基于网络药理学乌鳖返春口服液活性成分筛选

乌鳖返春口服液是一种结合了现代药物与食品特性的产品。本研究采用网络药理学方法,利用TCMSP数据库并结合相关文献查找其活性成分;通过SwissTargetPrediction和PharmMapper数据库预测其活性成分的可能作用靶点,在Genecards、DisGeNET和OMIM数据库检索、筛选活性成分作用的相关靶点;利用STRING数据库构建潜在作用靶点的蛋白相互作用(PPI)网络,筛选出该口服液活性成分作用的关键靶点网络,并对这些关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,确定其核心通路,以构建该口服液活性成分的作用网络。结果表明,共获得该口服液活性成分75个,基于活性成分得到384个潜在作用靶点,通过潜在作用靶点PPI网络筛选得到75个关键靶点。GO功能富集到892个条目,KEGG富集到164条通路。综合以上结果,认为该口服液活性成分作用机制可能是通过大黄蒽醌类、黄酮类和植物甾醇类化合物作用于AKT1、TNF和IL6核心靶点,以PI3KAkt、HIF-1、mTOR和FoxO为信号通路来实现。

亲和超滤质谱技术在中药活性成分筛选中的研究进展

亲和超滤质谱技术是20世纪90年代中期发展起来的一种快速、简单、有效的药物小分子发现模式。该技术利用配体与受体之间特异性结合,通过超滤装置快速筛选活性小分子化合物,再结合液相色谱-质谱联用技术(LC-MS),鉴定活性成分结构。亲和超滤质谱技术集药物活性成分筛选、结构鉴定于一体,尤其适用于从复杂体系中筛选潜在的活性小分子化合物。近年来,针对中药发挥药理作用具有多组分、多靶点的重要特点,亲和超滤质谱技术已被广泛用于从中药提取物中筛选与特定蛋白靶点相结合的小分子活性物质,对阐明中药药效的物质基础和以活性成分作为先导化合物的新药开发具有重要意义,是对传统药物发现方法的有利补充。本工作综述了该技术在中药活性成分筛选中的原理、特点、应用进展,以及对未来的展望。

双丹明目胶囊抑制人脐静脉内皮细胞增殖有效成分筛选研究

目的从双丹明目胶囊24个入血成分中筛选出抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的有效成分。方法将双丹明目胶囊24个入血成分标准品均稀释成终浓度为1、10、100μg/mL的溶液,分别干预体外培养的HUVEC,采用MTT法检测细胞存活率,对各成分进行初筛,再对有效成分进行浓度细化,确定有效成分的最佳作用浓度。在此基础上,采用Hoechst33258荧光染色和流式细胞术检测各有效成分对HUVEC凋亡的影响。结果 MTT检测结果显示,双丹明目胶囊24个入血成分中4个成分能有效抑制HUVEC增殖(P<0.05),分别为3-乙酸齐墩果酸、丹参酮ⅡA、芹菜素和大波斯菊苷,其最佳作用浓度分别为75、75、50、75μg/mL;进一步研究发现,上述4个成分均能使HUVEC细胞核固缩、碎裂,数量减少,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),其中以丹参酮ⅡA和芹菜素效果尤为明显。结论 3-乙酸齐墩果酸、丹参酮ⅡA、芹菜素和大波斯菊苷是双丹明目胶囊抑制HUVEC增殖、发挥治疗糖尿病视网膜病变疗效的有效成分。

麝香保心丸抗心肌细胞缺氧-复氧损伤活性成分筛选

目的：建立原代心肌细胞缺氧-复氧模型，并对麝香保心丸及其20种血中活性成分进行抗缺氧-复氧损伤的活性筛选。方法取新生（1～3 d）SD乳鼠的心脏，建立原代心肌细胞的缺氧-复氧损伤模型，并采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法进行麝香保心丸及其入血成分的活性筛选。结果麝香保心丸在50μg/ml浓度下具有较好的保护原代心肌细胞缺氧-复氧损伤的作用；人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、蟾毒灵和麝香酮具有较好的保护原代心肌细胞缺氧-复氧损伤的作用。结论麝香保心丸具有抗心肌细胞缺氧-复氧损伤的作用，人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2、蟾毒灵和麝香酮是其主要的有效成分。该研究为麝香保心丸深入的药效和机制研究奠定了基础。

多元统计分析线性模型主成分筛选准则研究

对多元统计分析线性模型中系数 β估计时 ,如果观测值矩阵出现多重共线性 ,常规的最小二乘法会因均方误差太大而失效。本文的研究表明把RMS和AIC准则用作主成分评判标准 ,可降低多重共线性 ,减少均方误差 。

细胞膜色谱研究进展及其在中药活性成分筛选中的应用

细胞膜色谱法作为近年来发展迅速的生物色谱技术,已成为筛选中药复杂体系中活性成分和研究药物与受体相互作用的重要工具。本文综述了细胞膜色谱技术的发展、分离原理、制备方法、针对其稳定性和寿命等问题进行的制备方法学优化、多种二维色谱方法学和应用策略,以及在中药等复杂体系活性成分筛选中的应用情况。在此基础上,本文展望了细胞膜色谱技术未来的发展趋势,以期为细胞膜色谱技术的进一步发展以及在药物高通量筛选领域的拓展应用提供思路。

