九味熄风颗粒HPLC指纹图谱及化学成分归属研究

目的:构建九味熄风颗粒的HPLC指纹图谱,获得良好的各色谱分离峰形,获悉其成分归属与含量,准确客观评估九味熄风颗粒的整体质量。方法:采用高效液相色谱法,以Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长225 nm,流速0.5 mL/min,柱温30℃。运用相关软件,以11批次的九味熄风颗粒为研究对象,计算其化学成分指纹图谱的相似度,指认图谱共有峰药材来源,结合飞行时间质谱法检测图谱中的主要化学成分。结果:建立了九味熄风颗粒的HPLC指纹图谱;发现并确定17个具有指纹意义的共有峰,可归属到6味药材,其中6个共有峰得到鉴定;各批次九味熄风颗粒样品指纹图谱与标准指纹图谱相似度均大于0.9。结论:该法准确快速获悉各批次原药材、中间体的成分变化,为合理调配提供试验数据支撑,最大程度保证成品的成分含量及组成比例的一致性。

梯度洗脱HPLC法对高原康胶囊主成分归属及有关物质检查

目的建立梯度洗脱HPLC法对高原康胶囊主成分归属及有关物质检查。方法采用Athena C18-WP(5μm,4.6×250 mm)色谱柱,0.05 mol.L-1磷酸二氢钠溶液为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,检测波长为240 nm;流速:1.0 ml.min-1;柱温:30℃。结果样品主成分归属及有关物质检查获得满意的结果。结论本方法快速、准确,可用于高原康胶囊主成分归属及有关物质检查。

复方三黄酊HPLC指纹图谱的建立和化学成分的归属

目的:采用高效液相色谱技术建立一种抗感染药物复方三黄酊乙醇部位的HPLC指纹图谱,同时分析其化学成分的归属。方法:色谱柱:Phenomenex Luna C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾水溶液(22∶78);流速:1.0 ml·min^(-1);检测器:DAD检测器;检测波长:237 nm;柱温:30℃;进样量:10μl。结果:得到分离度和理论塔板数较好的复方三黄酊药效部位的指纹图谱,共标定出6个指纹特征峰,方法的重现性、稳定性和精密度良好;同时结合复方药物、单味药物和对照品的保留时间信息,确定了复方三黄酊中药效部位的特征峰来源。结论:所建立的抗感染药物复方三黄酊乙醇部位指纹图谱特征性强、重现性较好,对复方三黄酊乙醇部位的质量评价有重要的参考价值。

金匮肾气丸正丁醇部位HPLC指纹图谱的建立及化学成分的归属

目的:采用高效液相色谱技术建立金匮肾气丸正丁醇部位HPLC指纹图谱,同时分析其化学成分的归属。方法:采用Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-1%冰醋酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;检测波长为254 nm;流速为0.5 mL.min-1;柱温为30℃。结果:得到分离度较好的金匮肾气丸药效部分的指纹图谱,共标定出14个指纹特征峰,方法稳定、重现性好。同时结合复方药物及单味药的物质信息,确定了金匮肾气丸药效部分特征峰的来源。结论:所建立的金匮肾气丸正丁醇部位指纹图谱特征性强、重现性较好,对金匮肾气丸正丁醇部位的质量评价有重要参考价值。

