成人外周血来源树突状细胞体外诱导培养及成熟调控

人体内树突状细胞具有成熟和未成熟两种形态。前者是早期免疫应答的强有力的抗原递呈细胞。后者具有截然不同的生物学特性 ,且能诱导免疫耐受。本研究从成人外周血中分离前体细胞 ,利用单核细胞条件性培养液 ,培养出比较均一的未成熟及成熟阶段的树突状细胞。第一阶段 :从外周血分离出能粘附塑料的单核细胞 ,在GM- CSF+IL- 4存在条件下培养 6～ 7d;第二阶段 ,加入单核细胞条件性培养液促进树突状细胞分化成熟。仅经第一阶段培养的细胞主要为未成熟树突状细胞 ,仍然表达单核细胞的表面标志 CD14 ,具有活跃的内化活动 ,其MHC- II分子主要分布在胞内的 MIIC器室 ;经第二阶段培养的树突状细胞则具有成熟树突状细胞的全部特征 :典型的树突状形态 ,悬浮生长 ,MHC- II分子主要分布在胞膜表面 ,表达树突状细胞的特异性标志 CD83,刺激同种 T淋巴细胞增殖的能力强 ,并在脱离特定细胞因子环境 3d后仍能保持该性状不变。由于该途径培养成熟、未成熟树突状细胞完全受外部因素调控 。

成熟促进因子及其对卵母细胞成熟调控机制研究的新进展

卵母细胞成熟调控机制一直是发育生物学和生殖生物学领域的热点问题。以现代分子生物学理论为基础 ,科学家们对卵母细胞成熟分裂的分子生物学调控机理进行了大量研究。发现了细胞周期中许多关键的调控因子 :cdc基因、周期蛋白依赖性激酶 (CDKs)及细胞周期蛋白 (cyclin)等。本文对卵母细胞成熟调控的核心调控物质———成熟促进因子 (maturation promotingfactor,MPF)的分子结构、周期变化及其在卵母细胞成熟过程中与丝裂原激活蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase,MAPK)相互作用关系的最新进展进行了综述。

2型糖尿病胰岛β细胞成熟调控的分子机制研究进展

T2DM的病理生理机制尚不明确,其主要特征是IR及胰岛功能障碍引起的血糖升高。胰岛β细胞的成熟及分泌功能受到复杂的基因调控,糖尿病患者的胰岛β细胞发生了去分化,且在内质网中异常合成错误胰岛素,表观遗传改变,在糖尿病发生发展中有重要意义。本文对T2DM胰岛β细胞成熟调控的分子机制进行探讨,以了解引起胰岛β细胞受损的原因,并对T2DM表观遗传研究进展进行综述。

雌激素及其受体调控卵母细胞成熟的研究进展

目前很多女性受到不孕不育、自然流产和出生缺陷等诸多生殖相关疾病的困扰,其主要原因为生殖细胞减数分裂异常和卵母细胞质量下降。雌激素不仅参与调控哺乳动物的发情和性行为,也参与调控卵母细胞的生长发育。雌激素受体作为类固醇激素受体的一种,在介导雌激素发挥基因组效应和非基因组效应中有着重要的作用。目前关于雌激素受体调控卵母细胞成熟的报道多集中于硬骨鱼类,特别是新型膜受体GPR30,而在哺乳动物方面的研究鲜有报道。因此作者介绍了雌激素核受体ERα、ERβ与新型膜受体GPR30的结构与分布,简述了膜受体GPR30的不同类型配体的研究进展,综述了雌激素受体在调控卵母细胞发育中的相互作用,发现雌激素的核受体与膜受体在卵母细胞成熟的过程中可能发挥不同的调控作用,并进一步阐述了雌激素及其受体在卵母细胞成熟过程中的潜在调控机制。

