALB/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者,同系移植组(Isograft组)供受者均为BALB/c小鼠。取供体小鼠的气管、左右主支气管连续气道作为供体,异位移植到受体小鼠背部皮下。分别于移植后第5、14、28天时,各取3只,将移植气管段取出作组织学分析。结果18例模型动物全部存活,无感染。病理切片示Allograft组小鼠移植气管管腔闭塞,慢性炎细胞浸润广泛,气管上皮完全脱落,纤维组织增生明显,呈现闭塞性细支气管炎表现;Isograft组小鼠移植气管的组织形态未见明显异常。结论小鼠异位气管移植的动物模型简单、经济、稳定性强、重复性好,能准确复制肺移植后闭塞性细支气管炎的病理过程。

肝脏移植动物实验研究进展(文献综述)

肝移植的实验研究经历了从大动物到小动物、从同种移植到异种移植、从原位移植到异位移植、从整体移植到部分移植、从死体移植到活体移植及各种特殊肝脏移植模型的建立。本文对肝脏移植的动物实验研究进展作一综述 。

大鼠小肠移植慢性排斥反应模型的建立

随着移植免疫学研究的进展及新型免疫抑制剂的问世，近年来器官移植取得了很大进步，尤其在小肠移植方面也有了长足发展。但是观察发现，随着器官移植存活期的延长，出现了移植物功能逐渐减退直至丧失的现象。目前研究认为，造成这种移植物远期功能减低的主要原因就是慢性排斥反应。因此，我们成功地建立了大鼠小肠移植慢性排斥反应模型，为临床研究慢性排斥反应提供了平台。

大鼠胸主动脉腹腔移植套管法的改良

目的:构建大鼠同种异体心脏移植物血管病模型,有效诱导心脏移植后的慢性排斥反应。方法:以Wistar大鼠为供体,将摘取的胸主动脉穿过自制的静脉留置针管后,翻转血管对称吻合、单侧打结固定,利用半针管将动脉套管植入到受体SD大鼠腹腔动脉中。术后7 d、28 d和56 d取移植动脉,常规行HE染色,观察血管形态变化,计算内膜厚度;免疫组织化学染色,观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和增殖细胞核抗原(PCNA)相对表达量。结果:34只大鼠成功建模30只,成功率为88.24%;随时间增加,移植动脉不断被单核巨噬细胞侵蚀,弹性纤维断裂,内膜出现炎症细胞和平滑肌血细胞的堆积;与对照组相比,7 d、28 d和56 d各组动脉内膜厚度显著增加(均P<0.01),α-SMA表达量明显减少(均P<0.05),PCNA表达量显著增加(均P<0.05);且随着时间的增加,动脉内膜厚度不断增加,α-SMA的表达量逐渐减少,PCNA的表达量逐渐增加(均P<0.05)。结论:此种动脉套管的改良以及半针管的运用使动脉移植更加简便有效,可重复性高,内膜增厚显著,能成功诱导出移植后的慢性排斥反应。

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