槲皮素减轻坐骨神经慢性缩窄性损伤大鼠的神经病理性疼痛及其相关机制

目的探究槲皮素对坐骨神经慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠神经病理性疼痛的影响及其机制。方法构建CCI大鼠模型,用不同浓度槲皮素干预,通过行为学实验检测机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL),ELISA试剂盒检测大鼠脊髓中炎性因子的表达,Western blot和qRT-PCR分别检测i NOS、COX-2和Wnt3a、β-catenin的蛋白以及mRNA的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠MWT和TWL值明显下降(P<0.05),脊髓TNF-α、IL-1β,疼痛相关分子i NOS、COX-2,WNT通路Wnt3a、β-catenin蛋白水平均显著上升(P<0.05),而槲皮素使模型组大鼠MWT和TWL值显著提高,TNF-α和IL-1β,i NOS和COX-2,Wnt3a和β-catenin水平均显著下降(P<0.05),并呈现一定的剂量依赖效应。而Wnt/β-catenin通路激活剂可阻断槲皮素对CCI大鼠的作用。结论槲皮素可能通过抑制Wnt/β-catenin通路及其下游靶分子COX-2和i NOS的表达减轻CCI大鼠的神经病理性疼痛。

氟比洛芬酯对坐骨神经慢性缩窄性损伤模型大鼠肌肉中P物质及神经速激肽1受体表达的影响

目的观察氟比洛芬酯对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)模型大鼠疼痛阈值及肌肉中P物质(SP)及神经速激肽1受体(NK1-R)表达的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为4组,每组6只。A组:氟比洛芬酯治疗CCI大鼠(CCI大鼠暴露并结扎右侧坐骨神经,观察记录术前及术后第3、6、9、12、15日大鼠行为学改变并测定其疼痛阈值,在术后疼痛高峰期给予氟比洛芬酯5 mg/kg尾静脉注射);B组:未经治疗CCI大鼠;C组:氟比洛芬酯治疗假手术大鼠(假手术大鼠仅暴露但不结扎坐骨神经,术后给予氟比洛芬酯5 mg/kg尾静脉注射);D组:假手术大鼠。采用免疫组织化学法检测大鼠肌肉中SP及NK1-R表达。结果术后第15日,A、B组大鼠达到疼痛高峰;A组大鼠经氟比洛芬酯治疗后疼痛阈值显著升高(P<0.05);C组大鼠给予氟比洛芬酯后疼痛阈值亦升高,但差异无统计学意义(P>0.05);A组SP及NK1-R的表达呈弱阳性,B组表达为强阳性,两组差异有统计学意义(P<0.05);C、D两组表达均为弱阳性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟比洛芬酯对坐骨神经CCI模型大鼠坐骨神经慢性疼痛有明显的镇痛效果,其机制可能与降低肌肉中SP及NK1-R的表达有关。

神经病理性疼痛相关蛋白质在双侧慢性缩窄性损伤大鼠脊髓后角的表达

目的评估双侧慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠的疼痛行为学改变,分析鉴定双侧CCI大鼠神经病理性疼痛相关蛋白的表达情况。方法以雌性SD大鼠为研究对象,采用双侧坐骨神经松结扎法制造双侧CCI模型,电子von Frey和丙酮刺激检测机械痛阈与冷痛阈,液相色谱-质谱/质谱联用(LC-MS/MS)技术分析鉴定CCI大鼠脊髓后角神经病理性疼痛相关蛋白质的表达情况。结果双侧CCI大鼠术后第7和14天的机械痛阈和冷痛阈较假手术组与正常组大鼠显著降低(P均<0.05)。双侧CCI大鼠与假手术大鼠比较,共发现25种差异表达蛋白质,其中表达上调18种,表达下调7种。结论双侧CCI大鼠的机械痛阈与冷痛阈显著降低,发现其脊髓后角存在25种与疼痛行为学相关的蛋白质。