临床级树突状细胞的分离和培养

目的 探讨从患者外周血树突状细胞前体培养足够数量的树突状细胞及调控其成熟的方法。方法 完全培养基用 5 %人AB型血浆代替 10 %胎牛血清 ,培养过程分两阶段 ,第一阶段 :从患者外周血分离出能黏附塑料的单核细胞 ,在GM CSF +IL 4存在条件下培养 5～ 7d ;第二阶段 ,加入模拟单核细胞条件性培养液或TNF α促进树突状细胞分化成熟。结果 5 %人AB型血浆代替 10 %胎牛血清后 ,在树突状细胞的获得率和纯度方面无统计学差异 ,模拟单核细胞条件性培养液使树突状细胞表达更高比例的成熟标志CD83+,具有更强的刺激T细胞的能力。

舌鳞癌患者外周血树突状细胞的体外培养和鉴定

目的:探讨应用GM-CSF、IL-4、TNF-α及肿瘤细胞裂解液体外诱导舌鳞状细胞癌患者外周血来源树突状细胞(DC)的方法。方法:选取10例舌鳞状细胞癌患者和6例健康人,抽取外周血,分离单核细胞,经贴壁获得树突状细胞前体细胞,在体外先后加入GM-CSF、IL-4和肿瘤细胞裂解液、TNF-α诱导培养,获得成熟DC,进行形态学观察,以流式细胞术检测DC标志物表达率。实验中设置舌癌组和健康对照组,肿瘤裂解液诱导组和空白对照组,采用t检验进行统计学分析。结果:经9d诱导培养,细胞数量增加,体积增大,相差显微镜、HE染色和扫描显微镜下均见细胞表面树突状突起,呈典型DC形态。舌癌组DC平均获得率9.9%,与健康组无显著差异(P=0.1287)。舌癌组成熟DC标志物CD83表达率为37.19%,共刺激因子CD40、CD80和MHC分子HLA-DR的表达率分别为51.79%、48.43%和65.82%,与健康组无显著差异(P>0.05)。肿瘤细胞裂解液诱导组较对照组可获得更高的DC获得率和成熟率,分别为P=0.0186和P=0.0473。结论:舌癌患者外周血来源DC前体细胞经体外诱导培养,可以转变为形态和功能成熟的DC;肿瘤细胞裂解液刺激,有助于提高DC获得率和成熟率。

Co-rrp基因小干扰RNA载体的构建及烟草中的遗传转化

为研究油茶种子成熟调控蛋白基因的功能,以pCAMBIA1304质粒为载体,根据油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA序列设计了小干扰RNA(Si RNA)序列,构建了油茶种子成熟调控蛋白基因小干扰RNA植物表达载体pCAMBIA1304-si RNA,并借助农杆菌介导叶盘法将pCAMBIA1304-si RNA转化到野生型烟草中,获得了稳定表达的转基因烟草苗。为下一步的油茶种子成熟调控蛋白基因的功能鉴定奠定了基础。

香蕉贮运保鲜技术研究进展

香蕉贮运保鲜是一项综合的系统工程,涉及香蕉品种及果实质量、采后处理过程及贮运保鲜技术与果实商品性等方面。本文综述了近年来国内外香蕉贮运、保鲜技术研究进展,着重介绍了以“控制低乙烯”为核心的香蕉保鲜贮运技术及香蕉采后处理轻简装备等在产业上的应用,同时简要介绍了生物技术在香蕉采后保鲜应用中的研究进展。

Avine种鸡内脏器官发育的相关性研究

试验对Avine种母鸡育成期 (5～ 2 5w) 14个内脏器官进行了解剖观测 ,通过聚类分析和主成分分析 ,以研究内脏器官发育的相关性 ,从而为种鸡饲养管理和调控性成熟提供试验依据。结果表明 :除腔上囊以外 ,各器官发育均为正相关 ,卵巢与其他器官呈中等正相关 ;卵巢和腔上囊各为一类 ,其他器官聚为一类 ;主成分分析表明卵巢的发育与腔上囊有抑制作用。