抑制ATP结合盒转运体亚家族C成员8表达促进大鼠脊髓损伤后神经组织修复和神经功能恢复

目的探究大鼠脊髓损伤发生后,损伤脊髓组织内ATP结合盒转运体亚家族C成员8（Abcc8）基因表达量变化及抑制Abcc8表达对脊髓损伤大鼠神经组织和神经功能恢复的影响。方法采用改良的Allen重物坠落打击法造成成年雌性Wistar大鼠（6月龄,200-220 g）中度脊髓损伤5 d后,通过苏木精-伊红（HE）染色检测脊髓损伤程度,通过免疫组织化学染色检测损伤脊髓组织内Abcc8基因表达产物磺脲受体1（SUR1）的表达量变化。大鼠脊髓损伤后立即通过经静脉给予反义核苷酸（ASO）抑制损伤脊髓内Abcc8基因表达,大鼠脊髓损伤28 d后通过Basso Beattie Bresnahan（BBB）评分评价大鼠运动功能,通过HE染色检测脊髓组织损伤区域面积。结果大鼠脊髓损伤5 d后,HE染色显示,损伤脊髓组织出现明显空洞和组织缺损,伴有多量炎细胞浸润和残存组织变形移位。免疫组织化学染色（荧光法）显示,大鼠脊髓损伤中心区域邻近坏死组织的半暗区内SUR1抗原荧光强度显著增加。大鼠脊髓损伤28 d后的HE染色-损伤区域面积测定显示,脊髓损伤后立即接受Abcc8-ASO治疗的大鼠脊髓损伤节段病灶面积明显减少。BBB运动功能评分显示,脊髓损伤发生后即进行Abcc8-ASO静脉注射治疗的大鼠的后肢运动功能恢复显著增强。结论大鼠脊髓损伤后,损伤脊髓组织内Abcc8基因表达量上升,抑制Abcc8表达对脊髓损伤大鼠神经组织和神经功能的恢复具有显著促进作用。

甘肃汉族人群溶质载体家族30成员8基因多态性与2型糖尿病的相关性

目的探讨甘肃汉族人群溶质载体家族30成员8(SLC30A8)基因多态性与2型糖尿病的相关性。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析法,随机选取甘肃116例2型糖尿病患者(2型糖尿病组)及80例体检者(对照组)进行SLC30A8基因rs13266634C/T单核苷酸多态性检测,比较两组间基因型频率和等位基因频率及相关性;以稳态模型胰岛B细胞分泌功能指数评估胰岛B细胞功能,胰岛素抵抗指数评估胰岛素抵抗。结果 2型糖尿病组CC基因型频率明显高于对照组,而TT基因型频率低于对照组。2型糖尿病组CC基因型频率与TT基因型频率比较,有显著性差异(P<0.01);C风险等位基因患2型糖尿病的风险是T等位基因者的2.40倍,有显著性差异(P<0.01);CC基因型的胰岛B细胞分泌功能指数、空腹胰岛素显著低于TT基因型,差异有统计学意义P<0.05)。CC、CT、TT3种基因型的胰岛素抵抗指数,差异无统计学意义。结论甘肃汉族人群存在SLC30A8基因rs13266634多态性,rs13266634多态性与甘肃汉族2型糖尿病的发生相关;SLC30A8基因rs13266634的C等位基因可能是2型糖尿病的风险等位基因。SLC30A8基因增加2型糖尿病的易感性可能与胰岛B细胞功能下降有关,与胰岛素抵抗无明显相关性。

溶质载体家族30成员8基因rs13266634C/T多态性与甘肃东乡族、汉族2型糖尿病的关系

目的探讨溶质载体家族30成员8(SLC30A8)基因rs13266634C/T单核苷酸多态性在甘肃东乡族、汉族人群中的分布及其与2型糖尿病(T_2DM)的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测甘肃东乡族、汉族T_2DM患者组(T_2DM组)和体检对照者组(对照组)SLC30A8基因rs13266634C/T多态性。结果 rs13266634C/T的CC基因型频率、C等位甚因的频率在东乡族和汉族T_2DM组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。东乡族C等位基因携带者患T_2DM的风险是T等位基因的1.62倍;汉族C等位基因携带者患T_2DM的风险是T等位基因的1.54倍。结论甘肃东乡族和汉族人群均存在SLC30A8基因rs13266634C/T位点变异,C等位基因是其风险等位基因,SLC30A8基因可能是甘肃东乡族和汉族人群T_2DM的易感基因。