桂附地黄丸抗PADAM有效部位的筛选及成分归属分析

目的:筛选桂附地黄丸抗中老年男性部分雄激素缺乏综合证(PADAM)的有效部位,并对有效部位的成分来源进行归属分析,为深入研究桂附地黄丸治疗PADAM的药效物质提供基础。方法:(1)制备桂附地黄丸的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水提部位,采用腹腔注射环磷酰胺致大鼠PADAM模型,以大鼠体质量、血清总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、肾脏SOD、MDA为主要评价指标,筛选桂附地黄丸抗PADAM的有效部位;(2)建立有效部位的指纹图谱,并与复方单味药及相应缺味药比较,分析有效部位成分的来源及归属。结果:(1)与正常组比较,模型组大鼠体质量、血清TT、FT含量和肾脏SOD活性显著降低(P<0.01),肾脏MDA水平明显升高(P<0.01)。桂附地黄丸、水提、水+正丁醇、水+乙酸乙酯、水+氯仿、水+石油醚部位能不同程度地改善PADAM大鼠的症状(P<0.01,P<0.05),其中水+正丁醇部位的作用更加显著(P<0.01)。(2)建立了水+正丁醇部位的指纹图谱,确定了以马钱苷为参照物的16个共有峰。(3)初步判断了桂附地黄丸水+正丁醇部位的16个特征峰的归属,此部分化学成分主要来源于熟地黄、牡丹皮、泽泻和山茱萸,以山茱萸所含的特征峰最为丰富。结论:水+正丁醇部位作为桂附地黄丸抗PADAM的有效部位,药效明确,质量可控,实验结果可为进一步研究其药效物质提供实验依据。

何首乌配方颗粒的UPLC指纹图谱及化学成分归属

目的:建立何首乌配方颗粒的UPLC指纹图谱,并对其主要的共有峰进行成分归属,为配方颗粒的快速质量评价提供方法。方法:采用超高效液相色谱法,以Agilent Eclipse Plus C_(18) RRHD(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为色谱柱,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长254 nm,流速0.4 m L·min^(-1),柱温30℃,同时采用飞行时间质谱法对指纹图谱中的主要化学成分进行归属。结果:建立了何首乌配方颗粒的UPLC指纹图谱,确定了12个共有峰,并对其中5个共有峰进行了指认,各何首乌配方颗粒样品指纹图谱与对照指纹图谱相似度均>0.9。结论:该方法简单、准确、快速、重复性好,能有效地对何首乌配方颗粒的质量进行快速评价。

蒙药方剂朱日亨滴丸化学成分鉴定及归属研究

目的采用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC Q-Exactive MS/MS)对朱日亨滴丸及其中间体中的化学成分进行快速鉴定和归属。方法选用ACE EXCEL3 C18-PFP色谱柱(3μm,100 mm×3 mm),流动相为含0.2%甲酸的甲醇(A)-0.2%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温35℃。正、负离子模式采集数据,质谱扫描范围为100~1000 m/z。通过文献检索、中药材网站收集朱日亨滴丸原药材中的化学成分,自建化学成分数据库。根据精确相对分子质量、二级质谱裂解碎片、对照品及文献比对,对朱日亨滴丸的化学成分进行鉴定。结果共识别和鉴定了朱日亨滴丸中130个成分。结论建立的HPLC Q-Exactive MS/MS方法快速、准确,其适用于朱日亨滴丸定性鉴别,为该药的质量体系建立和药效物质发现奠定了基础。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS快速分析白虎汤中的化学成分

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间高分辨质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)法分析白虎汤中的化学成分。方法:色谱条件为Waters UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.25 mL/min,进样量1μL,柱温40℃,检测范围m/z100~1500。质谱分析采用动态背景扣除(DBS)和信息关联模式(IDA)正、负离子分别采集。结果:通过高分辨质谱数据分析、结合参考文献数据以及对照品确认,从白虎汤中共鉴别出54个化学成分,包括27个黄酮类,11个甾体皂苷类,11个三萜类,3个有机酸类,2个酚类化合物。结论:应用UPLC-Q-TOF-MS/MS高分辨液质联用技术,较为全面地阐明了白虎汤中的化学成分,为进一步研究其药效物质及质量控制奠定基础。

