2-氯化腺苷通过调节戊四氮点燃癫痫小鼠脑组织P糖蛋白水平减轻组织脑损伤

目的观察2-氯化腺苷(2-CAdo)对戊四氮(PTZ)点燃癫痫小鼠脑内P糖蛋白(PGP)表达的影响。方法随机将C57BL/6小鼠40只,分为对照组(n=8)、PTZ组(n=16)和2-CAdo组(n=16),PTZ组和2-CAdo组小鼠腹腔注射30 mg/(kg·d)PTZ制备慢性点燃癫痫模型,对照组腹腔注射等量生理盐水,观察小鼠在PTZ点燃过程中癫痫发作情况(点燃率、点燃潜伏时间、发作开始时间和发作持续时间)。癫痫模型成功后,2-CAdo组小鼠连续腹腔注射2-CAdo[0.6 mg/(kg·d)]2周,对照组和PTZ组腹腔注射等量生理盐水。2周后将小鼠全部处死,采用HE染色观察小鼠大脑皮层和海马区的形态,Western blot法检测小鼠大脑皮层和海马中PGP水平,免疫组织化学染色检测PGP在小鼠大脑皮层和海马中的表达和定位。结果癫痫发作时,小鼠表现出全身颤抖、毛发竖起,精神萎靡、食欲不振、冲撞笼栏等异常行为。HE染色结果显示,2-CAdo组小鼠大脑皮层及海马脑组织损伤程度较PTZ组轻。在小鼠大脑皮层中,2-CAdo组PGP蛋白表达量明显低于对照组和PTZ组;而在海马中组织中,2-CAdo组和PTZ组PGP蛋白表达量又显著性高于对照组,尤其以2-CAdo组最为明显。结论 2-CAdo能够减轻癫痫所致的脑组织损伤,并且能下调大脑皮层PGP蛋白表达和上调海马区PGP蛋白的表达。

戊四氮点燃癫痫大鼠海马Cx32和Cx43表达及甘珀酸对其表达的影响

目的探讨点燃癫痫大鼠神经元、星形胶质细胞及其缝隙蛋白的变化,甘珀酸(CBX)对缝隙连接的影响。方法 30只SD雄性大鼠随机分为3组:对照组(NS组)、点燃组(K组)、点燃后干预组(KCBX组),每组10只大鼠。NS组每日腹腔注射生理盐水。K组和KCBX组大鼠腹腔注射戊四氮(PTZ)[35mg/(kg.d)]至点燃,再分别腹腔注射生理盐水、CBX(10mg/kg)干预3d。观察3组大鼠惊厥行为变化,并观察Cx32、Cx43在海马内的表达变化。结果①PTZ点燃癫痫大鼠出现自发性抽搐,KCBX组自发性抽搐次数明显减少(P<0.05)。②点燃癫痫大鼠海马Cx32、Cx43的表达增加;CBX干预后,Cx32、Cx43的表达减少(P<0.05)。结论 CBX抑制点燃大鼠Cx32、Cx43的表达和癫痫活动,提示缝隙连接在癫癎的发生发展过程中具有重要的作用。

银杏叶提取物对戊四氮诱导的癫痫发作的脑保护研究

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对癫痫发作的影响及对癫痫发作后脑损伤的保护作用。方法实验SD大鼠42只,随机分为两组,每组21只,分别用于银杏内酯B(GB)对钙超载的影响检测和活体下观察GBE对致痫大鼠的影响。结果GB剂量越大,对癫痫大鼠海马CA3区的钙超载减轻越明显;GBE剂量越大,癫痫发作的严重程度越轻,癫痫发作的潜伏期越长,海马CA3区的神经元丢失和神经细胞的凋亡数越少。结论GBE可以减轻癫痫状态下的钙超载,减轻癫痫发作的严重程度,减少神经元的丢失和神经元凋亡,对致痫大鼠具有脑保护作用。

愈痫灵颗粒对戊四氮致痫大鼠水迷宫成绩的影响

目的：通过水迷宫实验观察愈痫灵颗粒（YXLG）对戊四氮（PTZ）致痫大鼠学习、记忆能力的影响。方法：选取70只清洁级SD大鼠，从中随机选取10只作为空白对照组，其余大鼠用PTZ造模。将符合模型标准的大鼠随机分为3组：即YXLG组、丙戊酸钠组和模型组。以大鼠水迷宫实验的学习、记忆成绩来评价YXLG对致痫大鼠学习、记忆能力的影响。结果：与空白对照组比较，模型组学习成绩差，具有显著意义（P〈0．01），记忆成绩差，具有统计学意义（P〈O．05），提示癫痫可导致大鼠学习、记忆能力的下降。与模型组比较，YXLG组学习成绩差，具有显著统计学意义（P〈0．01），记忆成绩差，具有统计学意义（P〈0．05）；YXLG组与空白对照组比较，两指标差异无统计学意义（P〉0．05），提示YXLG可明显改善癫痫模型大鼠学习、记忆能力损害。结论：癫痫大鼠存在学习、记忆能力下降，YXLG可以改善癫痫大鼠的学习、记忆能力。