冰片通过TRPM8减轻小鼠心肌梗死后炎症反应并抑制心脏重构

目的:研究冰片(borneol)对小鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)后炎症反应和心脏重构的作用及可能机制。方法:8周龄野生型(wild-type,WT)C57BL/6小鼠和瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员8(transient receptor potential cation channel subfamily M member 8,TRPM8)基因敲除(TRPM8 gene knockout,TRPM8−/−)小鼠随机分为假手术组和MI组,再分别用生理盐水(对照组)或冰片(冰片组)灌胃。绘制小鼠MI后生存曲线,28 d后超声心动图检测心脏功能,多导生理记录仪测量血流动力学参数,病理染色观察MI面积、心肌肥大和间质纤维化,并检测梗死交界区心肌中炎症反应情况。结果:在WT小鼠中,梗死交界区心肌组织中TRPM8表达显著增加(P<0.05),冰片对心脏中TRPM8表达无影响(P>0.05),但可提高小鼠生存率,缩小MI面积,抑制MI后心脏重构,改善心脏功能(P<0.05或P<0.01);在TRPM8−/−小鼠中,冰片对小鼠生存率、MI面积、心肌肥大、心肌纤维化和心脏功能未见明显影响(P>0.05)。在WT小鼠中,冰片可减少中性粒细胞和巨噬细胞的浸润(P<0.01),抑制炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)过度表达(P<0.05或P<0.01);而在TRPM8−/−小鼠中,冰片对炎症细胞数量和炎症因子表达未见明显影响(P>0.05)。结论:TRPM8可能是冰片在心脏的作用靶点;冰片可能通过TRPM8减轻MI后炎症反应和抑制心脏重构,改善小鼠MI后的心脏功能。

SLC16A8通过正调控FN1促进结直肠癌细胞增殖、迁移及血管生成

目的探讨溶质载体家族16成员8(SLC16A8)通过上调纤维连接蛋白1(FN1)表达促进结直肠癌(CRC)细胞增殖和血管生成的作用机制。方法通过癌症基因体图谱(TCGA)的数据分析SLC16A8在CRC中的表达及与患者预后的关系,通过CancerSEA数据库对SLC16A8的功能进行分析。实时定量PCR法(RT-qPCR)检测CRC细胞中SLC16A8的表达水平,将培养CRC细胞分为SLC16A8过表达组,空白对照组和阴性对照组;CCK8法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞迁移能力;小管形成实验检测血管生成能力。通过生物信息学方法分析SLC16A8的下游基因,蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析SLC16A8对FN1蛋白表达的影响。过表达SLC16A8并抑制FN1表达,将培养CRC细胞分为SLC16A8过表达组,SLC16A8过表达+FN1 siRNA组,空白对照组和阴性对照组,分析SLC16A8是否通过正调控FN1促进CRC细胞增殖和血管生成。结果SLC16A8在CRC中高表达,并且高表达SLC16A8的CRC患者预后较差。SLC16A8功能主要与血管生成相关。SLC16A8在CRC细胞中高表达并可促进CRC细胞增殖、迁移和血管生成。FN1可能是SLC16A8的下游基因并且两者表达呈正相关。SLC16A8可促进FN1蛋白表达,并且SLC16A8通过正调控FN1促进CRC细胞增殖、迁移和血管生成。结论SLC16A8在CRC中高表达,并且SLC16A8通过正调控FN1促进CRC细胞增殖、迁移和血管生成。

