慢性间断性低氧大鼠认知功能和脑胆碱能神经元的进行性变化

目的:探讨慢性间断性低氧(CIH)大鼠认知功能的进行性变化及其与脑胆碱能神经元变化的关系。方法:成年雄性SD大鼠40只,随机均分为对照组、慢性间断性低氧1,3,5周组。应用Morris水迷宫检测认知功能的变化;利用HE染色在光镜下计数前额叶皮层和海马坏死神经元数;利用免疫组化方法检测前额叶皮层和海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性表达。结果:CIH各组大鼠学习记忆能力呈进行性下降趋势;与对照组比较,CIH5w组出现明显学习记忆功能障碍(P<0.05)。CIH各组前额叶皮层和海马变性坏死神经元数增多,且随低氧时间延长,上述改变呈慢性进行性加重趋势。CIH各组前额叶皮层和海马ChAT阳性表达逐渐下降;与对照组比较,CIH3w组和CIH5w组前额叶皮层和海马ChAT阳性表达明显减少,差异具有显著性(P<0.05)。结论:慢性间断性低氧大鼠认知功能进行性下降与前额叶皮层和海马神经元病理性损伤、ChAT表达进行性减少有关。

慢性间断性低氧对大鼠肝脏细胞色素P450的影响

目的观察慢性间断性低氧对大鼠肝脏P450同工酶的影响。方法♂SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组分别低氧3、7、14、28d。采用酶法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,分光光度法测定大鼠肝微粒体红霉素N-脱甲基酶(ERD)、苯胺羟化酶(ANH)活性,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠肝脏细胞色素P4503A2、2E1的mRNA表达水平。结果慢性间断性低氧对血清ALT和AST活性无明显影响;低氧7d后,大鼠肝脏ERD和ANH活性明显升高,28d时诱导率分别为155·5%和42·2%;同时CYP3A2和CYP2E1mR-NA的表达水平,也分别增加了220·5%和102·8%。结论慢性间断性低氧能明显增加大鼠肝脏ERD(CYP3A2)和ANH(CYP2E1)活性,其机制可能与其在转录水平上提高肝脏CYP3A2和CYP2E1的基因表达水平有关。

慢性间断性低氧对大鼠海马神经元及生长相关蛋白的进行性影响

目的观察慢性间断性低氧(CIH)过程中大鼠海马神经元的组织结构及生长相关蛋白(GAP)-43表达的进行性变化。方法成年雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分为对照组、CIH 1周组、CIH 3周组和CIH 5周组,每组各10只。后三组大鼠在自制缺氧舱内每天缺氧8 h,连续缺氧1周、3周和5周。HE染色后在光学显微镜下观察海马神经元组织结构;免疫组化方法检测海马神经元GAP-43的表达。结果 CIH大鼠海马出现变性坏死神经元,并且随着缺氧时间延长,上述改变呈逐渐加重趋势。与对照组比较,CIH组大鼠海马神经元GAP-43阳性表达增多,CIH后1周出现表达高峰(P=0.038),CIH后3周表达逐渐减少(P=0.382),CIH后5周表达接近正常水平(P=0.860)。结论随着缺氧时间延长,变性坏死神经元数量呈进行性增多,而GAP-43的表达却与此不一致。

慢性间断性低氧对大鼠肝脏CYP3A_2和CYP2E_1的影响研究

目的研究慢性间断性低氧对大鼠肝脏CYP3A2和CYP2E1的影响。方法将大鼠随机分为对照组、低氧3d组、低氧7d组、低氧14d组、低氧28d组,低氧处理结束24h后,常规腹腔注射麻醉,摘取眼球血液2ml制备血清,并测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、红霉素N-脱甲基酶(ERD)、苯胺羟化酶(ANH)活性;取新鲜肝组织以制备微粒体和提取核糖核酸(RNA),并以RT-PCR进行基因片段扩增以检测大鼠肝脏细胞色素CYP3A2、CYP2E1的mRNA表达水平。结果慢性间断性低氧对血清ALT、AST活性无明显影响;低氧7d后,大鼠肝脏ERD、ANH活性明显升高,28d时诱导率分别为155.5%、42.2%;同时,CYP3A2、CYP2E1mRNA的表达水平也分别增加了220.5%、102.8%。结论慢性间断性低氧能显著增加大鼠肝脏ERD、ANH活性,其机制可能与其在转录水平上提高肝脏CYP3A2和CYP2E1的基因表达水平有关。