戊四氮点燃大鼠癫痫发作和癫痫形成过程中海马5-HT水平的变化

目的：研究戊四氮（PTZ）点燃大鼠癫痫形成过程中行为、脑电及海马5-羟色胺（5-HT）水平的变化。方法：对大鼠腹腔注射PTZ35mg／（kg·d），观察行为变化，在不同时间点（第7、14、21、28天），进行脑电记录，微透析取海马组织间液，活体观察24只自由活动大鼠在点燃过程和诱发发作前后脑电、海马5-HT及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）水平及其5-HT转化率（5-HIAA／5-HT）的变化。结果：开始PTZ注射后，发作潜伏期逐日缩短，发作程度逐日加重，点燃时间在10～14d。在制模过程中有一只鼠死亡。海马脑电随着发作的加重而出现癫痫波潜伏期缩短，癫痫波量增加，发作间期出现自发放电。点燃早期（第7天），发作间期大鼠的海马5-HT水平略有升高，随着点燃时间延长，5-HT水平逐渐降低，在点燃后（第14天）维持点燃（第21、28天）5-HT水平持续下降，与点燃前5-HT水平比较，差异无显著意义（P〉0．05）；5-HT转化率在点燃过程变化差异无统计学意义；5-HIAA水平在点燃时期和维持点燃时期呈逐步降低，点燃期、维持点燃期与对照组比较差异有显著意义（P〈0．05）。结论：PTZ点燃大鼠癫痼形成过程中，在点燃前，发作间期的海马5-HT水平呈阶段性升高，点燃后，发作间期的海马5-HT水平逐渐降低；点燃后，发作间期的海马5-HT水平明显低于正常水平；随着维持点燃时间延长，发作间期的海马5一HT水平呈进行性下降。

白藜芦醇对戊四氮慢性点燃大鼠行为及脑电图的影响

目的：探讨白藜芦醇（resveratrol，RV）对戊四氮（pentylenetetrazole，PTZ）慢性点燃大鼠行为及脑电图（EEG）的影响。方法：将60只Wistar大鼠随机分为空白对照组（A组）、PTZ致癎组（B组）、RV干预组（C组），每组20只。B组和C组通过腹腔注射PTZ建立慢性癫癎动物模型，观察大鼠行为、脑电图及海马组织学变化情况。结果：腹腔注射RV可明显抑制大鼠的癎样放电，延长发作潜伏期、缩短发作时间，与PTZ致痂组相比重型发作率降低（P〈0．05）；同时在病理学上还能减轻海马神经元的损伤程度。结论：RV可明显抑制PTZ诱导的大鼠癫癎发作，对致癎海马神经元有一定的保护作用。

银杏叶提取物对戊四氮诱导大鼠癫痫发作和Cav3．2表达的影响

目的探讨银杏叶提取物（GBE）对戊四氮（PTZ）慢性致痫大鼠模型癫痫发作的影响及脑保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠40只，随机分为4组：PTZ致痫组、PTZ＋丙戊酸（VPA）组、PTZ＋VPA＋GBE组、生理盐水（NS）对照组，每组10只，观察各组大鼠的行为学、脑电图（EEG）、电迷宫正确率和颞叶海马T型ca2＋通道Car3．2表达变化。结果PTZ＋VPA组、PTZ＋VPA＋GBE组和NS组发作级别为0-Ⅱ级，EEG正常或少量棘慢波，EEG总功率差值及颞叶海马Cav3．2水平较PIE组显著降低，差别有统计学意义（P〈0．05）；相比于PTZ＋VPA组，PTZ＋VPA＋GBE组颞叶海马Cav3．2表达明显减少，差别有统计学意义（P〈0．05）。结论GBE能降低Car3．2水平，显著降低癫痫大鼠发作级别、减少脑部异常放电和改善认知功能，有辅助抗癫痫和脑保护作用。