喷他佐辛对慢性缩窄性损伤模型大鼠皮肤P物质及神经激肽1受体表达的影响

目的观察喷他佐辛对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)模型大鼠疼痛阈值、皮肤中P物质(SP)及神经激肽1受体(NK1-R)表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组12只。暴露模型组和治疗组大鼠坐骨神经给予三线点扎,观测得造模后第15日达疼痛高峰期。治疗组于造模后第15日单次给予喷他佐辛10 mg·kg^-1股部肌内注射,其他2组不给药。观察各组大鼠疼痛阈值变化,采用免疫组化法和RT-PCR法检测大鼠皮肤中SP及NK1-R蛋白和mRNA的表达水平。结果与造模前比较,造模后第15日模型组和治疗组疼痛阈值均显著降低(P <0.05),且均低于对照组(P <0.05)。治疗组大鼠治疗后疼痛阈值显著升高(P <0.05),且高于模型组(P <0.05)。模型组SP及NK1-R蛋白和mRNA的表达水平显著高于对照组(P <0.05),治疗组SP及NK1-R蛋白和mRNA的表达水平显著低于模型组(P<0.05)。结论喷他佐辛对CCI模型大鼠坐骨神经慢性疼痛有明显的镇痛效果,其机制可能与降低皮肤中SP及NK1-R的表达有关。

白细胞介素-4介导低强度运动对慢性坐骨神经缩窄性损伤小鼠的镇痛作用

目的探讨低强度运动能否通过白细胞介素(IL)-4介导对慢性坐骨神经缩窄性损伤(CCI)小鼠发挥镇痛作用。方法雄性C57/BL6健康小鼠48只,采用随机数字表法分为6组(n=8):假手术/静坐组(SS组)、假手术/生理盐水/运动(SNE组)、假手术/抗IL-4/运动(SAE组)、CCI/静坐组(CS组)、CCI/生理盐水/运动组(CNE组)、CCI/抗IL-4/运动组(CAE组)。制备CCI模型,造模后第1-15天行低强度运动,SAE组和CAE组小鼠运动前30 min腹腔注射IL-4受体拮抗剂(IL-4Ra)50μg。造模后第3(T_(1))、7(T_(2))、11(T_(3))、15(T_(4))天进行行为学测试以分析小鼠痛觉过敏的差异。造模后第15天取小鼠损伤侧坐骨神经和腰段脊髓(L_(1)~L_(6)),采用ELISA法检测IL-4、IL-1Ra、IL-5、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、脑源性神经营养因子(BDNF)、β-神经生长因子(β-NGF)的表达水平。结果CNE组造模后T_(3)和T_(4)时的机械刺激缩足反射阈值(PWMT)和热刺激缩足反射潜伏期(PWTL)均高于CS组和CAE组(P<0.05);CNE组和CAE组坐骨神经和腰段脊髓的IL-4水平均高于CS组,差异有统计学意义(P<0.05);CNE组坐骨神经和腰段脊髓的IL-1Ra、IL-5水平均高于CS组和CAE组,TNF-α、IL-1β、BDNF、β-NGF水平均低于CS组和CAE组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低强度运动可能通过IL-4介导对CCI小鼠产生镇痛作用。

慢性坐骨神经缩窄损伤导致大鼠背根神经节内质网应激反应

目的:研究坐骨神经慢性缩窄(chronic constriction injury,CCI)引起大鼠背根神经节内质网应激反应。方法:56只SD雄性大鼠随机分为两组:假手术组(sham组)和手术组(CCI组)(n=28)。手术前、术后1天、4天、7天、14天、21天和28天测定动物机械痛敏和热痛敏,背根神经节GRP78葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78,内质网应激反应的标志蛋白)的含量。结果:与假手术组相比,CCI组的机械痛阈和热痛阈在术后明显下降,背根神经节GRP78蛋白表达在第1天开始升高,第7天达到高峰。结论:坐骨神经慢性缩窄模型可以激活大鼠背根神经节GRP78蛋白表达和内质网应激反应,可能与神经病理性疼痛的形成有关。

