基于Wnt/β-catenin信号通路探索芪蛭通络方对糖尿病肾病大鼠肾间质纤维化的作用机制

目的:基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路探讨芪蛭通络方对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾间质纤维化的作用机制。方法:SD大鼠予高糖高脂饲料及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作DKD模型,取50只造模成功的大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组(每日14 mg/kg)和芪蛭通络方低、中、高剂量组(每日1.215 g/kg、2.430 g/kg、4.860 g/kg),每组10只。同时取10只SD大鼠予普通饲料和腹腔注射柠檬酸缓冲液,作为正常组。造模成功后,各给药组每日予相应药物灌胃,正常组和模型组每日灌胃等体积蒸馏水,各组均连续灌胃8周。收集处死前1 d各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白定量(24 h-UTP);处死前尾静脉取血,测血糖(GLU);末次给药后5 h,各组大鼠予异氟烷吸入麻醉,腹主动脉取血,分离血清测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);取双肾,采用苏木素-伊红(HE)染色法、马松(Masson)染色法观察各组大鼠肾脏组织病理变化;分别采用免疫组化(IHC)法、蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测各组大鼠肾组织Wnt1、β-catenin、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达。结果:模型组大鼠GLU、Scr、BUN、24 h-UTP水平均明显高于正常组(P<0.01),各给药组大鼠上述指标均明显低于模型组(P<0.01),芪蛭通络方高剂量组上述指标均明显低于厄贝沙坦组(P<0.01),芪蛭通络方对上述指标的改善作用表现出一定的剂量依赖性。病理图片显示,模型组大鼠肾小球结构遭到破坏,炎性改变明显,肾小管扩张,肾间质纤维化明显,肾组织蓝色胶原分泌增多且伴病理损伤;各给药组大鼠肾组织病理改变均有不同程度的改善,以芪蛭通络方高剂量组改善最为显著。免疫组化法及蛋白免疫印迹法结果显示,模型组大鼠Wnt1、β-catenin、CTGF、GSK-3β蛋白表达均明显高于正常组(P<0.01);各给药组大鼠上述蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。免疫组化法结果显示,芪蛭通络方高剂量组上述蛋白表达均明显低于厄贝沙坦组(P<0.05,P<0.01);蛋白免疫印迹法结果显示,芪蛭通络方高剂量组Wnt1、GSK-3β蛋白表达明显低于厄贝沙坦组(P<0.05,P<0.01),β-catenin、CTGF蛋白表达与厄贝沙坦组比较差异无统计学意义(P>0.05)。芪蛭通络方对上述蛋白的表达表现出一定的剂量依赖性。结论:芪蛭通络方可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,在一定程度上延缓肾间质纤维化,从而起到保护肾功能的作用。

血红蛋白、基质金属蛋白酶-7水平与老年糖尿病肾病患者肾间质纤维化以及预后的关系分析

目的探讨血红蛋白(Hb)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)水平与老年糖尿病肾病患者肾间质纤维化(RIF)以及进展为终末期肾病(ESRD)的关系。方法选择2014年4月至2020年4月石家庄市第三医院肾内科收治的103例老年糖尿病肾病患者(肾病组),95例单纯糖尿病患者(糖尿病组),59例体检志愿者为对照组。所有患者均接受Hb、MMP-7、肾功能、RIF血清学指标检测,出院后随访至2022年4月,统计ESRD发生情况。Pearson分析Hb、MMP-7与肾功能、RIF血清学指标的相关性。Kaplan-Meier生存曲线分析不同Hb、MMP-7水平下糖尿病肾病患者肾脏累积存活率。单因素或多因素COX风险比例回归分析老年糖尿病肾病患者ESRD的危险因素。结果肾病组Hb、估算肾小球滤过率(eGFR)低于对照组(P<0.05),MMP-7、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、转化生长因子(TGF)-β1、TGF-α水平高于对照组(P<0.05)。肾病组Hb与eGFR呈正相关(P<0.05),与Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α呈负相关(P<0.05),MMP-7与eGFR呈负相关,与Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α呈正相关(P<0.05)。低Hb水平组无ESRD累积存活率低于高Hb水平组(P<0.05),高MMP-7水平组无ESRD累积存活率低于低MMP-7水平组(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示TGF-β1、TGF-α、MMP-7是糖尿病肾病患者ESRD的危险因素(P<0.05),Hb、eGFR是糖尿病肾病患者ESRD保护因素(P<0.05)。结论老年糖尿病肾病患者Hb水平降低,血清MMP-7水平增高,且与肾功能下降、RIF以及ESRD发生有关。