耐抗癫痫药大鼠模型脑内P-糖蛋白的表达

目的：通过耐丙戊酸钠（VPA）、耐卡马西平（CBZ）大鼠惊厥模型探讨癫痫耐药机制。方法：采用大鼠腹腔注射戊四氮（PTz）21d的点燃方法，建立大鼠惊厥模型。在此基础上分别以CBZ及VPA灌胃14d，建立耐CBZ及耐VPA大鼠惊厥模型。实验分4组：正常对照组、惊厥对照组、耐CBZ组及耐VPA组，每组8只鼠。以惊厥潜伏期和Racine行为学分级作为评定药效指标。采用免疫组化法检测大鼠脑内P-糖蛋白（Pgp）的表达变化；统计分析各组大鼠脑内Pgp表达量，探索癫痫大鼠的耐药机制。结果：①24只大鼠在连续腹腔注射PTZ21d达点燃标准，成功建立惊厥模型；②取16只惊厥大鼠分两组各灌胃CBZ及VPA14d后，两组大鼠惊厥潜伏期（5．84士2．94和6．23土2．57min）较惊厥对照组的惊厥潜伏期（3．32±1．83min）显著延长（P〈0．01），提示耐CBZ及耐VPA模型制备成功；③惊厥对照组PgP的表达（12．40±10．35）比正常对照组（1．62±0．85）增高，差异有统计学意义（P〈0．01）；耐CBZ组（38．67±17．28）及耐VPA组大鼠的PgP的表达（42．33±15．54）较惊厥对照组（12．40±10．35）增高，差异有显著意义（P〈0．01）；而耐CBZ组与耐VPA组之间PgP的差别则无统计学意义（P〉O．05）。结论：①大鼠腹腔注射PTz21d，建立惊厥模型，再进一步分别灌胃CBZ及VPA14d，成功建立耐CBZ及耐VPA模型；②CBZ和VPA可显著诱导Pgp的表达，而长期惊厥发作对其表达也可能有一定的诱导Pgp表达的作用。

抗痫灵对癫痫大鼠脑内nNOS活性影响的实验研究

目的:观察中药抗痫灵对戊四氮点燃癫痫大鼠模型的影响,进一步探讨从调节一氧化氮合酶(nNOS)的nNOS(神经元型)亚型代谢的角度探讨抗痫灵的抗癫痫作用机制。方法:动物模型采用戊四氮点燃大鼠模型。免疫印迹(Western blot)方法观察实验各组大鼠大脑海马nNOS的活性变化。结果:抗痫灵组、丙戊酸钠组、模型组阳性细胞表达与正常对照组相比,有显著性差异(P<0.05),模型组较正常对照组大鼠脑nNOS内活性显著升高(P<0.01),中药组显著低于模型组(P<0.01)。结论:抗痫灵对戊四氮点燃大鼠癫痫发作有显著对抗作用,其作用机制可能与其降低模型大鼠脑内nNOS活性有关。

天麻茎秆水提物的抗惊厥作用

【目的】研究天麻茎秆(Gastrodia elata stalk)水提物的抗惊厥作用及其可能的作用机制。【方法】以SPF级ICR小鼠为研究对象,采用戊四氮(PTZ)和N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)构建2种小鼠癫痫模型,以卡马西平(80 mg/kg)为阳性对照,以相同体积的蒸馏水为空白对照,通过检测小鼠脑中γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、一氧化氮(NO)、五羟色胺(5-HT)、Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATP)、天冬氨酸(Asp)、总抗氧化能力(AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSR)、丙二醛(MDA)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化,分析天麻茎秆水提物高、中、低(2000,1000,500 mg/kg)3个剂量对模型小鼠惊厥发作的行为学影响,观察各组小鼠脑皮层及海马组织的病理学变化,免疫组织化学方法测定脑皮层、海马组织中c-Fos、TLR4蛋白的表达水平。【结果】与空白对照组相比,2种模型组小鼠发生惊厥数及死亡率极高,其脑组织中GABA、5-HT、Na+-K+-ATP、AOC、CAT、GSH、SOD、GSR、IL-10的含量降低,Glu、Asp、NO、MDA、IL-1β、TNF-α的含量升高,脑皮层和海马组织中c-Fos、TLR4蛋白表达水平升高,海马神经元受损。天麻茎秆高、中、低剂量组和卡马西平组均可改善由PTZ、NMDA所致上述指标的变化,延长小鼠的惊厥潜伏期,缩短惊厥持续时间,减少惊厥次数,降低惊厥强度及死亡率。【结论】天麻茎秆具有良好的抗惊厥作用,能缓解由PTZ和NMDA诱发的小鼠惊厥。