HPLC-Q-Exactive-MS/MS快速分析蒙药材悬钩子木中的化学成分

目的采用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS/MS)法快速分析蒙药材悬钩子木化学成分。方法采用CAPCELL PAK MGII C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^(-1),进样体积20μL,柱温30℃,热电喷雾(HESI)质谱离子源,在负离子模式下采集数据。结果依据精确质量数和Chem Spider、Pub Chem数据库确定化合物分子式及结构式,通过比较对照品及文献报道的保留时间、一级质谱以及二级碎片离子,结合此类化合物的裂解规律,从悬钩子木中共鉴定出71个化学成分,包括30个有机酸类、22个黄酮类、7个三萜皂苷类、5个香豆素类、1个木质素类、1个没食子鞣质和2个芳香族化合物。结论该方法可快捷、准确地鉴定悬钩子木中复杂化学成分,为悬钩子木的药效物质基础研究提供科学依据。

基于UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术的清肺排毒汤化学成分鉴定及归属研究

应用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术分析清肺排毒汤中的化学成分,明确其物质基础。采用ACQUITY UPLC HSS T3 (2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱和0.1%甲酸水溶液(B)-乙腈(A)流动相系统进行梯度洗脱;应用高分辨液质联用,质谱正负离子扫描模式,分析鉴定清肺排毒汤化学成分。根据精确相对分子质量数据和多级质谱碎片离子,结合对照品比对和文献报道,共从清肺排毒汤中分析鉴定了87个主要化学成分,包括43个黄酮、9个生物碱、4个三萜皂苷、1个倍半萜、2个香豆素、10个有机酸和18个其他类化合物。应用UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS高分辨液质联用技术,较为全面地阐明了清肺排毒汤中的化学成分,基本涵盖了清肺排毒汤中除石膏外的20味中药,为进一步建立清肺排毒汤的质量控制标准提供了科学依据。

蒲地蓝消炎口服液化学成分鉴定及归属研究

采用超高效液相色谱-电喷雾Orbitrap高分辨质谱联用技术(UPLC-ESI-Orbitrap-MS/MS)对蒲地蓝消炎口服液中的化学成分进行分析、鉴定和归属。选用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4. 6 mm×150 mm,3. 5μm),以甲醇-0. 1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0. 5 m L·min-1,进样量2μL,柱温30℃。电喷雾(ESI)离子源,正负离子模式采集数据,质谱扫描范围为m/z 50～2 000,以Orbitrap高分辨质谱为检测器进行检测。结合文献报道和质谱数据,通过串联质谱对蒲地蓝消炎口服液中的化学成分进行了结构鉴定,共鉴定79个化合物,包括30个生物碱类成分,28个有机酸类成分,18个黄酮类成分,3个香豆素类成分。最终归属为蒲公英的有芦丁、七叶内酯、没食子酸、咖啡酸、菊苣酸等39个化学成分,归属为黄芩的有黄芩苷、黄芩素、芹菜素、白杨素、千层纸素A等11个化学成分,归属为板蓝根的有精氨酸、脯氨酸、次黄嘌呤、表告依春、靛玉红等13个化学成分,归属为苦地丁的有去氢碎叶紫堇碱,氧化血根碱,紫堇灵,原阿片碱,spallidamine等18个化学成分。通过目前的化学模式及归属分析,蒲地蓝消炎口服液中化学成分含量较高的有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、芹菜素、白杨素、黄芩黄酮-Ⅱ、千层纸素A、菊苣酸、绿原酸、咖啡酸、七叶内酯、去氢碎叶紫堇碱、二氢血根碱、原阿片碱、紫堇灵、靛玉红等。建立的方法简单、准确、快速、灵敏度高、重复性好,适用于蒲地蓝消炎口服液的定性鉴别和定量测定,为该药的系统质量控制及活性成分全程可追溯体系的建立奠定了基础。

