编码Sema3a基因慢病毒载体的构建

目的构建Sema3a基因慢病毒表达载体,为转染原代心肌细胞及进一步研究奠定基础。方法 NCBI-Gene数据库检索Sema3a基因,设计合成PCR反应需要的上下游引物并扩增。扩增产物通过凝胶电泳并回收,SwaI酶切载体行酶切后连接,CaCl2法制备感受态大肠杆菌,转化扩增后,挑选克隆进行重组鉴定。结果PCR扩增和测序结果证实成功构建Sema3a的慢病毒载体检测并包装慢病毒。结论成功建立Sema3a重组慢病毒载体的三质粒包装系统。