NLRP3炎症小体参与糖尿病肾病肾间质纤维化机制的研究进展

肾间质纤维化(RIF)是糖尿病肾病(DN)进展至终末期肾病的不可逆因素。慢性炎症是DN-RIF发病机制的关键原因,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体作为重要的炎症调节因子,可通过炎症反应、氧化应激、自噬等机制促进DN-RIF的发生。本文对NLRP3炎症小体与RIF发生发展的机制及传统中药针对NLRP3炎症小体为靶点对RIF的治疗作用作一综述,以期对未来治疗RIF提供帮助。

线粒体损伤与糖尿病肾病肾间质纤维化的研究进展

糖尿病肾病(DN)是一种与糖尿病相关的微血管并发症,在长期高血糖环境下,肾脏细胞会发生氧化应激和炎症反应。肾间质纤维化(RIF)作为一种病理过程,涉及肾小管间质结构和功能的改变,会导致肾脏功能逐渐丧失,是DN发展的最终结果,且患者预后与RIF程度密切相关。线粒体损伤可引起细胞能量代谢障碍和氧化应激,而肾间质中线粒体数量远多于其他组织,早期病变也多以线粒体损伤为主。因此,早期发现线粒体损伤并进行干预对延缓RIF的发展至关重要。

复方α-酮酸联合羟苯磺酸钙治疗糖尿病肾病患者肾间质纤维化的疗效

目的观察复方α-酮酸联合羟苯磺酸钙对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)患者肾间质纤维化指标及血清超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)的影响。方法选取94例DKD患者,用随机数字表法均分为2组,对照组予以羟苯磺酸钙,观察组在对照组治疗的基础上联合使用复方α-酮酸,检测治疗前后血糖指标[餐后2 h血糖(2-hour postprandial plasma glucose,2 hPG)及空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)]、肾间质纤维化指标[肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子β_(1)(transforming growth factorβ_(1),TGF-β_(1))、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)]、hs-CRP、SAA水平和肾功能指标[血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿白蛋白排泄率(urine albumin excretion rate,UAER)、肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)],记录不良反应的发生情况。结果经治疗,观察组2 hPG、FPG、TGF-β_(1)、VEGF及Hcy的水平均明显低于对照组(P<0.05),HGF的水平明显高于对照组(P<0.05);观察组血清hs-CRP和SAA的水平均明显低于对照组(P<0.05),Scr、BUN及UAER均明显低于对照组(P<0.05),GFR明显高于对照组(P<0.05);2组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方α-酮酸联合羟苯磺酸钙可更好地延缓DKD患者的肾纤维化,降低血清hs-CRP和SAA的水平,改善患者的肾功能,且安全性好。

miR-193-5p联合Toll样受体4评估IgA肾病患者肾间质纤维化程度的价值分析

IgA肾病是一种以IgA免疫复合物在肾小球沉积引起的慢性肾脏疾病,占所有原发性肾小球疾病的30%~40%[1]。临床上诊断主要依靠肾活检和免疫病理;但是肾活检有一定的创伤性,并发症较多,而且穿刺取样不当可能造成结果不准确[2]。因此迫切需要寻找一种潜在的无创生物标志物用于IgA肾病的早期诊断。

线粒体自噬对肾小管间质纤维化的影响

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)的发病人数呈现递增的趋势,据研究表明,CKD的全球患病人数接近十分之一,延缓CKD的进程、提高CKD患者的生存质量已经成为一个亟待解决的难题[1]。肾小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis,TIF)作为肾纤维化中的一种最常见、最难治愈的病理改变,它会使肾实质受到损害并导致肾功能逐渐丧失,已经成为CKD进展至终末期肾病的最终结局[2]。

驱动肾小管间质纤维化的新机制

肾纤维化,尤其是肾小管间质纤维化,是所有慢性肾脏疾病进展为终末期肾病的最常见途径。肾小管上皮细胞在受到慢性损伤后会发生糖脂代谢改变、未折叠蛋白反应、自噬和衰老、上皮细胞-间充质转化和细胞周期G2/M期停滞等几种适应性反应。修复机制适应不良,会诱导产生肾小管间质纤维化。本文将讨论肾小管上皮细胞的这些适应性反应驱动肾小管间质纤维化的分子机制,为探寻肾小管间质纤维化新的药物作用靶点提供参考。