TRPM2在损伤性神经性疼痛过程中参与急性疼痛向慢性疼痛的转化

目的探究TRPM2在损伤性神经性疼痛中的作用和可能机制。方法建立坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠模型,体外培养原代背根神经节(DRG)细胞并完成siRNA的转染,CCI大鼠早期(CCI术后1~4 d)或晚期(CCI术后7~10 d)每天给予阴性对照或si TRPM2处理。RT-PCR检测CCI大鼠DRG和脊髓中TRPM2mRNA的表达,观察大鼠机械痛敏感性和热痛敏感性情况,测定iNOS、NO和ROS水平。结果CCI显著增加DRG和脊髓中TRPM2的表达,CCI术后早期敲除TRPM2可减轻损伤引起的神经性疼痛,而后期敲除则没有效果,CCI大鼠敲除TRPM2可显著降低iNOS的表达、NO以及ROS的水平。结论TRPM2主要参与损伤性神经性疼痛中急性疼痛向慢性疼痛的早期转化,其减轻了早期阶段损伤引起的神经性疼痛,这是一个潜在的神经性疼痛的早期治疗靶点。

MiR-204-5p减轻大鼠坐骨神经慢性缩窄损伤引起神经病理性疼痛的作用机制

背景:miR-204-5p是神经病理性疼痛的潜在生物标志物,但其在神经病理性疼痛中的作用及作用机制尚未阐明。目的:探讨miR-204-5p对大鼠坐骨神经慢性缩窄性损伤引起的神经病理性疼痛的作用及其分子机制。方法:①将90只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空载体组、miR-204-5p过表达组、杂乱干扰组和AURKB干扰组,每组15只。采用坐骨神经慢性缩窄性损伤方法建立大鼠神经性疼痛动物模型,建模后分别注射以下重组慢病毒(空载体、miR-204-5p过表达载体、杂乱干扰载体、AURKB短发夹RNA),注射量为1μg。术前及术后第7,14天,采用RT-qPCR检测大鼠背根神经节中miR-204-5p和AURKB mRNA的表达水平;术前及术后第3,7,14,21天,通过缩足反应阈值和缩足潜伏期评估机械异位痛和热痛觉过敏;术后第7天,采用酶联免疫吸附法分析大鼠背根神经节中炎性细胞因子水平。②采用100 nmol/L脂多糖诱导大鼠小胶质细胞HAPI产生炎症反应,细胞分为对照组、脂多糖组、脂多糖+NC mimic组、脂多糖+miR-204-5p mimic组、脂多糖+miR-204-5p mimic+空载体组、脂多糖+miR-204-5p mimic+AURKB过表达组。采用酶联免疫吸附法分析大鼠小胶质细胞HAPI中炎性细胞因子水平;Western blot法检测大鼠小胶质细胞HAPI中AURKB及Wnt/β-catenin通路标志蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因法验证miR-204-5p与AURKB的靶定关系。结果与结论:①与假手术组比较,坐骨神经慢性缩窄性损伤大鼠背根神经节中miR-204-5p表达显著降低;②与模型组比较,过表达miR-204-5p可显著提高缩足反应阈值和缩足潜伏期;③在坐骨神经慢性缩窄性损伤大鼠和脂多糖激活的HAPI细胞中,过表达miR-204-5p可以抑制炎性细胞因子的分泌;④双荧光素酶报告基因证实了AURKB是miR-204-5p的下游靶基因;⑤在坐骨神经慢性缩窄性损伤大鼠背根神经节中,AURKB mRNA表达显著升高,沉默AURKB可抑制神经病理性疼痛和神经炎症;⑥在脂多糖激活的HAPI细胞中,miR-204-5p过表达通过抑制AURKB表达降低Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达水平,减轻神经炎症反应;⑦以上研究结果表明,miR-204-5p通过AURKB/Wnt/β-catenin通路缓解坐骨神经慢性缩窄性损伤大鼠神经病理性疼痛。

