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RANKL诱导小鼠单核细胞RAW264.7分化成成熟破骨细胞 被引量:10
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作者 肖新华 周后德 +9 位作者 王运林 张红 袁凌青 胡平安 杨雅 何玉玲 隋国良 翟木绪 王敏 廖二元 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第2期151-155,共5页
目的观察小鼠的单核/巨噬细胞RAW264.7的一般生物学特征及在RANKL诱导下形成成熟破骨细胞的特征。方法 RANKL诱导RAW264.7细胞6d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) 染色法观察TRAP阳性多核细胞,吖啶橙染色激光共聚焦显微镜(LCSM)观察多... 目的观察小鼠的单核/巨噬细胞RAW264.7的一般生物学特征及在RANKL诱导下形成成熟破骨细胞的特征。方法 RANKL诱导RAW264.7细胞6d后,用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) 染色法观察TRAP阳性多核细胞,吖啶橙染色激光共聚焦显微镜(LCSM)观察多核细胞形态;诱导RAW264.7细胞9d后,RT-PCR检测RAW264.7细胞的破骨细胞表型和功能基因表达及其 RANKL诱导后变化;诱导RAW264.7细胞12d后,钙磷覆盖的破骨细胞活性分析板观察破骨细胞的骨吸收功能。结果 RAW264.7细胞TRAP染色阴性,单核或2个核,能表达破骨细胞表型和功能基因,无骨吸收功能。RANKL可诱导RAW264.7细胞形成TRAP阳性成熟的多核破骨细胞, 上调CathepsinK、CAⅡ、integrinβ3等基因。mRNA的表达。结论 RAW264.7具有破骨细胞特征性基因表达谱,是一种较好的破骨前体细胞模型。RANKL可诱导RAW264.7细胞形成成熟破骨细胞。 展开更多
关键词 成熟破骨细胞 RANKL RAW264.7细胞 单核细胞 小鼠 抗酒石酸酸性磷酸酶 激光共聚焦显微镜 integrin 单核/巨噬细胞 骨吸收功能 分化 TRAP 多核骨细胞 基因mRNA 细胞表型 细胞形成 生物学特征 吖啶橙染色 基因表达及
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联合应用重组人骨保护素和阿伦膦酸钠抑制成熟破骨细胞的体外实验研究 被引量:14
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作者 黄鹏 王岩 +5 位作者 迟志永 杨子义 倪健 杨武剑 王冉东 白金柱 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期812-816,共5页
目的研究联合应用重组人骨保护素(rhOPGFc)和阿伦膦酸钠(ALN)对破骨细胞抑制作用。方法进行人类OPGFc融合蛋白毕赤酵母表达株的构建和鉴定。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞RAW264.7按照4∶1比例混合,培养于96孔... 目的研究联合应用重组人骨保护素(rhOPGFc)和阿伦膦酸钠(ALN)对破骨细胞抑制作用。方法进行人类OPGFc融合蛋白毕赤酵母表达株的构建和鉴定。酶消化法获取新生小鼠颅骨成骨细胞,与破骨细胞前体细胞RAW264.7按照4∶1比例混合,培养于96孔板中。9d后,重酒石酸盐抗酸性磷酸酶染色(TRAP染色)鉴定后,分别使用10-5g/LrhOPGFc、10μmol/LALN、10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN、5×10-6g/LrhOPGFc+5μmol/LALN作用于混合细胞体系,并设空白对照。加药后3、7d观察破骨细胞数目和形态,计算单位面积内TARP阳性细胞个数,并行骨磨片吸收陷窝计数。结果重组人骨保护素(rhOPGFc)分子量与预期结果相符合,蛋白印迹检测(Westernblotting)显示,该条带可被抗免疫球蛋白IgG抗体别显色。小鼠成骨细胞与破骨细胞前体细胞RAW264.7混合培养后9d,体系中出现大量多核成熟破骨细胞,TARP染色证实为成熟破骨细胞。加药3、7d后,与对照组相比,其余各组破骨细胞TARP阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数均明显减少,以10-5g/LrhOPGFc+10μmol/LALN组减少最为显著。结论重组人骨保护素(rhOPGFc)可以有效减少成熟破骨细胞数目并抑制其功能。联合应用rhOPGFc和阿伦膦酸钠可以交互抑制成熟破骨细胞功能。 展开更多
关键词 成熟破骨细胞 人骨保护素 阿伦膦酸钠 体外实验研究 重组 RAW264.7 LALN 细胞抑制作用 颅骨成骨细胞 前体细胞 细胞数目 阳性细胞 吸收陷窝 IgG抗体 免疫球蛋白 骨细胞功能 酵母表达 融合蛋白 新生小鼠 酶消化法 96孔板
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淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响 被引量:73
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作者 张大威 程岩 +3 位作者 张金超 王乃利 杨梦甦 姚新生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期463-467,共5页
目的研究淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响,评价淫羊藿苷对骨质疏松的预防及治疗作用。方法采用1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞以及原代分离的乳兔成熟破骨细胞与骨片共培养的方法,考察淫羊藿苷对破骨细... 目的研究淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响,评价淫羊藿苷对骨质疏松的预防及治疗作用。方法采用1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞以及原代分离的乳兔成熟破骨细胞与骨片共培养的方法,考察淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响。结果浓度为100、50μmol.L-1的淫羊藿苷明显抑制1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞的数目,当其浓度为100、50、10μmol.L-1时,明显抑制破骨细胞的骨吸收功能,具体表现在吸收陷窝数目及表面积均明显减少。结论淫羊藿苷不仅可以明显抑制破骨细胞的分化,同时具有抑制破骨细胞的骨吸收功能的作用,提示淫羊藿苷具有改善骨吸收功能亢进的潜力。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 成熟破骨细胞 骨细胞细胞 分化 骨吸收