Sigirr缺失调控NF-κB并参与慢性肾病小鼠发生肾间质纤维化

目的研究Sigirr基因缺失小鼠在慢性肾病(CKD)并发肾间质纤维化(RIF)中的作用和机制。方法利用PCR鉴定正常基因型(Sigirr^(+/+))小鼠和Sigirr基因缺失(Sigirr^(-/-))小鼠。含0.2%高腺嘌呤饲料喂养小鼠,连续喂养12周,以建立慢性肾脏损伤并发RIF模型。收集小鼠眼框静脉血以检测肾功能;利用HE染色分析肾脏组织病理变化,通过Masson染色观察肾脏纤维化程度,利用IHC和Western blot检测白细胞介素(IL)-1β、MyD88和NF-κB等信号分子变化,同时观察转化生长因子(TGF)-β1、E-cadherin和Vimentin的表达变化。结果肾功能检测结果显示高腺嘌呤喂养小鼠的血清肌酐和尿素氮较对照组增加;HE和Masson染色结果显示:与Sigirr^(+/+)小鼠比较,Sigirr^(-/-)小鼠的肾组织中,炎症细胞浸润和胶原纤维沉积更明显。IHC和Western blot结果显示IL-1β及其下游的MyD88表达增加,p-P65水平显著增加;Sigirr^(-/-)小鼠的肾组织中IL-1β、MyD88、p-P65等变化较Sigirr^(+/+)小鼠显著;同时TGF-β1显著增加,且Vimentin的表达增加,E-cadherin的表达明显降低,Western blot检测Vimentin、E-cadherin结果与免疫组化一致,且α-SMA也显著升高。结论高腺嘌呤饮食可以建立CKD并发RIF小鼠模型。Sigirr的缺失增加肾间质IL-1β介导NF-κB信号通路的活化,促进TGF-β1表达,有利于上皮-间质细胞转分化相关RIF过程。

慢性肾病大鼠血清Bcl-3、Gal-3、TGF-β1与肾间质纤维化的关系

目的探讨腺嘌呤诱导的慢性肾病大鼠血清Bcl-3、Gal-3、TGF-β1与肾间质纤维化的关系。方法将20只SPF级雄性大鼠随机分为对照组(n=10)和模型组(CKD组,n=10),模型组给予腺嘌呤灌胃,对照组给予等体积生理盐水灌胃,分别于第3、6周处死大鼠,留取血检测尿素氮、肌酐及Bcl-3、Gal-3、TGF-β1水平,HE染色观察肾脏病理改变,Masson染色观察肾间质纤维化情况及严重程度,免疫组化染色观察肾组织中α-SMA蛋白的表达情况。结果与对照组相比,CKD组各时间点的血尿素氮、肌酐、Bcl-3、Gal-3和TGF-β1水平均明显升高(P<0.05)。CKD组大鼠肾组织HE染色可见肾小管上皮细胞变性坏死、肾间质纤维化等病理改变;Masson染色可见蓝色胶原沉积明显增多,同时α-SMA蛋白表达也明显升高(P<0.05)。CKD组肾间质胶原纤维相对面积评分明显高于对照组(P<0.05)。相关性分析显示血Bcl-3、Gal-3、TGF-β1水平与肾间质纤维化相对面积呈正相关(r_(s)=0.776,P<0.001;r_(s)=0.58,P<0.001;r_(s)=0.52,P=0.001)。结论腺嘌呤诱导的CKD模型大鼠血清Bcl-3、Gal-3和TGF-β1水平明显升高,且与肾纤维化严重程度密切相关,有望成为评估肾纤维化的新型生物标志物。