微囊化PC12细胞蛛网膜下腔移植治疗慢性神经源性疼痛

背景:大量动物实验已证实,微囊化嗜铬细胞蛛网膜下腔移植具有镇痛作用,但由于异体移植存在伦理学的广泛争议,而人肾上腺嗜铬细胞来源匮乏,因此,必须寻求一种新的、可合成和释放脑啡肽等物质,且来源丰富的细胞用于移植镇痛研究。目的:观察微囊化PC12细胞移植入慢性神经源性疼痛模型大鼠蛛网膜下腔后的镇痛效果。方法:将慢性坐骨神经缩窄性损伤模型鼠随机数字表法分为3组,造模后1周进行移植。微囊化PC12细胞组、裸PC12细胞组、空微囊组分别取微囊包裹后第3-5天的微囊化PC12细胞悬液、PC12细胞悬液、APA空微囊悬液植入大鼠蛛网膜下腔。结果与结论:微囊化PC12细胞组大鼠在移植后各时间点,两侧后肢收缩次数和时间的差值与移植前相比显著下降(P<0.01),组间比较其差值均低于裸PC12细胞组和空微囊组(P<0.01);在移植后第7周,微囊化PC12细胞组大鼠脑脊液中脑啡肽和去甲肾上腺素的浓度显著高于裸PC12细胞组和空微囊组(P<0.01)。提示微囊化PC12细胞蛛网膜下腔移植可有效缓解慢性坐骨神经缩窄性损伤模型鼠在冷致痛实验中的痛觉过敏现象,同时,大鼠脑脊液中脑啡肽和去甲肾上腺素的水平相应升高。

芒果苷对CCI大鼠神经病理性疼痛的改善作用

目的:探究芒果苷对慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用及机制。方法:采用成年SpragueDawley大鼠构建CCI模型,以模拟临床神经病理性疼痛。将大鼠随机分为假手术组(Sham组)、CCI组、CCI+Man组[手术后立即用40 mg/(kg·d)芒果苷灌胃,连续治疗17 d],10只/组。术后连续17 d观察缩爪机械阈值(PWMT)和缩爪热潜伏期(PWTL);术后17 d,处死大鼠,ELISA检测脊髓中细胞因子IL-1β、IL-6及趋化因子CCL2、CCR2表达水平;免疫荧光法检测脊髓神经元中Cleaved caspase-3和pJNK蛋白表达水平;免疫组化法和Western blot分析脊髓中c-Fos蛋白表达水平。结果:与Sham组相比,CCI组大鼠术后第1~17天的PWMT和PWTL显著降低,脊髓中促炎因子IL-6、IL-1β,趋化因子CCL2、CCR2及c-Fos蛋白水平明显升高(P<0.001);脊髓神经元细胞中Cleaved caspase-3和pJNK蛋白水平明显升高(P<0.001)。经芒果苷治疗后,CCI组大鼠术后第1~17天的PWMT和PWTL显著升高,脊髓中促炎因子IL-6、IL-1β,趋化因子CCL2、CCR2及c-Fos蛋白水平明显降低(P<0.01);脊髓神经元细胞中Cleaved caspase-3和pJNK蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论:芒果苷对CCI大鼠的神经病理性疼痛具有改善作用,其可能与降低脊髓炎症、凋亡、c-Fos及pJNK蛋白表达有关。

脂肪源性干细胞移植对大鼠慢性坐骨神经缩窄性损伤IL-10和IL-1β表达的影响

目的探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)移植对慢性坐骨神经缩窄性损伤(CCI)大鼠热痛阈和机械痛阈表达及坐骨神经中白介素-10(IL-10)和白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法通过在坐骨神经上结扎四个松结制备实验CCI大鼠模型,大鼠随机分为正常组、模型组和ADSCs组。ADSCs组尾静脉注射ADSCs细胞悬液,造模后14 d检测各组热痛阈和机械痛阈,实时荧光定量PCR检测坐骨神经IL-10和IL-1βm RNA表达。结果与正常组比较,模型组、ADSCs组热痛阈和机械痛阈显著降低,IL-10和IL-1βm RNA表达显著增高(<0.01)。与模型组比较,ADSC组坐骨神经热痛阈、机械痛阈、IL-10 m RNA显著增高,IL-1βm RNA表达显著降低(<0.01)。结论脂肪源性干细胞移植降低CCI神经性疼痛可能与调节CCI大鼠模型坐骨神经IL-10和IL-1β等抗炎症因子和前炎症因子的表达,上调热痛阈和机械痛阈相关。

