BDNF及其受体TrkB在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中的调节作用及其机制

目的 观察脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸激酶B（TrkB）在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中的作用及其机制.方法 将20只Wistar雄性大鼠称重后按完全随机方法分成两组,避水应激组（WAS组）和假避水应激组（SWAS组）,每组10只.记录两组在慢性避水应激模型造模期间粪便粒数;酶联免疫吸附试验（ELISA）、实时定量PCR、Western印迹和免疫组化法检测BDNF和TrkB在大鼠血清及结肠肌层的表达.分别用河豚毒素（TTX）、BDNF和TrkB抑制剂K252a、BDNF孵育各组近端结肠肌条,记录近端结肠环形肌条肌张力的变化.结果 WAS组大鼠造模期间粪便粒数明显多于SWAS组（P＜0.05）.WAS组大鼠血清BNDF水平高于SWAS组[（158.30±9.82）比（84.68 ±7.80） pg/ml]、结肠肌层TrkB蛋白表达水平高于SWAS组（0.44±0.03比0.30±0.02）（均P＜0.05）,而肌层BDNF mRNA表达两组差异无统计学意义（P＞0.05）.TrkB主要在肌层神经元的细胞核表达,且WAS组表达明显强.WAS组近端结肠环形肌条收缩幅度明显高于SWAS组[（0.35±0.02）比（0.22±0.03）g,P＜0.05];加入TTX阻断肠神经作用后,WAS组环形肌条收缩幅度仍大于SWAS组[（0.89±0.07）比（0.53 ±0.06）g,P＜0.05];用BDNF孵育肌条,记录不同时间点的标准化率（R值）,其中孵育6、12 min时两组肌条R值差异有统计学意义（均P＜0.05）,BDNF能诱导收缩波峰;用K252a孵育环形肌条30 min后加入BDNF,导致BDNF引起的峰值延后且降低.结论 BDNF通过作用于TrkB受体在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中发挥一定的调节作用.