当归芍药散含药血清及其有效成分对肾间质纤维化大鼠的作用及机制

目的 探讨当归芍药散(DSS)含药血清及其有效成分阿魏酸(FA)、芍药苷(PF)对肾间质纤维化(RIF)大鼠的作用及机制。方法 制备当归芍药散药液,以低剂量(0.05 mL DSS药液/10 g体质量)、中剂量(0.1 mL DSS药液/10 g体质量)、高剂量(0.2 mL DSS药液/10 g体质量)每日同一时间灌胃雄性Sprague Dawley大鼠,持续7 d,腹主动脉取血获得相应低、中、高剂量DSS血清(DSSS)。将大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)分成对照组、模型组(TGF-β处理)、siRNA转染组(TGF-β+siRNA处理)、FA组(TGF-β+FA处理)、PF组(TGF-β+PF处理)及DSSS低、中、高剂量组(TGF-β+DSSS-L、TGF-β+DSSS-M、TGF-β+DSSS-H分别处理)。筛选并确定DSSS、FA、PF、TGF-β对NRK-52E细胞的干预浓度,对以上各组NRK-52E细胞进行干预。采用Western blotting法检测各组NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1(CASP-1)、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素-18(IL-18)、纤连蛋白(FN)、E型钙黏蛋白(E-Cadherin)、N型钙黏蛋白(N-Cadherin)的蛋白表达变化。结果 相较于模型组,DSSS、FA、PF治疗组细胞焦亡相关蛋白NLRP3、CASP-1、GSDMD、IL-18表达均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。DSSS中、高剂量及FA、PF治疗组相较于模型组纤维化相关黏附蛋白FN、E-Cadherin、N-Cadherin表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 当归芍药散含药血清及有效成分FA、PF可抑制TGF-β诱导的NRK-52E细胞纤维化模型中NLRP3介导的焦亡蛋白激活,并能调节黏附蛋白表达和上皮-间质转化进展,缓解纤维化。

盐皮质激素受体与慢性肾脏病肾纤维化的研究进展

慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)是指持续时间>3个月的肾脏结构或功能异常,是儿童常见的泌尿系统疾病之一。全球CKD患病率为11%~13%,儿童为56.0/1000000~74.7/1000000[1]。CKD主要表现为不可逆的肾功能下降,肾间质纤维化是其重要的病理特点。

中药单体靶向TGF-β 1/Smad信号通路防治肾间质纤维化研究进展

肾间质纤维化(RIF)是慢性肾脏病(CKD)的主要病理学基础,是各种肾脏疾病进展至终末期肾病的最终共同途径,以细胞外基质(ECM)在肾间质中异常沉积为特征。RIF是多种信号通路相互作用的结果,其中TGF-β 1/Smad具有调控细胞增殖、分化、凋亡、自噬等作用,是RIF的主要信号转导通路。受损组织的修复再生有赖于瞬时信号通路的激活,但持续的信号激活会刺激纤维瘢痕增生并替代正常的肾单位,损伤肾功能 [1] 。目前西医对于RIF的治疗多选用RAAS阻断剂,但其在延缓CKD进展方面的有效率仅为20%左右 [2] ,这在临床上造成很大的局限性。

肾复康Ⅱ号联合氯沙坦钾对IgAN伴肾小管间质纤维化患者尿蛋白定量与中医证候积分的影响

目的:探讨肾复康Ⅱ号胶囊联合氯沙坦钾片对免疫球蛋白A肾病(immunoglobulin A nephropathy,IgAN)伴肾小管间质纤维化患者尿蛋白定量与中医证候积分的影响及其相关性。方法:将80例IgAN伴肾小管间质纤维化患者分为对照组和试验组各40例,对照组予氯沙坦钾片治疗,试验组在对照组基础上予肾复康Ⅱ号胶囊,观察两组患者治疗12、24周后尿蛋白定量及治疗前后中医证候积分。结果:与治疗前比较,试验组治疗12、24周后尿蛋白定量下降(P<0.05),对照组治疗24周尿蛋白定量下降(P<0.05);与对照组比较,试验组治疗12、24周尿蛋白定量降低(P<0.05);治疗24周后试验组中医证候积分较治疗前降低(P<0.05)。结论:IgAN伴肾小管间质纤维化患者尿蛋白定量与中医证候积分之间存在相关性,尿蛋白定量及预后与中医证候、总有效率具有一致性。

基于“久病在络,气血皆塞”理论论治慢性肾脏病肾间质纤维化

本文以叶天士“久病在络,气血皆塞”理论为基础,根据慢性肾脏病生理及病理特点,阐明慢性肾脏病肾间质纤维化的病理变化是从功能性到器质性的演变过程,表现出由表及里、由浅入深的传变规律。本病发展至中后期病势缠绵难愈,使肾之络脉失养、气血运行失调,日久虚瘀互结,肾络壅塞,导致“肾络瘀滞”;治疗上以“补肾通络”为主要原则。本文旨在从“久病在络,气血皆塞”理论论治慢性肾脏病肾间质纤维化,以期为临床治疗提供新思路。