阿利吉仑对慢性坐骨神经缩窄性损伤大鼠TNF-α表达的影响

目的探讨阿利吉仑对慢性坐骨神经缩窄性损伤(CCI)大鼠模型热痛阈和机械痛阈表达和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法通过在坐骨神经上结扎四个松结制备实验CCI大鼠模型,大鼠随机分为正常组、CCI组和阿利吉仑组(50 mg/kg,腹腔注射)。造模后14 d检测各组热痛阈和机械痛阈,实时荧光定量PCR检测坐骨神经TNF-αmRNA表达。结果与正常组比较,模型组和阿利吉仑组热痛阈和机械痛阈显著降低,TNF-αmRNA表达水平显著增高(<0.01)。与模型组比较,阿利吉仑组坐骨神经热痛阈、机械痛阈显著增高,TNF-αmRNA表达水平显著降低(<0.01)。结论阿利吉仑上调坐骨神经缩窄性损伤大鼠坐骨神经热痛阈和机械痛阈可能与下调TNF-αmRNA表达相关。

DNA甲基转移酶类在大鼠神经病理性疼痛发病机制中的作用

目的:探索DNA甲基转移酶类(DNA methyltransferases,DNMTs)在坐骨神经慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)发病机制中的作用。方法:腰段鞘内置管成功的27只成年雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为假手术组+生理盐水组(sham+NS组)、CCI+NS组及CCI+5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-AZA)组(CCI+5-AZA组),每组9只。CCI术后第3天至第14天,sham+NS组和CCI+NS组每天鞘内注射1次NS,CCI+5-AZA组每天鞘内注射1次10μmol/L 5-AZA。分别于术前及术后第3,5,7,10,14天测定各组大鼠术侧后足机械痛阈和热痛阈。术后第14天各组大鼠于深麻醉下处死,取脊髓腰膨大,采用RT-PCR,Western印迹和免疫组织化学测定DNMT1,DNMT3a和DNMT3b的表达。结果:术后第3天至第14天,CCI+NS组的机械痛阈和热痛阈均较sham+NS组明显下降(均P<0.05)。术后第5天至第14天,CCI+5-AZA组的机械痛阈和热痛阈均较CCI+NS组明显上升(均P<0.05),但仍低于sham+NS组(均P<0.05)。DNMT1,DNMT3a和DNMT3b在大鼠脊髓腰膨大背角处有致密表达,且以胞核分布为主。术后第14天CCI+NS组的DNMT1,DNMT3a和DNMT3b表达较sham+NS组均明显上升(均P<0.05)。CCI+5-AZA组的DNMT1,DNMT3a和DNMT3b表达均较CCI+NS组明显下降(均P<0.05),但仍高于sham+NS组(均P<0.05)。结论:DNMTs在脊髓腰膨大处的表达上调很可能在CCI大鼠NPP发病机制中起重要作用。DNMTs抑制剂5-AZA可下调DNMTs的表达和缓解CCI诱导的NPP,可能成为NPP的潜在治疗药物。

氢溴酸高乌甲素对神经病理性疼痛大鼠的影响

目的研究氢溴酸高乌甲素对大鼠慢性缩窄性损伤(CCI)模型神经病理性疼痛的镇痛作用。方法24只大鼠建立CCI模型,分为四组,于术后第7天腹腔分别注射不同剂量的氢溴酸高乌甲素2、4和6mg/kg及生理盐水,给药后进行辐射热痛阈值的测定,测后取大鼠脊髓、脑组织标本采用EMSA进行核因子-κB(NF-κB)的活性测定。结果术后大鼠结扎侧足的热痛阈值明显缩短,氢溴酸高乌甲素4mg/kg组和6mg/kg组与生理盐水组相比较热痛觉过敏反应明显缓解(P<0·01)。NF-κB在生理盐水组中表达最高,2mg/kg组表达最低。结论氢溴酸高乌甲素能明显缓解CCI大鼠的热痛觉过敏现象,达到镇痛效果,同时能使NF-κB的表达减少。