含维生素组合定痫胶囊与定痫胶囊加服维生素组合控制癫痫的疗效

目的比较含维生素组合定痫胶囊与定痫胶囊加服维生素组合用于控制癫痫的疗效。方法选用60只健康的雄性Wistar作为实验材料,按照随机数字法分为5组,A组12只不注射PTX和抗癫痫药物,B^E组的48只大鼠均应用PTZ构建癫痫大鼠模型,C组大鼠灌服丙戊酸钠,D组灌服菖连定痫胶囊和维生素,E组灌服含维生素组合菖连定痫胶囊。比较大鼠的惊厥发生率、病死率、癫痫发作级别、惊厥持续时间、体质量和Bcl-2的表达水平变化。结果 4周后4组大鼠的惊厥发生率、病死率、癫痫发作级别、体质量和惊厥发作时间具有统计学差异(P<0.05)。与用药前相比,C^E组大鼠的惊厥发生率、病死率、癫痫发作级别、体质量和惊厥发作时间均明显好转(P<0.05)。5组大鼠海马区的Bcl-2的表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论含维生素组合定痫胶囊与定痫胶囊加服维生素组合用于癫痫控制的疗效均较明显,二者无明显差异。

矿物药青礞石对PTZ点燃癫痫大鼠影响的脑组织代谢组学分析

目的:通过青礞石干预戊四氮(PTZ)点燃癫痫大鼠的脑组织代谢组学研究,探讨青礞石治疗癫痫可能的作用机制。方法:运用PTZ点燃法建立大鼠癫痫动物模型,实验分为空白组、模型组、卡马西平组、青礞石组。通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法(UPLC/Q-TOF-MS)技术检测脑组织样品,利用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和SPSS 18.0软件等方式对实验结果进行统计分析。结果:建立了大鼠脑组织代谢指纹图谱、代谢轮廓图,显示各组代谢轮廓发生了明显的变化,各组间均能很好地分开,并且青礞石组较卡马西平组有更靠近空白组的趋势。筛选出了7个差异代谢物,包括磷脂酰丝氨酸(PS)(18∶0/18∶0),L-谷氨酸,二十二碳六烯酰基乙醇酰胺,花生四烯酸,葡糖鞘氨醇,胆甾烷-3,7,12,24,25-五醇,溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)(P-18∶0)。除二十二碳六烯酰基乙醇酰胺和LysoPC(P-18∶0)外,青礞石对其他5个差异代谢物均有显著性干预调节作用。影响PTZ点燃大鼠发生代谢紊乱的可能代谢通路有12条,较为重要的代谢通路有3条,即D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及花生四烯酸代谢,其中又以D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢最为重要。结论:从脑组织代谢组学分析来看,青礞石对PTZ癫痫大鼠具有明确的干预作用,这可能与其干预以上差异代谢物含量及相关代谢通路有关,可减少兴奋性神经递质对脑组织神经元的毒性作用以及抑制脑组织炎症的发展以维持脑细胞的生物学功能而减缓癫痫发生。

矿物药青礞石对PTZ点燃癫痫大鼠脑组织、血浆中金属元素的影响

目的:研究青礞石对戊四氮(PTZ)点燃癫痫大鼠脑组织、血浆中金属元素的影响,探讨青礞石可能的效应物质基础。方法:采用PTZ点燃法建立癫痫大鼠模型,运用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定空白组、模型组、卡马西平组(0.1 g·kg^(-1))和青礞石组(2 g·kg^(-1))大鼠脑组织、血浆中的金属元素含量,实验数据用SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果:与空白组比较,模型组大鼠脑组织中Sr,Sb,Ba含量明显上升(P<0.05,P<0.01);Zn,Fe,Cu,K,Li,Co,Sn,Pb含量明显下降(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,青礞石组大鼠脑组织中Zn,Fe,K,Li,Co,As,Pb含量明显上升(P<0.05,P<0.01);Sr,Sb含量显著下降(P<0.01)。说明青礞石对大鼠脑组织中金属元素含量向正常水平的调节具有积极作用,干预效果明确,且总体效果优于卡马西平组。与空白组比较,模型组大鼠血浆中K,Sr,Cd含量明显上升(P<0.05);Li,Al,Ti,Cr含量明显下降(P<0.05)。与模型组比较,青礞石组大鼠血浆中Ca,K,Li,Al,V含量明显上升(P<0.05,P<0.01);Fe,Ti,Sr,Cd含量明显下降(P<0.05,P<0.01)。各组间金属元素相关性分析显示,大鼠脑组织中有17对元素存在显著正相关性,2对元素存在显著负相关性,大鼠血浆组织中有8对元素存在显著正相关性,6对元素存在显著负相关性。结论:以Zn,Fe,K,Li,Co,As,Pb,Sr,Sb,Ca,Al,V,Ti,Cd为代表的金属元素群可能是青礞石干预PTZ点燃癫痫模型大鼠的效应物质基础,作用机制可能与这些金属元素群干预影响神经递质的释放及神经元的电平衡、调节离子(Na+,K+,Ca2+等)通道失常诱发的异常同步放电及干预癫痫相关代谢通路等有关,使兴奋与抑制活动相互牵制,最终达到神经元、细胞电平衡等趋于正常生理状态。青礞石组的干预作用总体优于卡马西平组。