奥美沙坦酯联合骨化三醇治疗对早期2型糖尿病肾病患者炎症状态及肾间质纤维化的影响

目的研究奥美沙坦酯联合骨化三醇治疗对早期2型糖尿病肾病(T2DN)患者炎症状态及肾间质纤维化的影响。方法以回顾性分析为法,观察对象为2020年1月至2022年1月入四川大学华西医院的100例早期T2DN患者,根据不同治疗方法分为研究组(n=50)与对照组(n=50)。研究组联用奥美沙坦酯、骨化三醇治疗,对照组单用奥美沙坦酯治疗,持续用药8周。比较两组患者治疗前后炎症指标[C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)]、肾间质纤维化指标[血清同型半胱氨酸(Hcy)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)]、血糖指标[糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2 hPG)、空腹血糖]水平、肾功能指标[肾小球滤过率(GFR)、血尿素、血肌酐]水平与治疗后总有效率、不良反应(恶心呕吐、头晕头痛、发热、胃肠道反应)发生率。结果治疗8周后,两组患者的CRP、PCT、Hcy、VEGF、TGF-β1、HbA1c、2 hPG、空腹血糖、血尿素、血肌酐水平较治疗前明显下降,GFR较治疗前明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者的CRP、PCT、Hcy、VEGF、TGF-β1、HbA1c、2 hPG、空腹血糖、血尿素、血肌酐水平为(14.36±2.04)mg/L、(1.21±0.08)μg/L、(13.79±1.72)μmol/L、(346.91±23.82)pg/mL、(152.97±18.92)pg/mL、(5.81±0.65)%、(8.36±1.24)mmol/L、(6.18±1.06)mmol/L、(4.27±1.08)mmol/L、(71.28±11.15)μmol/L,较对照组[(16.32±2.26)mg/L、(1.44±0.11)μg/L、(19.34±2.48)μmol/L、(394.36±25.11)pg/mL、(169.04±19.75)pg/mL、(6.42±0.76)%、(10.28±1.39)mmol/L、(7.81±1.12)mmol/L、(5.61±1.16)mmol/L、(78.41±12.37)μmol/L]更低,GFR为(93.85±8.62)mL·min^(-1)·1.73 m^(-2),较对照组[(86.29±8.93)mL·min^(-1)·1.73 m^(-2)]更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者的治疗总有效率为98.00%,明显高于对照组(84.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者恶心呕吐、头晕头痛、发热、胃肠道反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论奥美沙坦酯联合骨化三醇治疗早期T2DN患者的效果显著,可抑制患者炎症反应及肾脏纤维化,改善血糖及肾功能,且无明显副作用,安全性高。

益气清利化瘀方对梗阻性肾病大鼠肾间质纤维化作用机制研究

目的:研究益气清利化瘀方对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化的影响及可能作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为6组,每组8只,分别为假手术组、模型组、科素亚组、中药小剂量组、中药中剂量组、中药大剂量组;大鼠采用UUO模型;中药组用益气清利化瘀方小、中、大剂量配方颗粒,西药用氯沙坦钾片,术后2 d开始给药,2周后处死大鼠,肾脏组织予光镜观察及免疫组化法检测α-SMA、TGF-β_(1)、Smad2和Smad7的表达;Western Blot方法检测肾组织TGF-β_(1)、Smad7蛋白的表达;血清予检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)和白蛋白(Alb)。结果:与模型组比较,中药大剂量组肾小管正常结构存在,炎症细胞浸润少。治疗后各组Scr、UA较模型组均有下降,其中血Scr下降明显,中药大剂量组和中剂量组优于其他组(P<0.01);免疫组化显示各治疗组α-SMA、TGF-β_(1)减少,Smad2表达减弱,Smad7的表达升高,以中药大剂量组改变最明显(P<0.01);Western Blot检测显示各治疗组Smad7蛋白表达均增强,以中药大剂量组表达最强(P<0.01)。各治疗组TGF-β_(1)蛋白表达均减弱,中药大剂量组、中剂量组改善最显著(P<0.01)。结论:益气清利化瘀方具有修复受损肾组织,维持肾脏皮质髓质、肾小管正常结构的作用,其机制可能与抑制α-SMA表达,调节TGF-β/Smads信号通路有关,其正向作用与剂量的梯度递增存在正相关,为进一步开展对CRF梯度诊治方案的研究与推广提供了实验依据。