维拉帕米增强氯胺酮对神经病理性疼痛的拮抗作用

目的探讨钙通道拮抗剂维拉帕米对静脉全麻药氯胺酮拮抗神经病理性疼痛的影响。方法 48只健康♂大鼠随机分为正常对照组(N)、假手术组(S)、疼痛模型组(M)、氯胺酮给药组(K)、维拉帕米给药组(V)以及维拉帕米和氯胺酮联合给药组(V+K)共6组,通过大鼠坐骨神经松扎制备坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)神经病理性疼痛模型。各组大鼠从手术后d1～14每天腹腔注射相应不同的药物,N、S和M组大鼠给予生理盐水,K组大鼠给予10μg.g-1的氯胺酮溶液,V组大鼠给予5μg.g-1的维拉帕米溶液,V+K组先给予维拉帕米(5μg.g-1)溶液,20 min后再给予氯胺酮溶液。在手术前1 d和手术后1、3、7、11 d和14 d给药后10 min分别用Hargreaves法测量热缩足潜伏期,VonFrey细丝测量机械刺激缩足反射阈值。结果在手术前各组之间的痛觉无差异,在手术和给药后各时间点模型组大鼠的热缩足潜伏期和机械刺激缩足反射阈值均降低,而氯胺酮改善了CCI大鼠的热痛觉过敏和机械痛觉超敏,维拉帕米单独给药对CCI大鼠的痛觉无影响,但联合用药时维拉帕米增强了氯胺酮的镇痛效应。结论维拉帕米能够增强氯胺酮拮抗CCI大鼠神经病理性疼痛的作用。

曲马多对神经病理性疼痛大鼠P2X3受体表达的影响

目的研究曲马多对大鼠神经病理性疼痛的镇痛作用及背根神经节(DRG)P2X_3受体表达的影响。方法 30只 SD 大鼠建立慢性缩窄性损伤(CCI)模型后随机分为假手术组(S 组,不给药)和手术组(T5组、T10组、T20组、NS 组),于术后第3天开始腹腔分别注射不同剂量的曲马多(5、10、20 mg/kg)及生理盐水,各组大鼠分别于术前和术后第3、7、10、14天测定大鼠右后足热痛阈,术后第14天取大鼠 DRG 采用免疫组化法测定 P2X_3。结果术后大鼠右后足热痛阈明显缩短。P2X_3在 NS 组表达最高,NS、T5、T10组明显高于 S 组(P<0.05);T20组表达最低,与 S 组相比差异无统计学意义。结论曲马多能剂量依赖性地缓解 CCI 大鼠的热痛觉过敏现象,达到镇痛效果,同时能使 P2X_3表达减少。

氟比洛芬酯治疗大鼠坐骨神经痛

目的观察氟比洛芬酯治疗慢性缩窄性损伤(CCI)模型模拟大鼠坐骨神经慢性疼痛的效果。方法36只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分入6组,每组6只:氟比洛芬酯治疗CCI组,脂肪乳剂治疗CCI组,安慰剂治疗CCI组,CCI组,氟比洛芬酯治疗假手术组,假手术组。制作动物模型前将大鼠称重记录,测试基础疼痛阈值。4个CCI组用线疏松结扎大鼠右侧坐骨神经制备坐骨神经痛模型,疼痛阈值检测确定坐骨神经CCI在术后15d达到高峰期。2个假手术组大鼠仅暴露但不结扎右侧坐骨神经。在疼痛阈值达峰值的术后15d,大鼠称重后,氟比洛芬酯治疗CCI组大鼠尾静脉注射氟比洛芬酯5mg/kg,脂肪乳剂治疗CCI组大鼠尾静脉注射脂肪乳剂5mg/kg,安慰剂治疗CCI组大鼠尾静脉注射相同容量的0.9%氯化钠溶液,氟比洛芬酯治疗假手术组大鼠尾静脉注射氟比洛芬酯5mg/kg。用药组注射药物前和注射药物后15min测定大鼠的疼痛阈值。结果 CCI模型大鼠与行假手术的大鼠间术前体重的差异无统计学意义(P>0.05),术后15d的体重均有增加,CCI模型大鼠与术前的差异无统计学意义(P>0.05),行假手术的大鼠较术前显著增加(P<0.05)。6组间大鼠术前的疼痛阈值的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。4个CCI组大鼠术后15d注射药物前的疼痛阈值均较同组术前显著降低(P值均<0.05),出现痛觉敏感;2个假手术组大鼠手术前后疼痛阈值的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。注射药物后15min,氟比洛芬酯治疗CCI组大鼠的疼痛阈值显著高于同组注射药物前(P<0.05),而脂肪乳剂治疗CCI组、安慰剂治疗CCI组和氟比洛芬酯治疗假手术组注射药物前后疼痛阈值的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论氟比洛芬酯治疗CCI模型模拟大鼠坐骨神经慢性疼痛的效果良好。