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水溶性大豆异黄酮对破骨细胞分化和功能的影响 被引量:1
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作者 李湘辉 张金超 +3 位作者 张雅鸥 刘长振 隋森芳 杨梦甦 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期406-409,共4页
目的:研究水溶性大豆异黄酮(WSSI)对1,25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓细胞分化形成破骨细胞样细胞以及兔成熟破骨细胞骨吸收功能的影响。方法:通过TRAP染色对骨髓细胞诱导分化形成的TRAP阳性多核巨细胞计数;用显微摄影结合计算机图像分析... 目的:研究水溶性大豆异黄酮(WSSI)对1,25-二羟基维生素D3诱导兔骨髓细胞分化形成破骨细胞样细胞以及兔成熟破骨细胞骨吸收功能的影响。方法:通过TRAP染色对骨髓细胞诱导分化形成的TRAP阳性多核巨细胞计数;用显微摄影结合计算机图像分析测定骨吸收造成的陷窝数目及表面积,以评价破骨细胞活性;用扫描电镜观察骨吸收陷窝的形态。结果:浓度为20.0、4.0、2.0和0.4μg/ml的水溶性大豆异黄酮既能抑制破骨细胞样细胞的形成(P<0.001),还能抑制成熟破骨细胞的骨吸收功能(P<0.001),具体表现在随着浓度的升高骨吸收陷窝数目及表面积减少。结论:WSSI可以明显抑制破骨细胞样细胞的形成和成熟破骨细胞的骨吸收功能。 展开更多
关键词 水溶性大豆异黄酮 骨细胞细胞 成熟破骨细胞 骨吸收
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安石榴苷对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响 被引量:2
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作者 褚耿磊 李东亚 +3 位作者 李洪伟 邓威 葛保健 郭开今 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1865-1866,共2页
破骨细胞(OC)活性改变是引起骨质疏松症、假体周围骨溶解等各种代谢性骨病的主要原因。本研究旨在探讨安石榴苷对核因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导小鼠单核/巨噬细胞株RAW264.7分化为成熟破骨细胞的影响及机制。
关键词 RAW264.7细胞 骨细胞分化 安石榴 假体周围骨溶解 成熟破骨细胞 骨质疏松症 代谢性骨病
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OPG治疗代谢性骨病的研究进展 被引量:1
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作者 韩光红 陈远萍 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期324-326,共3页
关键词 代谢性骨病 OPG RANKL系统 骨细胞凋亡 治疗 成熟破骨细胞 骨保护素 前体细胞 体外抑制 骨细胞
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慢病毒载体介导骨保护素基因转染兔骨髓间充质干细胞的研究 被引量:1
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作者 孙传秀 何盛为 +3 位作者 赵文志 米立东 杜广宇 孙雪刚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期128-128,共1页
骨保护素(OPG)具有抑制成熟破骨细胞的活性并诱导其凋亡的功能,对骨质疏松有防治作用.我们通过构建OPG基因慢病毒载体,并转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),检测其在BMSCs中的表达及活性. 一、材料与方法 1.实验材料:慢病毒转染相... 骨保护素(OPG)具有抑制成熟破骨细胞的活性并诱导其凋亡的功能,对骨质疏松有防治作用.我们通过构建OPG基因慢病毒载体,并转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),检测其在BMSCs中的表达及活性. 一、材料与方法 1.实验材料:慢病毒转染相关试剂盒(Clontech公司)。聚合酶链反应(PCR)及实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)试剂盒(TaKaRa公司)。新西兰兔2只(大连医科大学动物实验中心)。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 新西兰兔 基因转染 骨保护素 病毒载体介导 实时定量聚合酶链反应 成熟破骨细胞 大连医科大学
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髋关节假体周围骨质溶解的生物学机制 被引量:18
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作者 艾承冲 蒋佳 陈世益 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期441-448,共8页