ABCA8通过调控Wnt/β-catenin通路抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:研究ATP结合盒亚家族A成员8(ABCA8)对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用生物信息学分析ABCA8在CRC组织中的表达情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测临床CRC癌组织和CRC细胞系中ABCA8 mRNA表达水平。采用ABCA8基因过表达慢病毒感染SW480细胞,再将细胞分为对照(Blank)组、空载(Vector)组、ABCA8过表达(Oe-ABCA8)组、Vector+HLY78组和Oe-ABCA8+HLY78组,其中Wnt/β-catenin信号通路激动剂HLY78干预浓度为10μmol/L。CCK-8法检测各组细胞增殖活性;Transwell实验检测各组细胞迁移与侵袭细胞数量;Western blot法检测各组细胞中ABCA8、β-catenin、c-Myc和金属基质蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平。结果:ABCA8在CRC癌组织和CRC细胞系SW480、SW620、 HCT116和HT-29中均呈低表达水平。与Blank组比较,Oe-ABCA8组SW480细胞增殖活性显著降低(P<0.05),迁移与侵袭细胞数量显著减少(P<0.05),细胞中ABCA8表达显著升高(P<0.05),β-catenin、c-Myc和MMP-9蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而Vector组各指标无显著性差异(P>0.05)。与Vector组比较,Vector+HLY78组SW480细胞增殖活性显著升高(P<0.05),迁移与侵袭细胞数量显著增多(P<0.05),细胞中β-catenin、c-Myc和MMP-9蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与Oe-ABCA8组比较,Oe-ABCA8+HLY78组SW480细胞增殖活性显著升高(P<0.05),迁移与侵袭细胞数量显著增多(P<0.05),细胞中β-catenin、c-Myc和MMP-9蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论:ABCA8在CRC组织和细胞系中低表达,过表达ABCA8可抑制CRC细胞系SW480的增殖、迁移与侵袭,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号传导有关。

三磷酸腺苷结合盒式亚家族C成员8在脑胶质瘤组织中的表达及预后预测价值

目的探讨脑胶质瘤组织中三磷酸腺苷结合盒式亚家族C成员8(ABCC8)mRNA的表达及其作为预测脑胶质瘤预后评估指标的应用价值。方法收集中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中304例脑胶质瘤患者(研究组)的性别、年龄、组织病理类型、WHO分级、IDH突变、1p/19q缺失、生存时间和ABCC8 mRNA表达水平等数据,采用单因素及多因素Cox回归分析明确脑胶质瘤患者的预后影响因素,并通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库的506例脑胶质瘤患者、分子脑肿瘤数据库(REMBRANDT)的271例脑胶质瘤患者进行验证。结果研究组304例脑胶质瘤组织中ABCC8 mRNA表达量为15.93±1.23。ABCC8 mRNA表达量与患者的年龄、组织病理类型、WHO分级、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变状态、1p/19q缺失状态、WHO分子分级有关(均P<0.01)。ABCC8 mRNA高表达组患者的中位生存时间为85.60个月,明显长于低表达组(14.07个月,P<0.001)。单因素Cox回归分析显示,年龄、组织病理类型、WHO分级、IDH突变状态、1p/19q缺失状态、术后放疗、术后化疗及ABCC8 mRNA表达与患者总生存时间有关(均P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,WHO分级(HR=3.117,95%CI:1.970~4.930)、1p/19q缺失状态(HR=0.285,95%CI:0.155~0.526)、术后化疗(HR=0.680,95%CI:0.488~0.948)及ABCC8 mRNA表达(HR=0.690,95%CI:0.491~0.971)为脑胶质瘤患者生存时间的独立影响因素。在TCGA数据集中,ABCC8 mRNA高表达组患者的中位生存时间为133.70个月,长于低表达组患者(19.60个月,P<0.001)。在REMBRANDT数据集中,ABCC8 mRNA高表达组患者中位生存时间为37.93月,长于低表达组患者(15.83个月,P<0.001)。结论脑胶质瘤组织中ABCC8 mRNA的表达水平与肿瘤恶性程度有关,恶性程度越高,表达越低。ABCC8 mRNA的表达水平是脑胶质瘤患者预后的独立影响因素,ABCC8 mRNA高表达者预后好于低表达者。