高通量技术与网络药理学在中药活性成分筛选中的应用

目的:解决中药活性成分筛选的技术瓶颈。方法:根据实验室前期研究结果和相关文献,分析了有关通量研究技术,总结了课题组在网络药理学的指导下利用通量技术筛选中药活性成分。结果:快速制备、高通量筛选、高通量生物芯片技术以及组合药靶网络对于中药活性成分筛选、毒性成分排除、药物分子机制研究均有重要价值,是中药现代化及网络药理学研究的关键技术。结论:高通量技术与网络药理学相结合可提高中药活性成分筛选的效率。

HPLC-DAD-MS-DPPH在线筛选与定性黑脉羊肚菌抗氧化活性成分

为建立在线高效液相色谱-高分辨质谱-2,2-二苯代苦味酰基苯肼(high-performance liquid chromatogra phy-diode array detection-mass spectrometry-DPPH,HPLC-DAD-MS-DPPH) 快速筛选和定性黑脉羊肚菌(Morchella angusticeps)中抗氧化活性成分的方法,对黑脉羊肚菌样品的水提物、50%乙醇提取物、95%乙醇提取物和氯仿提取物进行检测,并应用高分辨质谱对筛选所得抗氧化活性成分进行定性分析.结果 显示,黑脉羊肚菌水提物抗氧化活性最优,筛选获得抗氧化活性成分3个,应用高分辨质谱进行定性分析,获得抗氧化成分分别为山梨醇、未知化合物和柠檬酸.故可知,黑脉羊肚菌抗氧化活性成分主要为水溶性小分子极性化合物,以水提取物中含量最为丰富.本方法直观、快速、准确,适用于复杂天然产物中抗氧化活性成分的快速筛选与定性.

药用活性成分的体外筛选课程改革与实践思考

药用活性成分的体外筛选是面向沈阳药科大学本科生开设的课程。通过课程的学习使学生掌握活性筛选的基础理论、基本知识和基本方法,深入了解活性筛选在新药研发过程中的应用,培养学生在以后药学学习和工作中严谨的科学态度和精益求精的学习作风。课程秉承“学生中心、研学融合、持续改进”的教学理念,创新教学模式,实现知识传授向能力培养的转化。通过构建“每课一问引导—理论学习—实用道具、视频和漫画加深理解—小组合作录制相关视频”的层次化教学模式,实现知识、能力和素质的有机融合,培养学生的创新性思维和团队协作能力。教学过程结合超星学习通等网络平台,重塑课程教学模式并构建全新的课程考核方式,进一步提升了教学质量,具有很大的推广价值。

基于中药血清药物化学的活性成分筛选的现状和问题

为了探讨基于中药血清药物化学的活性成分筛选的优势和存在问题,查阅了2003—2013年关于中药血清药物化学的研究文献,并进行统计分析。结果显示共涉及88个复方或单味药;共检测到血中移行成分970个,其中原型成分582个,代谢产物388个;鉴定结构的原型成分270个,占入血原型成分的46.4%;鉴定结构的代谢产物为37个,占代谢产物的9.53%;80.37%的被鉴定结构的原型成分有活性报道。基于中药血清药物化学的活性成分筛选有快速、准确、低成本、易操作、应用面广等优点,是一种高效的中药活性成分筛选方法。但该方法应用范围有一定的局限性,应用现状还存在研究不规范、不系统、不深入、国际和产业推广度低等问题。

具有酪氨酸酶抑制活性的丹参有效成分筛选研究

目的筛选丹参中对酪氨酸酶活性具有抑制作用的有效成分。方法基于受试物抑制酪氨酸酶催化底物L-多巴的反应原理,将丹参经80%乙醇提取后依次经石油醚、氯仿、醋酸乙酯、饱和正丁醇和水5种不同极性溶剂萃取,分别检测各提取部位对酪氨酸酶活性的抑制作用;并通过UPLC-MS/MS技术鉴定活性最强提取部位化学成分,结合分子对接技术预测各成分潜在活性,并通过酶学检测验证。结果丹参氯仿萃取层具有较强的酪氨酸酶抑制活性。其生物活性与丹参素、原儿茶醛等6种成分有关,酶学检测验证结果与筛选结果一致。结论丹参中丹参素和原儿茶醛等成分对酪氨酸酶活性具有显著的抑制作用。

受体色谱:中药靶向活性成分高效筛选技术

中药活性成分高效筛选技术是化学、生物学和医药学等众多领域的前沿研究问题之一。笔者课题组将G-蛋白偶联受体(GPCRs)识别药物的高特异性和高效液相色谱(HPLC)的高分离能力相结合,提出了受体色谱概念,探索了多种受体固定化方法,建立了系列受体色谱模型,成功将其应用于药物-受体相互作用研究及中药活性成分筛选,为中药受体靶向活性成分高效筛选提供了新方法。

