超声靶向微泡破裂内皮祖细胞移植干预大鼠慢性移植物血管病的实验研究

目的探讨超声靶向微泡破裂(UTMD)内皮祖细胞(EPCs)移植干预大鼠慢性移植物血管病(CAV)的效果。方法实验于2016年1月—2017年3月在四川大学实验室进行。选取成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组:同种移植对照组(n=10),供、受体均为SD大鼠,无特殊处理;异种移植组(n=10):SD大鼠接受Lewis大鼠腹主动脉移植,尾部静脉注射生理盐水1 ml;EPCs组(n=10):实行异种移植,并于尾部静脉注射EPCs悬液1 ml;UTMD+EPCs组(n=10):实行异种移植,行体外UTMD处理后再经尾部注射EPCs悬液1ml。移植60 d后取出移植血管,观察其组织病理学变化,测量内膜厚度,分别应用免疫组织化学法及Western blot法测定各组移植动脉增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果同种移植对照组移植血管形态正常;异种移植组血管内膜明显较同种移植组明显增厚,呈移植物血管病表现;EPCs组与UTMD+EPCs组血管内膜厚度较异种移植组减少,而UTMD+EPCs组血管内膜厚度较EPCs组减少(P均<0.05),与异种移植组相比,EPCs组与UTMD+EPCs组PCNA、VEGF TNF-α表达水平明显下降(P均<0.05),且UTMD+EPCs组PCNA、VEGF TNF-α表达水平低于EPCs组(t=7.114、6.230、2.196,P均<0.05)结论超声靶向微泡破裂可提高EPCs治疗CAV的效果,能更好地降低异体移植动脉PCNA、VEGF、TNF-α表达,可修复受损内膜,抑制CAV发生。

NF-κB与慢性移植物血管病

核因子-κB(NF-κB)的活化在慢性移植物血管病(CAV)的发生、发展过程中至关重要。以NF-κB作为预防、治疗CAV的靶点所进行的研究已取得了一定进展。

大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型的建立

慢性排斥反应已成为阻碍移植物长期存活的重要原因，慢性排斥反应最主要的病理特征是慢性移植物血管病。免疫性和非免疫性因素共同作用导致发生慢性移植物血管病，至今无有效的药物应用于临床，加强这方面的基础研究已经显得日益重要。通过建立简单、实用的动物模型能更好开展慢性移植物血管病的基础研究。笔者建立大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型，报告如下。

花椒毒酚对大鼠心脏移植物血管病的作用及机制研究

目的:探讨花椒毒酚对大鼠心脏移植物血管病(CAV)的作用及相关机制。方法:以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,采用胸主动脉腹腔移植法将大鼠随机分为模型组和药物组(再分为空白对照、7天组、28天组和56天组)。药物组花椒毒酚10 mg/(kg·d)灌胃给药,模型组同剂量生理盐水灌胃。各时间点取出移植动脉,常规行HE染色和免疫组织化学染色,并计算各组细胞粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),转化生长因子-β1(TGF-β1)和核因子-κB(NF-κB)/P65表达的平均光密度值。结果:模型组在7天时动脉管壁出现大量炎症细胞浸润,56天时内膜增厚明显,而药物组比同期各模型组炎症细胞浸润明显减少、内膜增厚程度明显减小(均P<0.05);与同期各模型组相比,药物组ICAM-1、TNF-α、TGF-β1、NF-κB/P65的平均光密度值均有不同程度降低,α-SMA均有不同程度升高(均P<0.05)。结论:花椒毒酚能降低大鼠CAV中ICAM-1、TNF-α、TGF-β1的表达,保留部分平滑肌细胞的收缩表型,改善血管形态,缓解病情进展,其作用可能与部分抑制NF-κB/P65活化相关。

高迁移率族蛋白B1在心脏移植物血管病中的作用研究进展

心脏移植是终末期心衰的重要治疗手段,心脏移植物血管病(CAV)是制约移植后心脏长期存活的主要因素。目前CAV的发病机制仍未阐明,免疫和非免疫因素共同参与了CAV的发生发展过程。高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为自我衍生的先天免疫激活物,在调节免疫和炎症反应中发挥重要作用,既往研究发现其与移植物排斥反应密切相关。本文将概述HMGB1在CAV发展中的作用,包括危险因素(高血糖、高血压、高血脂)、移植因素(缺氧、缺血再灌注损伤)、免疫因素,并总结其对血管平滑肌细胞的影响,为CAV的防治提供参考。

心脏移植后的移植物血管病

心脏同种移植是末期心力衰竭病人可接受的临床治疗,迄今世界上已进行了约三万例,长期存活者死亡的首要原因是冠状动脉进行性狭窄,一般被认为是“慢性排斥”造成,然而,其确切机制仍有争论,最近有人提出这种现象,称为“移植物血管病”。在心脏移植的早期几乎所有病人均发生冠脉狭窄,此后,由于精细的手术技术,和更有效的免疫抑制而逐渐得到改善,最近据国际心肺移植学会报道,病人一年生存率约为76％,以后每年以4％下降直至5年后生存率为60％,10年后为40％。