ABCA8在结直肠癌中的生物信息学分析及验证

目的研究ATP结合盒亚家族A成员8(ABCA8)在结直肠癌中的作用。方法下载癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中的结直肠癌数据,利用limma R包研究ABCA8在TCGA数据集中的表达情况。随即利用结直肠癌的临床生存状态数据研究该基因是否和结直肠癌的生存预后相关。利用基因相关性分析研究ABCA8在结直肠癌中和其他基因之间是否具有相关性。利用R包estimate包和CIBERSORT R包得到结直肠癌中每个样本的肿瘤微环境打分以及运行肿瘤免疫浸润分析,并且对ABCA8基因表达量高低的两个分组之间进行免疫细胞以及肿瘤微环境的表达进行分析。利用免疫检查点相关基因分析ABCA8和其之间的关联。采用Western Blot验证收集的结直肠癌患者癌、癌旁以及正常组织中的ABCA8的表达情况,并且同时验证人类蛋白图谱数据库(The Human Protein Atlas,HPA)中ABCA8基因在结直肠癌以及正常肠道组织中的表达水平变化。结果通过差异分析发现ABCA8在结直肠癌中低表达。通过相关性分析一共得到了多个与ABCA8密切相关的基因。通过肿瘤微环境评分发现依据ABCA8表达水平不同分成的高、低表达两组中,基质评分,免疫评分和肿瘤微环境评分均有差异。利用生物信息学分析还发现ABCA8基因和免疫细胞以及免疫检查点相关基因之间具有明显的关联。通过Western Blot和HPA数据库中发现正常肠组织中ABCA8的表达水平高于结直肠癌组织。结论ABCA8在结直肠癌和正常肠道组织中具有明显差异,可以作为一种新的诊断生物标志物。

肺腺癌表达TRPM8蛋白的意义

目的:探讨肺腺癌表达瞬时受体电位阳离子通道M亚家族成员8(TRPM8)蛋白的意义。方法:收集112例肺腺癌患者的肿瘤组织标本,对其进行4~5年临床随访。免疫组织化学染色检测肿瘤组织中TRPM8蛋白的表达,分析TRPM8蛋白表达与肺腺癌患者临床特征及预后的关系。培养A549肺腺癌细胞,通过感染慢病毒上调细胞中TRPM8蛋白的表达,CCK-8法及集落形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,划痕实验及Transwell实验观察细胞迁移和侵袭。培养H1299肺腺癌细胞,通过感染慢病毒上调细胞中TRPM8表达后,分别在免疫缺陷小鼠左右臀部皮下注射对应空载体细胞及上调TRPM8的细胞,分析TRPM8对移植瘤生长的影响。结果:肺腺癌组织存在TRPM8表达。TRPM8蛋白高表达的肺腺癌患者,其4~5年累积生存率高于TRPM8蛋白低表达的患者(P=0.017),且其肿瘤最大径小于低表达的患者(P=0.028)。上调A549细胞中TRPM8的表达后,细胞活力较空载体组和亲本细胞组显著减弱,形成的集落数显著减少,处于S期的细胞比例显著升高,迁移和侵袭能力显著下降(P<0.01)。与空载体对照细胞株比较,上调H1299细胞中TRPM8的表达后,其在免疫缺陷小鼠皮下的移植瘤生长速率显著下降,肿瘤重量显著降低(P<0.01)。结论:TPRM8在肺腺癌中具有抑癌作用,低表达TRPM8蛋白的肺腺癌患者预后不良。

ABCG8期多态性与胆囊结石易感性关系的Meta分析

目的 探讨ATP结合盒B亚族成员8转运蛋白基因（ABCG8） D19H位点2号染色体5’端编码区第55对核苷酸（ G55 C）多态性与胆囊结石易感性的关系。方法 制定检索策略，检索中外文数据库，收集有关ABCG8 D19 H位点G55 C多态性与胆囊结石易感性相关性的研究，对胆囊结石患者（胆结石组）和健康者（对照组） G55 C等位基因型（C/G）、共显性模型（CC/GG和CG/GG）、显性模型（CC＋CG/GG）和隐性模型（CC/CG＋GG）等所占比例进行分析，同时按地域人种（黄种人与白种人）进行亚组分析。结果 共7篇文献纳入研究，胆结石组1116例，对照组2239例，入选文献无发表偏倚。统计分析显示，ABCG8 D19H位点G55C多态性与胆囊结石形成有关（C/G：OR＝2．22，95％CI＝1．66～2．96；CG/GG：OR＝2．37，95％CI ＝1．72～3．26；CC ＋CG/GG：OR＝2．39，95％CI ＝1．76～3．26）。结论 ABCG8 D19H位点G55C多态性可能与胆囊结石易感性有关。