1,25-(OH)_(2)-VitD3通过抑制Snail1-SMAD3/SMAD4复合物形成减轻糖尿病肾病肾小管间质纤维化

目的研究1,25-(OH)2-VitD3(VitD3)对糖尿病肾病肾小管间质纤维化的影响.方法NRK-52E肾小管上皮细胞分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖培养基处理)、高糖组(25 mmol/L葡萄糖的培养基处理)和高糖加VitD3组(25 mmol/L葡萄糖培养基联合10-8 mol/L VitD3).实时定量PCR和Western blot法分别检测NRK-52E细胞Snail家族转录抑制物1(Snail1)、SMAD家族成员3(SMAD3)、SMAD4、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的mRNA和蛋白表达;免疫荧光细胞化学染色检测Snail1、SMAD3、SMAD4的表达及定位;通过染色质免疫沉淀检测Snail1与SMAD3/SMAD4形成的复合物与柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)的启动子结合情况;荧光素酶报告检测Snail1、SMAD3/SMAD4和E-cadherin的相互作用;采用小干扰RNA(siRNA)抑制细胞Snail1、SMAD4的表达后,通过实时定量PCR检测E-cadherin的mRNA表达.SD大鼠随机分为对照组、DKD组和VitD3处理组.DKD组和VitD3处理组通过注射链脲佐菌素(STZ)先制备DKD模型,DKD造模成功后,VitD3处理组予60ng/kgVitD3灌胃,对照组和DKD组给予生理盐水灌胃;DKD组和VitD3处理组同时皮下注射胰岛素(1~2)U/kg控制血糖,持续8周.采用实时定量PCR和Western blot法分别检测肾组织中Snail1、SMAD3、SMAD4、α-SMA、E-cadherin的mRNA和蛋白水平,免疫组织化学检测肾组织Snail1、SMAD3、SMAD4、α-SMA和E-cadherin的表达及定位.结果与对照组相比,高糖处理的NRK-52E细胞及DKD肾组织Snail1、SMAD3、SMAD4和α-SMA的mRNA和蛋白表达均上调,E-cadherin表达下调;给予VitD3干预后,DKD模型中Snail1、SMAD3、SMAD4、α-SMA和E-cadherin的表达水平恢复到与对照组接近.染色质免疫沉淀提示Snail1、SMAD3/SMAD4与CAR的启动子Ⅳ结合,而VitD3能够阻止Snail1、SMAD3/SMAD4与CAR的启动子Ⅳ结合;荧光素酶报告检测证实Snail1、SMAD3/SMAD4和E-cadherin的互作关系;用siRNA抑制Snail1、SMAD4的mRNA后,上调高糖诱导下E-cadherin的表达.结论VitD3可抑制Snail1-SMAD3/SMAD4的复合物的形成,减轻糖尿病肾病肾小管间质纤维化.

IgA肾病患者血浆中miR-191-5p表达及其与肾间质纤维化相关性的研究

目的:探讨IgA肾病患者血浆中miR-191-5p表达及其与肾间质纤维化(RIF)相关性的研究。方法:选择2017年2月至2022年2月我院收治的80例IgA肾病患者(IgA肾病组),根据CKD分期分为Ⅰ~Ⅱ期组(42例)、Ⅲ期组(38例),根据牛津分型分为T 0组(20例)、T 1组(39例)、T 2组(21例),另选择77例健康志愿者为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测受试者血浆miR-191-5p表达,全自动生化分析仪检测肾功能[血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)],酶联免疫吸附试验检测RIF指标[转化生长因子TGF-β1、TGF-α]。Pearson分析miR-191-5p表达与肾功能及RIF指标、RIF面积的相关性。结果:IgA肾病组血浆miR-191-5p表达低于对照组(P<0.05),Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α水平高于对照组(P<0.05)。Ⅲ期组血浆miR-191-5p表达低于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05),Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α水平高于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05),RIF面积大于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05);T 2组血浆miR-191-5p表达低于T 0组和T 1组(P<0.05),Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α水平高于T 0组和T 1组(P<0.05),RIF面积大于T 0组和T 1组(P<0.05)。CKD患者血浆miR-191-5p表达与RIF面积、Scr、BUN、TGF-β1、TGF-α均呈负相关(r=-0.509、-0.379、-0.311、-0.475、-0.486,P<0.05)。结论:IgA肾病患者血浆miR-191-5p表达降低,且与RIF以及肾功能下降有关。

移植肾间质纤维化与抗纤维化研究进展

移植肾间质纤维化是慢性移植肾功能不全(chronic allograft dysfunction,CAD)的主要病理表现,也是造成移植肾长期存活率低的主要原因。多种因素及作用机制可直接或间接导致间质纤维化的发生,如何预防以及减缓移植肾间质纤维化进程是当前亟待解决的难题。因此,本文总结了近年来国内外关于移植肾间质纤维化主要发生机制及抗间质纤维化方面取得的进展。