参芪扶正注射液延缓CCI大鼠神经病理性疼痛的产生

目的:探讨早期给予参芪扶正注射液是否可以抑制坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠神经病理性疼痛的产生.方法:SD大鼠32只,随机分为4组(n=8):①假手术组(sham组);②对照组(CCI组),即单纯行CCI手术组;③CCI+生理盐水组(CCI+saline组),于CCI术后立即腹腔注射生理盐水25mL/kg,连续7d,1次/d;④CCI+参附组(CCI+ShenFu组),于CCI术后即刻腹腔注射参芪扶正注射液,25mL/kg,连续7d,1次/d.于术前2d,术后1,3,7,10,14d测定各组大鼠热缩足反射潜伏期(TWL)、机械缩足反射阈值(MWT).结果:与Sham组比较,CCI组和CCI+Saline组术后各日TWL,MWT明显降低(P<0.01),其MWT从术后第1日即开始下降,第7日降至最低值(为基础值的19.7%和18.1%,与基础值比较均P<0.01);其TWT从术后第1日即开始缩短,第3日即缩短至最低值(为基础值的58.4%和60.2%,与基础值比较均P<0.01),CCI组和CCI+Saline组两组间差异无统计学意义.与CCI,CCI+Saline组相比,CCI+ShenFu组在术后第1,3,7日的MWT降低较为缓和(P<0.01),但自术后第10日始,各组间差异无统计学意义;CCI+ShenFu组在术后第1日TWL缩短较为缓和(P<0.01),但自术后第7日始,各组间差异无统计学意义.结论:早期给予参芪扶正注射液可以轻度延缓CCI大鼠机械性触诱发痛的形成,抑制术后第1日的热痛觉过敏.

Wnt3a信号通路通过JMJD6的表观遗传修饰参与神经病理性疼痛

目的:探讨Wnt3a通过Jumonji C结构域6(Jumonji C domain 6,JMJD6)的表观遗传修饰在神经病理性疼痛中发挥作用的机制。方法:将SD大鼠分为4组:Sham组,慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury,CCI)组,CCI+阴性慢病毒表达载体(LV-NC)组;CCI+慢病毒过表达载体(LV-JMJD6)组。构建SD大鼠坐骨神经CCI模型和JMJD6慢病毒表达载体。CCI术后第3天通过鞘内导管给药,按照分组分别给予生理盐水和含慢病毒的试剂(病毒滴度1×108 TU/mL)各20μL。监测大鼠的机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL),并运用蛋白质印迹法检测脊髓水平Wnt3a及NR2B蛋白的表达变化,免疫共沉淀检测JMJD6与Wnt3a之间是否存在直接相互作用。结果:与Sham组相比,CCI术后各组大鼠的PWMT明显降低和PWTL明显缩短(P<0.05)。与CCI组和CCI+LV-NC组相比,CCI+LV-JMJD6组的PWMT在术后第10和14天明显升高,PWTL在术后第14天明显延长(P<0.05)。CCI术后第14天,CCI组及CCI+LV-NC组Wnt3a和NR2B蛋白表达水平较Sham组明显升高,鞘内注射慢病毒载体后,CCI+LV-JMJD6组的Wnt3a和NR2B蛋白表达水平较CCI+LV-NC组降低(P<0.05)。免疫共沉淀结果显示Wnt3a与JMJD6之间无直接相互作用。结论:Wnt3a参与调节神经病理性疼痛,其作用可能与JMJD6的表观遗传修饰相关,两者可能通过间接相互作用进行调节。

EGCG对神经病理性疼痛小鼠痛行为学的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对神经病理性疼痛小鼠疼痛行为学的影响。方法ICR小鼠随机分为假手术组、慢性坐骨神经缩窄性损伤组(CCI)、CCI+EGCG 100 mg/kg组、CCI+EGCG 65 mg/kg组、CCI+EGCG 20 mg/kg组,采用Von Frey纤维丝、辐射热测痛仪、冷板法观察EGCG对神经病理性疼痛小鼠疼痛行为学的影响。结果与CCI组相比,ip给予EGCG 100和65 mg/kg可分别提高小鼠损伤侧后足的机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,PWT)、热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)及冷缩足反射次数(P<0.05)。结论EGCG可减轻CCI诱发的神经病理性疼痛。