癫清片对戊四唑点燃大鼠海马损害的病理学观察

目的观察癫清片对戊四唑(PTZ)点燃大鼠脑组织学损害特点。方法取按照One’s分级标准造模成功的癫大鼠60只,随机分为模型对照组;癫清片高、中、低剂量组;癫宁片组及苯妥英钠片组,连续灌胃给药28 d,处死后脑标本制成4μm层厚的横轴位切片,HE染色,光镜下观察各组海马的CA1、CA2、CA3、CA4的组织学改变,并选择组织学损害最明显的区域在高倍镜下(40×10)计数神经元的丢失。结果模型对照组总的神经细胞数量减少,变性神经细胞可占锥体细胞的83%,各给药组与模型组相比,均可增加总的神经细胞数量,变性神经细胞比率减少,其中癫清片高剂量组与苯妥英钠片组表现相似。结论PTZ可使海马的CA1、CA2、CA3、CA4的大量神经细胞变性坏死;癫清片具有增加锥体层总体神经细胞和正常神经细胞数量的作用。

粉防己碱对戊四唑致癎大鼠皮层电图和海马超微结构的影响

目的:探讨钙拈抗剂粉防己碱(tetradrine,Tet)对戊四唑(Pentylentetrazol,PTZ)诱导的大鼠癫癎模型的作用。方法:健康SD大鼠24只,随机分为4组,对照组和Tet 3个剂量组(15 mg／kg, 30 mg／kg,60 mg／kg)各6只。观察大鼠腹腔注射PTZ前后癫癎发作的情况,按Racine分级标准分级,同时记录皮层电图(ECoG),观察PTZ注射后到出现癎样放电的潜伏期及1 h内癎样放电累加的持续时间。电镜观察海马神经元超微结构的改变。结果:对照组给PTZ后均出现癫癎发作,程度均为5级, Tel组发作程度明显减轻。ECoG上出现癎样放电的潜伏期延长,癎样放电在1 h中的持续时间缩短。同时,Tel也能明显减轻PTZ致癎大鼠海马CA1区锥体细胞线粒体的损伤程度。结论:Tet对PTZ诱导的癫癎大鼠的发作有明显的对抗作用,对海马锥体神经元的损伤具有保护作用。

人参皂苷Rb1经鼻给药对戊四唑慢性点燃小鼠的抗癫痫作用

目的:观察人参皂苷Rb_(1)经鼻给药的抗癫痫作用并对作用机制进行初探研究。方法:采用小鼠戊四唑(PTZ)腹腔注射构建慢性癫痫模型,造模成功后(21 d)将癫痫小鼠随机分为PTZ组、丙戊酸钠(VPA)组、人参皂苷Rb_(1)低、高剂量组(20、40 mg·kg^(-1))。各组小鼠分别经鼻给予相应药物30 d,每日2次,空白组经鼻给予等体积生理盐水。给药期间记录小鼠体质量变化、癫痫发作潜伏期、癫痫发作级别,远程无线记录动物脑电图(EEG)变化。采用神经元特异核蛋白(NeuN)观察大脑皮层及海马神经元损伤,采用离子钙结合衔接分子-1(IBA-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)分别观察小胶质细胞激活、星形胶质细胞活化现象。用谷氨酸(Glu)转运体-1(GLT-1)、谷氨酰胺合成酶(GS)观察Glu调节关键分子变化。结果:与空白组比较,PTZ明显抑制小鼠体质量增加(P<0.05,P<0.01),显著缩短癫痫发作潜伏期(P<0.01),显著升高癫痫发作最高级别(P<0.01),癫痫样脑电波增加。与PTZ组比较,人参皂苷Rb_(1)低、高剂量组小鼠体质量增加(P<0.05,P<0.01),癫痫发作潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),癫痫发作级别降低(P<0.05,P<0.01),癫痫样脑电波减少。免疫荧光(IF)结果显示,人参皂苷Rb_(1)治疗显著改善PTZ引起的小鼠大脑皮层运动感觉区及海马CA1区神经元损伤(P<0.05,P<0.01),并明显抑制小胶质细胞激活(P<0.05,P<0.01)、星形胶质细胞活化。进一步研究发现,人参皂苷Rb_(1)治疗显著改善癫痫小鼠大脑星形胶质细胞GLT-1(P<0.01)和GS表达(P<0.01)。结论:人参皂苷Rb_(1)经鼻给药能显著改善PTZ引起的小鼠癫痫症状,对癫痫小鼠大脑神经元损伤具有明确保护作用,并能显著抑制癫痫小鼠大脑小胶质细胞激活和星形胶质细胞活化,其抗癫痫作用可能与调节星形胶质细胞Glu代谢关键分子GLT-1和GS有关。