2014-2015年中国部分地区蜜蜂慢性麻痹病病毒流行病学调查及系统发育分析

【目的】前期笔者课题组对北京地区蜂群进行了常见病毒感染情况的调查,发现蜜蜂慢性麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)在病蜂群中的检出率显著高于在健康蜂群中的检出率,据此推测可借助病蜂群对CBPV进行研究。鉴于目前国内CBPV流行病学数据的匮乏,论文旨在了解中国主要养蜂区病蜂群中CBPV的分布及遗传变异情况,以期为该病的防控提供依据。【方法】2014—2015年间从四川、安徽、浙江、河南、山东、山西、黑龙江、北京8个主要养蜂省(市)共采集到136份病蜂样品,采用RT-PCR法检测CBPV的感染情况。每份样品随机选取10只蜜蜂,取其头部,利用Trizol法提取样品的总RNA;通过凝胶电泳及Nanodrop ND-2000对总RNA的质量进行定性与定量检测。以样品总RNA为模板合成cDNA第一条链,而后以cDNA为模板扩增CBPV的特异性片段。所有扩增片段均进行琼脂糖凝胶电泳,对部分阳性样品进行测序与序列分析;通过扩增片段与阳性片段的比对确定每份样品中CBPV的检出情况。为研究CBPV中国分离株的系统发育特性,以样品cDNA为模板,扩增全部阳性样品的Rd RP基因(RNA-dependent RNA polymerase)特异性片段,而后进行测序与序列分析。将序列提交至GenBank获取基因登录号。对获得的分离株的Rd RP基因与GenBank上发表的相应序列进行比较分析,利用CLUSTAL W软件对全部参考序列及本研究获得的分离株的对应序列进行同源性比对,应用软件MEGA 6.0中邻接法(neighbor-joining)对所有序列绘制系统进化树。【结果】蜜蜂头部总RNA质量检测结果显示,所有样品的总RNA相对完整,且浓度处于(980.5±37.1)ng·μL^(-1)范围内,A260/A280在1.92—2.24。CBPV感染率检测结果显示,136份病蜂样本中共检出120份CBPV阳性样品,阳性率高达88.2%。全部阳性样品的电泳结果可见与预期大小一致的特异性片段,其序列与靶序列同源性达到99%以上。Rd Rp基因特异性片段的序列分析表明,本研究共获得8个CBPV中国分离株,其序列与多种其他地区的CBPV的相应序列同源性达到97%以上。中国分离株GenBank登录号分别为KT374042—KT374049。对其系统进化树分析后可知,世界流行的CBPV分离株可分为5个进化分支:两个欧洲分支(European clade 1、European clade 2),两个中日混合分支(Chinese-Japanese clade 1、Chinese-Japanese clade 2)和一个美国分支(US clade)。获得的8个中国分离株均存在于同一进化分支上,且与之前得到的6个江苏分离株以及4个日本分离株共同形成两个混合分支。【结论】进一步证实了中国病蜂群中普遍存在CBPV感染;系统进化关系表明,目前国内CBPV分离株之间的遗传关系无明显地域性特征,与日本分离株亲缘关系较近。有关CBPV的监测工作亟需加强,且其预警作用需引起重视。

蜜蜂慢性麻痹病的防治

蜜蜂慢性麻痹病是由慢性麻痹病病毒（Chronic bee paralysis virus，CBPV）引起的一种成年蜂传染病。自1963年从患有麻痹病的蜜蜂体内分离到麻痹病病毒后，世界各地西方蜜蜂蜂群检出CBPV的几率较高。

蜜蜂慢性麻痹病的防控

近几年我国春季和秋季会有大量蜜蜂爬出巢门而死亡，死亡的成年蜜蜂中，有很大一部分是由慢性麻痹病引起的。蜜蜂慢性麻痹病又叫黑蜂病、瘫痪病，养蜂者要学会鉴别该病发作时成年蜂从爬出巢门到死亡的的症状，从而有效预防和控制该病。蜜蜂慢性麻痹病的防治对于蜂群春繁阶段快速度过越冬蜂更替期，迅速进入采集蜂积累阶段有重要意义。因此，本文对慢性麻痹病的发病原因、症状描述以及防治措施做简要介绍。