慢性间断性低氧大鼠脑皮层GAP-43表达的时间变化

目的观察慢性间断性低氧(CIH)大鼠脑皮层生长相关蛋白(GAP-43)表达的时间变化,探讨这些变化与缺氧性脑损伤修复间的关系。方法成年雄性SD大鼠40只,随机均分为对照组、CIH 1周、CIH 3周和CIH 5周组。CIH组大鼠在自制缺氧舱内每天缺氧8小时,连续缺氧1、3和5周。利用免疫组化方法检测大脑皮层神经元生长相关蛋白的表达。结果与对照组比较,慢性间断性低氧大鼠脑皮层神经元GAP-43阳性表达增多,表达高峰出现在1周后(P<0.05),3周后表达逐渐减少(P>0.05),5周后表达接近对照组水平(P>0.05)。结论慢性间断性低氧大鼠脑皮层生长相关蛋白的表达呈现时间变化,这可能与缺氧性脑损伤后的修复有关。

慢性间断性低氧对发育期幼鼠认知功能的影响及机制研究

目的探讨慢性间断性低氧对发育期幼鼠认知功能的影响及其可能机制。方法 21日龄SD雄性幼鼠20只,随机均分为对照组、慢性间断性低氧(CIH)组。CIH组幼鼠在自制缺氧舱内每天缺氧8 h,连续缺氧6周。利用Mor-ris水迷宫检测幼鼠认知功能的变化;利用HE染色在光镜下观察海马神经元组织学结构变化。结果与对照组比较,CIH组幼鼠出现认知功能障碍(P<0.05);对照组海马神经元形态正常,CIH组海马神经元出现变性坏死。结论 CIH致发育期幼鼠认知功能障碍,其机制可能与海马神经元病理损伤有关。

慢性间断性低氧诱导大鼠前包钦格复合体磷酸化PKC底物表达增加

延髓腹外侧前包钦格复合体(pre-Bötzinger complex,pre-BötC)被认为是呼吸节律产生中枢。间断性低氧可诱导呼吸长时程易化(long-term facilitation,LTF),是呼吸可塑性的电生理特征。本研究组前期研究显示慢性间断性低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)诱导大鼠pre-BötC磷酸化蛋白激酶Cθ(phospho-protein kinase Cθ,P-PKCθ)表达上调。本研究旨在探讨磷酸化-蛋白激酶C底物(P-PKC substrates,P-PKCsub)在大鼠pre-BötC的超微结构分布以及CIH干预后的表达变化。应用神经激肽1受体(neurokinin-1 receptor,NK1R)免疫反应(immunoreactive,ir)产物作为pre-BötC神经元的标志,并用抗P-PKCsub抗体双标记进行免疫荧光和免疫电镜观察,用Western blot分析延髓腹外侧区(包含pre-BötC)P-PKCsub蛋白的表达变化。结果显示,光镜下,NK1R-ir标记主要沿pre-BötC神经元胞膜分布,清晰勾勒胞体和突起。P-PKCsub-ir标记多呈点状分布在胞体和突起,膜下亦有分布。大部分P-PKCsub-ir神经元共表达NK1R。CIH干预诱导延髓腹外侧区P-PKCsub蛋白表达水平上调。电镜下,NK1R-ir产物主要分布在pre-BötC神经元胞体和树突的胞膜内表面。P-PKCsub-ir金颗粒分布在pre-BötC神经元胞体和树突,在细胞膜下有较多分布,内质网和突触后致密体亦可见。以上结果提示,CIH干预可能通过激活PKCθ,上调P-PKCsub蛋白表达,参与pre-BötC的呼吸可塑性调控。