鼻咽癌组织中WNT8B与ZNF191蛋白表达与临床病理及预后的相关性分析

目的 探讨鼻咽癌组织中Wnt家族成员8B(Wnt family member 8B,WNT8B)与锌指转录因子191(zinc finger transcription factor 191,ZNF191)蛋白表达与临床病理及预后的相关性。方法 收集2017年1月~2019年1月东阳市人民医院保存的126例鼻咽癌组织石蜡标本及其临床病理资料(病例组),另选取慢性鼻咽炎组织样本40例(对照组)。采用免疫组织化学法检测2组样本组织中WNT8B和ZNF191蛋白表达情况,并对比两蛋白阳性率及共表达阳性率,分析病例组患者鼻咽癌组织中WNT8B和ZNF191蛋白表达与临床病理因素关系,采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析法分析鼻咽癌组织中WNT8B和ZNF191表达与预后的关系。结果 病例组鼻咽癌组织中WNT8B和ZNF191阳性率及二者共表达阳性率均高于对照组鼻咽黏膜组织(P<0.05)。Spearson相关性分析结果显示,鼻咽癌组织中WNT8B与ZNF191表达呈正相关(P<0.05)。T3~T4级、Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的鼻咽癌组织中WNT8B和ZNF191阳性率及二者共表达阳性率分别高于T1~T2级、Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05)。WNT8B阳性与阴性患者3年生存率分别为57.89%、83.87%,ZNF191阳性与阴性患者分别为56.79%、77.78%,共表达阳性患者与非共表达患者分别为50.75%、79.66%;经Kaplan-Meier分析结果显示,WNT8B阳性患者与阴性、ZNF191阳性与阴性、共表达阳性与非共表达患者累积存活曲线比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,浸润深度[HR(95%CI)=1.980(1.023~3.955)]、TNM分期[HR(95%CI)=3.207(1.936~11.751)]、WNT8B阳性表达[HR(95%CI)=4.506(2.068~13.774)]、ZNF191阳性表达[HR(95%CI)=3.114(2.061~10.485)]、WNT8B+ZNF191共表达[HR(95%CI)=4.691(2.144~14.902)]是影响总生存期的独立危险因素(P<0.05)。结论 鼻咽癌患者鼻咽癌组织中WNT8B和ZNF191阳性表达率高,WNT8B和ZNF191表达与鼻咽癌患者浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及预后生存相关。

ZnT8在胰腺癌发生和发展中的作用

本研究主要探索锌转运蛋白8(ZnT8)/溶质载体家族30成员8(SLC30A8)在胰腺癌的发生和发展中的作用.利用cBioPortal平台分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库资料中胰腺癌患者的SLC30A8基因的拷贝数变异和突变情况、患者的预后生存情况、共表达基因;利用DAVID平台进行功能富集分析得到共表达基因的GO功能分类条目;通过STRING数据库分析蛋白质相互作用.结果发现,SLC30A8在患病人群中遗传发生改变的占9%;在总体生存期,无进展生存期和疾病特异性生存期中SLC30A8遗传改变组的生存率都显著低于未改变组的(p<0.05);SLC30A8参与了调节激素水平、肽激素分泌的调节和胰岛素分泌调节等生物过程.本研究为探索ZnT8在胰腺癌发生中的机制做了基础工作,并且该基因可能成为胰腺癌治疗的潜在靶点.

