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甘蓝型油菜WRI1基因cDNA克隆与种子特异性表达载体的构建
1
作者
施春霖
刘聪
+3 位作者
肖旦望
邬克彬
陈社员
熊兴华
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期120-125,共6页
WRI1基因所编码的转录因子参与糖酵解和脂肪酸合成,在种子油的积累过程中起着关键作用。在种子中超表达WRI1基因,对提高油菜种子含油量具有重要意义。本研究利用RT-PCR技术,从甘蓝型油菜湘油15号cDNA中分离克隆了5个WRI1基因全长cDNA序...
WRI1基因所编码的转录因子参与糖酵解和脂肪酸合成,在种子油的积累过程中起着关键作用。在种子中超表达WRI1基因,对提高油菜种子含油量具有重要意义。本研究利用RT-PCR技术,从甘蓝型油菜湘油15号cDNA中分离克隆了5个WRI1基因全长cDNA序列,选取2种存在明显差异(碱基缺失)的cDNA序列构建植物种子特异性表达载体。为后续转基因研究这种差异是否会造成WRI1基因在提高含油量作用上的差异作准备。通过双酶切和连接反应,分别将WRI1基因和napin启动子基因插入到pBI121载体的GUSA基因和CaMV35启动子基因位置。酶切及PCR检测结果显示,napin启动子和WRI1已插入相应位置,完成2种载体种子特异性表达WRI1基因重组载体pBI121+napin+WRI1的构建,命名为pBI121NW2、pBI121NW4。
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关键词
甘蓝型油菜
懈朋
克隆
种子特异性表达载体
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职称材料
题名
甘蓝型油菜WRI1基因cDNA克隆与种子特异性表达载体的构建
1
作者
施春霖
刘聪
肖旦望
邬克彬
陈社员
熊兴华
机构
作物基因工程湖南省重点实验室
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期120-125,共6页
基金
国家863课题(2012AA101107-3)
湖南省科技厅课题(2007RS4014)
文摘
WRI1基因所编码的转录因子参与糖酵解和脂肪酸合成,在种子油的积累过程中起着关键作用。在种子中超表达WRI1基因,对提高油菜种子含油量具有重要意义。本研究利用RT-PCR技术,从甘蓝型油菜湘油15号cDNA中分离克隆了5个WRI1基因全长cDNA序列,选取2种存在明显差异(碱基缺失)的cDNA序列构建植物种子特异性表达载体。为后续转基因研究这种差异是否会造成WRI1基因在提高含油量作用上的差异作准备。通过双酶切和连接反应,分别将WRI1基因和napin启动子基因插入到pBI121载体的GUSA基因和CaMV35启动子基因位置。酶切及PCR检测结果显示,napin启动子和WRI1已插入相应位置,完成2种载体种子特异性表达WRI1基因重组载体pBI121+napin+WRI1的构建,命名为pBI121NW2、pBI121NW4。
关键词
甘蓝型油菜
懈朋
克隆
种子特异性表达载体
Keywords
Brassica napus
WRI1
Cloning Seed-specific expression vector
分类号
S565.4 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘蓝型油菜WRI1基因cDNA克隆与种子特异性表达载体的构建
施春霖
刘聪
肖旦望
邬克彬
陈社员
熊兴华
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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