蜜蜂慢性麻痹病诊断实例

北京市某规模化养蜂合作社的蜂群短期内死亡严重,疑似蜜蜂慢性麻痹病。通过对发病蜂场临床症状调查和实验室病毒检测,结合对无症状蜂场病原检测后,确诊发病蜂场病因主要为蜜蜂慢性麻痹病与蜜蜂微孢子虫混合感染;另外,无症状蜂场处于该疫病潜伏期,并有疫病暴发和流行风险。建议蜂农进行蜂群疫病自查与送检,争取早发现早治疗,避免更大损失。

蜜蜂慢性麻痹病的急救疗法

慢性蜜蜂麻痹病又叫瘫痪病、黑蜂病.是为害成年蜂的主要传染病,分布范围广泛,世界上许多养蜂国家都有此病发生;在我国春季和秋季大量死亡的成年蜜蜂中,有较大部分都是由慢性蜜蜂麻痹病引起的.蜜蜂发生慢性麻痹病后,可采取下列急救疗法.

山东省意大利蜜蜂慢性麻痹病毒感染情况调查及防控建议

蜜蜂慢性麻痹病是由蜜蜂慢性麻痹病毒引起的对蜂群造成毁灭性破坏的病毒病,该病的发生与蜂群的环境因素有密切关系。因此,明确蜜蜂慢性麻痹病的感染情况,有利于该病的预防。研究采用实地考察和高效灵敏的PCR检测相结合的方法,对山东省17个地市意大利蜜蜂蜂场的蜜蜂慢性麻痹病毒感染情况进行了调查。结果显示,山东省蜜蜂慢性麻痹病毒感染率为7.5%。根据调查结果提出了相应的防治措施,为山东省蜜蜂慢性麻痹病的防控以及养蜂业的健康持续发展提供了科学的理论依据。

蜜蜂慢性麻痹病的急救疗法

慢性蜜蜂麻痹病又叫瘫痪病、黑蜂病,是危害成年蜂的主要传染病,分布范围广泛,世界上许多养蜂国家都有此病发生;在我国春季和秋季大量死亡的成年蜜蜂中,有较大部分都是由慢性蜜蜂麻痹病引起的.因此,蜜蜂发生慢性麻痹病后,要采取急救疗法.

蜜蜂慢性麻痹病的急救疗法

蜜蜂慢性麻痹病又叫瘫痪病、黑蜂病。是危害成年蜂的主要传染病，分布范围广泛，世界上许多养蜂国家都有此病发生；在我国春季和秋季大量死亡的成年蜜蜂中，有较大部分是由慢性蜜蜂麻痹病引起的。

慢性蜜蜂麻痹病的分布危害及季节特征和防治药物

慢性蜜蜂麻痹病是一种危害成年蜂的病毒病,世界许多国家普遍都有此病分布,1982～1985年调查表明,在我国,慢性麻痹病的发病率占成年蜂病的66.8％。该病严重影响密蜂的寿命,造成蜂群群势下降,蜂蜜和王浆产量降低。发病与季节关系密切,一年之中,以春、秋季节发病为重。应用“抗蜂病毒一号”药物防治该病,对蜜蜂安全,疗效达90％以上,现已在全国推广,经济效益和社会效益显著。

浅谈蜜蜂麻痹病及防治

一、麻痹病的识别 蜜蜂麻痹病有两种，一种叫急性麻痹病，另一种叫慢性麻痹病，它们不是同一种病毒引发。患急性麻痹病的蜜蜂外表没有特殊变化，但开箱后大多数蜜蜂振翅欲飞。病蜂因其足麻痹抓不住脾，提脾时像雨点状落脾。病蜂在箱内、箱外仰着不停挣扎，直至死去。一般发病1周左右全部死光，蜂王也染病死亡。

