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人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定
被引量:
1
1
作者
刘红
刘宾
+5 位作者
李瑞娟
杨萌萌
李鹏聪
张鑫
孙旭东
杨铁生
《中国医药生物技术》
CSCD
2012年第6期430-435,共6页
目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌...
目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌抗体亚型;制备小鼠腹水,用protein G从腹水中纯化出CYFRA21-1的mAb;用间接ELISA测定mAb的效价,Western blot和竞争ELISA对mAb的免疫特性进行检测,竞争ELISA对mAb的临床应用性进行评价。结果获得2G8和12G7两株能稳定分泌人CYFRA21-1mAb的杂交瘤细胞株,其分泌抗体都为轻链为κ的IgG1;两株mAb都能特异识别人血清中的CYFRA21-1,效价分别为1×10-6和5×10-7;检测134份血清样本CYFRA21-1含量的结果与北京源德生物医学工程有限公司CYFRA21-1化学发光法定量检测试剂盒检测结果的相关性分别为y=0.8167x+0.3755(r=0.9772)和y=0.8142x+0.3655(r=0.9770)。结论成功制备两株人CYFRA21-1的特异mAb,为后期人血清CYFRA21-1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础。
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关键词
成功制备两株人cyfra21-1的特异mab
为后期
人血清
cyfra
21
-
1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础
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职称材料
题名
人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定
被引量:
1
1
作者
刘红
刘宾
李瑞娟
杨萌萌
李鹏聪
张鑫
孙旭东
杨铁生
机构
北京大学人民医院检验科
北京源德生物医学工程有限公司
北京大学工学院生物医学工程系
出处
《中国医药生物技术》
CSCD
2012年第6期430-435,共6页
文摘
目的制备人细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),并对其免疫特性进行鉴定。方法用重组CYFRA21-1蛋白免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高小鼠的脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,进行亚克隆,并鉴定分泌抗体亚型;制备小鼠腹水,用protein G从腹水中纯化出CYFRA21-1的mAb;用间接ELISA测定mAb的效价,Western blot和竞争ELISA对mAb的免疫特性进行检测,竞争ELISA对mAb的临床应用性进行评价。结果获得2G8和12G7两株能稳定分泌人CYFRA21-1mAb的杂交瘤细胞株,其分泌抗体都为轻链为κ的IgG1;两株mAb都能特异识别人血清中的CYFRA21-1,效价分别为1×10-6和5×10-7;检测134份血清样本CYFRA21-1含量的结果与北京源德生物医学工程有限公司CYFRA21-1化学发光法定量检测试剂盒检测结果的相关性分别为y=0.8167x+0.3755(r=0.9772)和y=0.8142x+0.3655(r=0.9770)。结论成功制备两株人CYFRA21-1的特异mAb,为后期人血清CYFRA21-1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础。
关键词
成功制备两株人cyfra21-1的特异mab
为后期
人血清
cyfra
21
-
1定量测定试剂盒的完全国产化奠定了良好的基础
Keywords
Keratin
-
1
9
Antibodies, monoclonal
Tumor markers, biological
cyfra
21
-
1
分类号
R446.6 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人细胞角蛋白19片段单克隆抗体的制备和鉴定
刘红
刘宾
李瑞娟
杨萌萌
李鹏聪
张鑫
孙旭东
杨铁生
《中国医药生物技术》
CSCD
2012
1
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参考文献
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