髋关节置换术后假体磨损产生微粒引起的假体周围骨质溶解和假体松动,导致手术失败,往往需要接受翻修手术。关节假体的任一组成材料(超高分子聚乙烯、钛合金、Al2O3、ZrO2、聚甲基丙烯酸甲酯等)产生的磨损微粒都会引起骨质溶解。磨... 髋关节置换术后假体磨损产生微粒引起的假体周围骨质溶解和假体松动,导致手术失败,往往需要接受翻修手术。关节假体的任一组成材料(超高分子聚乙烯、钛合金、Al2O3、ZrO2、聚甲基丙烯酸甲酯等)产生的磨损微粒都会引起骨质溶解。磨损微粒通过吞噬作用或模式识别受体作用于巨噬细胞引起趋化因子巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor, M-CSF) 、巨噬细胞趋化蛋白(macrophage chemotactic protein-1, MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白(macrophage inhibitory protein-1, MIP-1) 和促炎因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎性介质释放,启动骨质溶解的进程。此外磨损微粒还会促使M0型巨噬细胞极化为M1型而促进炎症因子释放。骨质溶解过程中单核巨噬细胞系来源的巨噬细胞、破骨细胞、树突状细胞,骨髓间质来源的成骨细胞、骨细胞、成纤维细胞,以及淋巴细胞通过细胞因子相互作用,最终使假体周围基础多细胞单位(bone multicellular units,BMU)中的破骨活动强于成骨活动,导致骨质溶解发生。成纤维细胞、树突细胞和和淋巴细胞分泌MCP-1、MIP-1、IL-8可促进局部巨噬细胞的募集和激活,另外RANKL、TNF-α和IL-1β表达增多可促进破骨细胞前体细胞分化为成熟破骨细胞。TNF-α和IL-1β与磨损微粒作用于成骨细胞可促进IL-6、MCP-1和M-CSF表达,同时也促进巨噬细胞的募集和激活。核内转录因子NF-κB在调节假体周围炎症反应和骨代谢基因表达中有重要作用,不同炎性因子的作用下NF-κB下游基因表达不同,从而起到促进或对抗骨质溶解的作用。此外,假体周围骨质溶解的个体差异性可能还与IL-1RA基因、IL-6基因、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)基因的单核苷酸多态性有关。 展开更多
关键词 髋关节假体 骨质溶解 巨噬细胞集落刺激因子 生物学机制 周围 转录因子NF-ΚB 成熟破骨细胞 IL-6基因
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Effects of the rare earth ions on bone resorbing function of rabbit mature osteoclasts in vitro 被引量:13
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作者 ZHANGJinchao XUShanjin +1 位作者 WANGKui YUShifeng 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第20期2170-2175,共6页
The effects of rare earth ions on bone resorbing function of osteoclasts were studied by culturing Japanese white rabbit osteoclasts on bone slices. In order to evaluate the activity of osteoclasts, the number and sur... The effects of rare earth ions on bone resorbing function of osteoclasts were studied by culturing Japanese white rabbit osteoclasts on bone slices. In order to evaluate the activity of osteoclasts, the number and surface areas of lacunae were measured by photomicrography and image analysis, and the calcium concentration in the supernatant was measured by the atomic absorption spectrometry. The lacunae morphology was observed under a scanning electron microscope. The results indicated that La3+, Sm3+ and Er3+ at the concentration of 1.00?0-5, 1.00?0-6 and 1.00?10-7mol/L and Nd3+, Gd3+ and Dy3+ at the concentration of 1.00?10-5 and 1.00?0-6 mol/L inhibited osteoclastic activity as indicated by the dose-dependent reduction in the numbers and surface areas of the lacunae (P<0.01). On the contrary, the number and surface areas of lanunae were increased and osteoclastic bone resorbing function was significantly enhanced by La3+, Sm3+ and Er3+ at the concentration of 1.00?0-8 mol/L and Nd3+, Gd3+ and Dy3+ at the concentration of 1.00?0-7 mol/L (P<0.01). Nd3+, Gd3+ and Dy3+ had no effect on osteoclastic bone resorption function at concentrations as low as 1.00?0-8 mol/L (P>0.05). It is suggested that the effects of rare earth ions on osteoclastic bone resorption are bidirectional, depending on concentrations and species. 展开更多
关键词 野兔 稀土金属离子 成熟破骨细胞 骨再吸收 骨密度 钙浓度
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