巨噬细胞在移植后慢性排斥反应中的作用研究进展

器官移植是治疗终末期器官病变的最佳方法,然而排斥反应仍然是影响移植物存活的重要因素。目前,针对急性排斥反应的治疗方法效果良好,但对慢性排斥反应仍缺乏有效的治疗手段,长期慢性排斥反应可能导致移植物失功,严重影响移植物的长期存活率。近年来,巨噬细胞在慢性排斥反应中的作用逐渐受到关注。本文对慢性排斥反应的主要病理变化、参与慢性排斥反应巨噬细胞的多样性及功能差异、巨噬细胞参与慢性排斥反应的作用及机制进行综述,并总结巨噬细胞相关慢性排斥反应治疗的研究进展,以期为巨噬细胞在器官移植术后慢性排斥反应中的作用研究提供参考。

沙利度胺对大鼠慢性移植物血管病的保护作用

目的探讨沙利度胺对大鼠慢性移植物血管病的保护作用。方法实验分为4组:同种移植对照组,供、受者均为Lewis大鼠,无特殊处理;异种移植对照组,Lewis大鼠接受Brown-Norway(BN)大鼠腹主动脉移植(BN-Lewis);沙利度胺小剂量组(50mg·kg-1·d-1,BN-Lewis);沙利度胺大剂量组(100mg·kg-1·d-1,BN-Lewis)。于移植后60d取移植动脉,分别进行组织病理学观察、测量内膜厚度,免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测TNF-α及上皮细胞增殖细胞核抗原(PCNA)在移植动脉中的表达。结果同种移植对照组移植动脉形态正常;异种移植对照组移植动脉呈移植物血管病表现,血管内膜增厚;沙利度胺小剂量及大剂量组移植动脉呈内膜炎改变,内膜厚度比异种移植对照组减小(P<0.05)。与异种移植对照组相比,沙利度胺小剂量组和大剂量组移植动脉TNF-α及PCNA蛋白表达量降低(均P<0.05)。结论沙利度胺能降低移植动脉TNF-α及PCNA蛋白的表达,缓解移植动脉的纤维化进程以及内膜增生,对慢性排斥反应所致的移植物血管病具有抑制作用。

超声介导微泡在内皮祖细胞移植修复大鼠慢性移植物血管病中的应用

目的探讨超声介导的微泡破坏（US＋MB）促进内皮祖细胞（EPCs）移植治疗大鼠慢性移植物血管病（CAV）的可行性。方法体外分离、培养及鉴定大鼠EPCs并建立大鼠腹主动脉移植模型。实验分为4组，空白对照组无特殊处理；异系移植对照组尾静脉注射1ml生理盐水IEPCs治疗组尾静脉注射1mlEPCs悬液；Us＋MB＋EPCs组先在体外予超声波破坏微泡作用后再经尾静脉输注1mlEPCs悬液。8周后取出移植血管进行组织病理学观察，测量内膜厚度，免疫组化检测SDF-1α表达，RT—PCR定量分析SDF-1α及TNF-α在移植动脉的表达。结果异系移植对照组、EPCs治疗组、US＋MB＋EPCs组内膜厚度、炎症反应程度及因子表达水平与空白对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05），其中US＋MB＋EPCs组移植动脉内膜增生程度最小（P〈0．05），炎症反应最轻，SDF-1α表达水平最高，TNF-α的表达水平最低（P〈0．05）。结论超声介导微泡破坏可有效促进EPCs修复CAV中受损的内膜，延缓病变的进展。

沙利度胺延缓大鼠的慢性移植物血管病

目的研究沙利度胺对慢性移植物血管病的缓解作用，并探讨其机制。方法建立大鼠腹主动脉慢性移植物血管病模型。同系对照组的供、受者均为Brown-Norway大鼠（BN大鼠），术后每天以生理盐水灌胃；同种移植组均以BN大鼠为供者，Lewis大鼠为受者，术后每天以生理盐水灌胃，溶剂对照组术后每天以二甲基亚砜灌胃，高剂量组术后每天以沙利度胺200mg／kg灌胃，低剂量组术后每天以沙利度胺100mg／kg灌胃。术后8周，光镜下观察移植血管组织形态学变化；采用免疫组织化学法测定移植血管中白细胞介素9（IL9）和转化生长因子β（TGF-β）表达情况；采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清血小板衍生生长因子（PDGF）浓度。结果同种对照组、溶剂对照组、高剂量组和低剂量组均呈现出典型的移植相关血管硬化，内膜明显增生，并呈同心圆增厚，同系对照组、同种对照组、溶剂对照组、高剂量组和低剂量组移植血管内膜厚度分别为（4．12±0．21）、（67．23±6．12）、（53．11±5．71）、（21．28±4．52）和（23．45±3．64）μm，高剂量组和低剂量组移植血管内膜厚度明显小于同种对照组和溶剂对照组（P〈O．05）。同系对照组、同种对照组、溶剂对照组、高剂量组和低剂量组IL9阳性细胞率分别为（12．54±4．56）％、（50．55±6．39）％、（45．26±2．32）％、（27．37±5．29）％和（29．11±3．20）％；TGF-β阳性细胞率分别为（18．12±6．21）％、（49．23±3．23）%、（40．61±4．13）%、（31．71±8．60）％和（29．35±6．85）％，高剂量组和低剂量组IL-9阳性细胞率和TGF-β阳性细胞率均明显低于同种对照组和溶剂对照组（P〈0．05）。同系对照组、同种对照组、溶剂对照组、高剂量组和低剂量组血清中PEGF含量分别为0、（998±18）、（745±29）、（287±97）和（299±36）pg／ml，高剂量组和低剂量组血清PDGF含量均明显低于同种对照组和溶剂对照组（P〈0．05）。结论低剂量沙利度胺即可缓解慢性移植物血管病，这种作用可能与组织中TGF-β和IL-9表达下调，以及血清中PDOF浓度下降相关。