慢性间断低氧模型大鼠动脉内膜损伤及相关途径分析

目的:通过对慢性间断低氧(CIH)大鼠动脉内膜病理改变及厚度的观察和血管炎症因子变化的检测,探讨CIH对动脉内膜的损伤及其可能的途径。方法:24只成年Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为4组:慢性间断低氧组(CIH组),慢性间断低氧+N-乙酰半胱氨酸干预组(CIH+NAC组)、慢性间断低氧+生理盐水组(CIH+NS组)和常氧对照组(control组),每组6只。经相应处理42 d后处死大鼠取心脏血和胸主动脉。ELISA法检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α),氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),正五聚蛋白3(PTX3)血清浓度,观察胸主动脉病理变化,通过计算机图像分析系统测定动脉内膜厚度。结果:CIH组及CIH+NS组大鼠胸主动脉内皮细胞部分受损脱落,少量单核细胞、巨噬细胞浸润,动脉内膜厚度与对照组比较均明显增厚(P<0.001);CIH+NAC组大鼠胸主动脉内膜厚度与CIH组及CIH+NS组比较显著减小(P<0.001)。CIH组及CIH+NS组大鼠血清HIF-1α,ox-LDL,PTX3浓度与对照组比较明显增高(P<0.001)。CIH+NAC组大鼠血清HIF-1α,ox-LDL,PTX3水平较CIH组及CIH+NS组明显降低(P<0.001)。大鼠血清HIF-1α,ox-LDL,PTX3浓度间呈正相关,ox-LDL,PTX3浓度与胸主动脉内膜厚度呈正相关(P<0.001)。结论:CIH可损伤血管内皮细胞,使动脉内膜增厚。CIH通过激活氧化应激状态,增加HIF-1α,ox-LDL,PTX3等因子的产生是导致血管内皮损伤的一个重要途径。

下颌前移矫治器治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的研究进展

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是一种在临床上表现为睡眠中反复发生呼吸暂停或低通气的疾病,其发病率高且具有潜在致死危险。近年来该疾病日益受到重视,在众多治疗方法中,下颌前移矫治器作为一种非手术治疗方式,因其无创伤、便于摘戴、患者易于接受等独特的优点,是治疗轻、中度OSAHS的有效方法。本文就下颌前移矫治器分类、作用机制、与持续正压通气治疗的对比、对患者的影响等进行综述。

无创呼吸机治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征中缺氧诱导因子-1α的改变

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者呼吸机治疗前后血中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的水平及其对OSAHS发病的影响。方法 OSAHS患者60例及健康体检高龄老人作为对照组40例,OSAHS组在呼吸机治疗前及治疗后分别抽血查HIF-1α,通过多导睡眠监测仪检测血氧饱和度(Sp O2)、呼吸暂停低通气指数(AHI),对照组也进行相同检查。结果治疗前OSAHS组HIF-1α水平明显高于对照组及治疗后(P <0. 01),治疗后OSAHS组与对照组比较差异无统计学意义(P> 0. 05); OSAHS组治疗前后的丙二醛(MDA)水平均明显高于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)水平明显低于对照组,OSAHS组治疗前后AHI明显高于对照组,平均脉搏血氧饱和度(MSpO2)明显低于对照组,Sp O2水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 01); OSAHS组治疗前后Sp O2水平比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论慢性间断性低氧导致OSAHS患者血中HIF-1α水平明显升高,通过呼吸机辅助通气治疗有可能减缓OSAHS所引起的这一过程。

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并高血压的机制研究

多项研究提示阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征是高血压发病的独立危险因素.应激、氧化应激、系统性炎症、代谢紊乱、睡眠结构改变及遗传易感性等多种机制可能参与阻塞性睡眠低通气综合征并高血压的发生、发展.