SLC8A1-AS1靶向调控微小RNA-182-3p及对口腔鳞癌细胞迁移和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA溶质运载蛋白家族8成员A1反义RNA 1(SLC8A1-AS1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭中的生物学作用及其与微小RNA-182-3p(miR-182-3p)的靶向调控关系。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测OSCC组织和细胞(CAL-27、SCC-4、SCC-9和Tca8113)的SLC8A1-AS1和miR-182-3p水平。双荧光素酶报告实验鉴定SLC8A1-AS1和miR-182-3p的相互作用。将Tca8113细胞分为4组:对照组(空白对照)、SLC8A1-AS1过表达组(转染pcDNA3.1-SLC8A1-AS1+miR-182-3p阴性对照NC)、miR-182-3p过表达组(转染SLC8A1-AS1阴性对照pcDNA3.1+miR-182-3p模拟物mimics)和共过表达组(转染pcDNA3.1-SLC8A1-AS1+miR-182-3p mimics)。利用MTT法、划痕实验和Transwell小室实验检测SLC8A1-AS1和miR-182-3p对Tca8113细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果与癌旁组织相比,OSCC组织的SLC8A1-AS1水平下调,而miR-182-3p水平上调(P<0.05);与正常人口腔角质上皮细胞NHOK相比,OSCC细胞的SLC8A1-AS1水平下调,而miR-182-3p水平上调(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-182-3p mimics降低了野生型SLC8A1-AS1的荧光素酶活性(P<0.05),而不影响突变型SLC8A1-AS1的荧光素酶活性(P>0.05)。与对照组相比,SLC8A1-AS1过表达组的Tca8113细胞活力降低至1.454±0.103、划痕愈合率降低至(17.416±1.645)%及穿膜细胞数量减少至(119.877±6.469)个,而miR-182-3p过表达组的Tca8113细胞活力增强至2.879±0.126、划痕愈合率升高至(73.929±7.488)%及穿膜细胞数量增多至(391.243±23.819)个,且与SLC8A1-AS1过表达组相比,共过表达组Tca8113细胞活力增强至2.228±0.109、划痕愈合率升高至(32.924±4.114)%及穿膜细胞数量增多至(234.356±38.766)个,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SLC8A1-AS1通过靶向miR-182-3p在OSCC中发挥抑癌作用,SLC8A1-AS1/miR-182-3p轴可作为OSCC治疗的新靶点。

新候选肿瘤抑制基因溶质载体8号家族中的2号成员基因对胶质瘤细胞株U87的侵袭迁移能力和裸鼠致瘤性的影响

目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因（SLC8A2）对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株（实验组）和稳定表达GFP的U87-NC细胞株（阴性对照组）.Transwell小室及预铺50μl Matrigel基质胶的Transwell小室检测SLC8A2对U87细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染该基因后肿瘤细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9及MT1-MMP转录水平的变化,明胶酶谱法检测分泌至细胞培养基中MMP-2酶活性的变化；裸鼠皮下移植瘤实验（5只/组）检测SLC8A2对U87细胞致瘤性的影响.结果 U87-NC和U87-SLC8A2穿过Transwell小室基膜的细胞数分别为（279.70±17.50）个及（4.30±0.58）个,而穿过预铺Matrigel基质胶的Transwell小室基膜的细胞数分别为（274.0±21.3）个和（12.7±1.2）个,差异有统计学意义（P＜0.01）；与U87-NC比较,U87-SLC8A2细胞中MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MTl-MMP的转录水平分别下降了（55.4±3.2）％、（78.7±5.3）％、（79.7±4.6）％、（53.9±3.2）％及（70.9±4.4）％（P＜0.01）,且U87-SLC8A2细胞分泌的MMP-2酶活性较U87-NC下降了（93.2±5.1）％（P＜0.01）；接种U87-SLC8A2细胞的裸鼠全都不致瘤,而接种对照组细胞的裸鼠全部致瘤成功.结论 SLC8A2可下调MMP的活性而抑制胶质瘤细胞U87的侵袭迁移能力,并能显著抑制U87细胞在裸鼠体内的生长及增殖.