“桂枝与白芍”药对不同比例配伍的HPLC指纹图谱探讨

目的建立"桂枝与白芍"药对不同比例配伍的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,探讨桂枝与白芍不同比例配伍后化学成分差异性及其煎出率变化。方法采用HPLC法,以Dikma Spursil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相乙腈-0.1%冰醋酸水洗脱,温度25℃,进样量10μL,检测波长254 nm,流速1 m L/min。对"桂枝与白芍"药对(1∶1)、(1∶2)、(5∶3)不同比例配伍的HPLC指纹图谱采用相似度评价软件(2004A版)分析,并用各药对共有色谱峰面积与单煎相对应色谱峰面积的比值比较分析。结果确定18个共有峰,指认其中6个色谱峰,对共有峰归属,并进行相似度评价。初步确立单味白芍及桂枝白芍(1∶1)、(1∶2)、(5∶3)配伍后白芍中共有峰各成分煎出率依次提高,桂枝白芍(5∶3)时煎出效果最佳;桂枝白芍(5∶3)、(1∶2)配伍肉桂酸煎出率降低,可桂枝白芍(1∶1)配伍后肉桂酸煎出率接近单味桂枝,煎出效果最佳。结论该方法简单、准确、快速,重复性好,能有效地对"桂枝与白芍"药对的质量控制和成分鉴别及配伍理论提供依据。

基于HPLC特征图谱及化学计量学的苗药云实感冒合剂质量评价研究

目的:建立特征性图谱和多指标定量与化学计量学相结合的云实感冒合剂质量评价方法。方法:采用WondasilTM C18-superb色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为10μl,流速为1.0 ml·min^(-1),对没食子酸、原苏木素B、鞣花酸3种成分进行含量测定和特征图谱研究,并结合药材的图谱进行化学成分归属,结合化学计量学方法对云实感冒合剂的质量进行评价研究。结果:含量测定表明没食子酸0.3270~1.3640 mg·ml^(-1)、原苏木素B 0.1640~0.6200 mg·ml^(-1)、鞣花酸0.0160~0.0810 mg·ml^(-1)。17批云实感冒合剂的HPLC特征图谱共有模式确定了25个共有峰,其中没食子酸和鞣花酸来自于云实皮和蓝布正,原苏木素B来自于云实皮,供试品分别与云实皮、蓝布正、马鞭草、生姜药材呈现9,7,11,3个相对应的色谱峰,并且17批云实感冒合剂的特征图谱相似度大于0.97,聚类分析及主成分分析均将17批云实感冒合剂聚为3类。结论:本文建立了云实感冒合剂HPLC特征性图谱,灵敏度高,重复性好,简单方便,易操作,通过对比云实感冒合剂待测样品与云实感冒合剂HPLC特征图谱共有峰的相似度,并结合化学计量学方法,可对云实感冒合剂的质量进行整体描述和评价,并确保产品质量的均一性。

基于HPLC指纹图谱探讨当归-白芍不同比例配伍的差异性

目的建立当归-白芍药对不同比例的HPLC指纹图谱,探讨当归-白芍不同比例配伍在化学成分和溶出率上的差异性。方法采用HPLC法,采用Agilent Zorbax SB-C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃;乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1);检测波长220 nm进行试验,对当归-白芍11个不同比例配伍的HPLC图谱采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析,并对各药对典型的共有色谱峰面积与单提液相应的色谱峰面积的比值进行比较分析。结果确定14个共有峰,对共有峰进行归属,并进行相似度评价;配伍后白芍的溶出率均有不同程度的提高,以当归-白芍(5∶2)时溶出率最佳;而当归的溶出率均有不同程度的降低,当归-白芍(1∶1)时最接近单味当归,溶出率最佳。结论所建立的指纹图谱相关性强,能为当归-白芍药对的质量控制、成分归属和配伍理论提供科学依据。

复方丹参片的HPLC指纹图谱研究

目的:应用高效液相色谱(HPLC)法建立复方丹参片的指纹图谱。方法:色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%磷酸水(梯度洗脱),检测波长为272nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃。结果:所建指纹图谱特征性强、重复性好。共标定出8个指纹特征峰,其中5、6、7、8号特征峰来源于组方中的丹参,1、2、3、4号特征峰来源于组方中的三七。结论:复方丹参片药效部分特征峰主要源于丹参。本试验可为复方丹参片有效成分的追踪分离及中成药的二次开发奠定基础。