浅谈蜜蜂麻痹病

川东北秦巴、绥汀地区春秋两季,若蜂群管理不当,多有发生蜜蜂麻痹病,这种病分慢性、急性2种。蜜蜂麻痹病又叫瘫痪病、黑蜂病。是由病毒引起的危害成年蜂的传染病,其中慢性麻痹病危害最大。急性麻痹病经口侵染引起蜂群发病几率不高,侵染主要是由于大蜂螨媒介作用引起。所以防控上以治螨为主,春季做好保温,病害常会自愈。

慢性蜜蜂麻痹病毒SP1蛋白的原核表达及免疫原性分析

慢性蜜蜂麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)主要侵袭成年工蜂,造成患病蜜蜂神经麻痹,丧失飞行能力,出现爬行现象。CBPV据推测有两个结构蛋白SP1和SP2,通过对SP1蛋白的免疫原性探索,为SP1蛋白的功能研究和CBPV生物制剂研制奠定基础。本研究根据大肠杆菌密码子的偏嗜性,对CBPVSP1基因进行优化和合成,将其克隆至原核表达载体pET-32a,获得重组表达质粒pET-Opti-SP1。将重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,用SDS-PAGE和Western Blot方法对该蛋白进行分析和鉴定,然后对最佳表达条件进行摸索。在此基础上,用纯化后的SP1蛋白免疫接种BALB/c小鼠,同时设置纯化病毒组、pET-32a对照组和空白对照组,检测免疫小鼠的淋巴细胞增殖指数(SI)和血清中抗体水平。结果表明,首次成功表达和纯化了重组SP1蛋白,且该蛋白能诱导产生特异性抗CBPV的抗体,促进淋巴细胞的增殖和提高IL-4、IL-10、IFN-γ水平,具有较好的免疫原性。本研究为进一步研究CBPV SP1蛋白的功能和防治CBPV生物制剂的研发提供了帮助。

小经验试试看

提脾急往手上爬的蜜蜂提脾查蜂时,常会碰到不停有蜜蜂往手上爬,它们得了“爬蜂病”。这是养蜂人对以爬行为主症状的蜜蜂通俗而形象的叫法。初期症状不十分明显,随着病情发展,病蜂开始失去飞行能力,在蜂箱内外爬行,其中肠呈现苍白色、膨大,并失去光泽和环纹。“大肚型”慢性麻痹病,蜜蜂腹部膨大类似孢子虫病那样,但翅足颤抖,最后翅和足伸开,呈瘫痪状;“黑蜂型”往往呈油炸状,乌黑发亮,腹部不膨大,多发于夏秋高温季节。急性麻痹病引起的爬蜂症状不明显,发病快,死亡率高。由蜜蜂螺原体引起的蜜蜂爬蜂病,大多为青壮年采集蜂发病,严重时有大量幼蜂爬出箱外,死蜂双翅展开,吻伸出,似中毒状,但不具备其他中毒的典型症状。

2014年辽宁省养蜂生产形势回顾及2015年展望

2014年,由于受早春低温和后期干旱的影响,辽宁省全年的养蜂生产形势都不太乐观。全省蜂群数量有一定程度的下降,蜂产品产、收欠佳。1总体形势1.1蜂群数量及分布据统计,2014年辽宁省蜜蜂总量约为35.5万群,和2013年同期基本持平。西蜂总量约为34万群,较2013年略有减少,主要分布在辽西、北地区,约占总量的80%;辽东、南地区约占20%。中蜂总量约为1.5万群,较2013年略有增加。

蜜蜂病害常用药物分类与使用

减少抗生素污染,提高蜂产品质量已经成为广大养蜂业届同仁的共识。因此,对蜜蜂疾病的正确诊断、分类并合理用药已成为当务之急。现将蜜蜂疾病做简单的分类,介绍常用药物,尤其是无公害食品蜜蜂饲养允许使用的药物及使用规定,以期能指导养蜂生产,规范用药,生产高品质蜂产品。