circRNA_0000994通过翻译蛋白抑制心肌细胞肥大相关基因表达

目的:研究环状RNA(circRNA)_0000994对心肌细胞肥大表型的调控作用及机制。方法:通过RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=18)与心力衰竭(HF)病人(n=28)心肌组织中circRNA_0000994及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(SLC8A1)的表达水平。通过分离和培养新生小鼠心室肌细胞(NMVCs),利用重组腺病毒载体介导circRNA_0000994过表达并检测其对NMVCs肥大表型的影响。采用鬼笔环肽染色检测circRNA_0000994对血管紧张素II(Ang II)诱导的NMVCs肥大反应的影响。人AC16心肌细胞过表达circRNA_0000994后,利用质谱shotgun技术鉴定circRNA_0000994预期翻译蛋白(简称SLC8A1-605aa)的特征性肽段序列。利用NMVCs先后过表达circRNA_0000994及转染siRNA-SLC8A1-605aa,检测SLC8A1-605aa表达对circRNA_0000994抑制NMVCs肥大表型的影响。结果:在HF病人心肌组织中,circRNA_0000994及SLC8A1 mRNA的表达显著增加。过表达circRNA_0000994可降低NMVCs中心脏肥大相关基因肌球蛋白重链7(MYH7)、骨骼肌肌动蛋白α1(ACTA1)和心房钠尿肽(ANP)的表达,抑制Ang II诱导的NMVCs肥大反应(P<0.01)。Western blot及质谱shot-gun分析结果显示,circRNA_0000994可翻译SLC8A1-605aa蛋白。过表达circRNA_0000994和SLC8A1-605aa可一致地抑制NMVCs中心脏肥大相关基因表达,而抑制SLC8A1-605aa表达则可逆转circRNA_0000994对NMVCs肥大表型的抑制作用。结论:circRNA_0000994通过翻译SLC8A1-605aa蛋白发挥抑制心肌细胞肥大的作用。

ABCC8在胶质瘤中的表达及其临床意义

目的探讨ATP结合盒亚家族C成员8(ABCC8)在不同类型胶质瘤中的表达情况及其与患者总生存期的关系。方法收集中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中516例胶质瘤患者的ABCC8 mRNA数据及患者相应的临床特征[性别、年龄、组织病理类型、WHO分级、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变状态、1p/19q缺失状态及分子病理分型]、总生存期等,比较不同类型胶质瘤患者间ABCC8 mRNA的表达差异,以及不同类型胶质瘤患者中ABCC8 mRNA高表达(≥54.50)与ABCC8 mRNA低表达(<54.50)患者间总生存期的差异。结果(1)原发性胶质瘤患者的ABCC8 mRNA表达明显高于复发性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。少枝胶质细胞瘤患者的ABCC8 mRNA表达最高,星形胶质细胞瘤患者次之,胶质母细胞瘤患者最低,不同组织病理类型胶质瘤患者间差异均有统计学意义(P<0.05)。WHOⅡ级胶质瘤患者的ABCC8 mRNA表达最高,WHOⅢ级患者次之,WHOⅣ级患者最低,不同WHO分级患者间差异均有统计学意义(P<0.05)。IDH突变型胶质瘤患者的ABCC8 mRNA表达明显高于IDH野生型患者,1p/19q缺失胶质瘤患者的ABCC8 mRNA表达明显高于1p/19q不缺失患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。低级别胶质瘤患者及胶质瘤母细胞瘤患者中IDH突变型患者的ABCC8 mRNA表达均明显高于IDH野生型患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)在所有胶质瘤患者以及原发性、复发性胶质瘤,少枝胶质细胞瘤、星形胶质细胞瘤,WHO低级别(Ⅱ级)、WHO高级别(Ⅲ、Ⅳ级)胶质瘤,IDH突变型、IDH野生型胶质瘤,1p/19q缺失、1p/19q无缺失胶质瘤患者中,ABCC8 mRNA高表达患者的总生存期均明显长于ABCC8 mRNA低表达患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)多因素Cox回归分析显示ABCC8 mRNA表达是胶质瘤患者总生存期的独立影响因素(HR=0.747,P=0.025,95%CI:0.579~0.963)。结论胶质瘤患者中ABCC8 mRNA的表达与肿瘤恶性程度有关,且其可以作为预测患者预后的评估指标。