基于液相色谱分离的天然产物药物活性成分筛选技术研究进展

天然产物作为一个巨大的资源宝库,已成为现代药物研发的重要源泉。天然产物活性成分筛选技术的提高,对缩短研究周期、降低研发成本、提高筛选效率、加快新药研发进程十分关键。本文就近年来以色谱分离技术为基础的柱前、柱上和柱后3种活性化合物筛选技术及其应用进行了简要综述,以期为天然产物中活性成分的高效筛选提供一定参考。

芙蓉李中抗氧化活性成分的高通量筛选评价

目的:建立快速筛选芙蓉李中抗氧化活性成分的HPLC-DPPH·法,比较各活性成分清除自由基的抗氧化能力。方法:通过HPLC-DPPH·法,比较芙蓉李总多酚抗氧化提取物中分离的8个活性成分与DPPH·反应前后峰面积下降的百分比,筛选出抗氧化活性成分,通过计算各化合物的IC50值,评价它们的抗氧化能力大小。结果:已分离的芙蓉李总多酚抗氧化提取物中的8个代表性成分均具有抗氧化活性;在一定浓度范围内,表现出明显的浓度依赖性;对DPPH·的清除能力从大到小顺序依次为:槲皮素-3-O-L-呋喃阿拉伯糖苷>槲皮素>(-)-表儿茶素>化合物1>芦丁>化合物3>化合物2>柚皮素-7-O-β-葡萄糖苷。结论:芙蓉李总多酚抗氧化提取物中分离的8个代表性活性成分具有较强的体外抗氧化活性,可作为有效的天然自由基清除剂,芙蓉李总多酚抗氧化提取物的活性也与它们有关,故均具有广阔的开发利用前景。HPLC-DPPH·法快速直观,操作简便,重复性良好,可作为抗氧化活性成分高通量筛选的评价方法。

在线二维液相色谱技术用于天然产物活性成分筛选中的研究进展

高效快速地分离和筛选复杂体系中的活性成分是从天然产物中发现先导化合物的关键。近年来,在线二维液相色谱技术因具有分辨率高、自动化程度高以及集成方式灵活等优势在天然产物活性成分筛选研究中备受青睐。本文简要综述了在线二维液相色谱技术的特点及其在天然产物活性成分筛选领域中的应用研究进展,主要从柱前、柱上以及柱后三大筛选模式的不同集成方式展开叙述,并指出其不足,以期为后续应用研究提供科学参考,促进该技术在活性成分筛选领域的快速发展。

应用ASE-LC-ESI-MS法快速筛选肿节风的化学成分

目的:为肿节风药材化学成分的快速筛选提供一种分析方法。方法:利用快速溶剂萃取结合液质联用技术,采用正负离子全扫描模式检测肿节风药材中的化学成分。结果:提取特征准分子离子峰,同时根据化合物液相色谱行为,推断出22种化合物的分子量。通过与对照品的质谱行为比较和相关文献分析,鉴定了肿节风药材9个主要化学成分。结论:该方法简单、快速,是一种较好的肿节风药材的化学成分的快速筛选分析方法。

细胞膜仿生亲和识别技术在中药活性成分筛选中的应用研究进展

由于中药化学成分的复杂性以及作用机制的不明确性,采用合适的方法对中药活性成分进行筛选,以及对药效物质基础进行解析是中药研究需要面对的关键挑战。近年来,基于天然细胞膜靶向特异性的仿生亲和识别系统已被证明是筛选中药活性化合物的有效方法。该技术可在体外实现药物体内过程的模拟,在复杂体系分析中具有独特优势,作为一种新兴技术在药物发现领域具有潜在应用前景。综述了基于细胞膜的亲和识别策略在高效发现中药生物活性化合物方面的研究进展,并对其面临的挑战和未来发展方向进行了探讨,以期为该技术的进一步改善与应用提供思路与参考。

淫羊藿根与叶活性成分的分析和比较

采用细胞膜色谱法（ＣＭＣ）筛选，并结合离体药理实验确定主要活性成分，利用高效液相色谱法分析比较了淫羊藿根与叶中的活性成分及其差异性．色谱条件为Ｋｒｏｍａｓｉｌ ＯＤＳ 柱（１５０ ｍｍ× ４．６ ｍｍ．Ｉ．Ｄ ）流动相甲醇－水（７０：３０，Ｖ：Ｖ）；检测波长２７０ｎｍ。筛选发现淫羊藿根中的两个有效成分ＹＹＨ－２１４和ＹＹＨ－２１６对血管有较强的舒张作用，表明活性成分在ＣＭＣ模型体系中的保留特性与药理作用之间存在良好的相关性。在此色谱条件下淫羊藿叶未检测到这两种活性成分．

数据挖掘技术在治疗冠心病中药化学成分探索研究中应用的思路

中药药效成分是中药治病的基础,而中药化学成分纷繁复杂,要在海量的数据信息中探索发现这些成分之间的组合规律直至筛选出有效成分组合具有重要意义。文章主要介绍应用数据挖掘技术探索性研究治疗冠心病中药化学成分所形成的一些思路,认为选用数据挖掘方法处理中医文献中海量信息,进行治疗冠心病中药化学成分筛选具有较强的优越性。