移植肾T细胞介导的排斥反应的病理学

T细胞介导的排斥反应(TCMR)是器官移植排斥反应的主要效应机制之一,也是最常见的急性排斥反应类型。2019年Banff移植病理学诊断标准(Banff标准)根据免疫损伤病变的特征将TCMR分为急性TCMR(aTCMR)和慢性活动性TCMR(caTCMR)。本文对TCMR的基本定义、移植肾Banff标准中TCMR病理学的研究历程和TCMR的基本病变及其诊断分级进行综述,旨在为早期识别、诊断和治疗TCMR提供依据,以预防其进展为caTCMR,进而保障移植肾和受者的长期存活。

Banff移植肝病理学诊断标准及其进展

移植肝活组织检查(活检)病理学不仅在供肝病理学评估,而且在移植术后并发症的诊断和鉴别诊断中是不可缺少的。移植肝并发症的病理学诊断相关研究随着临床肝移植的扩展而日益深入,国际上逐渐制订了Banff移植肝活检病理学诊断标准,我国移植肝活检的病理学研究也逐步开展,并逐渐形成了适合我国肝移植临床实际的移植肝活检病理学诊断标准。本文对Banff移植肝活检病理学研究的历史和移植肝并发症的主要病变进行综述,旨在为我国更好地开展移植肝活检病理学诊断,协助临床进行肝移植术后并发症的明确诊断和针对性治疗,进一步提高移植肝和受者的良好存活提供参考依据。

移植胰腺病理学诊断标准及其进展

胰腺移植和胰肾联合移植是治疗1型糖尿病和部分2型糖尿病及其并发症导致的肾衰竭的最佳治疗方法。胰腺移植的类型主要包括同期胰肾联合移植(SPK)、肾移植后胰腺移植(PAK)和单纯胰腺移植(PTA)。在所有的胰腺移植类型中,对移植胰腺的活组织检查(活检)仍然是明确诊断其排斥反应并与其他并发症进行鉴别的最佳方法。本文对移植胰腺活检的方法及其相关的研究进展、移植胰腺活检排斥反应诊断标准及其进展、移植胰腺主要的并发症及其病理学表现进行阐述,旨在为指导临床对上述并发症予以准确诊断,良好地保障移植胰腺和受者的长期存活提供参考。

移植肾抗体介导的排斥反应的病理学

抗体介导的排斥反应(AMR)亦称体液性排斥反应,是由抗体、补体等多种体液免疫效应因子参与所致的排斥反应免疫损伤。AMR在超急性排斥反应、急性排斥反应以及慢性排斥反应中均发挥了重要的致病作用。本文对AMR的基本定义、Banff移植病理学诊断标准(Banff标准)中AMR病理学的研究历程及其主要成果以及移植肾AMR的主要病变特征进行综述,旨在为准确诊断、及时治疗AMR提供依据,以保障移植肾和受者的长期存活。

大鼠胸主动脉腹腔移植套管法的改良

目的:构建大鼠同种异体心脏移植物血管病模型,有效诱导心脏移植后的慢性排斥反应。方法:以Wistar大鼠为供体,将摘取的胸主动脉穿过自制的静脉留置针管后,翻转血管对称吻合、单侧打结固定,利用半针管将动脉套管植入到受体SD大鼠腹腔动脉中。术后7 d、28 d和56 d取移植动脉,常规行HE染色,观察血管形态变化,计算内膜厚度;免疫组织化学染色,观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和增殖细胞核抗原(PCNA)相对表达量。结果:34只大鼠成功建模30只,成功率为88.24%;随时间增加,移植动脉不断被单核巨噬细胞侵蚀,弹性纤维断裂,内膜出现炎症细胞和平滑肌血细胞的堆积;与对照组相比,7 d、28 d和56 d各组动脉内膜厚度显著增加(均P<0.01),α-SMA表达量明显减少(均P<0.05),PCNA表达量显著增加(均P<0.05);且随着时间的增加,动脉内膜厚度不断增加,α-SMA的表达量逐渐减少,PCNA的表达量逐渐增加(均P<0.05)。结论:此种动脉套管的改良以及半针管的运用使动脉移植更加简便有效,可重复性高,内膜增厚显著,能成功诱导出移植后的慢性排斥反应。