SLC30A8和PTPRD基因多态性与南京地区中老年人群2型糖尿病的相关性研究

目的 探讨溶质载体家族30/锌转运体,成员8（SLC30A8）基因（rs13266634和rs3802177）和蛋白酪氨酸磷酸酶受体D（PTPRD）基因（rs17584499）单核苷酸多态性与南京地区中老年人群2型糖尿病的相关性.方法 对南京地区40岁以上人群行75 g口服葡萄糖耐量试验及问卷调查,选取2型糖尿病1 758例（糖尿病组）,正常对照1 970名（对照组）,提取外周血基因组DNA,对其SLC30A8和PTPRD基因3个目标位点的基因型进行检测,分析与2型糖尿病的关系.结果 SLC30A8基因位点rs13266634在糖尿病组的基因型频率（CC、CT和TT）分别为35.9％、48.2％和15.9％,对照组为33.3％、48.8％和17.9％,糖尿病组C等位基因频率高于对照组（x2=3.986,P=0.046）,C等位基因携带者患2型糖尿病的风险是T等位基因的1.158倍[优势比（OR）=1.158,P=0.005].位点rs3802177在糖尿病组的基因型频率（CC、CT和TT）分别为35.3％、48.2％和16.5％,对照组为32.1％、49.9％和18.0％,糖尿病组C等位基因频率高于对照组（x2=4.085,P =0.043）,C等位基因携带者患2型糖尿病的风险是T等位基因的1.162倍（OR =1.162,P=0.004）.PTPRD基因位点rs17584499在糖尿病组的基因型频率（CC、CT和TT）分别为81.9％、16.9％和1.2％,对照组为82.4％、16.5％和1.1％,两组基因频率分布无统计学差异（x2=0.274,P=0.600）.结论 SLC30A8基因位点rs13266634和rs3802177的C等位基因可能是2型糖尿病的风险基因,与南京地区中老年人群2型糖尿病相关,未发现PTPRD基因（rs17584499）与本地区2型糖尿病相关.

鼻黏膜温度变化与鼻气流感知之间的相关性研究进展

关于鼻气流感知的机制仍知之甚少,目前认为产生鼻腔通畅感的主要机制是激活鼻黏膜温度感受器瞬态受体电位M型家族成员8。计算流体力学研究表明,鼻腔增加的热流量与患者主观气流感知相关。同样,使用温度探头对鼻腔进行的物理测量显示较低的鼻黏膜温度与更好的气流感知之间存在相关性。三叉神经功能检测也间接证实了这一点。本研究旨在综述鼻黏膜温度变化在鼻腔通畅感知中的作用及其量化方法。

胆结石病人肝脏核受体LRH-1及其调控基因表达的研究

目的研究胆囊胆固醇结石病人肝脏的肝脏受体类似物1（Liver receptor homolog 1，LRH-1）及其调控的三磷酸腺苷结合盒（ABC）转运体家族成员abcg5／8的表达，探讨胆固醇结石病发病的机制。方法27例胆囊胆固醇结石病人，男6例，女21例；年龄平均52岁。10例无胆石症的胆囊息肉病人为对照，男6例，女4例；平均年龄48岁。测定胆汁脂类成分和计算胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏LRH-1及abcg5／8mRNA的表达量。结果胆石组LRH-1表达高于对照组（14．18±1．80VS7．22±2．22，P〈0．05），胆石组肝脏abcg基因mRNA表达量均较对照组增高（abcg5：49．34±3．68vs33．48±2．77，P〈0．05；abcg8：38．93±5．70vs18．70±3．42，P〈0．05）。胆石组胆汁呈胆固醇过饱和（1．17±0．02）。结论该研究结果提示人类肝脏LRH-1及其调控的abcg5／8的表达增高与胆囊胆固醇结石形成有关。

比卡鲁胺对膀胱癌细胞增殖和侵袭功能的影响

目的:探讨比卡鲁胺对膀胱尿路上皮癌EJ细胞增殖、迁移和浸润功能的影响及其可能机制。方法:0,25,100μmol/L比卡鲁胺处理EJ细胞,MTT法检测细胞生长曲线;流式细胞PI单染法检测细胞周期;transwell细胞迁移实验法检测细胞迁移能力;transwell细胞侵袭实验法检测细胞侵袭能力;Western blotting检测雄激素受体(AR)、细胞周期蛋白D1、基质金属蛋白酶-2(MMP2)及瞬时受体蛋白家族成员-8蛋白(TRPM8)水平变化。结果:100μmol/L比卡鲁胺处理48 h后,EJ细胞增殖能力明显下降,细胞周期表现为G0/G1阻滞(P<0.05);不同浓度(25,100μmol/L)比卡鲁胺处理48 h后,EJ细胞迁移及浸润能力明显降低,AR、Cyclin D1、MMP2和TRPM8蛋白表达明显降低。结论:比卡鲁胺能抑制膀胱癌EJ细胞增殖、迁移和浸润功能,其机制可能与抑制AR信号通路、降低相关蛋白表达有关。